目的采用微阵列化学发光免疫检测方法建立热带无爪螨过敏原Blo t 5、Blo t 21特异性IgE的检测方法并评估其性能。方法筛选2022年3月-2023年3月海南省妇女儿童医学中心就诊的68例疑似热带无爪螨过敏患者及30名健康体检者,通过优化试剂浓...目的采用微阵列化学发光免疫检测方法建立热带无爪螨过敏原Blo t 5、Blo t 21特异性IgE的检测方法并评估其性能。方法筛选2022年3月-2023年3月海南省妇女儿童医学中心就诊的68例疑似热带无爪螨过敏患者及30名健康体检者,通过优化试剂浓度和反应条件,评估特异性IgE微阵列化学发光免疫检测Blo t 5、Blo t 21sIgE的各项性能指标。检测受试者血清Blo t 5、Blo t 21水平,以德国敏筛检测系统测定结果为对照进行一致性比较。结果抗原最佳浓度为50.0μg/mL。使用2%牛血清白蛋白封闭12 h的信噪比最高。酶标二抗最佳稀释梯度为2.5μg/mL。血清与芯片反应20 min结合酶标二抗反应20 min为最佳反应时间组合。微阵列化学发光免疫检测方法的最低检出限<0.01 IU/mL,线性范围0.20~100.00 IU/mL,批内、批间精密度分别小于8%、10%,Blo t 5和Blo t 21的交叉污染率分别为0.20%和0.31%。与德国敏筛过敏原检测系统测定结果相比,特异性IgE微阵列化学发光免疫检测方法的Blo t 5组分受试者工作特征(ROC)曲线下面积为0.880,灵敏度为76.5%(52/68),特异性为90.0%(27/30);Blo t 21组分ROC曲线下面积为0.797,灵敏度为63.2%(43/68),特异性为90.0%(27/30),一致性均较好(P<0.001)。结论本研究成功建立了热带无爪螨过敏原Blo t 5、Blo t 21特异性IgE微阵列化学发光免疫检测方法,该方法各项性能指标评估良好,与德国敏筛过敏原检测系统有较好的一致性。展开更多
利用DNAStar Protean软件对热带无爪螨主要致敏原Blo t 5的二级结构和表面特性进行分析,如理化性质、亲水性、表面可及性、可塑性等,预测Blo t 5蛋白的B抗原表位和T抗原表位。实验结果表明,Blo t 5蛋白的二级结构以α螺旋为主,存在6个...利用DNAStar Protean软件对热带无爪螨主要致敏原Blo t 5的二级结构和表面特性进行分析,如理化性质、亲水性、表面可及性、可塑性等,预测Blo t 5蛋白的B抗原表位和T抗原表位。实验结果表明,Blo t 5蛋白的二级结构以α螺旋为主,存在6个潜在的B抗原表位位点,可能的B抗原表位区域有:18-31,39-48,56-77,86-101,105-112,117-133氨基酸残基或其附近。含有7个潜在的T细胞抗原表位区域:32-37,40-44,57-65,70-79,86-95,100-104,115-120氨基酸残基或其附近。笔者应用Protean软件预测了热带无爪螨主要致敏原Blo t 5的抗原表位,为进一步研究Blo t 5致敏原的结构与功能,研制针对热带螨的预防性和治疗性疫苗、开发相应的诊断试剂盒奠定了基础。展开更多
为了建立热带螨重组Blo t 5(rBlo t 5)变应原诱导小鼠过敏模型,试验对热带螨Blo t 5基因序列进行优化与全基因合成,构建了原核表达载体PQE80L-Blo t 5,并在大肠杆菌中进行表达。利用镍柱亲和层析法纯化了rBlo t 5蛋白,Western blotting...为了建立热带螨重组Blo t 5(rBlo t 5)变应原诱导小鼠过敏模型,试验对热带螨Blo t 5基因序列进行优化与全基因合成,构建了原核表达载体PQE80L-Blo t 5,并在大肠杆菌中进行表达。利用镍柱亲和层析法纯化了rBlo t 5蛋白,Western blotting结果显示,纯化的rBlo t 5蛋白能与Blo t 5鼠单克隆抗体结合。随后将12只BALB/c小鼠随机均分为对照组(PBS组)与诱导组(rBlo t 5组),通过腹腔注射致敏与气道诱导后,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清总IgE水平;鼠尾静脉注射变应原诱发应激性过敏反应;HE染色观察小鼠肺部炎症严重程度。诱导小鼠过敏后发现,与PBS组相比,rBlo t 5组小鼠血清总IgE水平显著升高(P<0.05),应激性过敏反应引起体温显著下降(P<0.05),肺部组织细胞浸润显著增加(P<0.05)。本研究结果表明,原核表达纯化的rBlo t 5蛋白能够成功建立小鼠过敏模型。展开更多
目的预测热带无爪螨主要变应原Blo t 21的抗原表位。方法利用DNAStar Protean软件分析热带无爪螨主要变应原Blo t 21的二级结构和表面特性,如理化性质、亲水性、表面可及性、柔韧性等,预测Blo t 21蛋白的B抗原表位和T抗原表位,同时利用B...目的预测热带无爪螨主要变应原Blo t 21的抗原表位。方法利用DNAStar Protean软件分析热带无爪螨主要变应原Blo t 21的二级结构和表面特性,如理化性质、亲水性、表面可及性、柔韧性等,预测Blo t 21蛋白的B抗原表位和T抗原表位,同时利用Bepi Pred在线分析预测其可能的B细胞抗原表位。结果 Blo t 21蛋白的二级结构以α螺旋为主,存在7个潜在的B抗原表位位点,可能的B抗原表位区域有:2-11,19-28,35-54,55-70,72-83,96-112,123-129氨基酸残基或其附近。含有8个潜在的T细胞抗原表位区域:13-17,22-31,37-46,51-64,69-75,80-84,95-99,102-105氨基酸残基或其附近。结论应用Protean软件和Bepi Pred在线预测了热带无爪螨主要变应原Blo t 21的抗原表位,为进一步研究Blo t 21变应原的结构与功能,研制针对热带螨的预防性和治疗性疫苗、开发相应的诊断试剂盒奠定了基础。展开更多
为了建立热带螨重组变应原Blo t 21(rBlo t 21)诱导小鼠变态反应气道炎症模型,笔者利用从NCBI Gen Bank库里获得的热带螨Blo t 21基因序列,进行了序列优化与全基因合成,构建了原核表达载体PQE80LrBlo t 21,在大肠杆菌内诱导表达rBlo t ...为了建立热带螨重组变应原Blo t 21(rBlo t 21)诱导小鼠变态反应气道炎症模型,笔者利用从NCBI Gen Bank库里获得的热带螨Blo t 21基因序列,进行了序列优化与全基因合成,构建了原核表达载体PQE80LrBlo t 21,在大肠杆菌内诱导表达rBlo t 21,利用镍柱亲和层析纯化rBlo t 21蛋白。12只BALB/c小鼠随机分为对照组(PBS组)与诱导组(rBlo t 21组),每组6只,通过腹腔注射致敏与气道诱导后,分别通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清总IgE水平;鼠尾静脉注射变应原诱发应激性过敏反应;HE染色观察小鼠肺部炎症严重程度。本试验成功表达与纯化了重组热带螨变应原Blo t 21。利用纯化的rBlo t 21诱导小鼠变态反应气道炎症模型,与PBS组相比,rBlo t 21组的小鼠血清总IgE水平显著升高,肺部组织细胞侵润明显增加(P<0.05)。原核表达纯化的重组Blo t 21变应原能够诱导小鼠产生变态反应气道炎症。展开更多
"Red Plum Blossoms"Chinese Chamber Music Concert is a model programme from the Close Encounters with Chinese Classical Music Series launched by the Headquarters of China Cultural Centers and Tourism Offices(..."Red Plum Blossoms"Chinese Chamber Music Concert is a model programme from the Close Encounters with Chinese Classical Music Series launched by the Headquarters of China Cultural Centers and Tourism Offices(under preparation).展开更多
Cherry Blossoms Blooming In Advance提前盛开的樱花The blooming of cheny blossoms marks the arrival of spring.Down the ages,records of when the trees bloom have been kept by people.The data is so detailed and goes back ...Cherry Blossoms Blooming In Advance提前盛开的樱花The blooming of cheny blossoms marks the arrival of spring.Down the ages,records of when the trees bloom have been kept by people.The data is so detailed and goes back so far,and it,s allowed scientists to speculate(推测)Japan's climate data in centuries past.For the last 200 years,flowerings have generally come earlier and earlier caused,scientists think,by climate change.展开更多
The East Lake Cherry Blossom Garden opened to the public on March 9.With the temperaturerising rapidly,the cherry blossom season is expected to arrive nextweek.The garden has taken on a new look with the total area ha...The East Lake Cherry Blossom Garden opened to the public on March 9.With the temperaturerising rapidly,the cherry blossom season is expected to arrive nextweek.The garden has taken on a new look with the total area having been expanded to nearly 34.57 hectares.展开更多
文摘目的采用微阵列化学发光免疫检测方法建立热带无爪螨过敏原Blo t 5、Blo t 21特异性IgE的检测方法并评估其性能。方法筛选2022年3月-2023年3月海南省妇女儿童医学中心就诊的68例疑似热带无爪螨过敏患者及30名健康体检者,通过优化试剂浓度和反应条件,评估特异性IgE微阵列化学发光免疫检测Blo t 5、Blo t 21sIgE的各项性能指标。检测受试者血清Blo t 5、Blo t 21水平,以德国敏筛检测系统测定结果为对照进行一致性比较。结果抗原最佳浓度为50.0μg/mL。使用2%牛血清白蛋白封闭12 h的信噪比最高。酶标二抗最佳稀释梯度为2.5μg/mL。血清与芯片反应20 min结合酶标二抗反应20 min为最佳反应时间组合。微阵列化学发光免疫检测方法的最低检出限<0.01 IU/mL,线性范围0.20~100.00 IU/mL,批内、批间精密度分别小于8%、10%,Blo t 5和Blo t 21的交叉污染率分别为0.20%和0.31%。与德国敏筛过敏原检测系统测定结果相比,特异性IgE微阵列化学发光免疫检测方法的Blo t 5组分受试者工作特征(ROC)曲线下面积为0.880,灵敏度为76.5%(52/68),特异性为90.0%(27/30);Blo t 21组分ROC曲线下面积为0.797,灵敏度为63.2%(43/68),特异性为90.0%(27/30),一致性均较好(P<0.001)。结论本研究成功建立了热带无爪螨过敏原Blo t 5、Blo t 21特异性IgE微阵列化学发光免疫检测方法,该方法各项性能指标评估良好,与德国敏筛过敏原检测系统有较好的一致性。
文摘利用DNAStar Protean软件对热带无爪螨主要致敏原Blo t 5的二级结构和表面特性进行分析,如理化性质、亲水性、表面可及性、可塑性等,预测Blo t 5蛋白的B抗原表位和T抗原表位。实验结果表明,Blo t 5蛋白的二级结构以α螺旋为主,存在6个潜在的B抗原表位位点,可能的B抗原表位区域有:18-31,39-48,56-77,86-101,105-112,117-133氨基酸残基或其附近。含有7个潜在的T细胞抗原表位区域:32-37,40-44,57-65,70-79,86-95,100-104,115-120氨基酸残基或其附近。笔者应用Protean软件预测了热带无爪螨主要致敏原Blo t 5的抗原表位,为进一步研究Blo t 5致敏原的结构与功能,研制针对热带螨的预防性和治疗性疫苗、开发相应的诊断试剂盒奠定了基础。
文摘为了建立热带螨重组Blo t 5(rBlo t 5)变应原诱导小鼠过敏模型,试验对热带螨Blo t 5基因序列进行优化与全基因合成,构建了原核表达载体PQE80L-Blo t 5,并在大肠杆菌中进行表达。利用镍柱亲和层析法纯化了rBlo t 5蛋白,Western blotting结果显示,纯化的rBlo t 5蛋白能与Blo t 5鼠单克隆抗体结合。随后将12只BALB/c小鼠随机均分为对照组(PBS组)与诱导组(rBlo t 5组),通过腹腔注射致敏与气道诱导后,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清总IgE水平;鼠尾静脉注射变应原诱发应激性过敏反应;HE染色观察小鼠肺部炎症严重程度。诱导小鼠过敏后发现,与PBS组相比,rBlo t 5组小鼠血清总IgE水平显著升高(P<0.05),应激性过敏反应引起体温显著下降(P<0.05),肺部组织细胞浸润显著增加(P<0.05)。本研究结果表明,原核表达纯化的rBlo t 5蛋白能够成功建立小鼠过敏模型。
文摘目的预测热带无爪螨主要变应原Blo t 21的抗原表位。方法利用DNAStar Protean软件分析热带无爪螨主要变应原Blo t 21的二级结构和表面特性,如理化性质、亲水性、表面可及性、柔韧性等,预测Blo t 21蛋白的B抗原表位和T抗原表位,同时利用Bepi Pred在线分析预测其可能的B细胞抗原表位。结果 Blo t 21蛋白的二级结构以α螺旋为主,存在7个潜在的B抗原表位位点,可能的B抗原表位区域有:2-11,19-28,35-54,55-70,72-83,96-112,123-129氨基酸残基或其附近。含有8个潜在的T细胞抗原表位区域:13-17,22-31,37-46,51-64,69-75,80-84,95-99,102-105氨基酸残基或其附近。结论应用Protean软件和Bepi Pred在线预测了热带无爪螨主要变应原Blo t 21的抗原表位,为进一步研究Blo t 21变应原的结构与功能,研制针对热带螨的预防性和治疗性疫苗、开发相应的诊断试剂盒奠定了基础。
基金Project 10671062 is supported by NSF of China,Project 11071065 is supported by NSF of ChinaProject 20094306110004 supported by RFDP of high education of China and Supported by the Program for Science and Technology Research Team in Higher Educational Institutions of Hunan Province
文摘In this paper, we extend Hu and Zhang＇s results in [2] to different case.
文摘为了建立热带螨重组变应原Blo t 21(rBlo t 21)诱导小鼠变态反应气道炎症模型,笔者利用从NCBI Gen Bank库里获得的热带螨Blo t 21基因序列,进行了序列优化与全基因合成,构建了原核表达载体PQE80LrBlo t 21,在大肠杆菌内诱导表达rBlo t 21,利用镍柱亲和层析纯化rBlo t 21蛋白。12只BALB/c小鼠随机分为对照组(PBS组)与诱导组(rBlo t 21组),每组6只,通过腹腔注射致敏与气道诱导后,分别通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清总IgE水平;鼠尾静脉注射变应原诱发应激性过敏反应;HE染色观察小鼠肺部炎症严重程度。本试验成功表达与纯化了重组热带螨变应原Blo t 21。利用纯化的rBlo t 21诱导小鼠变态反应气道炎症模型,与PBS组相比,rBlo t 21组的小鼠血清总IgE水平显著升高,肺部组织细胞侵润明显增加(P<0.05)。原核表达纯化的重组Blo t 21变应原能够诱导小鼠产生变态反应气道炎症。
文摘"Red Plum Blossoms"Chinese Chamber Music Concert is a model programme from the Close Encounters with Chinese Classical Music Series launched by the Headquarters of China Cultural Centers and Tourism Offices(under preparation).
文摘Cherry Blossoms Blooming In Advance提前盛开的樱花The blooming of cheny blossoms marks the arrival of spring.Down the ages,records of when the trees bloom have been kept by people.The data is so detailed and goes back so far,and it,s allowed scientists to speculate(推测)Japan's climate data in centuries past.For the last 200 years,flowerings have generally come earlier and earlier caused,scientists think,by climate change.
文摘The East Lake Cherry Blossom Garden opened to the public on March 9.With the temperaturerising rapidly,the cherry blossom season is expected to arrive nextweek.The garden has taken on a new look with the total area having been expanded to nearly 34.57 hectares.
