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BMP4/SMAD4通过下调GJA 1基因表达影响绵羊卵巢颗粒间隙连接活性
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作者 何雨 王翔宇 +2 位作者 狄冉 储明星 梁琛 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第2期679-688,共10页
旨在探索骨形态发生蛋白4(bone morphogenetic protein 4,BMP4)对绵羊卵巢颗粒细胞中间隙连接蛋白基因(gap junction protein alpha 1,GJA 1)表达的影响及其分子调控机制。本研究利用廊坊市屠宰场收集的2~4岁健康绵羊卵巢分离颗粒细胞,... 旨在探索骨形态发生蛋白4(bone morphogenetic protein 4,BMP4)对绵羊卵巢颗粒细胞中间隙连接蛋白基因(gap junction protein alpha 1,GJA 1)表达的影响及其分子调控机制。本研究利用廊坊市屠宰场收集的2~4岁健康绵羊卵巢分离颗粒细胞,采用免疫荧光染色技术定位GJA1在颗粒细胞中的分布。将细胞随机分为4组,分别添加0、10、50和100 ng·mL^(-1)浓度的重组BMP4蛋白,每组3个重复,培养24 h,利用CCK-8法评估细胞活性,RT-qPCR和Western blot研究BMP4对GJA 1的mRNA和蛋白表达水平的影响。为探究BMP4调控GJA 1表达的潜在机制,将细胞随机分为3组,每组3个重复,除对照组外分别添加10μmol·L^(-1)BMP I型受体抑制剂(Dorsomorphin)和干扰小RNA敲除SMAD家族蛋白4(SMAD family member 4,SMAD 4),均添加100 ng·mL^(-1)的BMP4处理细胞24 h,RT-qPCR检测GJA 1和SMAD 4表达量,Western blot分析测定GJA1和SMAD4表达水平以及SMAD1/5/8的磷酸化水平,最后利用划痕染料示踪试验检测绵羊卵巢颗粒细胞之间的间隙连接活性。结果显示,BMP4显著抑制了绵羊卵巢颗粒细胞中GJA 1表达和间隙连接活性(P<0.05),此抑制效应在添加Dorsomorphin和敲除SMAD 4后显著减弱(P<0.05),同时,BMP4处理显著增加了SMAD1/5/8的磷酸化水平(P<0.05)。综上,BMP4通过SMAD1/5/8-SMAD4信号转导调控GJA 1表达进而影响颗粒细胞间隙连接活性,本结果增加了对绵羊BMP/SMAD通路调控颗粒细胞间隙连接活性的了解,为改进体外卵泡成熟方法和高繁母羊的分子育种提供了基础。 展开更多
关键词 绵羊 卵巢颗粒细胞 bmp4 间隙连接 GJA1 smad 4
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BMP4/Smad4在C57BL/6小鼠内耳前庭发育不同阶段的表达
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作者 邓安春 杨仕明 +1 位作者 黄德亮 孙建和 《听力学及言语疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期462-466,共5页
目的探讨骨形态形成蛋白4(bone morphogenetic protein 4,BMP4)和Smad4蛋白(drosophila mothers against decapentaplegic protein 4)在C57BL/6小鼠内耳前庭发育不同阶段的表达。方法选择从胚胎第10天(E10)到胚胎第20天(E20)每天的孕鼠... 目的探讨骨形态形成蛋白4(bone morphogenetic protein 4,BMP4)和Smad4蛋白(drosophila mothers against decapentaplegic protein 4)在C57BL/6小鼠内耳前庭发育不同阶段的表达。方法选择从胚胎第10天(E10)到胚胎第20天(E20)每天的孕鼠各两只(共22只),取E10~E17的胚胎头、E18~E20的胚胎内耳,通过冰冻连续切片、免疫组化或免疫荧光染色,观察小鼠胚胎内耳前庭发育过程中BMP4/Smad4的表达情况。结果 BMP4从E10开始,在间充质浓聚前就有表达;间充质一开始浓聚,BMP4在其中就有较丰富的表达;早期主要表达在前庭囊及前庭囊周围的间充质,在胚胎发育的后期,其在软骨囊及前庭上皮里有广泛阳性表达;Smad4在小鼠内耳前庭的表达情况与BMP4不一致,E10到E12的小鼠内耳Smad4表达阴性,E15时各个壶腹嵴、囊斑里才有较明显的Smad4表达,而内耳周围软骨囊到E16时才有明显的Smad4表达。结论 BMP4与小鼠内耳前庭形态形成及毛细胞分化发育、功能形成有关;Smad4与BMP4的表达时空特征不同,Smad4可能主要参与了小鼠内耳前庭发育后期的形态塑形和功能发育。 展开更多
关键词 小鼠 前庭 bmp4/smad4
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炙甘草汤调控miR-26b-5p/SMAD4通路对心房颤动大鼠模型心房重构的影响
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作者 刘魁智 宣学习 +2 位作者 周芃 袁孝伟 朱自强 《天津医药》 2026年第1期14-22,共9页
目的探讨炙甘草汤对心房颤动(AF)大鼠模型心房重构及微小RNA(miR)-26b-5p/母亲DPP同源物(SMAD)4通路的影响。方法构建AF大鼠模型,将造模成功的大鼠随机分为AF组、维拉帕米组、炙甘草汤低剂量(炙甘草汤-L)组、炙甘草汤高剂量(炙甘草汤-H... 目的探讨炙甘草汤对心房颤动(AF)大鼠模型心房重构及微小RNA(miR)-26b-5p/母亲DPP同源物(SMAD)4通路的影响。方法构建AF大鼠模型,将造模成功的大鼠随机分为AF组、维拉帕米组、炙甘草汤低剂量(炙甘草汤-L)组、炙甘草汤高剂量(炙甘草汤-H)组、炙甘草汤-H+anti-NC组、炙甘草汤-H+miR-26b-5p抑制剂(anti-miR-26b-5p)组,每组18只;另取18只健康大鼠作为对照组。检测各组大鼠心功能、体外AF诱发率;苏木精-伊红(HE)染色及Masson染色观察心房组织病理变化;原位末端标记(TUNEL)染色检测心房组织心肌细胞凋亡情况;免疫组化检测心房组织Ⅰ型胶原(ColⅠ)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达;qRT-PCR检测miR-26b-5p相对表达水平;Western blot检测SMAD4、BCL-2相关X蛋白(BAX)、活化的胱天蛋白酶-3(C-caspase3)的表达;双萤光素酶实验验证miR-26b-5p与SMAD4的靶向关系。结果与对照组相比,AF组心房组织出现严重病理损伤,心肌细胞结构异常、肿胀稀疏排列紊乱、蓝色胶原沉积明显;左室收缩末期内径(LVESD)、左室舒张末期内径(LVEDD)升高,左室射血分数(LVEF)、左室缩短分数(LVFS)降低;AF诱发率、胶原面积百分数、细胞凋亡率增加;BAX、C-caspase3、ColⅠ、α-SMA、SMAD4蛋白表达水平升高,miR-26b-5p水平降低(P<0.05)。与AF组相比,维拉帕米组、炙甘草汤-L组、炙甘草汤-H组治疗可逆转上述指标的变化趋势,减轻心房组织病理损伤,减少蓝色胶原沉积。炙甘草汤-H+anti-miR-26b-5p组可逆转炙甘草汤-H对AF大鼠模型心房重构的改善作用。Starbase网站及双萤光素酶基因报告结果显示,miR-26b-5p与SMAD4之间存在靶向关系。结论炙甘草汤可能通过上调miR-26b-5p进而抑制SMAD4表达,改善AF大鼠心房重构。 展开更多
关键词 心房颤动 心房重构 炙甘草汤 miR-26b-5p smad4
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基于KLF4/SMAD通路研究金蝉益肾通络方抑制糖尿病肾病小鼠上皮细胞间质化的机制
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作者 张可欣 何沛玥 +5 位作者 唐静怡 张泽钰 郭玺 吴宇琪 刘玉宁 纪越 《天津中医药》 2026年第1期104-110,共7页
[目的]糖尿病肾病(DKD)是糖尿病的重要微血管并发症。金蝉益肾通络方(JCYSTL)临床治疗糖尿病肾病效果显著,但具体的作用机制还有待进一步探讨。[方法]以高脂饮食联合链脲佐菌素诱导C57BL/6J小鼠的DKD模型为研究对象,并使用JCYSTL进行干... [目的]糖尿病肾病(DKD)是糖尿病的重要微血管并发症。金蝉益肾通络方(JCYSTL)临床治疗糖尿病肾病效果显著,但具体的作用机制还有待进一步探讨。[方法]以高脂饮食联合链脲佐菌素诱导C57BL/6J小鼠的DKD模型为研究对象,并使用JCYSTL进行干预。通过检测24 h-尿蛋白(24 h-UPQ)、血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)和苏木精-伊红染色(HE)、Masson染色,评估JCYSTL对DKD小鼠的治疗作用。通过蛋白免疫印迹法(Western blot)检测上皮细胞间质化标志物[闭锁小带蛋白1(ZO-1)、上皮性钙黏附蛋白(E-cad)、波形蛋白(VIM)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)]的表达水平,明确JCYSTL对DKD小鼠肾组织上皮细胞间质化的影响。通过RT-qPCR及Western blot检测Kruppel样因子4(KLF4)、Sma和Mad相关蛋白7(SMAD7)、Sma和Mad相关蛋白3(SMAD3)的表达,观察JCYSTL对KLF4/SMAD通路主要蛋白表达水平的影响。[结果]结果发现JCYSTL显著降低DKD小鼠血糖及24 h-UPQ、Scr、BUN水平,改善肾小球基底膜增厚及胶原沉积。Western blot显示,JCYSTL上调ZO-1、E-cad表达,抑制VIM、α-SMA,同时促进KLF4、SMAD7表达并抑制SMAD3表达。[结论]JCYSTL可能通过激活KLF4/SMAD通路抑制EMT,从而缓解DKD。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 上皮细胞间质化 金蝉益肾通络方 KLF4/smad通路
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白花丹素通过调节TGF-β1/Smad2及Nrf2/NOX4通路改善博来霉素诱导的肺纤维化
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作者 李慧 胡恒钊 +4 位作者 俞婷婷 胡慧娴 王佳乐 吴晶 郝伟 《中国临床药理学与治疗学》 北大核心 2025年第1期61-69,共9页
目的:探究白花丹素(plumbagi,PL)对博来霉素诱导的肺纤维化(pulmonary fibrosis,PF)的保护作用及其可能性机制。方法:将60只雄性C57BL/6小鼠随机分为:对照组(Control)、博来霉素组(bleomycin,BLM)、PL低剂量组(1 mg/kg)、PL高剂量组(2 m... 目的:探究白花丹素(plumbagi,PL)对博来霉素诱导的肺纤维化(pulmonary fibrosis,PF)的保护作用及其可能性机制。方法:将60只雄性C57BL/6小鼠随机分为:对照组(Control)、博来霉素组(bleomycin,BLM)、PL低剂量组(1 mg/kg)、PL高剂量组(2 mg/kg)。采用气管内注射BLM(3 mg/kg)复制小鼠PF模型,腹腔注射PL(1或2 mg/kg)3周,处死动物。HE与Masson染色观察肺组织形态学变化及胶原沉积情况。检测小鼠肺组织中超氧化物歧化酶(superoxide dis‐mutase,SOD)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)和羟脯氨酸(hydroxy‐proline,HYP)活性或含量。酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测小鼠肺组织中白介素-6(interleukin-6,IL-6)含量。免疫组化检测小鼠肺组织中核因子相关因子2(nuclear factor related factor 2,Nrf2)和NADPH氧化酶4(reduced nicotinamide adenine dinucleotide phosphate oxidase 4,NOX4)阳性细胞表达。Western blotting检测α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、I型胶原(collagen Ⅰ,Col Ⅰ)、Ⅲ型胶原(collagen Ⅲ,Col Ⅲ)、IL-6、转化生长因子-β_(1)(transforming growth factor-β_(1),TGF-β_(1))、p-Smad2、Nrf2和NOX4的蛋白表达。结果:与BLM组相比,PL治疗可减轻小鼠肺间质损伤及细胞外基质沉积,降低HYP含量(P<0.01,P<0.05),降低α-SMA、Col Ⅰ和Col Ⅲ的蛋白表达(P<0.01,P<0.05),减少IL-6的分泌(P<0.01),提高机体抗氧化能力(增强SOD和GSH的活性,减少MDA含量,P<0.01,P<0.05),显著下调TGF-β_(1)、p-Smad2和NOX4阳性细胞及蛋白表达(P<0.01,P<0.05),上调Nrf2阳性细胞及蛋白表达(P<0.01,P<0.05)。结论:PL可能通过调节TGF-β_(1)/Smad2及Nrf2/NOX4信号通路减轻炎症反应与胶原沉积,提高机体抗氧化能力,从而延缓PF进程。 展开更多
关键词 白花丹素 肺纤维化 TGF-β1/smad2信号通路 Nrf2/NOX4信号通路
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疏肝补肾祛痰法对PCOS大鼠TGF-β1及其受体与信号蛋白Smad4/7表达水平的影响
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作者 黄碧琴 张迎春 《时珍国医国药》 北大核心 2025年第7期1263-1266,共4页
目的 在前期实验的基础上观察疏肝补肾祛痰法对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠卵巢TGF-β1及其受体TGFR-β1与信号蛋白Smad4、Smad7在TGF-β/Smads通路中的表达变化及意义,探讨其抗卵巢纤维化的效果和作用机理。方法 选取6周龄SD雌性大鼠建立... 目的 在前期实验的基础上观察疏肝补肾祛痰法对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠卵巢TGF-β1及其受体TGFR-β1与信号蛋白Smad4、Smad7在TGF-β/Smads通路中的表达变化及意义,探讨其抗卵巢纤维化的效果和作用机理。方法 选取6周龄SD雌性大鼠建立PCOS模型,随机分为正常组、模型组、西药阳性组、中药治疗低、中、高剂量组,每组15只。通过蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠卵巢中TGF-β1/TGFR-β1及信号蛋白Smad4、Smad7的表达量。结果 模型组中TGF-β1、TGFR-β1表达增高(P<0.01),各治疗组中TGF-β1、TGFR-β1的表达降低(P<0.01),西药组与中药低、中剂量组的表达无明显差异性(P>0.05);模型组中Smad4表达增高,Smad7蛋白表达显著降低有显著性差异(P<0.01);各治疗组Smad7均有所升高(P<0.01),中药中剂量组、西药组Smad7无显著性差异(P>0.05);西药组及中药中、高剂量组中Smad4的表达降低(P<0.01),且西药组与中药中、高组表达无差异(P>0.05)。结论 疏肝补肾祛痰法可用于治疗多囊卵巢综合征而其抗纤维化作用可能部分是通过调节TGF-β1/TGFR-β1及信号蛋白Smad4/7的表达,进而调控卵巢TGF-β/Smads信号通路的激活来实现的。 展开更多
关键词 大鼠卵巢纤维化 多囊卵巢综合征 疏肝补肾祛痰法 TGF-β1/TGFR-β1受体 smad4蛋白 smad7蛋白
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中华鳖BMP4基因的分子特征及表达研究
7
作者 熊钢 王子奥 +3 位作者 彭治桃 康骊 周先文 王晓清 《湖南农业科学》 2025年第11期86-92,共7页
为探讨中华鳖BMP4基因的分子特征及其在卵泡发育中的作用,采用分子克隆和生物信息学方法获得了中华鳖BMP4全长cDNA序列,采用荧光定量PCR对BMP4 mRNA组织表达、性周期中卵巢及孵化胚胎性腺的表达特性进行分析。结果显示:中华鳖BMP4 cDNA... 为探讨中华鳖BMP4基因的分子特征及其在卵泡发育中的作用,采用分子克隆和生物信息学方法获得了中华鳖BMP4全长cDNA序列,采用荧光定量PCR对BMP4 mRNA组织表达、性周期中卵巢及孵化胚胎性腺的表达特性进行分析。结果显示:中华鳖BMP4 cDNA序列长度为1743 bp,具有1209 bp的开放阅读框,450 bp的5'端非编码区,75 bp的3'端非编码区,编码402个氨基酸,编码蛋白的等电点为9.24,分子量为45.07 kD。BMP4氨基酸序列具有由24个氨基酸残基组成的信号肽和6个螺旋结构。龟鳖类BMP4氨基酸序列的同源性分析显示:中华鳖与绿海龟(Chelonia mydas)、红海龟(Caretta caretta)和棱皮龟(Dermochelys coriacea)聚成的一支比较近。表达分析表明:BMP4 mRNA在卵巢组织中表达量显著高于其肝、肌肉、肠道和精巢组织(P<0.05)。BMP4 mRNA在性周期的中华鳖卵巢中冬季表达量最低,在春季卵巢内卵泡发育期表达量最高,排卵后其表达量随即回落。试验结果表明:BMP4基因参与中华鳖卵巢内卵泡的生长、成熟和排卵的调节,同时可能参与中华鳖胚胎性腺发育,而不参与中华鳖胚胎性腺分化。 展开更多
关键词 中华鳖 bmp4基因 性腺发育 卵泡发育
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补肾中药对骨质疏松症大鼠下丘脑BMP-4、Smad6 mRNA及蛋白表达的影响 被引量:33
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作者 金珉廷 郑洪新 朱辉 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2008年第8期556-560,共5页
目的探索肾虚骨质疏松症的病理机制,研究补肾中药对肾虚骨质疏松大鼠防治作用的机理。方法实验采用去双侧卵巢的方法,建立肾虚骨质疏松症模型。补肾中药复方(高、中、低)剂量对实验大鼠治疗12周,以骨疏康颗粒、盖天力牡蛎钙作为阳性对照... 目的探索肾虚骨质疏松症的病理机制,研究补肾中药对肾虚骨质疏松大鼠防治作用的机理。方法实验采用去双侧卵巢的方法,建立肾虚骨质疏松症模型。补肾中药复方(高、中、低)剂量对实验大鼠治疗12周,以骨疏康颗粒、盖天力牡蛎钙作为阳性对照药,并设正常对照组和模型空白组。用RT-PCR法、Western印迹法检测肾虚骨质疏松症大鼠下丘脑组织中BMP-4、Smad6 mRNA和蛋白表达。结果①与正常组比较,模型空白组大鼠下丘脑组织中的BMP-4 mRNA和蛋白表达水平明显增强;Smad6 mRNA和蛋白表达水平明显降低。②与模型空白组比较,补肾中药组对模型大鼠下丘脑组织中的BMP-4 mRNA和蛋白表达明显降低;而Smad6 mRNA和蛋白表达明显增强。结论肾虚骨质疏松症的病理机制为肾精不足,骨髓、脑髓失养,表现在下丘脑-垂体-靶腺轴的调控失常,包括下丘脑组织的细胞因子及其信号传导通路的异常。 展开更多
关键词 肾虚 骨质疏松症 bmp-4 smad6
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补肺益肾方对TGF-β1/BMP-4诱导的肺血管平滑肌细胞TGF-β1/Smad信号通路的影响 被引量:12
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作者 任周新 李建生 +3 位作者 沈俊岭 梅晓峰 余海滨 冯月 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期126-132,共7页
目的:探讨补肺益肾方对转化生长因子-β1(TGF-β1)/骨形成蛋白-4(BMP-4)诱导的肺血管平滑肌细胞增殖及TGF-β1/Smad信号传导的影响,并探讨其相关的作用机制。方法:应用TGF-β1/BMP-4诱导人肺动脉平滑肌细胞增殖。细胞分为正常组(... 目的:探讨补肺益肾方对转化生长因子-β1(TGF-β1)/骨形成蛋白-4(BMP-4)诱导的肺血管平滑肌细胞增殖及TGF-β1/Smad信号传导的影响,并探讨其相关的作用机制。方法:应用TGF-β1/BMP-4诱导人肺动脉平滑肌细胞增殖。细胞分为正常组(10%正常大鼠血清),诱导增殖组(含7.5μg·L^-1TGF-β1与5.0μg·L^-1BMP-4的10%正常大鼠血清),4%补肺益肾方含药血清(含7.5μg·L^-1TGF-β1与5.0μg·L^-1BMP-4,6%正常大鼠血清及4%补肺益肾大鼠血清),6%补肺益肾方含药血清(含7.5μg·L-1TGF-β1与5.0μg·L^-1BMP-4,4%正常大鼠血清及6%补肺益肾大鼠血清)及8%补肺益肾方含药血清组(含7.5μg·L-1TGF-β1与5.0μg·L^-1BMP-4,2%正常大鼠血清及8%补肺益肾大鼠血清)。24 h后,显微镜下观察细胞的密度,5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-bromo-2-deoxyuridine,Brd U)法检测细胞增殖,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Smad1,2,3和5以及p-Smad2/3蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链式反应法(Real-time PCR)检测纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1),结缔组织生长因子(CTGF),分化抑制因子-1(ID-1)和ID-2 mRNA的表达。结果:TGF-β1/BMP-4作用24 h后,细胞密度增加、细胞增殖率显著增加(P〈0.05),补肺益肾方抑制TGF-β1/BMP-4诱导的细胞增殖,显示出浓度依赖性,其中8%浓度显著抑制细胞增殖(P〈0.01)。TGF-β1/BMP-4及补肺益肾方均不影响Smad1,2,3和5蛋白的表达;但TGF-β1/BMP-4诱导p-Smad2/3的表达(P〈0.05),8%补肺益肾方显著抑制TGF-β1/BMP-4诱导的p-Smad2/3表达(P〈0.05)。TGF-β1/Smad2通路的下游效应基因的检测发现,TGF-β1/BMP-4及补肺益肾方均不影响PAI-1,ID-1和ID-2 mRNA的表达;但TGF-β1/BMP-4诱导后,CTGF mRNA表达水平的显著增加(P〈0.01),8%补肺益肾方抑制TGF-β1/BMP-4诱导的CTGF mRNA的表达(P〈0.05)。结论:补肺益肾方抑制TGF-β1与BMP-4合用诱导的肺动脉平滑肌细胞的增殖,抑制p-Smad2/3/CTGF通路的活化是可能的作用途径。 展开更多
关键词 转化生长因子-β1(TGF-β1)/骨形成蛋白-4(bmp-4) 补肺益肾方 肺动脉平滑肌细胞 TGF-β1/smad通路 增殖
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BMP4基因修饰骨髓间充质干细胞复合壳聚糖对骨缺损修复的促进作用
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作者 蒋学林 眭江涛 谢江 《解剖科学进展》 2025年第1期67-70,共4页
目的 探究BMP4基因修饰骨髓间充质干细胞(BMSCs)复合壳聚糖对骨缺损大鼠的治疗作用及机制。方法 8周龄雄性SD大鼠随机分为对照组(Control组)、BMSCs-CS组和BMP4-BMSCs-CS组,每组10只,采用Micro-CT对各组大鼠桡骨进行影像学检查;采用HE... 目的 探究BMP4基因修饰骨髓间充质干细胞(BMSCs)复合壳聚糖对骨缺损大鼠的治疗作用及机制。方法 8周龄雄性SD大鼠随机分为对照组(Control组)、BMSCs-CS组和BMP4-BMSCs-CS组,每组10只,采用Micro-CT对各组大鼠桡骨进行影像学检查;采用HE染色观察各组大鼠骨缺损部位成骨情况;采用Van Gieson染色观察各组大鼠骨组织形态学变化并计算缺损区新骨形成面积百分比;采用Western blot检测各组大鼠骨组织中OCN、RUNX2、RANKL、OPG、Notch 1、Hes 1、Hey 1和Jagged 1蛋白表达情况;采用免疫荧光观察各组大鼠骨组织中CD31表达情况。结果 与BMSCs-CS组和Control组相比,BMP4-BMSCs-CS组大鼠截骨线完全消失,可见大量骨痂生成,皮质重建良好,髓腔再通;可见大量成熟度较高的骨基质形成并且新骨形成面积百分比明显升高;大鼠骨组织中OCN、RUNX2、OPG、Notch 1、Hes 1、Hey 1、Jagged 1和CD31蛋白表达水平明显升高,RANKL蛋白表达水平明显降低。结论 BMP4基因修饰增加骨髓间充质干细胞复合壳聚糖对大鼠骨缺损的修复作用,其机制与Notch信号通路激活有关。 展开更多
关键词 骨缺损 bmp4基因 骨髓间充质干细胞 壳聚糖 NOTCH信号通路
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淫羊藿苷、补骨脂素、齐墩果酸、二苯乙烯苷正交配伍调控Bmp2、Smad1、4诱导BMSCs成骨分化的影响 被引量:20
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作者 高璐 郑洪新 +2 位作者 陈谊敬 宗志红 林庶茹 《世界科学技术-中医药现代化》 北大核心 2014年第5期1094-1102,共9页
目的:观察4种补肾中药淫羊藿、补骨脂、女贞子、何首乌有效成分淫羊藿苷、补骨脂素、齐墩果酸、二苯乙烯苷正交配伍,两种非补肾中药川芎、黄芪有效成分川芎嗪、黄芪甲苷,对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)的调控作用。方法:65只SD大鼠随机... 目的:观察4种补肾中药淫羊藿、补骨脂、女贞子、何首乌有效成分淫羊藿苷、补骨脂素、齐墩果酸、二苯乙烯苷正交配伍,两种非补肾中药川芎、黄芪有效成分川芎嗪、黄芪甲苷,对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)的调控作用。方法:65只SD大鼠随机分为正常对照组、阳性转化液对照组、补肾配伍组(1组、2组、3组、4组、5组、6组、7组、8组、9组)、非补肾药对照组(黄芪甲苷组、川芎嗪组)。补肾配伍组、非补肾药对照组予灌胃给药,每日1次,连续3天。正常对照组、阳性转化液对照组予等剂量生理盐水灌胃。灌胃第3天,大鼠处死后取各组含药血清培养骨髓间充质干细胞6、12、18天;ELISA法分别定量检测6、12、18天骨形态发生蛋白2(Bmp2)活性表达及含量,评价成骨细胞分化程度。用实时定量PCR法检测含药血清培养骨髓间充质干细胞第18天Bmp2、Smad1、Smad4 mRNA表达。结果:补肾配伍药可提高体外培养骨髓间充质干细胞Bmp2的活性表达及含量,在12天达到高峰值。补肾配伍组能上调Bmp2、Smad1、Smad4的mRNA表达。结论:补肾中药有效成分配伍能促进骨髓间充质干细胞分化为成骨细胞,其机制可能与上调Bmp2、Smad1、Smad4 mRNA表达量及Bmp2的活性及含量有关。 展开更多
关键词 补肾中药 骨髓间充质干细胞 成骨细胞 骨形态发生蛋白2 smad1 smad4
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一次急性力竭运动后大鼠肝TWSG1、BMP6、SMAD4mRNA及肝非血红素铁的时相性变化 被引量:4
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作者 王羽 王海涛 +2 位作者 王金霞 宋文靖 刘玉倩 《中国运动医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期997-1000,1017,共5页
目的:检测一次急性力竭运动后大鼠肝扭转原肠胚形成同系物1(Twisted gastrulation,TWSG1)、SMAD4(drosophila mothers against decapentaplegic protein)和肝铁贮存的动态变化,了解急性运动对铁代谢的调控作用。方法:雄性SD大鼠30只(220... 目的:检测一次急性力竭运动后大鼠肝扭转原肠胚形成同系物1(Twisted gastrulation,TWSG1)、SMAD4(drosophila mothers against decapentaplegic protein)和肝铁贮存的动态变化,了解急性运动对铁代谢的调控作用。方法:雄性SD大鼠30只(220±10)g分为对照组(CG组,6只)和运动组(EG组,24只),运动组再分为E0h组、E3h组、E6h组和E24h组。运动组进行跑速为30 m/min的一次急性力竭跑台运动。分别于运动结束后0 h、3 h、6 h和24 h采用RT-PCR法测定大鼠肝脏TWSG1、骨形态发生蛋白6(Bone morphogenetic protein6,BMP6)和SMAD4 mRNA表达,采用试剂盒检测肝非血红素铁。结果:(1)E3h组TWSG1 mRNA表达量显著低于CG组和E24h组(P<0.01),E24h组显著高于其它各组(P<0.01)。E3h组BMP6和SMAD4 mRNA显著高于其它各组(P<0.01),E24h组显著低于其它各组(P<0.01)。(2)E3h组肝非血红素铁与CG组比较显著下降(P<0.01)。结论:一次急性力竭运动中TWSG1、BMP6及SMAD4通路对机体铁状态发挥重要调控作用。 展开更多
关键词 扭转原肠胚形成同系物1 急性力竭运动 smad4
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BMP-4通过Smad1信号通路诱导头颈鳞癌细胞发生上皮-间质转化而调控其发生侵袭的研究 被引量:1
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作者 徐婷 肖大江 张欣 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2013年第23期3837-3839,共3页
目的:体外试验探讨BMP-4及Smad1介导的信号通路在促进头颈鳞癌侵袭中的作用。方法:采用人重组BMP-4干预头颈鳞癌细胞(SCCHN)株,激光共聚集显微镜观察SCCHN细胞发生上皮-间质转化(EMT)的形态学改变。采用免疫印迹法检测蛋白的表达;侵袭... 目的:体外试验探讨BMP-4及Smad1介导的信号通路在促进头颈鳞癌侵袭中的作用。方法:采用人重组BMP-4干预头颈鳞癌细胞(SCCHN)株,激光共聚集显微镜观察SCCHN细胞发生上皮-间质转化(EMT)的形态学改变。采用免疫印迹法检测蛋白的表达;侵袭试验用以检测细胞的侵袭力与迁移力的改变。结果:BMP-4可促进SCCHN细胞发生EMT形态学改变,同时促进细胞发生侵袭,EMT相关蛋白E-caherin显著下调,vimentin显著上调;Smad1磷酸化水平增高。结论:BMP-4可通过诱导头颈鳞癌细胞发生EMT从而促进肿瘤的转移,为头颈鳞癌转移机制研究开辟新的通路。 展开更多
关键词 头颈部肿瘤 bmp-4 smad1 p-smad1 肿瘤转移
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IRAK-4对成骨细胞分化BMP-Smad通道的影响 被引量:1
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作者 刘晓春 黄东 +3 位作者 于明圣 申宽宏 黄永军 牟勇 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2013年第3期318-320,共3页
目的探讨白细胞介素-l受体相关激酶-4对成骨细胞分化过程BMP-Smad通道的影响。方法 C2C12细胞是肌卫星细胞,不同培养条件下有不同分化潜能。它可分化为成骨细胞,是研究体外成骨细胞分化的理想模型。C2C12细胞培养于培养板中,随机分为3组... 目的探讨白细胞介素-l受体相关激酶-4对成骨细胞分化过程BMP-Smad通道的影响。方法 C2C12细胞是肌卫星细胞,不同培养条件下有不同分化潜能。它可分化为成骨细胞,是研究体外成骨细胞分化的理想模型。C2C12细胞培养于培养板中,随机分为3组,每组加入不同培养物,模拟干细胞向成骨细胞分化过程中受到的不同刺激。检测ALP活性、Smad1 mRNA、P-Smad1蛋白表达,观察不同刺激对成骨细胞分化的影响。结果与正常对照组比较,BMP-2组ALP活性明显增加,与BMP-2组比,BMP2+IRAK-4siRNA转染组ALP活性增加,BMP2+IRAK-4siRNA转染组和BMP-2组比Smadl mRNA的表达只是轻微增加,P-Smad1蛋白表达明显增加。结论 BMP-2可增强C2C12细胞成骨化,IRAK-4可抑制C2C12细胞被BMP-2诱导的成骨化,其机制可能是通过减弱BMP-Smad通道中Smad1磷酸化水平实现的。 展开更多
关键词 IRAK-4 骨形成 bmp-smad通道
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熊果酸通过BMP-2/Smad4/Wnt/β-catenin信号通路介导对去卵巢大鼠骨量流失的保护作用 被引量:14
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作者 李洁 孙雅楠 +1 位作者 解光越 李斯 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期1810-1814,共5页
目的探讨熊果酸(XGS)对去卵巢大鼠骨量流失的影响,并探索可能的机制。方法通过双侧去卵巢建立骨质疏松大鼠模型;随后随机分为假手术组(Sham)、去卵巢组(OVX)以及熊果酸组(XGS),每组10只;其中XGS组大鼠接受熊果酸(100 mg/kg)治疗12周;待... 目的探讨熊果酸(XGS)对去卵巢大鼠骨量流失的影响,并探索可能的机制。方法通过双侧去卵巢建立骨质疏松大鼠模型;随后随机分为假手术组(Sham)、去卵巢组(OVX)以及熊果酸组(XGS),每组10只;其中XGS组大鼠接受熊果酸(100 mg/kg)治疗12周;待治疗检测股骨骨量、骨密度(BMD)、骨矿物质含量(BMC)、骨代谢指标以及BMP-2、Smad4、Wnt 1和β-catenin表达。结果治疗12周后,与OVX组相比,Micro-CT和双能X线结果显示XGS组的大鼠骨小梁微观参数、骨密度和骨矿物质含量得到明显改善。XGS组大鼠BMD、BMC、TV/BV、Tb.N、Tb.Th和Tb.Sp较OVX组明显改善(P<0.05)。血清检测结果和生物力学检测结果显示XGS组的最大载荷和弹性模量均高于OVX组(P<0.05);XGS组大鼠血清ALP、OPD和OCN水平较OVX组明显降低,组间差异有统计学意义(P<0.05)。WB检测显示,和OVX组比较,XGS组BMP-2、Smad4、Wnt1和β-catenin表达水平明显上调,比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论熊果酸可以通过BMP-2/Smad4/Wnt/β-catenin信号通路介导对去卵巢大鼠骨量流失保护作用。 展开更多
关键词 熊果酸 绝经后骨质疏松症 骨代谢指标 骨密度 bmp-2/smad4/Wnt/β-catenin信号通路
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异氟醚后处理通过Bmp4/Smad信号通路调节脑缺血再灌注损伤大鼠AQP4表达 被引量:3
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作者 孟轶男 安洋 王守田 《解剖学研究》 CAS 2018年第5期398-402,共5页
目的探讨异氟醚后处理对脑缺血再灌注损伤大鼠AQP4表达的影响及Bmp4/Smad信号通路发挥的调节作用。方法SPF级SD大鼠48只,体质量250~300 g,随机分为假手术组(Sham组)、脑缺血再灌注损伤组(CIRI组)、异氟醚后处理组(ISO组)、AQP4抑制剂组(... 目的探讨异氟醚后处理对脑缺血再灌注损伤大鼠AQP4表达的影响及Bmp4/Smad信号通路发挥的调节作用。方法SPF级SD大鼠48只,体质量250~300 g,随机分为假手术组(Sham组)、脑缺血再灌注损伤组(CIRI组)、异氟醚后处理组(ISO组)、AQP4抑制剂组(TGN020组)、BMP4抑制剂组(LDN193189组)和二甲基亚砜组(DMSO组),每组8只。采用大脑中动脉结扎方法建立CIRI模型;苏木精-伊红(HE)染色观察大脑组织病理学变化;Western blot法检测各组大鼠BMP4、Smad、p-Smad和AQP4蛋白表达水平;qRT-PCR法检测AQP4m RNA表达水平。结果ISO后处理可以改善大鼠脑缺血再灌注损伤的脑组织损伤,降低AQP4的表达水平(P<0.05),增加BMP4和p-Smad的表达(P<0.05);加入BMP4抑制剂后,ISO的作用得到抑制(P<0.05)。结论ISO后处理对CIRI大鼠脑组织有保护作用,其机制与AQP4表达及Bmp4/Smad信号通路有关。 展开更多
关键词 异氟醚后处理 脑缺血再灌注损伤 水通道蛋白 bmp4/smad信号通路
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“邵氏五针法”对哮喘大鼠血清中IL-4、IL-6及肺组织中TGF-β1、Smad2 mRNA的影响 被引量:1
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作者 张淑宁 王培育 +8 位作者 张雪琳 李胜男 朱芷欣 邓云鹏 魏腾腾 何广帅 靳诺佳 刘高飞 杨旭光 《辽宁中医药大学学报》 2025年第11期127-131,共5页
目的观察针刺“肺俞”“大椎”“风门”对哮喘大鼠血清中白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-6(IL-6)及肺组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)和Smad家族成员Smad2基因表达的影响。方法选取40只大鼠分为空白组、模型组、针刺组和地塞米松组4组... 目的观察针刺“肺俞”“大椎”“风门”对哮喘大鼠血清中白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-6(IL-6)及肺组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)和Smad家族成员Smad2基因表达的影响。方法选取40只大鼠分为空白组、模型组、针刺组和地塞米松组4组,每组10只。通过腹腔注射卵蛋白加氢氧化铝混合物并用卵蛋白滴鼻激发的方法来制备慢性哮喘大鼠模型,空白组用0.9%氯化钠溶液代替。针刺组每周针刺“肺俞”“大椎”“风门”3次,每次20 min,地塞米松组每周腹腔注射地塞米松磷酸钠注射液3次,空白组和模型组仅陪同抓取固定,不进行治疗。干预结束24 h后取材,苏木精-伊红(HE)染色对肺组织进行病理学检查;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中IL-4、IL-6的表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)测定TGF-β1和Smad2 mRNA在大鼠肺组织中的表达情况。结果与空白组相比,模型组大鼠支气管管壁和平滑肌可见明显增厚、管腔变窄,并有较多的炎性细胞浸润,大鼠血清中IL-4、IL-6和肺组织中TGF-β1、Smad2 mRNA的表达量显著升高(P<0.01);与模型组相比,针刺组和地塞米松组大鼠气道炎症程度均降低,血清中IL-4、IL-6和肺组织中TGF-β1、Smad2 mRNA的表达量均显著降低(P<0.01)。结论“邵氏五针法”可以通过下调大鼠血清中IL-4、IL-6及肺组织中TGF-β1、Smad2 mRNA的表达,减轻炎症细胞浸润,抑制平滑肌增厚和气道重塑,可作为针刺抗哮喘效应的机制之一。 展开更多
关键词 邵氏五针法 哮喘 气道重塑 白细胞介素-4 白细胞介素-6 转化生长因子-β1 mRNA smad家族成员2 mRNA
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SMAD4、SOX2、P53在宫颈癌组织中的变化及其临床意义 被引量:1
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作者 施稳稳 王准证 《承德医学院学报》 2025年第3期196-200,共5页
目的探究Smad同源物4(SMAD4)、性别决定区Y框蛋白2(SOX2)、P53基因(P53)在宫颈癌(CCA)患者癌组织中的表达变化及其对预后的预测价值。方法回顾性选取2021年1月~2022年1月漯河市中心医院收治的CCA患者82例为观察组,另选取良性肿瘤患者82... 目的探究Smad同源物4(SMAD4)、性别决定区Y框蛋白2(SOX2)、P53基因(P53)在宫颈癌(CCA)患者癌组织中的表达变化及其对预后的预测价值。方法回顾性选取2021年1月~2022年1月漯河市中心医院收治的CCA患者82例为观察组,另选取良性肿瘤患者82例为对照组,对比2组不同病理特征下SMAD4、SOX2、P53的表达,分析各指标与CCA病理特征的相关性,并探讨其与CCA患者预后的关系。结果观察组SOX2、P53表达情况高于对照组,SMAD4表达情况低于对照组(P<0.05);Ⅰ~Ⅱ期患者SOX2、P53表达情况低于Ⅲ~Ⅳ期,高分化患者低于中、低分化,SMAD4表达情况高于Ⅲ~Ⅳ期,高分化患者高于中、低分化(P<0.05);CCA患者SOX2、P53表达情况与TNM分期呈正相关,与分化程度呈负相关,SMAD4表达情况与TNM分期呈负相关,与分化程度呈正相关(P<0.05);SOX2、P53表达阳性患者2年生存率低于阴性患者,SMAD4表达阳性患者2年生存率高于阴性患者(P<0.05)。结论CCA组织中SOX2、P53表达异常升高,SMAD4表达异常降低,三项指标与CCA发生、TNM分期、分化程度密切相关,可为临床预后预测提供有效参考。 展开更多
关键词 宫颈癌 smad4 SOX2 P53 预后
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磁共振成像联合血清SLIT3、Smad4在膝关节退行性骨关节炎患者关节损伤程度中的评估价值
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作者 朱洁 闫苗苗 +2 位作者 王剑 刘荣 崔涛涛 《中国CT和MRI杂志》 2025年第11期173-176,共4页
目的探究磁共振成像(MRI)联合血清神经轴突生长因子3(SLIT3)、Smad同源物4(Smad4)在膝关节退行性骨关节炎(OA)患者关节损伤程度中的评估价值。方法选取本院2021年9月至2023年9月收治的膝关节退行性OA患者180例作为观察对象,所有患者均进... 目的探究磁共振成像(MRI)联合血清神经轴突生长因子3(SLIT3)、Smad同源物4(Smad4)在膝关节退行性骨关节炎(OA)患者关节损伤程度中的评估价值。方法选取本院2021年9月至2023年9月收治的膝关节退行性OA患者180例作为观察对象,所有患者均进行MRI检查;血清SLIT3、Smad4采用ELISA检测,以关节镜为金标准,采用四格表分析MRI对关节软骨损伤以及膝关节退行性OA患者关节损伤程度的诊断价值。绘制ROC曲线分析MRI、血清SLIT3、Smad4对膝关节退行性OA患者关节中重度损伤的评估价值。结果MRI和关节镜对关节炎症状的检出率比较无差异(P>0.05)。MRI检测出现膝关节退行性OA患者关节损伤轻度136例,中度35例,重度9例,其诊断轻度的准确度98.89%,中度的准确度96.67%,重度的准确度97.78%。轻度、中度和重度组血清SLIT3、Smad4水平依次降低(P<0.05)。根据ROC曲线得知,MRI、血清SLIT3、Smad4评估膝关节退行性OA患者关节中重度损伤的AUC为0.911、0.875、0.825,三者联合评估膝关节退行性OA患者关节中重度损伤的AUC为0.978,三者联合优于各自单独预测(_(Z联合vs MRI)=2.553,Z_(联合vs SLIT3)=2.586,Z_(联合vs Smad4)=2.567,P均<0.05)。结论膝关节退行性OA患者中血清SLIT3、Smad4水平随着关节损伤程度的升高而降低,MRI诊断膝关节退行性OA患者关节损伤程度的准确度较高,MRI联合血清SLIT3、Smad4可提高对膝关节退行性OA患者关节损伤程度的评估价值。 展开更多
关键词 磁共振成像 神经轴突生长因子3 smad同源物4 膝关节退行性骨关节炎 损伤程度
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BRD4通过HMGB1/TGF-β1/Smad通路参与调控肺泡上皮细胞间质转化 被引量:3
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作者 陈茹茹 韩璐 +3 位作者 何海兰 郝小惠 刘和亮 郭灵丽 《安徽医科大学学报》 北大核心 2025年第2期247-254,共8页
目的探究溴结构域蛋白4(BRD4)在转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的肺泡Ⅱ型上皮细胞间质转化中的作用机制。方法采用不同浓度(5、10 ng/ml)的TGF-β1刺激MLE-12细胞48 h建立上皮间质转化(EMT)细胞模型,并对细胞予以50 nmol/L BRD4抑制剂J... 目的探究溴结构域蛋白4(BRD4)在转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的肺泡Ⅱ型上皮细胞间质转化中的作用机制。方法采用不同浓度(5、10 ng/ml)的TGF-β1刺激MLE-12细胞48 h建立上皮间质转化(EMT)细胞模型,并对细胞予以50 nmol/L BRD4抑制剂JQ-1,100μmol/L高迁移率族蛋白B1(HMGB1)抑制剂甘草甜素(GA)和3μg/ml的重组高迁移率族蛋白1(rHMGB1)预处理。实验分组为:对照组、TGF-β1组、JQ-1组、JQ-1+TGF-β1组、GA组、GA+TGF-β1组、JQ-1+TGF-β1+rHMGB1组。采用CCK-8法检测JQ-1对细胞活力的影响;采用Western blot检测CDH1、ZO-1、Vimentin、α-SMA、BRD4、HMGB1、TGF-β1及Smad2/3、p-Smad2/3的蛋白表达水平;通过划痕实验检测细胞迁移能力。结果与对照组比较,TGF-β1组Vimentin、α-SMA蛋白表达增加,CDH1和ZO-1蛋白表达降低,提示EMT模型构建成功。在该模型中,BRD4、HMGB1的表达明显增加。不同浓度的JQ-1均可抑制MLE-12的细胞活力,且呈浓度依赖性。JQ-1和GA均可缓解TGF-β1诱导的EMT的发生,并抑制由TGF-β1引起的HMGB1表达的增加和TGF-β1/Smad2/3通路的激活,而采用rHMGB1上调HMGB1的表达可以减少JQ-1对EMT和TGF-β1/Smad2/3通路的影响。此外,JQ-1和GA均可以有效降低TGF-β1诱导的细胞迁移;而rHMGB1可以缓解JQ-1对细胞迁移速率的抑制作用。结论BRD4可通过影响HMGB1/TGF-β1/Smad2/3信号通路调控肺泡Ⅱ型上皮细胞向间质转化过程,且BRD4可能成为抑制肺纤维化的一个潜在靶点。 展开更多
关键词 溴结构域蛋白4 高迁移率族蛋白1 TGF-β1/smad2/3 上皮间质转化 纤维化 JQ-1
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