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P38MAPK信号通路参与BMP-13诱导C3H10T1/2细胞向心肌样细胞分化
1
作者 孙文静 陈沅 +4 位作者 张芬 陈露 陈妙月 耿雪静 朱高慧 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2013年第2期161-165,共5页
目的探讨P38 MAPK对BMP-13诱导C3H10T1/2细胞向心肌样细胞分化的影响。方法实验共4个部分,分组如下:1)BMP-13腺病毒(Ad-BMP-13)对P38 MAPK的作用:Ad-BMP-13转染组、Ad-GFP转染组和C3H10空白组。Western blot检测磷酸化P38 MAPK(p-P38 MA... 目的探讨P38 MAPK对BMP-13诱导C3H10T1/2细胞向心肌样细胞分化的影响。方法实验共4个部分,分组如下:1)BMP-13腺病毒(Ad-BMP-13)对P38 MAPK的作用:Ad-BMP-13转染组、Ad-GFP转染组和C3H10空白组。Western blot检测磷酸化P38 MAPK(p-P38 MAPK)和总P38 MAPK(t-P38 MAPK)的表达变化,免疫荧光技术定位p-P38 MAPK;2)P38 MAPK干扰腺病毒(Ad-si-P38)对P38 MAPK的作用:si-P38干扰组、si-NC干扰对照组和C3H10空白组。Western blot检测t-P38 MAPK的表达;3)Ad-si-P38阻断P38 MAPK后对BMP-13诱导分化的影响:si-P38+Ad-BMP-13转染组、si-NC+Ad-BMP-13转染组、si-NC+Ad-GFP转染组和C3H10空白组。Western blot检测cTnT和Cx43的表达,荧光定量PCR检测GATA-4和MEF-2C的mRNA表达;4)SB203580阻断P38 MAPK后对BMP-13诱导分化的影响:DMSO+Ad-BMP-13转染组、SB203580(2、5和10μmol/L)+Ad-BMP-13转染组。荧光定量PCR检测GATA-4和MEF-2C的mRNA表达。结果 BMP-13促进P38 MAPK的磷酸化。Ad-si-P38可以有效降低P38 MAPK表达水平。Ad-si-P38阻断P38 MAPK后BMP-13诱导组cTnT、Cx43表达有明显降低(P<0.05),GATA-4和MEF-2C的表达也有显著降低(P<0.05)。随P38 MAPK特异性抑制剂SB203580浓度增加,BMP-13诱导组GATA-4和MEF-2C的表达降低(P<0.05)。结论 Ad-BMP-13可以通过激活P38 MAPK信号通路来调控C3H10T1/2细胞向心肌样细胞分化。 展开更多
关键词 bmp-13 C3H10T1 2细胞 P38 MAPK RNA干扰 SB203580
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BMP-13在C_3H10T_(1/2)干细胞向心肌样细胞分化过程中的作用 被引量：4
2
作者 韦皓 陈沅 +1 位作者 沈彪 赵璐 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期813-817,共5页
目的研究骨形态形成蛋白-13(bone morphogenetic proteins-13,BMP-13)促骨髓间充质干细胞C3H10T1/2向心肌样细胞分化过程中的作用。方法骨髓间充质干细胞C3H10T1/2经pAdEasy-BMP-13重组腺病毒质粒感染后,利用Western blot以及免疫荧光... 目的研究骨形态形成蛋白-13(bone morphogenetic proteins-13,BMP-13)促骨髓间充质干细胞C3H10T1/2向心肌样细胞分化过程中的作用。方法骨髓间充质干细胞C3H10T1/2经pAdEasy-BMP-13重组腺病毒质粒感染后,利用Western blot以及免疫荧光技术于1、2、3周时分别检测C3H10T1/2干细胞心肌特异性蛋白cTnT、Cx43、α-MHC、α-actin的表达变化;同时以实时荧光定量PCR技术进行心肌分化特异性基因GATA4、MEF2C的检测,4周后应用电子显微镜观察干细胞超微结构变化。结果 C3H10T1/2干细胞经pAdEasy-BMP-13感染诱导后,细胞开始伸展,折光性增强,细胞间连接较紧密且细胞排列趋向一致;pAdEasy-BMP-13和pAdEasy-BMP-2感染后细胞于3周时,Western blot技术检测出心肌特异性肌钙蛋白(cardiac isoform of tropnin T,cTnT)、连接蛋白Cx43(connexin 43,Cx43)(P<0.05),免疫荧光检测有蛋白α-MHC、α-actin表达,而于1周和2周时未检测出。同时pAdEasy-GFP感染后细胞和未感染组细胞1、2周和3周均未发现有心肌特异性蛋白cTnT、Cx43、α-MHC、α-actin的表达。3周对各组均出现心脏早期发育特异性基因GATA4、MEF2C的表达,但pAdEasy-BMP-13和pAdEasy-BMP-2感染后细胞表达量明显高于pAdEasy-GFP感染后细胞和未感染组细胞(P<0.05);pAdEasy-BMP-13感染后细胞于4周时透射电镜下观察出现闰盘及肌丝样细胞超微结构,而pAdEasy-GFP感染后细胞和未感染组细胞没有出现类似结构。结论 pAdEasy-BMP-13可以诱导C3H10T1/2干细胞向心肌样细胞分化。 展开更多
关键词 bmp-13 C3H10T1/2干细胞 心肌细胞
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仙灵骨葆对兔膝骨性关节炎治疗作用的研究 被引量：15
3
作者 程潭 张柳 +4 位作者 李震 李强 穆树林 田发明 刘永强 《中国矫形外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期530-533,共4页
[目的]研究仙灵骨葆(xianlinggubao,XLGB)对兔骨性关节炎关节软骨及软骨下骨的保护作用。[方法]30只3个月龄雄性日本大耳白兔,随机分为对照组(Sham)、盐水组(ACLT+NS)和仙灵骨葆组(ACLT+XLGB),每组各10只。盐水组和仙灵骨葆组行右膝关... [目的]研究仙灵骨葆(xianlinggubao,XLGB)对兔骨性关节炎关节软骨及软骨下骨的保护作用。[方法]30只3个月龄雄性日本大耳白兔,随机分为对照组(Sham)、盐水组(ACLT+NS)和仙灵骨葆组(ACLT+XLGB),每组各10只。盐水组和仙灵骨葆组行右膝关节前交叉韧带切断术(anterior cruciate ligament transaction,ACLT)造成膝骨性关节炎模型。术后仙灵骨葆组125mg/(kg·d)灌胃;盐水组则给予等剂量生理盐水。6周后处死动物,取股骨测量骨密度,之后脱钙制片,行HE染色、Mankin评分及BMP-2、MMP-13免疫组化染色;取右膝胫骨近端包埋,制成硬组织切片,用于骨组织形态计量学测量。[结果](1)Mankin评分:仙灵骨葆组显著低于盐水组。(2)股骨远端骨密度及胫骨近端软骨下骨骨量:仙灵骨葆组均显著高于盐水组。(3)免疫组化:仙灵骨葆组MMP-13的表达显著低于盐水组,BMP-2的表达显著高于盐水组。[结论]仙灵骨葆125mg/(kg·d)灌胃能够部分阻止骨关节炎兔关节软骨的退变,其作用机制可能与下调MMP-13的表达,上调BMP-2的表达,同时增加软骨下骨骨量,改善其微观结构有关。 展开更多
关键词 仙灵骨葆 骨性关节炎 软骨细胞 软骨下骨 bmp-2 MMP-13
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氦氖激光对退变颞下颌关节髁突软骨基质与基质调节因子表达的影响 被引量：1
4
作者 毛凯平 邹璟 +3 位作者 李解 姜梦雅 高桃珍 黄国付 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期21-25,共5页
目的:研究氦氖激光对退变颞下颌关节髁突软骨细胞外基质和基质调节因子表达的影响。方法:将40只健康成年雄性新西兰大白兔随机分为正常组、假模型组、模型组和治疗组(n=10),对治疗组兔采用氦氖激光治疗,组内又分为造模后第1、11天2个取... 目的:研究氦氖激光对退变颞下颌关节髁突软骨细胞外基质和基质调节因子表达的影响。方法:将40只健康成年雄性新西兰大白兔随机分为正常组、假模型组、模型组和治疗组(n=10),对治疗组兔采用氦氖激光治疗,组内又分为造模后第1、11天2个取材时间点(n=5)。于不同时间点取出颞下颌关节组织,HE染色观察组织学形态,Western Blot方法检测细胞外基质Col-2、PRG-4和基质调节因子MMP-13、TIMP-1、BMP-2的表达。结果:经过氦氖激光治疗后的髁突软骨纤维层轻度松解和部分胶原纤维合成增强。造模后第1天模型组与治疗组MMP-13表达均明显升高,Col-2、PRG-4、TIMP-1、BMP-2表达均明显降低(P<0.05);治疗组第11天与第1天比较,MMP-13表达降低(P<0.05),Col-2、PRG-4、TIMP-1、BMP-2表达升高(P<0.05)。结论:氦氖激光治疗可上调退变颞下颌关节软骨细胞外基质Col-2、PRG-4和基质调节因子TIMP-1、BMP-2蛋白表达,下调MMP-13蛋白表达。 展开更多
关键词 氦氖激光 颞下颌关节退变 Col-2 PRG-4 MMP-13 TIMP-1 bmp-2
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骨形成过程中两条重要的信号传导通路 被引量：7
5
作者 明磊国 陈克明 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2011年第3期275-278,共4页
Wnt信号通路与BMP-2信号通路能够促进成骨细胞的分化和成骨细胞分泌的胞外基质的生物矿化,在这一过程中起着极其重要的作用。本文主要综述了,近年来对这两条信号通路研究的最新进展。
关键词 Wnt信号通路 bmp-2信号通路 p-—catenin SMADS RUNX2 Msx2 OSTERIX p38MAPK
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