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基于BSA-seq和RNA-seq的西瓜裂刻叶候选基因挖掘
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作者 王志强 杜慧莹 +3 位作者 李程 郭松 田梅 于蓉 《中国农业大学学报》 北大核心 2025年第11期67-84,共18页
裂刻叶是植物适应环境的重要特征,挖掘西瓜裂刻叶相关基因对西瓜育种、遗传改良及叶缘形态发育的分子调控机制研究具有重要意义。首先以西瓜裂刻叶自交系SW246(P_(1))与全缘叶自交系SW247(P_(2))为亲本,通过杂交构建六世代遗传群体(P_(1... 裂刻叶是植物适应环境的重要特征,挖掘西瓜裂刻叶相关基因对西瓜育种、遗传改良及叶缘形态发育的分子调控机制研究具有重要意义。首先以西瓜裂刻叶自交系SW246(P_(1))与全缘叶自交系SW247(P_(2))为亲本,通过杂交构建六世代遗传群体(P_(1)、P_(2)、F_(1)、F_(2)、BC_(1)P_(1)、BC_(1)P_(2));后采用BSA-seq进行基因定位,并结合转录组测序RNAseq数据进行关联分析,从而挖掘叶片裂刻关键调控基因。遗传分析结果表明:在后代群体中,F_(1)、BC_(1)P_(1)群体西瓜叶片均为裂刻叶,F_(2)群体裂刻叶和全缘叶的分离比符合3∶1的孟德尔分离比例,BC_(1)P_(2)群体裂刻叶和全缘叶分离比符合1∶1的理论比,说明裂刻叶和全缘叶性状符合单基因显性遗传模式,裂刻叶对全缘叶为显性。BSA-seq分析发现SNP和InDels关联交集位于4号染色体23164320—24976967 bp内,长度1.81 Mb,包含171个候选基因。其中在此区间亲本间存在非同义突变的SNP共22个,混池间存在非同义突变的SNP共16个;亲本间存在移码突变的InDel共3个,混池间存在移码突变的InDel共4个。联合BSA-seq与RNA-seq分析发现共有26个基因显著相关。此外,通过对BSA-seq和RNA-seq联合分析得到的4个候选基因及26个显著相关基因进行生物信息学分析、转录因子预测和基因注释,推测结果发现:1个编码PPR蛋白的基因(Cla97C04G076940),与HD-Zip、TCP、LOB、E2FDP、TIFY等转录因子相关;另有1个与IAA-氨基酸水解和E3泛素连接酶相关的基因,该基因可能在叶缘性状的调控过程中发挥关键作用。本研究可为进一步精细定位西瓜裂刻叶调控基因奠定基础。 展开更多
关键词 西瓜 裂刻叶 bsa-seq RNA-SEQ 候选基因
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基于BSA-seq定位野生大豆籽粒蛋白含量QTL
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作者 袁翠平 孙国金 +7 位作者 齐广勋 刘晓冬 董岭超 王玉民 王英男 赵洪锟 杨佳慧 董英山 《中国油料作物学报》 北大核心 2025年第4期904-911,共8页
野生大豆具有较高的籽粒蛋白含量,发掘和利用其蛋白含量基因对于高蛋白种质创制和品种培育具有重要价值。以绥农14/ZYD01015杂交组合衍生的RIL群体为材料,开展野生大豆ZYD01015的蛋白含量基因定位研究。RIL群体籽粒蛋白含量具有较大的... 野生大豆具有较高的籽粒蛋白含量,发掘和利用其蛋白含量基因对于高蛋白种质创制和品种培育具有重要价值。以绥农14/ZYD01015杂交组合衍生的RIL群体为材料,开展野生大豆ZYD01015的蛋白含量基因定位研究。RIL群体籽粒蛋白含量具有较大的遗传变异,且符合正态分布;对2020年和2021年RIL群体分别构建了高蛋白含量池和低蛋白含量池,采用BSA-seq(bulked segregant analysis sequencing,BSA-seq)技术进行了关联分析,在大豆20号染色体(Chr20)关联到1个区间(Chr20:3100000~33360000)。根据区间多态性Indel标记信息开发了12个分子标记,进行了蛋白含量QTL定位,鉴定出1个蛋白含量QTL位点qPRO-20,位于分子标记WS185和WS205之间,即Chr20:20071086~23798747区段,可解释14.00%(2020年)和13.26%(2021年)的遗传变异。QTL两侧分子标记WS185和WS205,其等位变异间蛋白含量均差异显著(P<0.01),可用于分子标记辅助筛选,能够从与ZYD01015相同等位基因型的材料中,筛选到蛋白含量在45%以上种质的概率达62.7%以上。 展开更多
关键词 野生大豆 蛋白含量 QTL定位 bsa-seq
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基于GWAS和BSA-seq挖掘辣椒果实中辣椒红色素含量的QTL区间及候选基因 被引量:1
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作者 班国梁 曹亚从 +8 位作者 张正海 于海龙 吴华茂 李戎轩 赵红 张伟丽 聂智星 宋红霞 王立浩 《中国蔬菜》 北大核心 2025年第1期37-45,共9页
辣椒红色素是目前全球销量最大的纯天然可食用色素,培育高辣椒红色素品种为辣椒产业重要任务。通过对255份一年生栽培种辣椒核心种质的辣椒红素含量进行全基因组关联分析(genome-wide association study,GWAS),在第1、2、3、5、6、8、9... 辣椒红色素是目前全球销量最大的纯天然可食用色素,培育高辣椒红色素品种为辣椒产业重要任务。通过对255份一年生栽培种辣椒核心种质的辣椒红素含量进行全基因组关联分析(genome-wide association study,GWAS),在第1、2、3、5、6、8、9、10、11和12号染色体均关联到与辣椒红素含量显著相关的区间,关联区间内共包括93个基因,根据功能注释和转录表达数据预测了3个影响辣椒果实中辣椒红素含量的候选基因。通过对高辣椒红色素材料Pep-340、低辣椒红色素材料Pep-276构建的F2群体进行混合分组分析法-测序(bulked segregant analysis-sequencing,BSA-seq)分析,在第1、3、5和10号染色体定位到与辣椒红色素含量相关区间,其中第3和5号染色体上的定位区间与GWAS分析中的显著相关区间相近或重合;利用这两个区间的In Del分子标记,进行遗传连锁分析,将调控辣椒红色素含量基因定位在3号染色体的q CC3.1,物理位置为22.8~25.9 Mb,其中含有99个基因,根据功能注释和转录组分析,预测了4个影响辣椒果实中辣椒红色素含量的候选基因Capana03g001314、Capana03g001325、Capana03g001334和Capana03g001387。研究结果为调控辣椒中辣椒红色素含量基因精细定位及分子标记辅助选择育种奠定基础。 展开更多
关键词 辣椒 辣椒红色素 GWAS bsa-seq QTL
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基于BSA-seq和RNA-seq挖掘桃单果质量性状候选基因
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作者 别航灵 杜嘉怡 +3 位作者 陈昌文 方伟超 王力荣 曹珂 《果树学报》 北大核心 2025年第9期1945-1957,共13页
【目的】单果质量是果树作物长期以来重要的育种目标之一,挖掘桃单果质量性状候选基因,为选育深受消费者喜爱的桃新品种提供理论和方法支撑。【方法】以大果型桃品种中油桃13号和小果型桃品种郑2007-4-28为亲本,构建F1分离群体,采用极... 【目的】单果质量是果树作物长期以来重要的育种目标之一,挖掘桃单果质量性状候选基因,为选育深受消费者喜爱的桃新品种提供理论和方法支撑。【方法】以大果型桃品种中油桃13号和小果型桃品种郑2007-4-28为亲本,构建F1分离群体,采用极端性状混池(BSA)重测序(BSA-seq)方法定位单果质量性状位点,并结合转录组测序(RNAseq)数据进行联合分析,挖掘桃单果质量性状的关键候选基因。同时,结合实时荧光定量(qRT-PCR)和异源过表达番茄的方法对基因进行功能验证。【结果】采用delta SNP-index、欧氏距离算法(ED)和G’value进行BSA-seq分析,将桃单果质量性状定位在6号染色体2191165~3794466 bp处,定位区间共1.6 Mb,包含261个基因。RNA-seq数据表明,261个基因中的189个在桃果实发育时期有表达,其表达模式可分为4类。其中,有38个基因在大果型和小果型果实发育过程中均表现出前期高表达后期低表达的趋势。根据基因功能注释和前期的基因型数据分析,选择Prupe.6G029300进行异源稳定转化,发现过表达番茄植株果实小于野生型。【结论】将桃单果质量性状定位于6号染色体2191165~3794466 bp处,定位区间内38个基因在桃果实发育过程中表现出前期高后期低的表达趋势,对其中的关键候选基因Prupe.6G029300进行过表达导致番茄单果质量降低,表明Prupe.6G029300可能参与桃果实发育调控。 展开更多
关键词 bsa-seq RNA-SEQ 单果质量
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基于BSA-seq的番木瓜株高候选基因定位
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作者 吴夏明 周陈平 +5 位作者 杨敏 徐泽 邝瑞彬 刘传和 贺涵 魏岳荣 《生物技术通报》 北大核心 2025年第9期54-61,共8页
【目的】株高是影响番木瓜产量和品质的重要性状之一,定位番木瓜株高的主要候选基因,为番木瓜的矮化育种提供基因资源。【方法】以YY(植株较高)和GM(植株较矮)为亲本构建定位群体,利用BSA-seq技术对两亲本以及子代混池GY-H(高池)和GY-S... 【目的】株高是影响番木瓜产量和品质的重要性状之一,定位番木瓜株高的主要候选基因,为番木瓜的矮化育种提供基因资源。【方法】以YY(植株较高)和GM(植株较矮)为亲本构建定位群体,利用BSA-seq技术对两亲本以及子代混池GY-H(高池)和GY-S(矮池)进行测序分析,数据经质控后,利用ED以及SNP-index法计算混池之间的基因频率差距,定位番木瓜株高候选区间。【结果】本次BSA-seq产生的数据良好,数据经过滤后,最终得到高质量的SNP位点337980个用于基因定位,利用ED以及SNP-index法计算寻找混池之间基因型频率的显著差异,最终分别在第3、6和8染色体上共定位到大小为0.93 Mb的候选区间,将该区间与番木瓜‘紫晖’参考基因组比对,0.93 Mb的区间内共包含46个编码基因,其中,有37个基因被注释。【结论】Cp_zihui12764、Cp_zihui06963、Cp_zihui07024和Cp_zihui12732可能是调控番木瓜株高的候选基因。 展开更多
关键词 番木瓜 株高 bsa-seq 基因定位 候选基因
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基于BSA-seq和GWAS技术的豇豆花色基因定位分析
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作者 胡格格 朱姝萌 +4 位作者 苏晓佳 康研 刘明慧 郭瑞 潘磊 《植物遗传资源学报》 北大核心 2025年第7期1459-1468,I0034-I0040,共17页
豇豆(Vigna unguiculata)是主要豆科农作物之一,广泛分布在全球热带和亚热带地区,我国各地均有种植。豇豆花色是一种重要农艺性状,在其繁殖过程中发挥着重要作用,但是豇豆花色变异的分子遗传基础尚不清楚。为此,采用基于重组自交系群体... 豇豆(Vigna unguiculata)是主要豆科农作物之一,广泛分布在全球热带和亚热带地区,我国各地均有种植。豇豆花色是一种重要农艺性状,在其繁殖过程中发挥着重要作用,但是豇豆花色变异的分子遗传基础尚不清楚。为此,采用基于重组自交系群体花色的BSA-seq分析与豇豆自然群体(271份)花色的全基因组关联分析相结合,将控制花色的基因定位于第9号染色体上31.9 Mb~32.3 Mb之间(0.4 Mb)。分析表明该区间包含30个基因,其中TRANSPARENT TESTA GLABRA 1(TTG1)基因位于SNP-index峰值附近,且在拟南芥中参与调控花青素的生物合成。进一步采用RT-qPCR分析发现,紫色和白色旗瓣的TTG1基因表达量存在显著差异。此外,在该区域内筛选出2对多态性SSR引物,能够区分RILs群体中紫色和白色旗瓣个体。本研究结果可为豇豆花色遗传变异和分子育种提供一定的理论依据。 展开更多
关键词 豇豆 花色 bsa-seq 全基因组关联分析 分子标记
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基于BSA-seq对一个水稻类病斑基因的初步定位 被引量:1
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作者 卢东莹 陈杰 +2 位作者 李慈云 杨健飞 牛晓磊 《热带生物学报(中英文)》 2025年第5期707-717,共11页
类病斑突变体(lesion mimic mutants,LMM)在植物免疫和生长发育研究中具有重要意义。本研究旨在通过BSA-seq(bulked segregant analysis sequencing)技术对1个水稻类病斑基因进行初步定位。首先,从籼稻(Oryza sativa ssp.)品种‘黄华占... 类病斑突变体(lesion mimic mutants,LMM)在植物免疫和生长发育研究中具有重要意义。本研究旨在通过BSA-seq(bulked segregant analysis sequencing)技术对1个水稻类病斑基因进行初步定位。首先,从籼稻(Oryza sativa ssp.)品种‘黄华占’(‘HHZ’)经EMS诱变后的群体中筛选出1个出现类病斑症状的突变体LMM43,通过LMM43与野生型亲本杂交后得到的F_(2)代分离群体进行表型分析,确定类病斑性状的遗传模式。利用BSA-seq技术,对类病斑表型的个体和正常个体的DNA混合样本进行高通量测序。通过关联分析单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)及插入缺失(insertion and deletion,InDel)的差异结合表现型分析,将目标基因初步定位在水稻第10号染色体的一段区间内,该区间长度约为1.37 Mb,包含199个基因,最终确定了5个候选基因。 展开更多
关键词 水稻 类病斑 抗病性 bsa-seq
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基于BSA-seq技术的块茎芽眼深度QTL定位分析
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作者 邵顺伟 陈卓 +9 位作者 兰振东 蔡兴奎 邹华芬 李晨曦 唐景华 朱熙 张彧 董建科 金辉 宋波涛 《作物学报》 北大核心 2025年第7期1725-1735,共11页
芽眼深度是马铃薯块茎的重要性状之一,对马铃薯的外观品质及加工适宜性具有重要影响。为挖掘控制马铃薯芽眼深度的数量性状位点,本研究以四倍体深芽眼品种“华薯12”为母本、浅芽眼高代品系“天2002-4-5”为父本,杂交获得F_(1)代分离群... 芽眼深度是马铃薯块茎的重要性状之一,对马铃薯的外观品质及加工适宜性具有重要影响。为挖掘控制马铃薯芽眼深度的数量性状位点,本研究以四倍体深芽眼品种“华薯12”为母本、浅芽眼高代品系“天2002-4-5”为父本,杂交获得F_(1)代分离群体,共255份无性系。基于连续2年田间表型观测数据,分别选取20个深芽眼和20个浅芽眼个体构建混合池,利用BSA-seq技术进行芽眼深度相关性状的QTL定位,并结合传统QTL定位方法,采用完备区间作图法构建遗传连锁图谱,成功定位到2个与芽眼深度相关的QTL位点。2年表型相关性分析结果表明,马铃薯块茎芽眼深度主要受遗传因素的控制。10号染色体上qEyd10.1位点的LOD值为4.96,表型贡献率为14.49%;3号染色体上qEyd3.1位点的LOD值为3.29,表型贡献率为10.18%。其中, qEyd3.1与此前报道的芽眼深度调控位点一致,而qEyd10.1为新发现的QTL。2个位点的加性效应均为负值,表明降低芽眼深度的等位基因来源于浅芽眼亲本“天2002-4-5”。通过对定位区间内候选基因注释结合芽眼深浅材料基因结构变异分析,推测Soltu.DM.10G029390.1、Soltu.DM.03G036540.1、Soltu.DM.03G036140.1和Soltu.DM.03G036580.1可能为与芽眼深度相关的候选基因。本研究通过BSA-seq与传统QTL定位相结合的方式,快速完成了同源四倍体马铃薯中芽眼深度这一数量性状的调控位点定位工作,并初步确定了4个候选基因,为进一步完成芽眼深度调控基因的克隆及其遗传机制解析奠定了重要基础,也为培育具有浅芽眼块茎的四倍体马铃薯新品种提供了参考。 展开更多
关键词 马铃薯 芽眼深度 QTL定位 bsa-seq 遗传连锁图谱
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基于BSA-seq技术定位绿豆种皮光泽基因
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作者 王茜 李博博 +9 位作者 吴若楠 李晨浩 张泽燕 闫建俊 朱慧珺 闫虎斌 郝青婷 赵雪英 高伟 张耀文 《植物遗传资源学报》 北大核心 2025年第7期1436-1447,共12页
种皮光泽不仅影响绿豆外观品质和商品价值,还与其抗逆等性状密切相关。以明绿豆并绿15号和毛绿豆冀绿20号为亲本配置杂交组合,构建F2分离群体,利用BSA-seq技术进行绿豆种皮光泽相关基因的定位。结果表明,种皮光泽性状的相关基因定位在1... 种皮光泽不仅影响绿豆外观品质和商品价值,还与其抗逆等性状密切相关。以明绿豆并绿15号和毛绿豆冀绿20号为亲本配置杂交组合,构建F2分离群体,利用BSA-seq技术进行绿豆种皮光泽相关基因的定位。结果表明,种皮光泽性状的相关基因定位在11号染色体48061~11475465 bp的区域,大小11.43 Mb。候选区域内共注释到1292个基因,其中在亲本之间共注释到163个非同义突变基因,48个移码突变基因。进一步进行精细定位,开发8个KASP标记和7个InDel标记将种皮光泽的候选区间缩小至0.39 Mb(9969581~10362350 bp)。通过数据库基因功能注释分析,定位区间内共注释到9个非同义突变基因,结合qRT-PCR表达分析筛选出jg34407、jg34408、jg34414、jg34422、jg34433和jg34438共6个绿豆种皮光泽性状候选基因。其中jg34407基因功能注释为E3泛素连接酶,jg34438基因注释为转录因子MYC2,推测jg34407和jg34438可能通过调控蛋白质降解以及次生代谢产物合成间接影响种皮光泽性状。本研究为后期基因克隆和分子标记辅助育种提供了理论基础。 展开更多
关键词 绿豆 种皮光泽 bsa-seq 基因定位 分子标记
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基于BSA-seq技术的辣椒分枝QTL定位
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作者 宋拉拉 苏丹 +3 位作者 白立伟 夏忠敏 陈锡 胡明文 《分子植物育种》 北大核心 2025年第6期1864-1873,共10页
分枝是辣椒(Capsicum annuum L.)重要的农艺性状之一,不仅影响辣椒产量的多少,也是观赏效果的重要因素。本研究以独杆辣椒(du-1)、簇生朝天椒(S16)及它们的F_(2)代分离群体为材料,构建亲本及F_(2)代辣椒分枝极端混池,利用BSA-seq技术,... 分枝是辣椒(Capsicum annuum L.)重要的农艺性状之一,不仅影响辣椒产量的多少,也是观赏效果的重要因素。本研究以独杆辣椒(du-1)、簇生朝天椒(S16)及它们的F_(2)代分离群体为材料,构建亲本及F_(2)代辣椒分枝极端混池,利用BSA-seq技术,筛选辣椒分枝性状的QTLs。结果显示,SNP与InDel关联区域取其交集,得到9个与性状相关的候选区域,总长度为21.53 Mb,主要集中在1号染色体上。同时,利用BLAST软件对候选区间内编码基因进行多个数据库深度注释,共注释到121个基因,其中非同义突变基因31个,移码突变基因5个。结合候选区域内基因的GO富集和KEGG富集分析,筛选出与辣椒分枝性状相关候选基因7个。以上结果为进一步辣椒分枝性状基因克隆和分子标记辅助育种提供基础。 展开更多
关键词 辣椒 分枝 bsa-seq QTL定位
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结合BSA-seq和QTL分析鉴定东乡野生稻耐储性QTL
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作者 王世林 吴婷 +2 位作者 周诗琪 宋思铭 胡标林 《中国水稻科学》 北大核心 2025年第6期789-800,共12页
【目的】水稻种子储藏对保障粮食安全生产具有重要意义,挖掘水稻耐储性基因资源,为培育耐储藏水稻新品种奠定遗传基础。【方法】以东乡野生稻东野80为供体、栽培稻R974为轮回亲本,分别构建了364份回交重组自交系和84份BC3F7单片段代换... 【目的】水稻种子储藏对保障粮食安全生产具有重要意义,挖掘水稻耐储性基因资源,为培育耐储藏水稻新品种奠定遗传基础。【方法】以东乡野生稻东野80为供体、栽培稻R974为轮回亲本,分别构建了364份回交重组自交系和84份BC3F7单片段代换系。统计人工老化处理种子发芽率,并结合QTL和BSA-seq分析联合检测水稻耐储性QTL,进一步通过基因注释信息、GO富集分析和基因测序预测候选基因。【结果】利用单片段代换系共检测到9个耐储性QTL,分别为qSS1.1、q SS1.2、q SS2.1、qSS2.2、q SS3、q SS6、q SS7、qSS9.1和q SS11,贡献率为1.60%~17.82%,其中7个QTL的增效等位基因来自东野80,且qSS7和qSS11为新的QTL。而利用回交重组自交系进行BSA-seq分析,共关联到37个位点,分布于2、4、5、6、7、8、9和11号染色体上。其中,qSS7在2种方法中均被检测,将其进一步缩小至480.1 kb区间内。此外,qSS4和qSS9.2分别被缩小至199.7 kb和177.8 kb的交叠区间内。结合基因注释信息查询、GO富集分析和基因测序结果,推测LOC_Os04g31040和LOC_Os04g31070为q SS4的候选基因,LOC_Os07g07930为qSS7的候选基因,LOC_Os09g15800和LOC_Os09g15835为qSS9.2的候选基因。【结论】本研究通过QTL和BSA-Seq分析分别鉴定到9个和37个耐储性QTL,并推测了qSS4、qSS7和qSS9.2的候选基因。其中,qSS4和qSS9.2的东野80增效等位基因显著提高水稻种子耐储性,可为东乡野生稻耐储性QTL克隆及其在栽培稻耐储性遗传育种利用提供新的有利位点。 展开更多
关键词 东乡野生稻 耐储性 QTL定位 bsa-seq
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基于BSA-Seq筛选鲜食糯玉米抗南方锈病候选基因 被引量:1
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作者 吴蓓 田耀加 +3 位作者 叶伟忠 黄亮华 王秋燕 秦晓霜 《植物生理学报》 北大核心 2025年第1期61-70,共10页
玉米南方锈病(southern corn rust, SCR)是影响华南地区鲜食玉米生产的主要病害之一,筛选抗南方锈病相关基因对鲜食糯玉米(Zea mays var. sinensis)抗病品种的选育和遗传改良具有重要作用。本研究以鲜食糯玉米高抗南方锈病自交系09N1-1-... 玉米南方锈病(southern corn rust, SCR)是影响华南地区鲜食玉米生产的主要病害之一,筛选抗南方锈病相关基因对鲜食糯玉米(Zea mays var. sinensis)抗病品种的选育和遗传改良具有重要作用。本研究以鲜食糯玉米高抗南方锈病自交系09N1-1-1和高感病自交系09N9-3为亲本进行杂交,构建F2代分离群体。从F_(2)代群体中挑选高抗和高感南方锈病的单株各30株,分别构建极端性状的DNA混池,通过混合群体分离测序(bulked-segregant analysis sequencing, BSA-Seq)技术初步定位鲜食糯玉米抗南方锈病相关基因。结果表明,测序平均覆盖深度为33.50×,得到1个与抗病相关的候选区域,长度为4.23 Mb,位于玉米10号染色体上,共包含150个基因。其中,有119个基因存在非同义突变, 53个基因存在移码突变。对候选区域内基因进行注释分析,定位到7个与抗病相关的候选基因:Zm00001d023332、Zm00001d023265、Zm00001d023267、Zm00001d023304、Zm00001d023303、Zm00001d023393和Zm00001d023273。研究结果可为鲜食糯玉米南方锈病抗病基因的克隆及抗病新品种选育提供参考依据。 展开更多
关键词 鲜食糯玉米 玉米南方锈病 bsa-seq 候选基因
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基于BSA-seq和RNA-seq技术挖掘黄瓜白粉病抗性基因
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作者 秦垒 张巧英 +3 位作者 孙雷 石昊颖 檀海斌 石学萍 《华北农学报》 北大核心 2025年第2期153-160,共8页
黄瓜白粉病是危害黄瓜生产的主要病害之一,制约了黄瓜的安全生产。定位黄瓜抗白粉病相关基因,有助于理解黄瓜对白粉病抗性的遗传规律和分子机制,也为抗病育种提供了多样化的基因资源。以黄瓜抗病自交系QK和感病自交系QG为亲本,构建了QK&... 黄瓜白粉病是危害黄瓜生产的主要病害之一,制约了黄瓜的安全生产。定位黄瓜抗白粉病相关基因,有助于理解黄瓜对白粉病抗性的遗传规律和分子机制,也为抗病育种提供了多样化的基因资源。以黄瓜抗病自交系QK和感病自交系QG为亲本,构建了QK×QG的F_(1)、F_(2)群体。采用极端性状混池重测序(BSA-seq)的方法对黄瓜白粉病抗性基因进行初步定位,结合转录组数据和基因注释信息对抗病表型关联区间进行缩短,发掘序列变异,筛选关键基因。人工接种结果显示:F_(1)植株全部表现感病,说明白粉病杭性可能由隐性基因控制;F_(2)群体表现出从抗病到感病的连续正态分布。利用BSA-seq、SNP-Index方法和QTG-seq法,分析结果的交集为5号染色体的19—21 Mb区段,该区段共有77个注释基因在样本间存在SNP差异,其中非同义突变共有33个。转录组测序(RNA-seq)结果显示,感病材料中共有309个上调基因,697个下调基因。在5号染色体的候选区段内有13个基因的表达量在接病后差异显著,基于差异表达基因和BSA分析结果将该区段内的候选基因缩减为3个,其中仅LOC101207011基因内检测到SNP突变。候选基因LOC101207011是由第656位的Val突变为了Leu,实时荧光PCR也验证该基因与黄瓜抗白粉病具有连锁关系。 展开更多
关键词 黄瓜 bsa-seq RNA-SEQ 白粉病 定位
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Mapping of the Pepper Purple Fruit Gene and Development of Molecular Markers Based on BSA-Seq
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作者 Xinxin Liu Yueyue Zhang +6 位作者 Rahat Sharif Weiqin Mo Zhenrong Li Guiling Yang Chao Song Ting Ye Changming Chen 《Phyton-International Journal of Experimental Botany》 2025年第6期1695-1709,共15页
The color difference of capsicum fruit is closely related to the type and content of pigment in the peel,which is mainly determined by anthocyanins,chlorophyll,and carotenoids.This study used green“CA59”and purple“... The color difference of capsicum fruit is closely related to the type and content of pigment in the peel,which is mainly determined by anthocyanins,chlorophyll,and carotenoids.This study used green“CA59”and purple“Z81”pepper fruits as parents to create the F2 generation.The fruit color of 466 F2 population was identified,and the extreme individuals from this population were selected for Bulked Segregant Analysis(BSA)using resequencing.Genetic analysis revealed that a pair of genes controls the expression of the purple fruit trait in capsicum.Using functional annotation,expression analysis,and sequencing analysis of candidate genes,it was determined that there were four genes in the region between InDel 67 and InDel 75(185,664,068 BP-186,514,350 bp)on chromosome 10,that is the linkage interval for pepper purple fruit.There are 7 SNPs in the CaMYB1 gene(Capann_59V1aChr10g016200)in the pepper variety“Z81”.Of these,4 SNPs are located in the gene’s coding region.These 4 SNPs lead to 2 mutations that do not change the amino acid sequence(synonymous mutations)and 2 mutations that do change the amino acid sequence(non-synonymous mutations).Additionally,the expression level of the CaMYB1 gene in the purple fruit of“Z81”is significantly higher than that in the green fruit of“CA59”.CaMYB1 is believed to be a crucial candidate gene in regulating anthocyanin production in purple capsicum fruit.A molecular marker,InDel 67,was successfully developed,with a total separation rate of 92.4%. 展开更多
关键词 PEPPER purple fruit genetic analysis bsa-seq CaMYB1
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基于BSA-Seq和RNA-Seq方法鉴定大豆抗豆卷叶螟候选基因 被引量:14
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作者 曾维英 赖振光 +3 位作者 孙祖东 杨守臻 陈怀珠 唐向民 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期1460-1471,共12页
豆卷叶螟(Lamprosema indicata Fabricius)是重要的大豆食叶性害虫,挖掘大豆抗豆卷叶螟相关基因对大豆抗虫品种选育和遗传改良至关重要。本研究用大豆高抗豆卷叶螟材料赶泰-2-2和高感豆卷叶螟材料皖82-178进行杂交构建F2代分离群体,从30... 豆卷叶螟(Lamprosema indicata Fabricius)是重要的大豆食叶性害虫,挖掘大豆抗豆卷叶螟相关基因对大豆抗虫品种选育和遗传改良至关重要。本研究用大豆高抗豆卷叶螟材料赶泰-2-2和高感豆卷叶螟材料皖82-178进行杂交构建F2代分离群体,从303个F2代单株中挑选出高抗豆卷叶螟和高感豆卷叶螟的单株各30株,分别构建2个极端性状的DNA混合池用于全基因组重测序以分析控制豆卷叶螟相关的候选基因。结果表明,4个样本中共有11,963,077个单核苷酸多态性(SNPs)标记,根据SNP-index方法关联分析,共有329个基因位于99%置信区间外,这些基因主要集中在7号染色体5,601,065~5,865,237 bp区间(总长为0.26 Mb)、16号染色体2,975,110~6,336,096 bp区间(总长为3.36 Mb)、18号染色体44,366,115~54,297,600 bp区间(总长为9.93 Mb)等区域内。将BSA-Seq结果与转录组测序结果进行联合分析发现,有12个基因相关联;最后,结合生物信息学分析、候选基因的表达模式和基因的同源注释,锁定CNGC4、WRKY16转录因子、AAP7、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶、ZPR1B等12个基因为控制豆卷叶螟性状相关的候选基因。本研究结果不仅为解析大豆抗豆卷叶螟的分子机理奠定重要的基础,也将为大豆抗虫基因的克隆奠定坚实的理论基础。 展开更多
关键词 大豆 豆卷叶螟 bsa-seq RNA-SEQ 候选基因
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基于BSA-Seq技术鉴定大豆耐荫性状相关候选基因 被引量:7
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作者 曾维英 苏燕竹 +5 位作者 赖振光 杨守臻 陈怀珠 谭玉荣 孙祖东 盖钧镒 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期1006-1015,共10页
间套种是我国南方大豆种植的重要模式,而高秆作物的遮荫胁迫导致大豆产量和品质难以提升,是制约大豆间套种发挥潜力的限制因素,因此对大豆耐荫性的解析尤为重要。本研究以强耐荫材料矮脚早和极不耐荫材料齐佩华为亲本构建RILs群体,根据... 间套种是我国南方大豆种植的重要模式,而高秆作物的遮荫胁迫导致大豆产量和品质难以提升,是制约大豆间套种发挥潜力的限制因素,因此对大豆耐荫性的解析尤为重要。本研究以强耐荫材料矮脚早和极不耐荫材料齐佩华为亲本构建RILs群体,根据耐荫指数表型鉴定RIL群体的耐荫性,从RIL群体中挑选出强耐荫和极不耐荫家系各30个,分别构建成两个极端性状DNA子代混合池,对子代混合池和亲本池分别开展平均60×和30×覆盖深度的全基因组重测序,通过计算两个子代池的SNP-index,比较SNP-index在耐荫池与不耐荫池染色体各区段的差异,定位耐荫性状的关联区域;根据基因注释信息,预测候选基因。结果表明4个样本共得到11963077个单核苷酸多态性(SNPs)标记,发现控制耐荫相关性状的基因主要集中在1号染色体51942~505708 bp区段、4号染色体50972768~51854631 bp区段、9号染色体48778767~50178743 bp区段和18号染色体40858027~43909456 bp区段内,共包含408个基因,通过基因注释和功能分析发现ACC氧化酶5、生长素诱导蛋白5NG4、光敏色素相关丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶、转录因子MYBJ6和MYB128等5个基因可能在大豆耐荫过程中起着重要作用,确定为大豆耐荫性的候选基因。本研究结果将为解析大豆耐荫的分子机理奠定重要的基础,同时为大豆耐荫基因的图位克隆奠定坚实的理论基础。 展开更多
关键词 大豆 耐荫 bsa-seq 候选基因
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利用BSA-Seq方法鉴定向日葵耐盐候选基因 被引量:6
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作者 贾秀苹 卯旭辉 +3 位作者 岳云 陈炳东 梁根生 王兴珍 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期777-784,共8页
挖掘向日葵耐盐基因对作物耐盐品种选育具有重要意义。本研究利用高耐盐自交系Y07-136R(父本)和不耐盐自交系Y05-222A(母本)及其构建的包含600个单株的F2分离群体为试验材料,挑选分离群体中耐盐和不耐盐的极端分离株系各50株单株,分别... 挖掘向日葵耐盐基因对作物耐盐品种选育具有重要意义。本研究利用高耐盐自交系Y07-136R(父本)和不耐盐自交系Y05-222A(母本)及其构建的包含600个单株的F2分离群体为试验材料,挑选分离群体中耐盐和不耐盐的极端分离株系各50株单株,分别构建两个DNA池用于高通量测序以分析筛选向日葵耐盐候选基因。通过本研究共发掘到6个耐盐关键候选基因(Ha0_73Ns. 730/Ha10. 228/Ha12. 2377/Ha2. 3822/Ha8. 182/Ha9.5434),功能注释分别为依赖ATP的RNA解旋酶、热休克蛋白、生长素结合蛋白、溶质运载蛋白家族成员、核糖体蛋白S21家族成员及未知功能蛋白。通过候选基因同源分析、代谢通路分析及共表达基因分析发现,这些基因参与植物逆境胁迫调控,可能具有耐盐的生物学功能。本研究结果为耐盐基因的克隆及功能解析提供了重要候选基因,同时为向日葵耐盐新品种的选育提供了重要的分子标记。 展开更多
关键词 向日葵 耐盐基因 bsa-seq 同源分析 功能注释
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利用BSA-Seq方法定位一个水稻早衰相关基因OsBRCA1 被引量:3
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作者 蒋家焕 朱永生 +5 位作者 陈丽萍 郑燕梅 蔡秋华 谢华安 王爱荣 张建福 《福建农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期131-137,共7页
【目的】水稻早衰突变体是研究水稻衰老机制的良好载体。定位和克隆水稻早衰相关基因,有助于理解水稻早衰的遗传规律和分子机制,为相关基因的作用机制研究奠定基础。【方法】用EMS化学诱变处理粳稻云引,获得一个稳定遗传的早衰突变体w14... 【目的】水稻早衰突变体是研究水稻衰老机制的良好载体。定位和克隆水稻早衰相关基因,有助于理解水稻早衰的遗传规律和分子机制,为相关基因的作用机制研究奠定基础。【方法】用EMS化学诱变处理粳稻云引,获得一个稳定遗传的早衰突变体w14,与日本晴杂交构建F;分离群体,并在群体中各选择100个隐性单株和显性单株的DNA等量混合,利用BSA-seq分析两个DNA池之间的差异位点,定位水稻早衰相关基因。【结果】突变体w14的早衰表型受单隐性基因控制,对两个DNA池测序结果进行单基因定位和突变基因的鉴定,发现单基因主峰位于Chr3,候选区间为Chr3:27.5~29.5 Mb,进一步在目标区域内找到2个符合条件的候选因果变异。【结论】候选基因LOC_Os03g49210突变位点是由野生型的C突变为T,且该突变位于候选基因的第2外显子上,属于错义突变,造成了该基因编码的第20个氨基酸由T(苏氨酸)变成I(异亮氨酸),从而可能导致了基因功能的改变,因此,将该基因定为本研究的候选基因,因与人类BRCA1同源,命名为OsBRCA1。 展开更多
关键词 水稻 突变体 早衰 基因克隆 bsa-seq
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基于BSA-seq的大豆棕色荚皮L2基因定位 被引量:2
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作者 樊超 毕影东 +5 位作者 李炜 梁文卫 刘淼 刘建新 杨光 邸树峰 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2024年第4期64-71,共8页
大豆荚皮的颜色是重要的驯化性状和表型特征,与炸荚习性和躲避捕食关系紧密。大豆荚皮颜色主要由2对等位基因控制,其中棕色荚皮L2基因尚未被鉴定。为了在大豆基因组上对该基因进行鉴定,为大豆棕色荚皮相关基因功能解析和育种应用提供一... 大豆荚皮的颜色是重要的驯化性状和表型特征,与炸荚习性和躲避捕食关系紧密。大豆荚皮颜色主要由2对等位基因控制,其中棕色荚皮L2基因尚未被鉴定。为了在大豆基因组上对该基因进行鉴定,为大豆棕色荚皮相关基因功能解析和育种应用提供一定的理论基础。以栽培大豆中龙优203(黄色荚皮)和野生大豆FF1235(黑色荚皮)为亲本构建F 2分离群体进行遗传分析。利用F 2群体棕色豆荚和黄色豆荚单株构建混池进行BSA-seq定位分析,并在此基础上进行重组交换单株分析。结果表明,大豆棕色荚皮性状为1对等位基因控制的质量性状。棕色荚皮L2基因关联区域位于3号染色体0~0.75 Mb的区段。进一步开发InDel分子标记进行精细定位,获得具有多态性的InDel引物7对。最终将棕色荚皮位点定位于3号染色体上的Indel-L2-3~Indel-L2-6,物理距离为344 kb。定位区间内共有候选基因32个,其中Glyma.03G005700基因注释为异丙基苹果酸聚合酶,与已发现的黑色荚皮基因L1(Glyma.19G120400)高度同源,其功能为将4-羟基丙酮酸转化为红果酸和番石榴酸,可能是调控大豆棕色荚皮形成的关键基因。 展开更多
关键词 大豆 荚皮颜色 基因定位 bsa-seq
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基于BSA-seq法的水稻稻瘟病抗性基因定位 被引量:4
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作者 陈丽 孙建昌 王昕 《中国稻米》 北大核心 2024年第6期35-41,48,共8页
为挖掘水稻稻瘟病抗性相关性状基因位点,于2022—2023年以水稻2013ZJP-3×京宁11杂交得到的重组自交系群体为试验材料,采用人工接种和自然诱发相结合的方法鉴定其对叶瘟、穗颈瘟的抗性,并采用BSA-seq法进行QTL定位分析。表型鉴定结... 为挖掘水稻稻瘟病抗性相关性状基因位点,于2022—2023年以水稻2013ZJP-3×京宁11杂交得到的重组自交系群体为试验材料,采用人工接种和自然诱发相结合的方法鉴定其对叶瘟、穗颈瘟的抗性,并采用BSA-seq法进行QTL定位分析。表型鉴定结果表明,F11群体的稻瘟病抗性呈连续性分布,且大部分材料表现为中抗,偏向于抗病亲本京宁11。筛选出19个抗性株系和17个感性株系材料,构建了抗感池。经过测序、变异检测和关联分析,共得到2个与稻瘟病抗性相关的区间,主要分布在5号和7号染色体上,区间总长度为1.45 Mb,共筛选出94个差异基因,其中,移码突变基因12个,非同义突变基因82个,移码和非同义突变基因9个。最终预测,基因LOC_Os05g10630、LOC_Os05g10650和LOC_Os07g08960与水稻稻瘟病抗性的相关性较大。 展开更多
关键词 水稻 稻瘟病 bsa-seq 基因定位
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