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携带p57和BLID基因的重组减毒沙门菌诱导乳腺癌细胞凋亡
1
作者 包利霞 顾天越 +8 位作者 刘青 朱凡杰 王鑫源 朱晓琛 刘婷婷 王晶钰 王雨欣 金天明 张东超 《中国兽医学报》 CSCD 北大核心 2024年第12期2564-2571,共8页
为构建携带p57和BLID基因的重组减毒沙门菌,并评价其对乳腺癌细胞的体外抑制作用及其对乳腺癌细胞凋亡的诱导作用,本研究构建了重组减毒沙门菌LH430/pEGFP-p57-BLID,利用RT-PCR和Western blot检测重组减毒沙门菌在癌细胞中的转录与表达... 为构建携带p57和BLID基因的重组减毒沙门菌,并评价其对乳腺癌细胞的体外抑制作用及其对乳腺癌细胞凋亡的诱导作用,本研究构建了重组减毒沙门菌LH430/pEGFP-p57-BLID,利用RT-PCR和Western blot检测重组减毒沙门菌在癌细胞中的转录与表达情况,CCK-8法评估重组减毒沙门菌安全性及对乳腺癌细胞活性的影响,细胞划痕试验分析重组减毒沙门菌对癌细胞的迁移力影响,流式细胞术和Western blot分析重组减毒沙门菌对MDAMB-231细胞凋亡的作用。结果显示,PCR能扩增出重组减毒沙门菌携带的目的基因条带,且重组减毒沙门菌携带的目的基因可在MDA-MB-231细胞中转录和表达;重组减毒沙门菌的生长特性和遗传稳定性良好。与PBS组相比,重组减毒沙门菌LH430/pEGFP-p57-BLID可极显著减弱(P<0.01)MDA-MB-231细胞的活性,并能极显著抑制(P<0.01)MDA-MB-231细胞的迁移。重组减毒沙门菌LH430/pEGFP-p57-BLID可明显增加MDA-MB-231细胞的凋亡数量,且能够极显著上调(P<0.01)促进凋亡蛋白Bax的表达,极显著下调(P<0.01)抑制凋亡蛋白Bcl-2的表达。结果表明,重组减毒沙门菌对乳腺癌细胞MDA-MB-231有抑制作用并能够诱导其发生凋亡,为后续开展体内抑瘤研究奠定基础。 展开更多
关键词 p57基因 blid基因 减毒沙门菌 乳腺癌 凋亡
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MicroRNA-575靶向抑制BLID促进非小细胞肺癌细胞的增殖和侵袭 被引量：3
2
作者 焉春华 史晓东 +6 位作者 于方飞 王宏伟 张晓飞 刘雅欣 于瑶 杨原荻 邵玉霞 《现代生物医学进展》 CAS 2017年第23期4432-4436,4524,共6页
目的:通过体外实验探讨miR-575对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖与侵袭能力的影响及相关机制。方法:采用实时定量PCR法检测不同非小细胞肺癌细胞系中miR-575、BLID的表达;CCK-8法检测转染miR-575模拟物、抑制因子后不同时间A549细胞增殖... 目的:通过体外实验探讨miR-575对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖与侵袭能力的影响及相关机制。方法:采用实时定量PCR法检测不同非小细胞肺癌细胞系中miR-575、BLID的表达;CCK-8法检测转染miR-575模拟物、抑制因子后不同时间A549细胞增殖情况的变化;Transwell法检测A549细胞的侵袭情况;Targetcan法及双荧光素酶检测miR-575对BLID 3'UTR端的靶向作用;Western blot法检测BLID蛋白的表达。结果:A549、SPC-A1、H1299、H1650等人非小细胞肺癌细胞系中miR-575的表达均显著高于永生化的人支气管上皮细胞系16HBE(P<0.001)。MiR-575模拟物转染的A549细胞miR-575的表达明显高于对照组(P<0.001),同时细胞的增殖和侵袭力增强(P<0.05);反之,miR-575抑制因子转染的A549细胞miR-575的表达显著降低,且细胞的增殖和侵袭力明显降低(P<0.01)。Targetscan法预测BLID可能是miR-575的下游靶基因,荧光素酶结果显示miR-575不仅能够有效抑制野生型BLID 3'UTR端的荧光素酶反应(P<0.01),而且能够降低BLID的蛋白表达量(P<0.01)。实时定量PCR结果显示BLID在NSCLC细胞系中均呈现显著的低表达(P<0.001),且转染BLID后,NSCLC细胞的增殖和细胞侵袭被明显抑制(P<0.05),而当miR-575与BLID共转染时,miR-575能够逆转BLID所抑制的细胞增殖和侵袭(P<0.01)。结论:在NSCLC细胞系中,miR-575的表达上调,且能够通过直接作用于下游靶点抑癌基因BLID从而促非小细胞肺癌细胞增殖及侵袭。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 microRNA-575 blid
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miR-501靶向BLID介导吉非替尼耐药性非小细胞肺癌的恶性表型 被引量：5
3
作者 葛凌 陈何健 徐航娣 《中国医药导报》 CAS 2020年第12期18-22,27,共6页
目的探究miR-501在吉非替尼耐药非小细胞肺癌(NSCLC)中的作用和机制。方法采用实时定量聚合酶链式反应(q RT-PCR)检测吉非替尼耐药性NSCLC血清和细胞系PC9/GR中miR-501的表达水平,通过CCK-8、划痕实验和Transwell实验检测miR-501对PC9/G... 目的探究miR-501在吉非替尼耐药非小细胞肺癌(NSCLC)中的作用和机制。方法采用实时定量聚合酶链式反应(q RT-PCR)检测吉非替尼耐药性NSCLC血清和细胞系PC9/GR中miR-501的表达水平,通过CCK-8、划痕实验和Transwell实验检测miR-501对PC9/GR的恶性表型的影响;利用在线数据库预测miR-501的潜在靶点,并验证其在PC9/GR的具体作用。结果与健康对照人群和正常人肺上皮细胞系比较,miR-501在吉非替尼耐药性NSCLC患者血清和PC9/GR中表达水平升高,差异有高度统计学意义(P <0.01);与mimics NC比较,miR-501 mimics PC9/GR的增殖、迁移和侵袭能力增加,差异有高度统计学意义(P <0.01);荧光素酶报告基因实验证实BLID是miR-501的直接靶点;与miR-501 mimics+pcDNA3.1比较,miR-501 mimics+pcDNA3.1-BLID PC9/GR的增殖、迁移和侵袭能力下降,差异有高度统计学意义(P <0.01)。结论上调表达的miR-501通过抑制BLID进而促进吉非替尼耐药性NSCLC的增殖、迁移和侵袭能力。因此,miR-501是吉非替尼耐药性NSCLC的潜在靶点。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 miR-501 吉非替尼耐药 blid
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视网膜色素变性和先天性静止性夜盲的mERG检查 被引量：2
4
作者 赵朝霞 董应丽 +2 位作者 李蕴随 尹卫靖 郭希让 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2003年第3期282-285,共4页
目的　比较视网膜色素变性 (RP)和先天性静止性夜盲 (CSNB)的多焦视网膜电图 (mERG)特征。方法　对 8例RP患者 14眼和CSNB患者 14眼进行mERG、传统ERG和视野检查。检测分别采用德国罗兰公司的RETI Scangamma型视觉电生理测试系统、日本... 目的　比较视网膜色素变性 (RP)和先天性静止性夜盲 (CSNB)的多焦视网膜电图 (mERG)特征。方法　对 8例RP患者 14眼和CSNB患者 14眼进行mERG、传统ERG和视野检查。检测分别采用德国罗兰公司的RETI Scangamma型视觉电生理测试系统、日本光电株式会社的Neuropack Ⅱ视电生理仪和Topcon公司的SBP 2 0 2 0型全自动视野计进行。检查结果与 14只正常眼进行比较。MERG选择一级反应 ,分析 6个环的平均b波振幅 (平均反应密度 )和a、b波平均潜伏值一级视网膜后极部 3 0°范围的振幅和及潜伏值和。结果　RP组 1～ 6环各环的平均振幅与正常组比较明显下降 (P=0 0 0 11～ 0 0 0 0 1) ,而在CSNB组可见 1～ 2环b波振幅的轻度下降 ,但无统计学差异 (P =0 12 89,0 0 5 43 ) ,3～ 6环各环的b波振幅明显下降 (P =0 0 0 61,0 0 0 0 2 ,0 0 0 3 6)。两个患病组的各环a、b波平均潜伏值明显延长 (P =0 0 0 2 7～0 0 0 0 1) ,但较CSNB组的振幅反应异常程度严重 ,后极部 3 0°范围b波潜伏值和及各环a、b波潜伏值的延长在RP和CSNB组均明显延长。结论　MERG在RP和CSNB的诊断中具有不同的意义。RP的mERG特征主要以振幅介导的参数异常为主 。 展开更多
关键词 诊断 多焦观网膜电图 观网膜色素变性 先天性静止性夜盲
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垂体腺瘤患者视野缺损一例解剖学病因分析
5
作者 车鹏 赵悦 《中华解剖与临床杂志》 2018年第3期266-267,共2页
患者女，42岁，主诉“双眼视物模糊半年，进行性加重1个月”，于2017年4月6日至咸阳市第一人民医院就诊。眼科检查：左眼裸眼视力3．0、右眼2．0；光学相干断层成像检查示左眼生理性盲点扩大（图1A），右眼鼻下视野缺损（图1B）。头颅MR... 患者女，42岁，主诉“双眼视物模糊半年，进行性加重1个月”，于2017年4月6日至咸阳市第一人民医院就诊。眼科检查：左眼裸眼视力3．0、右眼2．0；光学相干断层成像检查示左眼生理性盲点扩大（图1A），右眼鼻下视野缺损（图1B）。头颅MRI示鞍区占位，大小约1．4cm×0．9cm×2．0cm，考虑垂体瘤（见图2）。 展开更多
关键词 暗点 垂体肿瘤 视觉障碍 盲点
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