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题名流产布鲁氏菌1型Bb1-PCR检测方法的建立
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作者
崔光亚
刘瑞
邴啟政
曾巧英
田莉莉
范伟兴
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机构
甘肃农业大学动物医学院
青岛农业大学动物科技学院
中国动物卫生与流行病学中心
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出处
《中国兽医科学》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第7期725-729,共5页
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基金
国家自然科学基金项目(30960284)
甘肃农业大学伏羲杰出人才项目
现代农业(奶牛)产业技术体系专项经费项目(CARS-37)
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文摘
根据GenBank中已登录序列,针对流产布鲁氏菌1型特异的保守序列设计了1对引物,通过对反应体系及条件的优化,建立了一种可以快速鉴别流产布鲁氏菌1型的Bb1-PCR方法,并验证了其特异性和敏感性。应用该方法对牦牛流产胎盘组织的临床检样进行诊断,验证其临床适用性和准确性。结果显示,Bb1-PCR(25μL)的最佳扩增条件为:退火温度68.5℃,引物浓度15pmol/μL,Premix Taq12.5μL,35次循环。在该条件下,仅流产布鲁氏菌1型标准菌株(B.abortus 2308)扩增出784bp的目的条带,而马耳他布鲁氏菌,绵羊附睾种布鲁氏菌,猪种布鲁氏菌,犬种布鲁氏菌,沙林鼠种布鲁氏菌,流产布鲁氏菌2~6、9型,大肠杆菌O157:H7和耶尔森菌O:91均无条带出现。敏感性为1CFU/mL。用建立的Bb1-PCR方法能直接从流产胎盘检样中检测流产布鲁氏菌1型,其诊断结果和细菌学表型鉴定结果完全一致。本研究建立的Bb1-PCR方法能够准确检测流产布鲁氏菌1型,其高度特异、敏感、可靠、稳定,适用于布鲁氏菌病的流行病学快速诊断。
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关键词
布鲁氏菌病
流产布鲁氏菌1型
bb1-pcr方法
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Keywords
brucellosis
Brucella abortus biovar 1
bb1-pcr
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分类号
S852.614
[农业科学—基础兽医学]
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