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BPI_(23)-Fcγ1重组蛋白原核表达载体的构建、表达和生物学活性的测定 被引量：3
1
作者 安云庆 柯岩 杨贵贞 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期511-516,共6页
目的构建 pBV- BPI600- Fcγ 1700重组表达载体，转化大肠杆菌 DH5α，诱导表达 BPI23- Fcγ 1抗菌重组蛋白。方法采用 RT- PCR技术，从 HL- 60细胞和正常人白细胞 mRNA中扩增编码 BPI23和 IgG1Fc（ Fcγ 1）的基因；通过连接反应构建... 目的构建 pBV- BPI600- Fcγ 1700重组表达载体，转化大肠杆菌 DH5α，诱导表达 BPI23- Fcγ 1抗菌重组蛋白。方法采用 RT- PCR技术，从 HL- 60细胞和正常人白细胞 mRNA中扩增编码 BPI23和 IgG1Fc（ Fcγ 1）的基因；通过连接反应构建重组克隆载体和重组表达载体；转化感受态大肠杆菌 DH5α，通过温控诱导表达 BPI23- Fcγ 1重组蛋白；测定 BPI23- Fcγ 1重组蛋白的抗菌及免疫学活性。结果 (1)RT- PCR获得预期的扩增产物— BPI600bp和 Fcγ 1 700bp基因片段； (2)成功构建 pUC18- BPI180、 pUC18- BPI420和 pUC18- Fcγ 1700重组克隆载体， DNA测序结果与文献报道一致； (3)成功构建 pBV- BPI600- Fcγ 1700重组表达载体，酶切图谱分析与预期结果相符； (4)BPI23- Fcγ 1重组蛋白的表达量约占菌体蛋白总量的 20％； (5)复性后重组蛋白具有抗菌活性和激活补体、介导调理吞噬等作用。结论 pBV- BPI600- Fcγ 1700重组表达载体构建成功，并在大肠杆菌中得到表达，获得具有 BPI和 IgGFc双重生物学活性的重组抗菌蛋白。 展开更多
关键词 pBV-bpi600-Fcγ1700 重线表达载体 RT-PCR
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CONSTRUCTION, EXPRESSION AND BIOLOGICAL ASSESSMENT OF BPI_(23)-Fcγ1 RECOMBINANT PROTEIN PROKARYOTIC EXPRESSION VECTOR 被引量：7
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作者 安云庆 管远志 +1 位作者 柯岩 杨贵贞 《Chinese Medical Sciences Journal》 CAS CSCD 2002年第3期140-147,共8页
关键词 pBV bpi600 Fcγ1700 recombinant expression vector BPI23 Fcγ1 recombinant protein Objective. To construct pBV bpi600 Fcγ1700 recombinant expression vector to transform it into Escherichia coli DH5α and to induce the expression of BPI2
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