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布鲁氏菌分泌蛋白BspA和BspB真核表达载体的构建及在胚胎滋养层细胞中的表达 被引量:4
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作者 王书利 魏淑娟 +3 位作者 李梦含 郑好 司丽芳 李志强 《河南农业科学》 北大核心 2022年第8期143-149,共7页
为研究布鲁氏菌分泌蛋白BspA和BspB的作用,以布鲁氏菌S2308基因组为模板,根据GenBank登录的BspA和BspB基因序列设计引物,利用PCR扩增BspA和BspB基因片段,并将其克隆至pEGFP-N1载体,获得真核表达载体pEGFP-BspA和pEGFP-BspB。真核表达载... 为研究布鲁氏菌分泌蛋白BspA和BspB的作用,以布鲁氏菌S2308基因组为模板,根据GenBank登录的BspA和BspB基因序列设计引物,利用PCR扩增BspA和BspB基因片段,并将其克隆至pEGFP-N1载体,获得真核表达载体pEGFP-BspA和pEGFP-BspB。真核表达载体经酶切和测序分析鉴定后,利用Lipofectamine2000脂质体转染至胚胎滋养层细胞(HPT-8),采用Western blot(WB)检测BspA和BspB蛋白的表达,应用ELISA试剂盒检测细胞因子的分泌水平,利用乳酸脱氢酶(LDH)细胞毒性检测试剂盒检测细胞毒性水平。结果显示,BspA基因大小为576 bp,BspB基因大小为564 bp,真核表达质粒经限制性内切酶Eco RⅠ和XbaⅠ酶切验证正确,酶切产物经测序分析,显示与GenBank公布序列的同源性为100%;WB检测结果显示,pEGFP-BspA和pEGFP-BspB转染组分别在70 ku和68 ku处出现条带,与预期结果相符,表明BspA和BspB蛋白能在HPT-8细胞中表达;细胞因子检测结果显示,BspA和BspB蛋白可诱导HPT-8细胞分泌IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-5;细胞毒性检测结果显示,BspA和BspB蛋白对细胞无毒性。综上,成功构建了真核表达载体pEGFP-BspA和pEGFP-BspB,证实其能在HPT-8细胞中表达,并能诱导细胞因子分泌。 展开更多
关键词 布鲁氏菌 bspa蛋白 BspB蛋白 真核表达 胚胎滋养层细胞
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基于块金字塔的快速块匹配算法 被引量:7
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作者 俞能海 陈豪 刘政凯 《电路与系统学报》 CSCD 2003年第2期54-57,共4页
在运动图象编码中,块匹配技术有着非常广泛的应用。在众多的匹配算法中,金字塔算法(block sum pyramid algorithm,BSPA)由于速度较快、算法比较简单而得到了广泛的应用。在金字塔算法的基础上,本文提出一种新的基于块金字塔的块匹配算法... 在运动图象编码中,块匹配技术有着非常广泛的应用。在众多的匹配算法中,金字塔算法(block sum pyramid algorithm,BSPA)由于速度较快、算法比较简单而得到了广泛的应用。在金字塔算法的基础上,本文提出一种新的基于块金字塔的块匹配算法(NBSPA)。算法采用了预测初始中心,行更新等技术,实验结果表明,新的算法有效地降低了运算量。 展开更多
关键词 快匹配 运动估计 块金字塔算法(bspa) 新块金字塔算法(Nbspa)块和金字塔
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RAFT聚合方法合成自由基聚合物PTMA 被引量:2
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作者 朱军峰 拓欢 +1 位作者 朱婷 王佩 《应用化工》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期2670-2673,共4页
以苄基三硫代碳酸酯基丙酸(BSPA)为链转移试剂,采用RAFT聚合方法合成了分子量分布较窄的聚(4-甲基丙烯酰氧基-2,2,6,6-四甲基哌啶醇酯)(PTMPM-RAFT),并用氧化剂间氯过氧苯甲酸(m CPBA)氧化PTMPM-RAFT为聚(4-甲基丙烯酰氧基-2,2,6,6-四... 以苄基三硫代碳酸酯基丙酸(BSPA)为链转移试剂,采用RAFT聚合方法合成了分子量分布较窄的聚(4-甲基丙烯酰氧基-2,2,6,6-四甲基哌啶醇酯)(PTMPM-RAFT),并用氧化剂间氯过氧苯甲酸(m CPBA)氧化PTMPM-RAFT为聚(4-甲基丙烯酰氧基-2,2,6,6-四甲基哌啶氮氧自由基) PTMA。1H NMR、傅里叶红外光谱仪、紫外-可见分光光度计、凝胶渗透色谱以及X光电子能谱等证实了PTMPM-RAFT的结构及其分子量,并得到了氧化产物PTMA。 展开更多
关键词 自由基聚合物PTMA RAFT聚合 bspa PTMPM-RAFT
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