青光安Ⅱ号方通过Brn-3b调控Bax/Bcl-2/Caspase-3抑制青光眼RGCs凋亡的机制研究 被引量：1

1

作者 李文娟 谭涵宇 +3 位作者 时健 彭榆津 周蓓 彭清华 《中国中西医结合杂志》 北大核心 2025年第3期330-336,共7页

目的探讨青光安Ⅱ号方通过脑特定蛋白3B(Brn-3b)调控B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)/Bcl-2相关X蛋白(Bax)/半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)抑制青光眼RGCs凋亡的机制。方法将60只SPF级健康雄性SD大鼠,饲养1周后使用随机数字表将大鼠分... 目的探讨青光安Ⅱ号方通过脑特定蛋白3B(Brn-3b)调控B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)/Bcl-2相关X蛋白(Bax)/半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)抑制青光眼RGCs凋亡的机制。方法将60只SPF级健康雄性SD大鼠,饲养1周后使用随机数字表将大鼠分入空白组、模型组、青光安Ⅱ号方低剂量组、青光安Ⅱ号方中剂量组、青光安Ⅱ号方高剂量组和益脉康组,每组10只。除空白组,其余各组烙闭巩膜上静脉引起大鼠眼压升高造模。空白组和模型组用生理盐水灌胃,益脉康组和青光安Ⅱ号方各剂量组分别用益脉康[9.67 g/(kg·d)]和相应剂量青光安Ⅱ号方[3.375、6.75、13.5 g/(kg·d)]灌胃,每组均灌胃4周。术前、术后30 min、术后1、7、14、28天各组测量眼压。处死大鼠后分离视网膜组织,部分组织在光镜下观察,并检测每组大鼠视网膜RGCs凋亡以及RGCs中Brn-3b、Caspase-3、Bcl-2、Bax蛋白及mRNA的表达情况。结果各造模组大鼠眼压均较造模前有所升高(P<0.05),且在4周时也能保持高眼压状态。与同时期模型组比较,青光安Ⅱ号方各组和益脉康组RGCs凋亡数量均明显降低(P<0.01);与同时期青光安Ⅱ号方低、中剂量组和益脉康组比较,青光安Ⅱ号方高剂量组RGCs凋亡数量最低(P<0.05)。与模型组比较,益脉康组与青光安Ⅱ号方高剂量组Caspase-3和Bax蛋白及mRNA表达明显升高(P<0.01),益脉康组、青光安Ⅱ号方高剂量组Brn-3和Bcl-2蛋白及mRNA表达明显降低(P<0.01)。结论青光安Ⅱ号方通过调控Brn-3b及Bax/Bcl-2/Caspase-3来抑制RGCs凋亡与,与益脉康疗效相当。 展开更多

关键词 青光安Ⅱ号方 脑特定蛋白3B B淋巴细胞瘤-2基因/Bcl-2相关X蛋白/半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3 视网膜神经节细胞 凋亡

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Brn-4抗体对大鼠海马神经干细胞分化为神经元的影响 被引量：3

2

作者 田美玲 胡文忠 +3 位作者 金国华 秦建兵 谭雪锋 施金洪 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期85-88,共4页

为探讨Brn-4在海马神经干细胞(NSCs)向神经元分化过程中的作用,分别制备成年SD大鼠海马伞切割侧和正常侧海马提取液;将从鼠胚海马中分离、克隆和扩增的神经干细胞球分成6组:(1)切割组:加入含切割侧海马提取液的DMEM/F12培养基;(2)切割... 为探讨Brn-4在海马神经干细胞(NSCs)向神经元分化过程中的作用,分别制备成年SD大鼠海马伞切割侧和正常侧海马提取液;将从鼠胚海马中分离、克隆和扩增的神经干细胞球分成6组:(1)切割组:加入含切割侧海马提取液的DMEM/F12培养基;(2)切割阻断组:在切割组培养基中加入Brn-4多克隆抗体;(3)正常组:加入含正常侧海马提取液的DMEM/F12培养基;(4)正常阻断组:在正常组培养基中加入Brn-4多克隆抗体;(5)空白组:加入单纯的DMEM/F12培养基;(6)空白阻断组:在空白组培养基中加入Brn-4多克隆抗体。培养后第14d对NSCs分化的神经元进行MAP-2免疫荧光检测,图像处理系统计数各组MAP-2阳性神经元数、处理胞体面积和细胞周长,STATA7.0软件进行统计分析。结果显示:各组以上三项形态学指标从优到劣的排列顺序为:切割组、正常组、切割阻断组、正常阻断组、空白组和空白阻断组。统计分析结果表明,除空白组与空白阻断组三项指标无显著性差异外,其余各组间差异均有显著性意义(P<0.05)。上述结果提示,Brn-4多克隆抗体在体外能部分地阻断切割海马伞侧海马提取液促进NSCs向神经元分化的作用,因而Brn-4在海马NSCs向神经元分化过程中可能发挥重要作用。 展开更多

关键词 brn-4 神经干细胞 海马提取液 分化 神经元 大鼠

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HPV16 E7和Brn-3a在宫颈癌前病变中的表达及其意义 被引量：5

3

作者 贾英 吴瑾 唐良萏 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期568-571,共4页

目的研究HPV16E7和Brn3a在各级宫颈癌前病变(CIN)中的表达情况以及两者之间的关系,从分子生物学水平探讨其作为宫颈癌前病变的特异性标志物的可能性,以期寻找新的宫颈癌前病变筛查方法。方法对71例患者行宫颈薄层细胞学检查(ThinprepCel... 目的研究HPV16E7和Brn3a在各级宫颈癌前病变(CIN)中的表达情况以及两者之间的关系,从分子生物学水平探讨其作为宫颈癌前病变的特异性标志物的可能性,以期寻找新的宫颈癌前病变筛查方法。方法对71例患者行宫颈薄层细胞学检查(ThinprepCellTest,TCT),并在阴道镜下组织学活检,其TCT残留标本,用RTPCR法检测各标本中HPV16E7和Brn3a的表达。结果HPV16E7和Brn3a表达按细胞学分级和病理学分级其阳性率呈逐级增高趋势,差异均有显著性(P<0.0001)。两者作为宫颈癌前病变和HPV活化状态的诊断标志物,其结果是一致的(P<0.05)。结论TCT残留标本适合进行RTPCR分析研究。HPV16E7可作为宫颈癌前病变和HPV活化状态的生物标志物。Brn3a可作为可靠的CIN3生物标志物和HPV致癌基因转录活化的标志物。HPV16E7和Brn3a相互作用,可能为宫颈高度癌变发展的原因之一。 展开更多

关键词 宫颈癌前病变 TCT HPV16 E7 brn-3A RT-PCR

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Brn4在神经干细胞向神经元分化中的作用及其机制研究 被引量：2

4

作者 谭雪锋 张蕾 +3 位作者 田美玲 朱蕙霞 秦建兵 金国华 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期267-272,共6页

目的:观察脑因子4(Brn4)对神经干细胞(NSCs)向神经元分化的诱导作用,探讨Brn4促进新生神经元成熟和维持细胞存活的分子机制。方法:应用基因重组技术,构建pLV5-Brn4-GFP慢病毒表达载体,感染NSCs后使外源性Brn4基因稳定高表达。NSCs诱导... 目的:观察脑因子4(Brn4)对神经干细胞(NSCs)向神经元分化的诱导作用,探讨Brn4促进新生神经元成熟和维持细胞存活的分子机制。方法:应用基因重组技术,构建pLV5-Brn4-GFP慢病毒表达载体,感染NSCs后使外源性Brn4基因稳定高表达。NSCs诱导分化后,应用细胞免疫荧光法检测NSCs分化为微管相关蛋白-2(MAP-2)阳性神经元的情况,应用TUNEL法检测分化细胞的凋亡情况。结果:重组病毒感染NSCs后,Brn4蛋白表达较对照组增高约5倍,同时分化细胞中胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)及其受体GFRα-1和Ret蛋白的相对表达量均明显高于对照组(P﹤0.01)。NSCs分化2周后,Brn4过表达组MAP-2阳性神经元的分化率(65.71±5.18%)明显高于对照组(12.57±1.77%)(P﹤0.01),且细胞胞体较大,突起较丰富。而凋亡细胞的百分率(2.73±0.44%)明显低于对照组(8.39±0.95%,P﹤0.01)。结论:Brn4基因过表达可诱导NSCs向神经元分化,同时通过GDNF信号通路促进新生神经元的发育成熟,并通过抑制细胞凋亡提高细胞存活率。 展开更多

关键词 brn4 神经干细胞 神经元 分化 帕金森病 大鼠

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Brn-4在大鼠海马神经干细胞向神经元分化中的作用 被引量：2

5

作者 施金洪 田美玲 +4 位作者 朱蕙霞 秦建兵 谭雪锋 王磊 金国华 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期431-435,共5页

为探讨Brn-4在海马神经干细胞(neural stem cells,NSCs)向神经元分化过程中的作用,分别制备切割海马伞侧和正常侧海马提取液,将鼠胚海马神经干细胞球分成3组:(1)切割组加入含切割侧海马提取液的DMEM/F12无血清培养基;(2)正常组加入含正... 为探讨Brn-4在海马神经干细胞(neural stem cells,NSCs)向神经元分化过程中的作用,分别制备切割海马伞侧和正常侧海马提取液,将鼠胚海马神经干细胞球分成3组:(1)切割组加入含切割侧海马提取液的DMEM/F12无血清培养基;(2)正常组加入含正常侧海马提取液的DMEM/F12无血清培养基;(3)对照组加入单纯的DMEM/F12无血清培养基。培养后第14d行Brn-4/MAP-2免疫荧光双标染色。在荧光显微镜下分别计数每个视野下Brn-4单标神经元和Brn-4/MAP-2双标神经元的数量,并测量双标神经元的胞体面积、细胞周长以及Brn-4的免疫荧光强度。用图像处理系统和Stata7.0软件对所得数据进行统计学分析。结果显示:Brn-4/MAP-2双标神经元数在切割组中较多、胞体较大、突起较丰富,且Brn-4的免疫荧光亦较强;正常组次之,对照组最差。上述数据经组间比较分析,3组间差异有显著性意义(P<0.01)。本研究结果提示Brn-4在海马神经干细胞向神经元分化过程中可能发挥重要作用。 展开更多

关键词 brn-4 海马 神经干细胞 分化 神经元

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香蕉突脐蠕孢叶斑病菌Brn1基因的PCR扩增与序列分析(英文) 被引量：2

6

作者 林善海 黄思良 +3 位作者 覃丽萍 胡春锦 余功明 付岗 《南方农业学报》 CAS CSCD 2011年第11期1307-1310,共4页

【目的】为从分子水平进一步鉴定引起香蕉叶斑病的突脐蠕孢霉,对突脐蠕孢的Brn1基因序列进行了分析。【方法】用引物Brn101(5'-GCCAACATCGCAAACATGG-3')andBrn102(5'-GCAAGCAGCACCGTCAATACCAAT-3')对3个分生孢子形态差... 【目的】为从分子水平进一步鉴定引起香蕉叶斑病的突脐蠕孢霉,对突脐蠕孢的Brn1基因序列进行了分析。【方法】用引物Brn101(5'-GCCAACATCGCAAACATGG-3')andBrn102(5'-GCAAGCAGCACCGTCAATACCAAT-3')对3个分生孢子形态差异较大的香蕉突脐蠕孢叶斑病菌(CLER09、D087和JL05)的Brn1基因进行PCR扩增和系统发育分析。【结果】不同菌株间存在简单的碱基缺失和替换,供试菌株与Exserohilum rostratum在系统发育树上聚类在同一个分支,与Exserohilum属其他种明显分开,形成一个独立的演化群。遗传距离分析表明,供试菌株与E.rostratum亲缘关系相近,菌株间的遗传距离为0.000～0.018,而Exserohilum属种间的遗传距离为0.020～0.093。【结论】E.rostratum菌株间的遗传变异较大,但仍属种内变异;Brn1基因可作为支持具有明显形态变异菌株为E.rostratum成员的分子依据。 展开更多

关键词 嘴突脐蠕孢 系统发育 brn1降解酶基因 序列分析

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Brn-3a诱导胚胎干细胞向神经样细胞定向分化的研究 被引量：6

7

作者 谌宏鸣 谢富康 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期566-570,共5页

目的　探讨转录因子Brn 3a诱导胚胎干细胞 (ES细胞 )向神经细胞定向分化的可能性。　方法　将带有目的基因 (Brn 3a转录因子 )的重组表达载体pJ5Brn 3a ,通过脂质体转染到小鼠ES细胞株中进行表达 ,促使ES细胞向神经细胞分化 ,并采用免... 目的　探讨转录因子Brn 3a诱导胚胎干细胞 (ES细胞 )向神经细胞定向分化的可能性。　方法　将带有目的基因 (Brn 3a转录因子 )的重组表达载体pJ5Brn 3a ,通过脂质体转染到小鼠ES细胞株中进行表达 ,促使ES细胞向神经细胞分化 ,并采用免疫组织化学技术检测转染前后转录因子Brn 3a蛋白及分化后具有神经元表型特征的神经样细胞特异抗原的表达。　结果　 1 转染前ES细胞Brn 3a免疫反应阴性 ,转染后 2 4h检测Brn 3a免疫反应呈阳性 ;2 转染细胞经 1周培养 ,70 %以上的细胞具有明显的神经细胞样突起 ,神经细胞特有标记抗原NFH +L、NSE及SY呈免疫反应阳性 ;神经胶质细胞特有标记抗原GFAP为阴性。　结论　转录因子Brn 展开更多

关键词 转录因子brn-3a 胚胎干细胞 定向诱导 神经细胞 免疫组织化学

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宫颈液基细胞中转录因子Brn-3a表达对宫颈病变的早期诊断价值 被引量：2

8

作者 郭晓东 牛柯 +3 位作者 赵景民 熊璐 张昕 赵雨来 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期801-802,804,共3页

目的:探讨宫颈液基细胞中转录因子Brn-3a表达及其早期诊断宫颈病变的临床价值。方法:选择我院病理科有活检或手术切除标本病理诊断的液基细胞学检查(TCT)患者192例,并均行阴道镜下活组织检查。将入选病例剩余TCT标本进行Brn-3a蛋白免疫... 目的:探讨宫颈液基细胞中转录因子Brn-3a表达及其早期诊断宫颈病变的临床价值。方法:选择我院病理科有活检或手术切除标本病理诊断的液基细胞学检查(TCT)患者192例,并均行阴道镜下活组织检查。将入选病例剩余TCT标本进行Brn-3a蛋白免疫细胞化学染色,并与组织病理学结果进行对照。结果:TCT残留标本中Brn-3a蛋白表达的阳性率随宫颈病变严重程度加重而增高,且各级细胞学诊断间比较差异具有统计学意义(P<0.05)。单纯TCT的病理诊断符合率为SCC 96.8%(30/31),HSIL80.5%(33/41),LSIL76.9%(30/39),而TCT联合Brn-3a的病理诊断符合率为SCC 97.1%(30/31),HSIL78.6%(33/42),LSIL76.9%(30/39)。与单纯TCT的病理诊断符合率比较,TCT联合Brn-3a对HSIL、LSIL的病理诊断符合率明显高于单纯TCT(P<0.05)。结论:TCT联合Brn-3a检测对早期诊断宫颈病变具有一定的临床价值。 展开更多

关键词 宫颈癌 液基细胞学 brn-3A

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重组质粒pEGFP-Brn-4的构建及其在骨髓间质干细胞中的表达 被引量：1

9

作者 宣爱国 龙大宏 +1 位作者 陈艳 何峻峰 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期81-84,共4页

本研究构建了真核表达重组质粒pEGFP-Brn-4,并观察了其在大鼠骨髓间质干细胞(MSC)中的表达情况。提取新生鼠脑组织总RNA,利用RT-PCR的方法扩增Brn-4的基因片段,用基因重组技术将Brn-4基因片段克隆到真核表达载体pEGFP-C2中,测序及PCR进... 本研究构建了真核表达重组质粒pEGFP-Brn-4,并观察了其在大鼠骨髓间质干细胞(MSC)中的表达情况。提取新生鼠脑组织总RNA,利用RT-PCR的方法扩增Brn-4的基因片段,用基因重组技术将Brn-4基因片段克隆到真核表达载体pEGFP-C2中,测序及PCR进行鉴定;将重组质粒应用脂质体转染的方法转入MSC中,荧光显微镜观察绿色荧光蛋白(GFP)的表达。经酶切及DNA测序结果证实pEGFP-Brn-4表达质粒的DNA序列完全正确,将此质粒转染MSC后Brn-4基因获得表达。研究结果提示成功构建真核表达重组质粒pEGFP-Brn-4,且Brn-4基因可在MSC中表达,为后续探讨Brn-4修饰的MSC治疗老年痴呆的可行性奠定了基础。 展开更多

关键词 brn-4基因 重组质粒 骨髓间质干细胞 绿色荧光蛋白

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孕鼠铅暴露对仔鼠脑组织POU域蛋白Brn-3a基因转录及蛋白表达的影响 被引量：1

10

作者 常薇 谢虹 陈学敏 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期385-388,共4页

目的探讨铅对中枢神经系统神经细胞内转录因子Brn-3a表达的影响。方法雌性大鼠在围产期经饮水染铅(对照组蒸馏水、染铅组低0.5g/L、中1.0g/L、高2.0g/L),观察21日龄仔鼠脑组织,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)半定量检测Brn-3a的mRNA... 目的探讨铅对中枢神经系统神经细胞内转录因子Brn-3a表达的影响。方法雌性大鼠在围产期经饮水染铅(对照组蒸馏水、染铅组低0.5g/L、中1.0g/L、高2.0g/L),观察21日龄仔鼠脑组织,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)半定量检测Brn-3a的mRNA转录水平,采用免疫组织化学方法检测Brn-3a蛋白表达水平。结果RT-PCR凝胶成像系统结果分析表明,各染铅剂量组脑组织海马区扩增产物的电泳条带密度与对照组相比其差异有显著性(P<0.05),表明mRNA的表达量减弱。免疫组织化学图像分析表明,各染铅组脑组织皮层、海马及小脑的Brn-3a蛋白表达的阳性面积比[Aa(%)]、平均灰度与对照组相比其差异有不同程度的显著性(P<0.05或P<0.01),并呈剂量-依赖性的变化。染铅组Brn-3a表达低于对照组。结论本研究的铅暴露动物模型脑组织观察到,大鼠脑组织基因转录水平和蛋白表达水平有所下降,表明铅干扰了Brn-3a蛋白的正常表达模式,因此干扰了神经细胞的正常分化。 展开更多

关键词 醋酸铅 POU蛋白 基因蛋白 brn-3A 神经毒性 脑组织

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慢性高眼压大鼠模型视网膜中Brn-3a表达的动态变化 被引量：1

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作者 朱益华 陈晓莉 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期1077-1081,共5页

背景Brn-3a是最近发现的一种视网膜神经节细胞（RGCs）特异性标记物。高眼压的视功能损害主要与RGCs损伤有关，但高眼压大鼠视网膜损伤与Brn-3a表达的关系尚不清楚。目的观察慢性高眼压大鼠不同时期眼压、视网膜的形态学和Brn-3a表达的... 背景Brn-3a是最近发现的一种视网膜神经节细胞（RGCs）特异性标记物。高眼压的视功能损害主要与RGCs损伤有关，但高眼压大鼠视网膜损伤与Brn-3a表达的关系尚不清楚。目的观察慢性高眼压大鼠不同时期眼压、视网膜的形态学和Brn-3a表达的变化。方法将35只健康成年SD大鼠用随机数字表法随机分为正常对照组5只和模型组30只，术前测量眼压。模型组大鼠一侧眼用Shareef—Sharma手术方法建立慢性高眼压模型，对侧眼只切开结膜，不烙闭巩膜表层静脉作为伪手术眼。按照术后不同处理时间随机将模型组分为术后1、3、5、7、14、28d组共6个亚组，每组5只。分别于术前及术后30min，1、3、7、14、28d用Tono—Pen接触式眼压笔测量双眼眼压。各模型组于术后各相应时间点与正常对照组分别取5只大鼠过量麻醉处死，制作视网膜石蜡切片行常规组织病理学检查，评价视网膜形态变化，用甲苯胺蓝染色法计数RGCs，采用免疫组织化学法检测各时间点各组大鼠Brn-3a在RGCs中的表达。结果高眼压模型组大鼠术后各时间点眼压均明显高于术前，差异有统计学意义（F=95．631，P=0．001），术后28d时眼压是正常对照组大鼠眼压的1．59倍。与伪手术眼相比，模型眼术后各时间点眼压均明显升高，差异均有统计学意义（q=18．418、15．261、10．987、6．931、4．975、2．962，P〈0．05）。正常对照组RGCs数量为（29．08±1．98）个／高倍视野，造模后3、5、7、14、28d组大鼠RGCs计数逐渐下降，差异均有统计学意义（t=5．943、8．034、15．023、17．004、19．371，P〈0．05）。免疫组织化学染色表明，随着造模时间的延长，各组Brn-3a阳性RGCs数量逐渐下降，差异有统计学意义（F=127．583，P=0．000）。结论采用Shareef—Sharma法可成功建立大鼠慢性高眼压动物模型，其眼压为中等程度升高；高眼压持续时间越长，RGCs的丢失越多。Brn-3a仅在RGCs层表达，随眼压持续时间的增加，Brn-3a的表达减少。 展开更多

关键词 青光眼/模型 高眼压 视网膜神经节细胞 brn-3A

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基于Brn1基因的大蒜紫斑病菌PCR检测技术

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作者 王英超 纪瑛 +6 位作者 厉艳 王健力 江庆生 甘琴华 邵秀玲 吴兴海 封立平 《植物检疫》 北大核心 2015年第1期30-32,共3页

大蒜紫斑病菌是一种严重危害大蒜生产的真菌性病害,是中国大蒜出口中需要检疫的一种病害。根据1,3,8-三羟基萘还原酶基因(Brn1)的部分序列,设计出一对大蒜紫斑病菌特异性引物AP4/CTU,该引物特异性好,能专一扩增出480 bp电泳条带,而供试... 大蒜紫斑病菌是一种严重危害大蒜生产的真菌性病害,是中国大蒜出口中需要检疫的一种病害。根据1,3,8-三羟基萘还原酶基因(Brn1)的部分序列,设计出一对大蒜紫斑病菌特异性引物AP4/CTU,该引物特异性好,能专一扩增出480 bp电泳条带,而供试大蒜上的其他病害、不同属的真菌及空白对照均无扩增条带,建立了大蒜紫斑病菌的PCR鉴定方法。该方法灵敏度较高,DNA检测灵敏度为4 ng。该方法快速简便,适用于出入境检验检疫及大蒜健康检测领域。 展开更多

关键词 大蒜紫斑病菌 brn1基因 PCR 检测

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大鼠海马神经干细胞Brn-4基因的特异性siRNA研究

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作者 朱蕙霞 施金洪 +2 位作者 金国华 田美玲 秦建兵 《苏州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2009年第6期1021-1025,F0002,共6页

目的筛选出高效针对大鼠海马神经干细胞Brn-4基因沉默的特异性siRNA。方法设计4对抑制Brn-4基因表达的特异性siRNA序列,通过脂质体转染入体外培养的大鼠海马神经干细胞中,采用RT-PCR和免疫荧光检测转染细胞Brn-4基因的表达,筛选出沉默Br... 目的筛选出高效针对大鼠海马神经干细胞Brn-4基因沉默的特异性siRNA。方法设计4对抑制Brn-4基因表达的特异性siRNA序列,通过脂质体转染入体外培养的大鼠海马神经干细胞中,采用RT-PCR和免疫荧光检测转染细胞Brn-4基因的表达,筛选出沉默Brn-4基因最为有效的siRNA序列,并优化其转染条件。结果4对siRNA不同程度地阻断了海马神经干细胞Brn-4基因的表达,阻断效率最高的1^# siRNA最适转染剂浓度为0.5μmol/L,最佳转染时长为48 h。结论应用1^# siRNA可以高效率地沉默大鼠海马神经干细胞Brn-4基因的表达。 展开更多

关键词 海马 神经干细胞 SIRNA brn-4 大鼠

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尖锐湿疣皮损中Brn-3α的表达及意义 被引量：1

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作者 汪小柳 刘志军 《现代医药卫生》 2018年第9期1311-1312,共2页

目的观察转录因子——Brn-3α在尖锐湿疣(CA)皮损中的表达,并探讨其临床意义。方法选取2015年1月至2017年1月该院门诊或病房未接受过任何治疗的经病理检查确诊的CA患者的皮损25例(CA组)和正常皮肤组织20例(对照组),采用免疫组织化学技... 目的观察转录因子——Brn-3α在尖锐湿疣(CA)皮损中的表达,并探讨其临床意义。方法选取2015年1月至2017年1月该院门诊或病房未接受过任何治疗的经病理检查确诊的CA患者的皮损25例(CA组)和正常皮肤组织20例(对照组),采用免疫组织化学技术分别检测CA皮损和正常皮肤组织Brn-3α的表达水平。结果 CA组患者皮损Brn-3α表达阳性率[84.0%(21/25)]与对照组[80.0%(16/20)]比较,差异无统计学意义(χ2=0.002,P=0.965)。但CA组患者皮损Brn-3α表达水平(7.64±3.46)明显高于对照组[(5.80±2.86),差异有统计学意义(T=167.5,P=0.006 8)。结论 Brn-3α在CA皮损中表达水平明显升高,有助于表皮角质形成细胞异常增殖,与CA的发生、发展甚至恶变密切相关。 展开更多

关键词 尖锐湿疣 乳头状瘤病毒科 生殖器疾病 男(雄)性 生殖器疾病 女(雌)性 brn-3α基因

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Brn3族转录因子对视网膜神经节细胞发育分化调控作用的研究进展

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作者 黄倞 胡芳 曾祥云 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2011年第5期488-489,496,共3页

Brn3转录因子家族成员Brn3a、Brn3b和Brn3c广泛作用于中枢神经系统的发育分化过程,在胚胎期和成体视网膜神经节细胞中均有大量的表达。通过基因敲除技术研究发现,Brn3族转录因子成员的缺失将造成视网膜神经节细胞明显的发育缺陷,说明Brn... Brn3转录因子家族成员Brn3a、Brn3b和Brn3c广泛作用于中枢神经系统的发育分化过程,在胚胎期和成体视网膜神经节细胞中均有大量的表达。通过基因敲除技术研究发现,Brn3族转录因子成员的缺失将造成视网膜神经节细胞明显的发育缺陷,说明Brn3族成员是视网膜神经节细胞正常发育分化的重要调控因素。本文将对Brn3族转录因子在视网膜神经节细胞发育分化中的调控作用及其研究进展进行综述。 展开更多

关键词 brn3 视网膜神经节细胞 基因敲除模型 基因调控

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重组质粒pEGFP-Brn-4的构建及其在神经干细胞中的表达

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作者 宣爱国 龙大宏 +1 位作者 何峻峰 陈艳 《解剖学研究》 CAS 2007年第4期250-252,263,共4页

目的构建神经发育转录因子Brn-4基因真核表达重组质粒,研究Brn-4在神经干细胞(NSC)中的表达情况。方法从新生鼠脑组织提取总RNA,利用RT-PCR的方法获得编码鼠Brn-4的基因片段,应用基因重组技术,将鼠Brn-4基因片段克隆到真核表达载体pEGFP... 目的构建神经发育转录因子Brn-4基因真核表达重组质粒,研究Brn-4在神经干细胞(NSC)中的表达情况。方法从新生鼠脑组织提取总RNA,利用RT-PCR的方法获得编码鼠Brn-4的基因片段,应用基因重组技术,将鼠Brn-4基因片段克隆到真核表达载体pEGFP-C2中,应用脂质体转染NSC,荧光显微镜观察该Brn-4基因在NSC中的表达。结果限制性内切酶酶切分析和PCR法鉴定表明为正确重组子,Brn-4基因在NSC中获得表达。结论新构建的真核表达重组质粒pEGFP-Brn-4通过鉴定,结构正确;Brn-4基因可在NSC中表达,可作为后续研究老年性痴呆动物模型转基因实验的基因来源。 展开更多

关键词 brn-4基因 真核表达载体 神经干细胞 绿色荧光蛋白

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RT-PCR/Southern杂交法检测穹窿海马伞切割大鼠海马Brn-4 mRNA的表达变化

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作者 董传明 秦建兵 +3 位作者 金国华 王磊 朱蕙霞 田美玲 《南通大学学报（医学版）》 2007年第6期465-467,470,共4页

目的:探讨切割穹窿海马伞大鼠海马与正常海马内Brn-4 mRNA表达的差异。方法:42只SD大鼠随机分成正常对照组和切割穹窿海马伞后1、3、7、14、21及28d组。取各组大鼠的海马组织,提取总RNA,采用RT-PCR/Southern杂交方法分析穹窿海马伞切割... 目的:探讨切割穹窿海马伞大鼠海马与正常海马内Brn-4 mRNA表达的差异。方法:42只SD大鼠随机分成正常对照组和切割穹窿海马伞后1、3、7、14、21及28d组。取各组大鼠的海马组织,提取总RNA,采用RT-PCR/Southern杂交方法分析穹窿海马伞切割后海马内Brn-4 mRNA的表达变化。结果:海马内Brn-4 mRNA的表达量在切割后第3d开始升高,14d达到最高水平,随后下降,28d左右恢复至正常水平。结论:切割穹窿海马伞后海马内Brn-4mRNA表达明显上调,可能与促进海马内移植的或自体的神经干细胞向神经元分化有关。 展开更多

关键词 穹窿海马伞切割 海马 brn-4 逆转录聚合酶链反应 SOUTHERN杂交 大鼠

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Brn-3a和MDM-2在宫颈癌及癌前病变中的表达

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作者 黄雅 冯玉昆 +1 位作者 李建军 于璐 《中国误诊学杂志》 CAS 2009年第28期6809-6811,共3页

目的:探讨Brn-3a和MDM-2在宫颈癌和癌前病变中的表达及其作为宫颈癌和癌前病变生物标志物的可行性和临床意义。方法:利用SP免疫组化法检测110例蜡块标本中Brn-3a和MDM-2的表达。结果:宫颈癌及癌前病变各组的Brn-3a表达阳性率均高于对照... 目的:探讨Brn-3a和MDM-2在宫颈癌和癌前病变中的表达及其作为宫颈癌和癌前病变生物标志物的可行性和临床意义。方法:利用SP免疫组化法检测110例蜡块标本中Brn-3a和MDM-2的表达。结果:宫颈癌及癌前病变各组的Brn-3a表达阳性率均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);SCC组及CINIII组的MDM-2表达阳性率均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),SCC组与CIN组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。Brn-3a和MDM-2在各临床分期及组织学分级中的阳性表达无统计学差异(P>0.05);Brn-3a与MDM-2蛋白阳性表达之间无相关关系(P>0.05)。结论:Brn-3a和MDM-2可作为宫颈癌前病变的生物标志物。 展开更多

关键词 宫颈癌 宫颈癌前病变 brn-3A MDM-2 生物学标记

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联合检测脱落细胞中p16^(INK4A)、Brn3a和端粒酶等因子的表达对预测宫颈病变进展的价值 被引量：1

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作者 张楚悦 吴丹 +1 位作者 潘蕾 王丽华 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1101-1107,共7页

目的 :检测p16INK4A、Brn3a、端粒酶及人宫颈癌基因(human cervical cancer oncogene,HCCR)在宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)中的表达,探讨其对于预测宫颈病变进展的意义。方法 :262例宫颈脱落细胞标本取自宫... 目的 :检测p16INK4A、Brn3a、端粒酶及人宫颈癌基因(human cervical cancer oncogene,HCCR)在宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)中的表达,探讨其对于预测宫颈病变进展的意义。方法 :262例宫颈脱落细胞标本取自宫颈液基细胞学检查(liquid-based cytology test,LCT)残液制成的石蜡标本,包括30例正常宫颈细胞、80例意义不明不典型鳞状细胞(atypical squamous cells of undetermined signiicance,ASCUS)、72例低级别鳞状上皮病变(low-grade squamous intraepithelial lesion,LSIL)、50例高级别鳞状上皮病变(high-grade squamous intraepithelial lesion,HSIL)和30例浸润性宫颈鳞癌。采用免疫细胞化学法检测脱落细胞石蜡切片中p16INK4A、Brn3a、端粒酶及HCCR的表达水平。结果 :与正常宫颈细胞相比,ASCUS和LSIL标本中p16INK4A和Brn3a表达水平均升高(P<0.05);与ASCUS和LSIL相比,HSIL和浸润性宫颈鳞癌中p16INK4A、Brn3a、端粒酶及HCCR表达水平显著升高(P<0.05)。与最终病理诊断结果为慢性炎性反应和宫颈湿疣的患者相比,ASCUS中诊断为CIN1级的患者p16INK4A表达水平升高(P<0.05);诊断为CIN2+级的患者p16INK4A和Brn3a表达水平均升高(P<0.05)。LSIL中病理诊断结果为CIN2+级的患者与慢性炎性反应和宫颈湿疣病例相比,p16INK4A和Brn3a表达水平均明显升高(P<0.05)。ASCUS和LSIL患者中p16INK4A和Brn3a表达水平之间具有显著相关性(r=0.580,P<0.001)。结论 :检测p16INK4A、Brn3a、端粒酶及HCCR水平有助于鉴别诊断ASCUS/LSIL和HSIL/浸润性宫颈癌,而联合检测p16INK4A和Brn3a有助于预测ASCUS和LSIL的病变进展。 展开更多

关键词 宫颈上皮内瘤样病变 基因 p16^INK4A 转录因子brn-3A 端粒 末端转移酶 癌基因 诊断 鉴别

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Brn3b基因对视神经损伤条件下视网膜神经节细胞的保护作用 被引量：2

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作者 吴维霖 刘锦荣 +1 位作者 钟佳宁 王辉 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2018年第9期815-820,共6页

目的探讨Brn3b过表达对视神经损伤条件下视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)的保护作用。方法选取雄性健康成年BALB/c小鼠60只,用微型视神经夹将小鼠右眼球后视神经夹持损伤,按视神经损伤后的天数依次分为第1、3、5、7、14... 目的探讨Brn3b过表达对视神经损伤条件下视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)的保护作用。方法选取雄性健康成年BALB/c小鼠60只,用微型视神经夹将小鼠右眼球后视神经夹持损伤,按视神经损伤后的天数依次分为第1、3、5、7、14天组,小鼠左侧正常眼作为空白组,明确视神经损伤天数条件。选取雄性健康成年BALB/c小鼠40只,用微量进样器以小鼠右眼玻璃体内注射的方法将腺相关病毒载体转染小鼠视网膜,建立Brn3b过表达模型并分组:Brn3b过表达组[转染Brn3b过表达腺相关病毒载体(Brn3b overexpressed adeno-associated viral vector,AAV-CMV-Brn3b)]和阴性对照组[转染空白腺相关病毒载体(blank adeno-associated viral vector,AAV-CMV-GFP)阴性对照物],每组20只;之后,取Brn3b过表达组和阴性对照组各10只,用微型视神经夹将小鼠右眼球后视神经夹持损伤,构建模拟小鼠视神经损伤(controlled optic nerve crush,CONC)模型并分组:CONC-Brn3b过表达组和CONC-阴性对照组。利用视网膜铺片和切片免疫荧光标记相关蛋白表达量,检测Brn3b过表达对视神经损伤条件下RGCs、Brn3b和Caspase3蛋白表达的影响,并对其共定位情况做出统计分析。结果与阴性对照组相比,Brn3b过表达组小鼠视网膜Brn3b的表达水平明显增加。在小鼠CONC模型制作后的第7天RGCs的总凋亡数量达到65%,第14天RGCs的凋亡数量未见进一步改变。免疫荧光标记的蛋白表达量及其共定位分析显示,在视神经损伤条件下,与CONC-阴性对照组相比,CONC-Brn3b过表达组小鼠RGCs的凋亡量以及凋亡因子Caspase3的表达量均明显减少,差异均有统计学意义(均为P<0.001)。结论 Brn3b基因对视神经损伤条件下RGC具有明确的保护作用,Brn3b基因对凋亡因子Caspase3的表达可能具有一定的抑制作用。 展开更多

关键词 brn3b 视网膜神经节细胞 青光眼 视神经损伤模型 CASPASE3

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