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云南某奶牛场犊牛腹泻的病原学检测 被引量：1
1
作者 陈茜 岳华 汤承 《四川畜牧兽医》 2022年第5期29-31,共3页
云南省某奶牛场1~3月龄犊牛暴发以腹泻为主要症状的疾病,本试验对该场送检的16份犊牛腹泻粪便样本进行牛A群轮状病毒(BRVA)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、牛冠状病毒(BCoV)、牛诺如病毒(BNoV)、牛凸隆病毒(BToV)、牛纽布病毒(BNeV)、沙门氏... 云南省某奶牛场1~3月龄犊牛暴发以腹泻为主要症状的疾病,本试验对该场送检的16份犊牛腹泻粪便样本进行牛A群轮状病毒(BRVA)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、牛冠状病毒(BCoV)、牛诺如病毒(BNoV)、牛凸隆病毒(BToV)、牛纽布病毒(BNeV)、沙门氏菌(Salmonella)、产肠毒素大肠杆菌(ETEC)、安氏隐孢子虫(C.andersoni)9种病原的PCR检测。结果得出:16份样本中BNeV、BRVA、BToV和BNoV的检出率分别为62.5%(10/16)、37.5%(6/16)、18.75%(3/16)和6.25%(1/16),其他病原体未检出。结合临床检查结果,可以确定BRVA、BNoV、BNeV和BToV这四种病原的混合感染是引起该养殖场犊牛腹泻的主要原因,本结果为该场犊牛腹泻疾病的针对性防控提供了依据。 展开更多
关键词 奶牛 brva BNoV BNeV BToV PCR检测
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P[1]型A群牛轮状病毒VP8重组蛋白的表达与免疫原性研究 被引量：3
2
作者 姜晓明 汤承 岳华 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2022年第5期1970-1976,共7页
【目的】利用原核表达系统表达P[1]型A群牛轮状病毒(BRVA)VP8重组蛋白,并评价其反应原性与免疫原性。【方法】根据国内流行毒株RVA/Cow-tc/CHN/SDA2/2018/G6P[1]VP8基因序列(GenBank登录号:MN937517)进行密码子偏好性优化,构建P[1]型BRV... 【目的】利用原核表达系统表达P[1]型A群牛轮状病毒(BRVA)VP8重组蛋白,并评价其反应原性与免疫原性。【方法】根据国内流行毒株RVA/Cow-tc/CHN/SDA2/2018/G6P[1]VP8基因序列(GenBank登录号:MN937517)进行密码子偏好性优化,构建P[1]型BRVA VP8大肠杆菌原核表达系统,将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,IPTG诱导表达,通过SDS-PAGE分析重组蛋白表达形式。镍琼脂糖亲和层析纯化重组蛋白,Western blotting鉴定重组蛋白与兔抗G6P[1]型BRVA血清特异性结合能力,并将P[1]型BRVA VP8重组蛋白免疫兔,首免后2周加强免疫1次,共免疫2次。分别用间接ELISA方法与中和试验评价其免疫原性。【结果】本研究成功构建P[1]型BRVA VP8重组蛋白的原核表达系统;SDS-PAGE结果显示,高效表达大小为20 ku的P[1]型BRVA VP8重组蛋白,以可溶形式存在;Western blotting结果显示,P[1]型BRVA VP8重组蛋白能与兔抗G6P[1]型BRVA血清特异性结合;间接ELISA结果显示,P[1]型BRVA VP8重组蛋白亚单位疫苗能诱导兔产生抗体,兔首免1周后抗体开始出现并迅速上升,于第3周达到高峰,至第5周仍维持在较高水平;中和试验结果显示,第2次免疫后抗体最高的兔血清对G6P[1]型和G8P[1]型BRVA的中和效价分别为1∶17783和1∶64。【结论】本研究成功构建原核表达系统表达P[1]型BRVA VP8重组蛋白,并证实其具有良好的反应原性及免疫原性,为研制BRVA亚单位疫苗奠定基础。 展开更多
关键词 A群牛轮状病毒(brva) P1型 VP8蛋白 原核表达 免疫原性
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