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低强度脉冲超声联合BMP9修饰的BMSCs对大鼠牙槽骨缺损修复效果的研究
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作者 林利荣 李振兴 《中国美容医学》 2025年第6期6-11,共6页
目的:探讨低强度脉冲超声(Low-intensity pulsed ultrasound,LIPUS)联合骨形成蛋白9(Bone morphogenetic protein 9,BMP9)修饰的骨髓间充质干细胞(Bone marrow derived mesenchymal stem cells,BMSCs)对牙槽骨缺损的修复作用。方法:在... 目的:探讨低强度脉冲超声(Low-intensity pulsed ultrasound,LIPUS)联合骨形成蛋白9(Bone morphogenetic protein 9,BMP9)修饰的骨髓间充质干细胞(Bone marrow derived mesenchymal stem cells,BMSCs)对牙槽骨缺损的修复作用。方法:在大鼠上颌第一磨牙近中区造成牙周骨缺损构建牙槽骨缺损大鼠模型,将45只大鼠随机平均分为5组,每组9只,即正常组、对照组、超声治疗组、细胞治疗组、联合治疗组。通过CT扫描评价大鼠牙槽骨再生,通过HE染色、Masson染色和免疫组织化学染色观察大鼠骨缺损修复程度。利用生物发光成像在体内追踪BMSCs。结果:微型CT结果显示,与对照组相比,超声治疗组,细胞治疗组,联合治疗组促进了更多的新骨形成、BV、Tb.N增加、Tb.Sp降低,其中联合治疗组的新骨形成率明显增加(P<0.05);HE染色和Masson染色结果显示,在三组治疗组中,均可以观察到结缔组织、新血管形成和钙沉积物,联合治疗组中更明显;免疫组化染色结果显示,在三组治疗组中,联合治疗组COL-I 和骨桥蛋白表达增高更明显。生物发光显像显示LIPUS联合BMP9修饰的BMSCs组的荧光信号明显多于其他组,有较多的BMSCs定植于牙槽骨缺损区。结论:LIPUS联合BMP9修饰的BMSCs可以促进牙槽骨再生,对牙槽骨缺损修复的效果更好。 展开更多
关键词 低强度脉冲超声(LIPUS) 骨形成蛋白9(bmp9) 骨髓间充质干细胞(BMSCs) 牙槽骨修复 联合作用
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ORAI2通过MAPK/ERK1/2和PI3K/Akt通路促进BMP9诱导的MEFs成骨分化
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作者 任轶凡 兰钰 +3 位作者 彭鑫亮 杨星宇 高翔 杜宇 《骨科》 2025年第4期289-297,共9页
目的 本研究旨在鉴定与骨形态发生蛋白9(BMP9)有协同促成骨作用的新因子,以期为骨质疏松症的治疗提供新的分子靶点和实验依据。方法 为系统性评价钙释放激活钙调节蛋白2(ORAI2)在成骨分化中的功能,本研究构建了ORAI2过表达及沉默的细胞... 目的 本研究旨在鉴定与骨形态发生蛋白9(BMP9)有协同促成骨作用的新因子,以期为骨质疏松症的治疗提供新的分子靶点和实验依据。方法 为系统性评价钙释放激活钙调节蛋白2(ORAI2)在成骨分化中的功能,本研究构建了ORAI2过表达及沉默的细胞模型,在机制研究中,我们通过RNA测序(RNA-seq),利用实时定量PCR(RT-qPCR)和蛋白质印迹(Western blotting)验证关键分子的表达变化;借助碱性磷酸酶(ALP)染色及活性分析评估细胞成骨状态。结果 研究发现,ORAI2在BMP9诱导的鼠胚胎成纤维细胞(MEFs)成骨分化过程中的表达显著上调,而在骨质疏松(卵巢切除)大鼠模型中的表达下调。体外过表达ORAI2能有效促进成骨分化,相反,沉默ORAI2则显著抑制成骨分化。RNAseq及京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析显示,PI3K/Akt是介导ORAI2功能的关键信号通路。此外,通过蛋白质谱分析鉴定出含IQ基序GTP酶激活蛋白1(IQGAP1)是ORAI2的结合蛋白,ORAI2通过与IQGAP1结合特异性地激活了MAPK/ERK1/2信号通路。结论 ORAI2通过与BMP9协同,经PI3K/Akt和MAPK/ERK1/2通路促进成骨分化,是骨质疏松症的潜在治疗靶点。 展开更多
关键词 钙释放激活钙调节蛋白2 骨形态发生蛋白9 含IQ基序GTP酶激活蛋白1 成骨分化 间充质干细胞
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BMP9下调HIF-1α抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞的有氧糖酵解和迁移侵袭 被引量:2
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作者 余涛 陈远香 +6 位作者 刘施妍 余伙梅 廖德宇 杨诗雨 曾涛 魏兰 张彦 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期840-846,共7页
目的研究骨形成蛋白BMP9对三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞有氧糖酵解和迁移侵袭的调控作用。方法实验组使用人BMP9重组腺病毒(AdBMP9)感染MDA-MB-231细胞,对照组用空载的GFP腺病毒感染细胞。采用乳酸、葡萄糖和ATP检测试剂盒检测细胞的葡... 目的研究骨形成蛋白BMP9对三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞有氧糖酵解和迁移侵袭的调控作用。方法实验组使用人BMP9重组腺病毒(AdBMP9)感染MDA-MB-231细胞,对照组用空载的GFP腺病毒感染细胞。采用乳酸、葡萄糖和ATP检测试剂盒检测细胞的葡萄糖摄取量、乳酸和ATP生成量;通过GEPIA2数据库,分析BMP9在泛癌中与糖酵解关键酶基因的相关性;qRT-PCR检测过表达BMP9后,MDA-MB-231中糖酵解关键酶GLUT1、HK2、PKM2、LDHA的mRNA表达水平;STRING数据库分析BMP9抑制MDA-MB-231有氧糖酵解潜在靶点;Western blot检测细胞HIF-1α和下游蛋白表达水平;划痕实验和Transwell实验评估不同处理后,细胞的迁移与侵袭能力的改变。结果与对照组相比,BMP9下调乳腺癌MDA-MB-231细胞的葡萄糖摄取、乳酸生成及ATP水平(P<0.01),抑制HIF-1α及其下游蛋白表达;Rescue实验中,过表达HIF-1α能逆转BMP9对MDA-MB-231细胞有氧糖酵解和迁移侵袭的抑制作用。结论BMP9下调HIF-1α抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231有氧糖酵解和迁移侵袭能力。 展开更多
关键词 乳腺癌 bmp9 HIF-1Α 有氧糖酵解 迁移 侵袭
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BMP9对动脉性肺动脉高压肺血管内皮细胞影响的研究进展
4
作者 高婷 王丽红 《临床医学进展》 2024年第8期1195-1200,共6页
动脉性肺动脉高压(Pulmonary Arterial Hypertension, PAH),即第1大类肺动脉高压,是一种以高发病率和死亡率为特点的血管疾病,其主要表现是肺血管重塑和肺血管阻力增加,最终导致右心室衰竭甚至死亡。骨形态发生蛋白9 (Bone Morphogeneti... 动脉性肺动脉高压(Pulmonary Arterial Hypertension, PAH),即第1大类肺动脉高压,是一种以高发病率和死亡率为特点的血管疾病,其主要表现是肺血管重塑和肺血管阻力增加,最终导致右心室衰竭甚至死亡。骨形态发生蛋白9 (Bone Morphogenetic Protein 9, BMP9)属于转化生长因子β (Transforming Growth Factor-β, TGF-β)家族,主要由肝脏星状细胞产生,随血液循环到肺血管内皮细胞上与受体结合,在PAH中发挥相应的生物学效应,但是部分研究结果是相互矛盾的。本文对PAH中BMP9的信号通路及BMP9对肺血管内皮细胞作用的研究和进展进行综述。Arterial pulmonary hypertension (PAH), also known as the group 1 pulmonary hypertension, is a vascular disease characterized by high morbidity and mortality, and its main manifestations are pulmonary vascular remodeling and increased pulmonary vascular resistance, which eventually leads to right ventricular failure and even death. Bone Morphogenetic Protein 9 (BMP9) belongs to the Transforming Growth Factor-β (TGF-β) family, which is mainly produced by hepatic stellate cells, which circulates to pulmonary vascular endothelial cells with blood and bind to their receptors to exert corresponding biological effects in PAH, but some research results are contradictory. This article briefly reviews the BMP9 signaling pathway in PAH and the research and progress of BMP9 on pulmonary vascular endothelial cells. 展开更多
关键词 动脉性肺动脉高压 bmp9 BMPRII 肺血管内皮细胞 肺血管重塑
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RUNX2对BMP9诱导的间充质干细胞C3H10T1/2成骨分化的影响 被引量:7
5
作者 赵艳芳 宋涛 +1 位作者 刘跃亮 罗进勇 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期21-26,共6页
目的:研究和确认RUNX2在骨形态发生蛋白9(BMP9)诱导的间充质干细胞C3H10T1/2成骨分化中的作用。方法:通过Western blot、RT-PCR、荧光素酶活性分析检测BMP9对RUNX2表达的影响;分别在过表达RUNX2和RNA干扰抑制RUNX2表达的情况下,利用碱... 目的:研究和确认RUNX2在骨形态发生蛋白9(BMP9)诱导的间充质干细胞C3H10T1/2成骨分化中的作用。方法:通过Western blot、RT-PCR、荧光素酶活性分析检测BMP9对RUNX2表达的影响;分别在过表达RUNX2和RNA干扰抑制RUNX2表达的情况下,利用碱性磷酸酶(ALP)活性测定和染色、钙盐沉积实验,免疫细胞化学和裸鼠皮下异位成骨实验分析RUNX2对于BMP9诱导的间充质干细胞成骨分化的影响。结果:BMP9可以促进RUNX2的表达;RUNX2体外可促进BMP9诱导的C3H10T1/2的ALP活性和钙盐沉积,却抑制了OCN表达,RUNX2还可促进BMP9诱导的裸鼠皮下异位成骨;而在降低RUNX2表达后,BMP9诱导的C3H10T1/2细胞的ALP活性、钙盐沉积、OCN表达和裸鼠皮下异位成骨均受到抑制。结论:RUNX2可以促进BMP9诱导的间充质干细胞C3H10T1/2细胞成骨分化。 展开更多
关键词 间充质干细胞 bmp9 RUNX2 成骨分化
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siRNA干扰人BMP9重组腺病毒载体的构建及其促进乳腺癌SK-BR-3细胞增殖 被引量:4
6
作者 刘月红 王科 +4 位作者 孙笑笑 万绍恒 王维 陈莹莹 张彦 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2013年第2期149-155,共7页
目的筛选特异性干扰人BMP9基因的siRNA序列并制备重组腺病毒AdsiBMP9,探讨RNAi人BMP9基因后对乳腺癌SK-BR-3细胞增殖能力的影响。方法设计制备3对干扰人BMP9的双链DNA序列,亚克隆至Pses-Hus质粒中获得Pses-Hus-siBMP9质粒,脂质体转染乳... 目的筛选特异性干扰人BMP9基因的siRNA序列并制备重组腺病毒AdsiBMP9,探讨RNAi人BMP9基因后对乳腺癌SK-BR-3细胞增殖能力的影响。方法设计制备3对干扰人BMP9的双链DNA序列,亚克隆至Pses-Hus质粒中获得Pses-Hus-siBMP9质粒,脂质体转染乳腺上皮细胞HBL-100筛选有效干扰质粒,构建重组腺病毒并感染SK-BR-3细胞,RT-PCR,Western blot检测BMP9表达,MTT检测细胞增殖能力。结果成功构建并筛选出针对人BMP9基因的有效干扰质粒并包装成腺病毒,病毒滴度为1×1010IU/mL,感染SK-BR-3细胞显示BMP9在转录水平和翻译水平表达量显著低于对照组和空白组(P<0.05),第5天AdsiBMP9组细胞的增殖率显著高于AdsiNC组(P<0.05)。结论成功构建特异性沉默人BMP9基因的siRNA腺病毒载体,可有效抑制SK-BR-3细胞中BMP9基因的表达从而促进该细胞增殖。 展开更多
关键词 SIRNA bmp9 重组腺病毒载体 肿瘤增殖
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Shh促进BMP9诱导的小鼠间充质干细胞C3H10T1/2的成骨分化 被引量:3
7
作者 李丽 董谦 +3 位作者 冯巧灵 王玉凤 何通川 罗进勇 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2014年第12期1629-1634,共6页
目的观察Shh蛋白对骨形态发生蛋白9(BMP9)诱导的小鼠间充质干细胞(MSCs)C3H10T1/2成骨分化的影响,并初步探讨其作用机制。方法 Shh腺病毒和BMP9作用于C3H10T1/2细胞,碱性磷酸酶(ALP)检测ALP变化,茜素红S染色检测钙盐沉积,RT-PCR检测Shh... 目的观察Shh蛋白对骨形态发生蛋白9(BMP9)诱导的小鼠间充质干细胞(MSCs)C3H10T1/2成骨分化的影响,并初步探讨其作用机制。方法 Shh腺病毒和BMP9作用于C3H10T1/2细胞,碱性磷酸酶(ALP)检测ALP变化,茜素红S染色检测钙盐沉积,RT-PCR检测Shh、BMP9、骨桥蛋白(OPN)、骨钙素(OCN)以及成骨相关基因Id1、Id2、Id3、CTGF和Runx2的表达,Western blot检测OPN、OCN、Runx2、DLX5和p-Smad1/5/8的蛋白水平,荧光素酶报告基因检测Smad1/5/8的转录活性。结果 Shh不影响BMP9的表达,但可增强由BMP9诱导的C3H10T1/2细胞早晚期成骨分化(P<0.05),并促进BMP9诱导的成骨相关基因的表达(P<0.05);Shh促进了BMP9诱导的Smad荧光素酶活性(P<0.05),但对其磷酸化并无影响。结论 Shh可促进BMP9诱导的小鼠C3H10T1/2细胞的成骨分化。 展开更多
关键词 间充质干细胞 骨形态发生蛋白9 成骨分化 bmp9
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SDF-1/CXCR4在BMP9介导C2C12细胞成骨分化过程中的作用研究 被引量:2
8
作者 刘晨 杨丹丹 +5 位作者 白慧丽 李宝林 何方 张汝益 严树涓 施琼 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期154-162,共9页
为了观察SDF-1/CXCR4信号轴在BMP9促C2C12细胞成骨分化过程中的作用,通过重组腺病毒过表达BMP9,检测对C2C12细胞中SDF-1及受体CXCR4 mRNA和蛋白表达水平的影响;同时利用重组腺病毒或中和抗体干扰SDF-1/CXCR4,与BMP9先后作用于C2C12细胞... 为了观察SDF-1/CXCR4信号轴在BMP9促C2C12细胞成骨分化过程中的作用,通过重组腺病毒过表达BMP9,检测对C2C12细胞中SDF-1及受体CXCR4 mRNA和蛋白表达水平的影响;同时利用重组腺病毒或中和抗体干扰SDF-1/CXCR4,与BMP9先后作用于C2C12细胞,通过定量测定碱性磷酸酶(ALP)、染色测定ALP表达、免疫细胞化学测定骨钙蛋白(OCN)表达、茜素红S染色测定钙盐沉积、Real-time PCR检测成骨相关转录因子Runx2和Osx的表达、Western blot检测成骨分化信号通路MAPK和Smad的变化。结果显示,BMP9能明显抑制C2C12细胞中SDF-1、CXCR4的表达(P<0.01),且具有剂量和时间依赖性;预先干扰SDF-1/CXCR4能明显影响由BMP9介导的早、中期成骨标志物ALP、OCN及早期转录因子Runx2、Osx的表达(P<0.01)和MAPK、Smad信号通路相关蛋白的变化(P<0.05);外源性SDF-1并不能影响晚期成骨标志物钙盐沉积。提示SDF-1/CXCR4信号轴在由BMP9介导的C2C12细胞成骨分化早、中期过程中发挥重要作用。 展开更多
关键词 SDF—1 CXCR4 bmp9 成骨分化 C2C12细胞
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CD105、BMP9在绒癌组织中的表达及其临床病理意义 被引量:1
9
作者 王晓雨 王文泽 +3 位作者 杨隽钧 冯会敏 何瑜 向阳 《现代妇产科进展》 CSCD 北大核心 2017年第9期656-660,共5页
目的:研究绒癌化疗前后组织中CD105和BMP9的表达及其临床意义,为绒癌患者的个性化治疗和预后提供判断依据。方法:收集2010年1月至2015年12月于北京协和医院妇产科诊治的绒癌患者的石蜡组织标本41例,其中化疗前(初治组)标本8例,化疗后(... 目的:研究绒癌化疗前后组织中CD105和BMP9的表达及其临床意义,为绒癌患者的个性化治疗和预后提供判断依据。方法:收集2010年1月至2015年12月于北京协和医院妇产科诊治的绒癌患者的石蜡组织标本41例,其中化疗前(初治组)标本8例,化疗后(化疗组)标本33例。免疫组化法检测CD105和BMP9在绒癌组织中的表达,分析CD105和BMP9表达与绒癌患者临床病理参数之间的关系。结果:初治组中CD105在细胞型、合体型滋养细胞中呈强阳性,在中间型滋养细胞中呈阴性或弱阳性表达;BMP9在中间型滋养细胞中呈强阳性表达,在细胞型、合体型滋养细胞中呈中等阳性表达。不同患者化疗前绒癌组织中CD105、BMP9表达具有相似性。化疗后,CD105、BMP9表达均减弱,表达水平与患者年龄、术前血清β-HCG、是否转移等无关,与患者复发呈正相关。细胞型和合体型滋养细胞中CD105和BMP9表达呈显著相关性(P<0.05)。结论:CD105和BMP9在绒癌化疗后组织中表达下调,其表达水平可能与患者化疗耐药的产生和不良预后有关。 展开更多
关键词 绒癌 化疗 耐药 CD105 bmp9
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过表达S100A6对BMP9诱导的小鼠间充质干细胞C3H10T1/2成骨分化的影响 被引量:2
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作者 叶立伟 武睿 +6 位作者 段亮 张昀源 杨霞 陈娴 王海燕 何通川 周兰 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期1087-1093,共7页
以骨形态发生蛋白9(bone morphogenetic protein 9,BMP9)作为诱导小鼠间充质干细胞C3H10T1/2定向成骨分化的细胞因子,观察过表达S100A6对成骨分化的影响。用重组腺病毒AdBMP9与AdS100A6共感染C3H10T1/2细胞,随后检测成骨分化标志物,包括... 以骨形态发生蛋白9(bone morphogenetic protein 9,BMP9)作为诱导小鼠间充质干细胞C3H10T1/2定向成骨分化的细胞因子,观察过表达S100A6对成骨分化的影响。用重组腺病毒AdBMP9与AdS100A6共感染C3H10T1/2细胞,随后检测成骨分化标志物,包括Runx2、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、骨桥素(osteopontin,OPN)和钙盐沉积;检测方法包括免疫细胞化学、ALP染色、活性分析以及茜素红S染色;同时,用Western blot检测β-catenin的表达。过表达S100A6对所诱导的间充质干细胞C3H10T1/2成骨分化的早期指标Runx2的蛋白水平无明显影响(P>0.05;ICC法),对第7天的ALP和第18天钙盐的沉积也无明显影响(P>0.05);但是,能够引起第12天的OPN升高(P<0.05);同时,S100A6对BMP9诱导的C3H10T1/2细胞中的β-catenin水平的影响在第3、7天不明显(P>0.05),但在第12天时可致β-catenin水平下调(P<0.05)。过表达S100A6可促进BMP9诱导的C3H10T1/2细胞中OPN的表达,但对最终的成骨分化无明显影响。 展开更多
关键词 S100A6 骨形态发生蛋白9(bmp9) C3H10T1 2 成骨分化 Β-CATENIN
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DLX1联合BMP9促进人骨肉瘤细胞向成骨分化 被引量:2
11
作者 吕凤香 康权 +2 位作者 仇超 董姿杏 罗庆 《基础医学与临床》 CSCD 2017年第6期768-774,共7页
目的探讨DLX1联合BMP9可否影响人骨肉瘤细胞MG63的成骨分化。方法用构建有DLX1和BMP9基因的重组腺病毒Ad DLX1和Ad BMP9,单独或联合感染MG63细胞,分为DLX1组(Ad DLX1+AdRFP感染组)、DLX1+BMP9组(Ad DLX1+Ad BMP9感染组)、BMP9组(Ad BMP9... 目的探讨DLX1联合BMP9可否影响人骨肉瘤细胞MG63的成骨分化。方法用构建有DLX1和BMP9基因的重组腺病毒Ad DLX1和Ad BMP9,单独或联合感染MG63细胞,分为DLX1组(Ad DLX1+AdRFP感染组)、DLX1+BMP9组(Ad DLX1+Ad BMP9感染组)、BMP9组(Ad BMP9+AdRFP感染组)、RFP组(AdRFP感染组)。用RT-PCR和Western blot验证DLX1和BMP9的表达情况,Transwell实验检测细胞迁移、侵袭能力;碱性磷酸酶(ALP)染色和读数分析细胞早期成骨能力,茜素红染色检测细胞晚期成骨能力,Western blot检测骨桥蛋白(OPN)蛋白表达水平。结果 Ad DLX1和Ad BMP9感染MG63细胞后,DLX1和BMP9的表达水平上调(P<0.05);与RFP组相比,DLX1组、DLX1+BMP9组和BMP9组细胞迁移能力和侵袭能力下降(P<0.05),DLX1+BMP9组细胞迁移能力和侵袭能力下降更为明显(P<0.05);ALP活性、钙盐沉积和OPN蛋白表达在DLX1+BMP9组和BMP9组增加(P<0.05),且DLX1+BMP9组较BMP9组显著增强(P<0.05)。结论 DLX1与BMP9联合作用可抑制骨肉瘤细胞迁移和侵袭,同时可诱导骨肉瘤细胞向成骨分化。 展开更多
关键词 骨肉瘤 DLX1 bmp9 恶性生物学行为 成骨分化
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BMP9促进植入心肌前体干细胞改善心梗大鼠心功能 被引量:1
12
作者 赵璐 陈沅 +3 位作者 沈彪 周立刚 韦皓 张智睿 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2010年第6期623-629,共7页
目的探讨骨形态形成蛋白9(BMP9)能否促进植入的心肌前体干细胞(CPCs)改善心梗大鼠的心功能。方法用表达绿色荧光蛋白的AdBMP9腺病毒感染CPCs 24 h后,检测CPCs中BMP9的表达量。并将感染AdBMP9腺病毒的CPCs植入心肌梗死大鼠模型中,超声心... 目的探讨骨形态形成蛋白9(BMP9)能否促进植入的心肌前体干细胞(CPCs)改善心梗大鼠的心功能。方法用表达绿色荧光蛋白的AdBMP9腺病毒感染CPCs 24 h后,检测CPCs中BMP9的表达量。并将感染AdBMP9腺病毒的CPCs植入心肌梗死大鼠模型中,超声心动图检测左室心功能参数,Masson染色计算心肌梗死面积及观察植入细胞形态学,免疫荧光检测α-MHC及α-actin蛋白的表达。结果 AdBMP9腺病毒感染CPCs 24 h后,BMP9的表达量较其CPCs本身BMP9的表达量有显著增高(P<0.01)。术后4周,植入的感染AdBMP9腺病毒的CPCs及未处理的CPCs均能与周围正常心肌组织融合,且均有心肌特异性结构蛋白α-MHC及α-actin的表达,但较周围正常组织表达差(P<0.05)。同时,植入的心肌前体干细胞可以使心肌梗死面积显著缩小(P<0.05),而BMP9可以加强这一效果(P<0.01)。左室心功能参数结果与梗死面积结果相似。结论 BMP9对移植的心肌前体干细胞改善心梗大鼠心功能有促进作用。 展开更多
关键词 bmp9 心肌前体干细胞 心肌细胞 移植 心功能
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腺病毒介导的BMP9过表达抑制人骨肉瘤细胞系143B的增殖与迁移 被引量:1
13
作者 杨丹丹 刘晨 +4 位作者 白慧丽 李宝林 何方 张汝益 施琼 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2013年第9期1091-1096,共6页
目的探讨骨形态发生蛋白9(BMP9)过表达对人骨肉瘤细胞系143B的生物学行为的影响。方法用RT-PCR和Western blot检测骨肉瘤细胞系中BMP9的内源性表达,用表达BMP9的腺病毒重组体(adBMP9)感染内源性表达BMP9相对较低的骨肉瘤细胞系,Transwel... 目的探讨骨形态发生蛋白9(BMP9)过表达对人骨肉瘤细胞系143B的生物学行为的影响。方法用RT-PCR和Western blot检测骨肉瘤细胞系中BMP9的内源性表达,用表达BMP9的腺病毒重组体(adBMP9)感染内源性表达BMP9相对较低的骨肉瘤细胞系,Transwell法检测细胞侵袭,划痕愈合实验检测细胞迁移,MTT法和结晶紫染色法检测细胞的增殖,Hoechst 33258染色法检测凋亡,平板集落形成实验检测集落形成能力。结果 adBMP9可以明显减弱骨肉瘤细胞系143B的增殖、迁移、侵袭及集落形成能力(P<0.05),并促进细胞凋亡。结论 adBMP9能抑制人骨肉瘤细胞系143B的增殖和迁移,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 bmp9 骨肉瘤 生物学效应
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BMP9转染脂肪干细胞联合纳米相羟基磷灰石联合修复下颌骨 被引量:2
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作者 何锦泉 丁江峰 +3 位作者 欧阳可雄 黄珞 陈伦秋 朴正国 《中国医药指南》 2016年第10期42-43,共2页
目的评价应用BMP-9基因修饰的ADSCs作为种子细胞,以纳米羟基磷灰石作为载体,构建组织工程化骨来修复大鼠下颌骨骨缺损的效果。方法通过腺病毒转染的方法把BMP9介导到大鼠脂肪干细胞,使细胞均匀分布于纳米羟基磷灰石上。用牙科裂钻在下... 目的评价应用BMP-9基因修饰的ADSCs作为种子细胞,以纳米羟基磷灰石作为载体,构建组织工程化骨来修复大鼠下颌骨骨缺损的效果。方法通过腺病毒转染的方法把BMP9介导到大鼠脂肪干细胞,使细胞均匀分布于纳米羟基磷灰石上。用牙科裂钻在下颌角区制备3 mm×3 mm的骨缺损区,分别植入纳米羟基磷灰石及BMP9-ADSCs。于术后3个月处死动物,行micro CT扫描及组织学检查,评价骨缺损的修复情况。结果实验组A见大量新生骨,可见成熟骨细胞。实验组B较多新生骨形成,骨细胞接近成熟。对照组骨缺损处基本被纤维组织充填,未见新骨生成。结论纳米羟基磷灰石与BMP9转染的大鼠脂肪干细胞复合物植入下颌骨缺损中,可以促进骨缺损修复,增加血管化与骨化。 展开更多
关键词 bmp9 脂肪干细胞 纳米羟基磷灰石 骨缺损
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Runx3敲减抑制BMP9诱导小鼠胚胎成纤维细胞iMEFs向成骨分化
15
作者 王玉凤 冯巧玲 +2 位作者 吉彩霞 刘晓骅 罗进勇 《基础医学与临床》 CSCD 2016年第2期173-178,共6页
目的研究Runx3敲减对BMP9诱导的小鼠胚胎成纤维细胞iMEFs成骨分化的作用。方法 BMP9腺病毒感染iMEFs,用Western blot检测内源性Runx3蛋白的表达。Runx3干扰腺病毒ad-siRunx3和BMP9条件培养基共同处理iMEFs,用碱性磷酸(ALP)染色和活性定... 目的研究Runx3敲减对BMP9诱导的小鼠胚胎成纤维细胞iMEFs成骨分化的作用。方法 BMP9腺病毒感染iMEFs,用Western blot检测内源性Runx3蛋白的表达。Runx3干扰腺病毒ad-siRunx3和BMP9条件培养基共同处理iMEFs,用碱性磷酸(ALP)染色和活性定量测定检测成骨早期指标ALP;用茜素红S染色检测成骨晚期指标钙盐沉积;用RT-PCR检测成骨相关基因Id1、Id2、Id3和Runx2,用Western blot检测成骨相关蛋白Dlx5;用SBE荧光素酶报告质粒检测smad1/5/8的转录活性。结果 BMP9可以使Runx3表达降低(P<0.05);干扰Runx3可以抑制早期成骨指标ALP活性(P<0.05)和晚期成骨指标钙盐沉积;ad-siRunx3抑制BMP9诱导的成骨相关转录因子Id1、Id2、Id3和Runx2基因的表达(P<0.05)及DLX5蛋白的表达(P<0.05)。结论敲减Runx3可以抑制BMP9诱导小鼠胚胎成纤维细胞向成骨分化。 展开更多
关键词 iMEFs RUNX3 bmp9 成骨分化
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BMP9联合NGF对C3H10T1/2间充质干细胞骨向分化能力影响的实验研究 被引量:4
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作者 刘骏宇 杨琨 +3 位作者 李刚 王莹莹 温秀杰 谭颖徽 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期152-156,共5页
目的:探讨骨形态发生蛋白9(BMP9)与神经生长因子(NGF)联合处理对间充质干细胞(MSCs)骨向分化的影响。方法:以重组腺病毒法将BMP9导入C3H10T1/2细胞,构建MSCs骨向分化实验模型,设定分组为绿色荧光(GFP)对照组、NGF单独处理组、BMP9单独... 目的:探讨骨形态发生蛋白9(BMP9)与神经生长因子(NGF)联合处理对间充质干细胞(MSCs)骨向分化的影响。方法:以重组腺病毒法将BMP9导入C3H10T1/2细胞,构建MSCs骨向分化实验模型,设定分组为绿色荧光(GFP)对照组、NGF单独处理组、BMP9单独处理组以及BMP9+NGF联合处理组,分别在处理3 h、12 h、24 h、48 h、3 d、7 d后检测早期成骨分化标志物I型胶原、Runt相关转录因子2(RUNX2)和碱性磷酸酶(ALP)在细胞中的表达。检测方法采用ALP染色、实时定量RTPCR检测mRNA转录水平以及Western blot检测蛋白表达。结果:BMP9+NGF组较各单独处理组ALP活性显著增加,I型胶原、RUNX2的mRNA水平在BMP9+NGF组的表达明显高于其他各单独处理组,且各组在3 h即出现显著差异;RUNX2蛋白在各实验组均表达,BMP9+NGF组表达最高。结论:BMP9联合NGF在成骨诱导间充质干细胞分化早期,协同促进其骨向分化。 展开更多
关键词 骨形态发生蛋白9(bmp9) 神经生长因子(NGF) 间充质干细胞(MSCs) 骨向分化
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BMP9对人乳腺癌细胞MDA-MB-231骨转移的影响及可能机制 被引量:2
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作者 徐欣 李杰 +6 位作者 孙笑笑 王科 冯红蕾 刘月红 万绍恒 罗进勇 张彦 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期7-13,共7页
探讨BMP9对人乳腺癌MDA-MB-231细胞骨转移能力的影响及其可能的机制。扩增高滴度的BMP9表达腺病毒,感染MDA-MB-231细胞,制备表达BMP9的重组MDA-MB-231/BMP9细胞,以此作为实验组;同时以含GFP的空载腺病毒感染该细胞为MDA-MB-231/GFP,联合... 探讨BMP9对人乳腺癌MDA-MB-231细胞骨转移能力的影响及其可能的机制。扩增高滴度的BMP9表达腺病毒,感染MDA-MB-231细胞,制备表达BMP9的重组MDA-MB-231/BMP9细胞,以此作为实验组;同时以含GFP的空载腺病毒感染该细胞为MDA-MB-231/GFP,联合MDA-MB-231共同作为对照组;RT-PCR及Western blot检测重组MDA-MB-231/BMP9细胞中BMP9以及磷酸化Smad1(PSmad1)的表达;定量PCR及Western blot检测三组细胞中CTGFmRNA和蛋白水平的表达情况,最后结合X片运用免疫组织化学染色的方法检测三组标本中CTGF的表达。结果发现重组MDA-MB-231/BMP9细胞中存在BMP9的表达;与对照组细胞相比,MDA-MB-231/BMP9细胞中存在PSmad1的活化增强及CTGF的表达下调;X片发现实验组裸鼠胫骨溶骨性缺损减少;瘤体组织免疫组化发现实验组CTGF表达下调。所以BMP9可以在体内抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞的骨转移并且这种抑制作用有可能是通过下调CTGF来实现的。 展开更多
关键词 bmp9 骨转移 CTGF 乳腺癌
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p38 MAPK通路调控BMP9诱导hPDLSCs成骨分化的体外研究 被引量:5
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作者 张奕 胡婷 +2 位作者 叶国 向学熔 胡娜 《上海口腔医学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期596-601,共6页
目的:检测骨形成发生蛋白9 (bone morphogenetic proteins 9,BMP9)对人牙周膜干细胞(human periodontal ligament stem cells,hPDLSCs)的成骨诱导分化能力,并探讨p38 MAPK通路在该成骨分化中的作用。方法:培养h PDLSCs,腺病毒载体(Ad-BM... 目的:检测骨形成发生蛋白9 (bone morphogenetic proteins 9,BMP9)对人牙周膜干细胞(human periodontal ligament stem cells,hPDLSCs)的成骨诱导分化能力,并探讨p38 MAPK通路在该成骨分化中的作用。方法:培养h PDLSCs,腺病毒载体(Ad-BMP9)感染hPDLSCs后,通过碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP)活性测定与染色、定量聚合酶链反应(quantitative polymerase chain reaction, qPCR)、钙盐沉积等方法,分别检测ALP、骨桥蛋白(osteopontin,OPN)、骨钙素(osteocalcin, OCN)的表达及钙盐沉积量,评价BMP9诱骨分化的能力。在Ad-BMP9感染hPDLSCs 36 h后,检测BMP9作用hPDLSCs后对p38及MKK3/6磷酸化(p-p38, p-MKK3/6)的影响,以及p38 MAPK通路抑制剂SB203580预处理后BMP9-p38-MAPK通路对hPDLSCs成骨分化的影响。采用SPSS16.0软件包对数据进行统计学分析。结果:在Ad-BMP9作用下,ALP活性、OPN和OCN的表达均显著高于对照组(P<0.01), ALP染色与钙盐沉积结果与之吻合。Western印迹法检测发现,BMP9可增强p-p38、p-MKK3/6的表达。加入p38 MAPK通路抑制剂后,ALP、及OPN、OCN的表达均显著降低(P<0.01),钙盐沉积、基质矿化也显著减弱。结论:在hPDLSCs的分化过程中,BMP9对其具有诱骨分化能力。MKK3/6-p38 MAPK通路参与了该成骨分化过程且具有正向调节作用。 展开更多
关键词 人牙周膜干细胞 bmp9 成骨分化 P38MAPK
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外源性BMP9对骨肉瘤细胞MG63的影响与Wnt/β-catenin信号通路的关系 被引量:4
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作者 李宏维 叶凯山 王栓科 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期655-659,共5页
目的研究外源性骨形态发生蛋白9(bone morphogenetic protein 9,BMP9)过表达对骨肉瘤细胞的影响与Wnt/β-catenin信号通路的关系。方法用携带人BMP9基因的重组腺病毒Ad BMP9转染人骨肉瘤细胞MG63,上调MG63中BMP9的表达水平;MTT法检测细... 目的研究外源性骨形态发生蛋白9(bone morphogenetic protein 9,BMP9)过表达对骨肉瘤细胞的影响与Wnt/β-catenin信号通路的关系。方法用携带人BMP9基因的重组腺病毒Ad BMP9转染人骨肉瘤细胞MG63,上调MG63中BMP9的表达水平;MTT法检测细胞增殖能力的变化,Hochest染色法检测细胞凋亡的变化,Transwell实验检测细胞迁移能力的变化;实时定量PCR和Western blot分别检测Wnt/β-catenin信号通路中相关分子β-catenin、c-myc、cyclin D1和E-cadherin在mRNA和蛋白水平表达的变化。统计分析实验结果。结果获得了过表达BMP9的MG63细胞;BMP9能促进MG63细胞的增殖、迁移和凋亡;MG63细胞中BMP9的过表达增强了Wnt/β-catenin信号通路中相关分子β-catenin、c-myc、cyclin D1的表达,减弱了E-cadherin的表达。结论 BMP9对于骨肉瘤细胞MG63具有正性调节作用,该调控作用可能与Wnt/β-catenin信号通路相关。 展开更多
关键词 bmp9 骨肉瘤 MG63 WNT/Β-CATENIN信号通路
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BMP9经Smad信号通路调控iSCAP成骨/成牙本质分化 被引量:1
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作者 陈冰 孔令姣 +3 位作者 雷金霞 沈露 张彩 王金华 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期16-22,共7页
目的:研究BMP9是否能够激活i SCAP细胞中的Smad信号通路,以及Smad信号通路在BMP9诱导i SCAP细胞成骨/成牙本质向分化过程中的作用。方法:首先,采用Western印迹实验检测Ad-BMP9转染i SCAP后Smad1/5/8蛋白的磷酸化水平。随后,利用dn ALK1... 目的:研究BMP9是否能够激活i SCAP细胞中的Smad信号通路,以及Smad信号通路在BMP9诱导i SCAP细胞成骨/成牙本质向分化过程中的作用。方法:首先,采用Western印迹实验检测Ad-BMP9转染i SCAP后Smad1/5/8蛋白的磷酸化水平。随后,利用dn ALK1重组腺病毒和BMP9条件培养基作用于i SCAP,Western印迹实验检测Smad1/5/8蛋白磷酸化水平;采用碱性磷酸酶(ALP)活性检测和染色方法分析早期成骨/成牙本质指标变化,茜素红染色法检测钙盐沉积程度;RT-PCR成骨/成牙本质相关基因Runx2、OCN、OPN和DMP1表达的影响。结果:BMP9可上调i SCAP中Smad1/5/8的磷酸化水平;dn ALK1抑制BMP9条件培养基作用后,可抑制Smad1/5/8的磷酸化,i SCAP细胞中早期成骨/成牙本质标志物ALP活性和晚期成骨/成牙本质标志钙盐结节减少,重要成骨转录因子Runx2基因表达减少,成骨/成牙本质相关基因OCN、OPN、DMP1的表达也受到了抑制。结论:Smad信号通路在BMP9诱导i SCAP成骨/成牙本质过程中存在并起着重要作用。 展开更多
关键词 永生化根尖牙乳头干细胞 bmp9 显性负性突变ALK1受体成骨/成牙本质分化
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