青藤碱调控LncRNA BLACAT1对骨关节炎软骨细胞增殖、凋亡的影响 被引量：12

1

作者 陈晨 郑润泉 李宗玉 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第17期2069-2073,共5页

目的:探讨青藤碱对骨关节炎软骨细胞增殖、凋亡、炎症的影响及其对LncRNA BLACAT1的调控作用。方法:采用脂多糖(LPS)诱导软骨细胞建立骨关节炎软骨细胞损伤模型,加入不同浓度的青藤碱处理细胞,si-NC、si-BLACAT1分别转染软骨细胞后加入... 目的:探讨青藤碱对骨关节炎软骨细胞增殖、凋亡、炎症的影响及其对LncRNA BLACAT1的调控作用。方法:采用脂多糖(LPS)诱导软骨细胞建立骨关节炎软骨细胞损伤模型,加入不同浓度的青藤碱处理细胞,si-NC、si-BLACAT1分别转染软骨细胞后加入LPS处理细胞,pcDNA、pcDNA-BLACAT1分别转染入软骨细胞后加入青藤碱与LPS处理细胞;采用qRT-PCR法检测BLACAT1的表达量;采用CCK-8实验检测细胞增殖能力;采用平板克隆形成实验检测细胞克隆形成能力;采用流式细胞术检测细胞凋亡率;采用ELISA法检测IFN-γ、TNF-α的水平;采用Western blot法检测Bax、Bcl-2蛋白表达量。结果:青藤碱可降低LPS诱导的软骨细胞中BLACAT1的表达水平、凋亡率、Bax蛋白水平和IFN-γ、TNF-α的水平,并可增加细胞活力及克隆形成数,还可提高Bcl-2蛋白水平,差异均有统计学意义(P<0.05);转染si-BLACAT1能够增强LPS诱导的软骨细胞活力及克隆形成数,降低凋亡率、Bax蛋白水平及IFN-γ、TNF-α的水平,提高Bcl-2蛋白水平,差异均有统计学意义(P<0.05);BLACAT1过表达可明显逆转青藤碱对LPS诱导的软骨细胞增殖、克隆形成、凋亡及炎症的作用。结论:青藤碱可通过下调BLACAT1的表达而增强LPS诱导的软骨细胞增殖及克隆形成能力,并可抑制细胞凋亡、炎症反应从而减轻骨关节炎软骨细胞损伤。 展开更多

关键词 青藤碱 LncRNA blacat1 骨关节炎 软骨细胞 增殖 凋亡

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lncRNA BLACAT1靶向结合miR-29a-3p调控甲状腺癌细胞TPC-1的生物学行为 被引量：3

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作者 熊玉圆 王玲 +2 位作者 向高进 孟琳 王宏博 《现代肿瘤医学》 CAS 北大核心 2021年第19期3355-3362,共8页

目的:探讨长链非编码RNA BLACAT1(lncRNA BLACAT1)调控microRNA-29a-3p(miR-29a-3p)对甲状腺癌细胞恶性生物学行为的作用及其可能机制。方法:收集2018年06月至2019年03月在我院行甲状腺癌切除术的31例患者的肿瘤组织和相应的癌旁组织。... 目的:探讨长链非编码RNA BLACAT1(lncRNA BLACAT1)调控microRNA-29a-3p(miR-29a-3p)对甲状腺癌细胞恶性生物学行为的作用及其可能机制。方法:收集2018年06月至2019年03月在我院行甲状腺癌切除术的31例患者的肿瘤组织和相应的癌旁组织。采用qRT-PCR检测lncRNA BLACAT1、miR-29a-3p在甲状腺癌组织、癌旁组织、5种甲状腺癌细胞系(SW579、PDTC-1、HMGA1、TPC-1、KAT-5)及正常甲状腺细胞Nthy-ori 3-1中的表达水平;调控TPC-1甲状腺癌细胞系中lncRNA BLACAT1、miR-29a-3p的表达,采用CCK-8法检测细胞增殖情况,Transwell法检测细胞的迁移和侵袭能力。用生物信息分析和双荧光素酶报告基因法预测和验证lncRNA BLACAT1与miR-29a-3p的靶向关系。结果:与癌旁组织和正常甲状腺细胞相比,甲状腺癌组织和细胞系中lncRNA BLACAT1的表达水平显著上调,miR-29a-3p的表达水平显著下调(P<0.05);过表达lncRNA BLACAT1促进TPC-1细胞的增殖、迁移和侵袭;在甲状腺癌组织中lncRNA BLACAT1的表达水平与miR-29a-3p的表达水平呈负相关(r2=0.492,P<0.001);双荧光素酶分析证实lncRNA BLACAT1能特异性结合miR-29a-3p,并能降低其表达;过表达miR-29a-3p抑制TPC-1细胞的增殖、迁移和侵袭,且miR-29a-3p可以抑制由lncRNA BLACAT1过表达引起的TPC-1细胞增殖、迁移和侵袭能力的增强。结论:lncRNA BLACAT1通过靶向调控miR-29a-3p表达影响甲状腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭,从而促进甲状腺癌的发展。 展开更多

关键词 lncRNA blacat1 miR-29a-3p 甲状腺癌 TPC-1

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lncRNA BLACAT1在膀胱癌中的表达及意义 被引量：2

3

作者 杨晓峰 王倩倩 《实用肿瘤杂志》 CAS 2022年第6期501-507,共7页

目的研究长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)bladder cancer-associated transcript 1(BLACAT1)对膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响,分析其表达与膀胱癌临床特征的关系。方法选取2018年1月至2020年6月济宁医学院附属枣庄市立... 目的研究长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)bladder cancer-associated transcript 1(BLACAT1)对膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响,分析其表达与膀胱癌临床特征的关系。方法选取2018年1月至2020年6月济宁医学院附属枣庄市立医院确诊的98例膀胱癌患者的组织样本。采用实时定量聚合酶链式反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测BLACAT1在人膀胱癌细胞株[UM-UC-3、HTB1(J82)、HTB4(T24)和HTB-9(5637)]、人正常膀胱上皮细胞SV-HUC-1以及膀胱癌组织中BLACAT1的表达。分析98例患者BLACAT1表达与临床特征的关系。在人膀胱癌细胞UM-UC-3和HTB1(J82)中转染沉默BLACAT1的腺病毒过表达载体(设置两组平行试验组:sh-BLACAT1#1组和sh-BLACAT1#2组)和腺病毒空载体(sh-NC组)。采用5-乙炔基-2'-脱氧尿苷(5-ethynyl-2'-deoxyuridine,EdU)增殖检测实验和集落形成实验检测细胞增殖情况,TUNEL检测细胞凋亡,transwell检测细胞迁移和侵袭能力。分别在裸鼠皮下和尾静脉注射转染sh-NC和sh-BLACAT1#1的HTB1(J82)细胞,建立裸鼠移植瘤模型和转移瘤模型,测定移植瘤的体积及重量,对比转移灶。结果膀胱癌细胞株[UM-UC-3、HTB1(J82)、HTB4(T24)和HTB-9(5637)]较SV-HUC-1细胞BLACAT1高表达(均P<0.01)。UM-UC-3和HTB1(J82)细胞sh-BLACAT1#1组和sh-BLACAT1#2组较sh-NC组细胞增殖均下降(均P<0.01),细胞凋亡均增加(均P<0.01),UM-UC-3细胞sh-BLACAT1#1组和sh-BLACAT1#2组较sh-NC组细胞迁移和侵袭能力均降低(均P<0.01)。在裸鼠移植瘤和转移瘤模型中,sh-BLACAT1#1组较sh-NC组肿瘤生长和转移均被抑制(均P<0.05)。膀胱癌组织中BLACAT1表达水平在病理分级和淋巴结转移方面比较,差异均具有统计学意义(均P<0.01)。结论BLACAT1参与膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭,对预后评判有意义。 展开更多

关键词 膀胱癌 长链非编码RNA blacat1 细胞增殖 细胞凋亡 迁移 侵袭

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LncRNA BLACAT1通过抑制miR-519d促进宫颈癌细胞的增殖、迁移与侵袭 被引量：3

4

作者 郭改艳 舒丽莎 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2021年第21期4784-4788,共5页

目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)BLACAT1通过调控miR-519d对宫颈癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响。方法收集宫颈癌组织及癌旁组织样本和宫颈癌细胞系,采用RT-PCR检测宫颈癌组织和细胞中LncRNA BLACAT1的表达水平。在HeLa细胞中转染NC shRNA... 目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)BLACAT1通过调控miR-519d对宫颈癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响。方法收集宫颈癌组织及癌旁组织样本和宫颈癌细胞系,采用RT-PCR检测宫颈癌组织和细胞中LncRNA BLACAT1的表达水平。在HeLa细胞中转染NC shRNA、BLACAT1 shRNA敲降其表达,RT-PCR检测转染效率及miR-519d表达,CCK-8检测转染24、48、72 h的细胞活力变化。Transwell检测细胞迁移与侵袭能力。Western印迹检测E-钙黏蛋白(cadherin)、N-cadherin和波形蛋白(Vimentin)蛋白水平。采用双荧光素酶报告基因检测LncRNA BLACAT1与miR-519d靶向调控关系。结果LncRNA BLACAT1在宫颈癌组织及细胞中显著高表达(P<0.05)。敲降LncRNA BLACAT1显著抑制宫颈癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力(P<0.05)。敲降LncRNA BLACAT1显著抑制增加E-cadherin蛋白表达,显著降低N-cadherin和vimentin蛋白表达(P<0.05)。RT-PCR和双荧光素酶报告基因证实LncRNA BLACAT1与miR-519d之间靶向负调控关系。结论LncRNA BLACAT1通过抑制miR-519d促进宫颈癌细胞的增殖、迁移与侵袭和上皮间质转化,为临床宫颈癌早期诊断和治疗提供潜在的分子靶点。 展开更多

关键词 宫颈癌 LncRNA blacat1 增殖 迁移 侵袭 miR-519d

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LncRNA BLACAT1促进星形细胞瘤的增殖、侵袭和迁移 被引量：2

5

作者 周黄贵 张德龙 +2 位作者 刘俊 刘杰 毛捷 《右江民族医学院学报》 2018年第6期515-519,共5页

目的探讨lncRNA BLACAT1在不同WHO分级的星形细胞瘤样本的表达差异,以及BLACAT1对星形细胞瘤的生物学功能的影响。方法运用qRT-PCR技术检测本院星形细胞瘤样本的lncRNA BLACAT1表达量,分析lncRNA BLACAT1的表达量与WHO分级是否相关。运... 目的探讨lncRNA BLACAT1在不同WHO分级的星形细胞瘤样本的表达差异,以及BLACAT1对星形细胞瘤的生物学功能的影响。方法运用qRT-PCR技术检测本院星形细胞瘤样本的lncRNA BLACAT1表达量,分析lncRNA BLACAT1的表达量与WHO分级是否相关。运用RTCA增殖实验、划痕实验、Traswell侵袭/迁移实验检测NC组(阴性对照)和silence组(敲减BLACAT1)在细胞增殖、侵袭、迁移功能上的变化。结果星形细胞瘤WHO分级越高,lncRNA BLACAT1的表达量越高(P <0.001)。在RTCA增殖实验中,silence组增殖速率120h后明显慢于NC组(P <0.01),在划痕实验中,在12h、24h两个时间点测得silence组的划痕愈合速度慢于NC组(P <0.01)。Transwell侵袭、迁移实验中silence组24h后穿透到底面的细胞数量显著少于NC组(P <0.01)。结论星形细胞瘤分期分级越高,lncRNA BLACAT1的表达量越高。lncRNA BLACAT1对星形细胞瘤的增殖、侵袭、迁移能力有促进作用。 展开更多

关键词 lncRNA blacat1 星形细胞瘤 增殖 侵袭 迁移

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LncRNA BLACAT1调节miR-324-5p/MAP4K3轴对肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响 被引量：5

6

作者 廖运国 唐梓瑜 +3 位作者 李超 蒲嘉骐 邱世香 杨甜 《医学分子生物学杂志》 CAS 2023年第4期324-331,共8页

目的探讨长链非编码RNA膀胱癌相关转录本1(LncRNA BLACAT1)调节miR-324-5p/丝裂原活化蛋白激酶激酶激酶激酶3(MAP4K3)轴对人肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测肝癌组织、癌旁组织以及人正常肝细胞、人... 目的探讨长链非编码RNA膀胱癌相关转录本1(LncRNA BLACAT1)调节miR-324-5p/丝裂原活化蛋白激酶激酶激酶激酶3(MAP4K3)轴对人肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测肝癌组织、癌旁组织以及人正常肝细胞、人肝癌细胞(Huh-7、SMMC-7721、MHCC97 L)中BLACAT1、miR-324-5p、MAP4K3 mRNA的表达水平;将肝癌细胞系Huh-7细胞分为:ctrl组、si-NC组、si-BLACAT1组、si-BLACAT1+miR-NC组、si-BLACAT1+miR-324-5p inhibitor组;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测各组细胞中BLACAT1、miR-324-5p、MAP4K3 mRNA的表达;CCK-8法检测细胞增殖;划痕实验检测细胞迁移;Transwell小室检测细胞侵袭;蛋白免疫印迹检测细胞中MAP4K3、PCNA、MMP2、MMP9、c-Myc、Cyclin D1的表达;双荧光素酶报告基因实验分别验证BLACAT1和miR-324-5p、miR-324-5p和MAP4K3的关系。结果肝癌组织和人肝癌细胞系中BLACAT1、MAP4K3 mRNA表达水平显著增加,miR-324-5p表达显著降低(P<0.05);与ctrl组、si-NC组比较,si-BLACAT1组Huh-7细胞的BLACAT1、MAP4K3 mRNA表达、A450值、迁移率、侵袭率、PCNA、MMP2、MMP9、MAP4K3、c-Myc、Cyclin D1表达明显降低(P<0.05),miR-324-5p表达显著增加(P<0.05);抑制miR-324-5p表达减弱了敲低BASCAT1对Huh-7细胞的增殖、迁移和侵袭能力的抑制作用;BASCAT1靶向负调控miR-324-5p表达,miR-324-5p靶向调控MAP4K3表达。结论敲低BLACAT1可能通过靶向miR-324-5p来下调MAP4K3表达,进而抑制肝癌细胞增殖、迁移和侵袭。 展开更多

关键词 LncRNA blacat1 miR-324-5p MAP4K3 肝癌 增殖 迁移 侵袭

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lncRNA BLACAT1在下咽鳞状细胞癌中介导自噬调控肿瘤细胞的化疗敏感性

7

作者 迪丽努尔·尼加提 杨娜 古丽娜尔·吐尔地 《局解手术学杂志》 2022年第5期384-390,共7页

目的探究长链非编码RNA(lncRNA)膀胱癌相关转录因子1(BLACAT1)对下咽鳞状细胞癌(HSCC)细胞株顺铂(DDP)敏感性的影响及其作用机制。方法采用qRT-PCR检测40例HSCC患者的癌组织、癌旁组织、HSCC细胞株FaDu及DDP耐药细胞株FaDu/DDP中lncRNA ... 目的探究长链非编码RNA(lncRNA)膀胱癌相关转录因子1(BLACAT1)对下咽鳞状细胞癌(HSCC)细胞株顺铂(DDP)敏感性的影响及其作用机制。方法采用qRT-PCR检测40例HSCC患者的癌组织、癌旁组织、HSCC细胞株FaDu及DDP耐药细胞株FaDu/DDP中lncRNA BLACAT1的表达水平,CCK-8检测经不同浓度DDP处理后FaDu细胞和FaDu/DDP细胞的存活率。分别转染siRNA-BLACAT1序列和siRNA阴性对照至FaDu/DDP细胞中,记为si-BLACAT1组和si-NC组,以未转染的FaDu/DDP细胞作为对照组,qRT-PCR验证转染效果,CCK-8检测转染后经不同浓度DDP处理的FaDu/DDP细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡率,透射电子显微镜观察细胞自噬情况,免疫荧光染色测定LC3B荧光斑点的形成情况,Western blot检测细胞自噬相关蛋白的表达。结果HSCC组织中lncRNA BLACAT1 mRNA相对表达量显著高于癌旁组织(P<0.01);FaDu/DDP细胞中lncRNA BLACAT1 mRNA相对表达量高于FaDu细胞(P<0.05)。si-BLACAT1组细胞lncRNA BLACAT1 mRNA相对表达量低于对照组和si-NC组(P<0.05);当DDP作用浓度在6.25μmol/L及以上时,FaDu/DDP细胞存活率高于FaDu细胞(P<0.05),si-BLACAT1+DDP组细胞存活率低于DDP组和si-NC+DDP组(P<0.05)。与对照组比较,DDP组和si-NC+DDP组FaDu/DDP细胞凋亡率升高(P<0.05);与DDP组和si-NC+DDP组比较,si-BLACAT1+DDP组细胞凋亡率也升高(P<0.05)。对照组有一些自噬体和自噬溶酶体形成,DDP组和si-NC+DDP组自噬溶酶体形成较多,而si-BLACAT1+DDP组细胞中未观察到自噬体及自噬溶酶体。DDP组和si-NC+DDP组细胞内LC3B荧光斑点数较对照组增加(P<0.05);si-BLACAT1+DDP组细胞内LC3B荧光斑点数较DDP组和si-NC+DDP组均减少(P<0.05)。与对照组比较,DDP组和si-NC+DDP组FaDu/DDP细胞中LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ水平上调,Beclin-1蛋白表达量上升,p62蛋白表达量下降(P<0.05);与DDP组和si-NC+DDP组比较,si-BLACAT1+DDP组细胞中LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ水平下调,Beclin-1蛋白表达量下降,p62蛋白表达量上升(P<0.05)。结论lncRNA BLACAT1在HSCC组织及DDP耐药细胞株FaDu/DDP中高表达,下调lncRNA BLACAT1能够提高HSCC细胞对DDP的敏感性,其作用机制可能通过抑制自噬水平实现。 展开更多

关键词 下咽鳞状细胞癌 lncRNA blacat1 自噬 化疗敏感性 头颈癌

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lncRNA BLACAT1靶向LEMD1促进结直肠癌细胞的增殖和转移 被引量：2

8

作者 董满库 姜福全 +4 位作者 林海冠 孙晓敏 刘景欣 胡刚 杨建武 《实用肿瘤学杂志》 CAS 2020年第5期418-424,共7页

目的研究长链非编码RNA(lncRNA)BLACAT1在结直肠癌细胞发生发展过程的作用机制。方法starBase分析TCGA数据库中lncRNA BLACAT1分别在结直肠癌组织和癌旁组织中的表达水平,采用qPCR分别检测10例结直肠癌患者癌组织和癌旁组织中lncRNA BLA... 目的研究长链非编码RNA(lncRNA)BLACAT1在结直肠癌细胞发生发展过程的作用机制。方法starBase分析TCGA数据库中lncRNA BLACAT1分别在结直肠癌组织和癌旁组织中的表达水平,采用qPCR分别检测10例结直肠癌患者癌组织和癌旁组织中lncRNA BLACAT1的表达水平;检测结直肠癌细胞系SW620、SW480、HT-29、LoVo、HCT116和正常结直肠上皮细胞FHC中lncRNA BLACAT1的mRNA表达水平,筛选lncRNA BLACAT1高表达细胞系;敲低lncRNA BLACAT1验证对高表达细胞系增殖、迁移和侵袭的影响;starBase在线预测与lncRNA BLACAT1靶向作用的基因,qPCR和Western blot实验验证结果;starBase分析lncRNA BLACAT1与作用基因相关性,双荧光素酶报告基因实验验证lncRNA BLACAT1的靶基因;检测lncRNA BLACAT1作用靶基因对结直肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭的影响。结果TCGA数据库分析和结直肠癌患者检测结果均表明癌组织中lncRNA BLACAT1表达明显高于癌旁组织(P<0.001);结直肠癌细胞系SW620中lncRNA BLACAT1的mRNA表达水平最高(P<0.001);敲低lncRNA BLACAT1能够抑制SW620细胞的增殖(P<0.001)、迁移(P<0.001)和侵袭能力(P<0.001);qPCR和Western blot实验及数据库分析结果表明lncRNA BLACAT1与LEMD1的表达存在正相关关系(r=0.778,P<0.001),双荧光素酶报告基因实验证明LEMD1是lncRNA BLACAT1的靶基因;lncRNA BLACAT1上调LEMD1的表达,促进SW620细胞的增殖(P<0.001)、迁移(P<0.001)和侵袭(P<0.001)。结论lncRNA BLACAT1靶向LEMD1促进结直肠癌细胞SW620的增殖和转移。 展开更多

关键词 结直肠癌 lncRNA blacat1 LEMD1 增殖 转移

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lncRNA BLACAT1通过抑制miR-374b-5p促进非小细胞肺癌细胞增殖和转移 被引量：2

9

作者 李明如 林贵湖 +1 位作者 聂振凯 张凯华 《生物技术通讯》 CAS 2020年第3期262-268,共7页

目的:研究长链非编码RNA BLACAT1在非小细胞肺癌发生和转移过程中的作用机制。方法:starBase软件分析TCGA数据库中肺腺癌及肺鳞癌与癌旁组织之间BLACAT1表达差异;qRT-PCR检测人非小细胞肺癌细胞A549、HCC827、NCI-H1299、NCI-H23和正常... 目的:研究长链非编码RNA BLACAT1在非小细胞肺癌发生和转移过程中的作用机制。方法:starBase软件分析TCGA数据库中肺腺癌及肺鳞癌与癌旁组织之间BLACAT1表达差异;qRT-PCR检测人非小细胞肺癌细胞A549、HCC827、NCI-H1299、NCI-H23和正常肺上皮细胞BEAS-2B中BLACAT1的转录水平差异,筛选BLACAT1高表达非小细胞肺癌细胞系;CCK-8检测BLACAT1对非小细胞肺癌细胞增殖能力的影响;Transwell检测BLACAT1对非小细胞肺癌细胞迁移和侵袭能力的影响;starBase软件预测BLACAT1作用的miRNA,采用qRT-PCR验证敲低BLACAT1对预测miRNA表达的影响,筛选与BLACAT1相互作用的miRNA,双萤光素酶报告基因实验验证结果;CCK-8检测BLACAT1/miR-374b-5p对非小细胞肺癌细胞增殖能力的影响;Transwell检测BLACAT1/miR-374b-5p对非小细胞肺癌细胞迁移和侵袭能力的影响;Western印迹检测非小细胞肺癌细胞转移相关基因的蛋白表达水平。结果:肺腺癌及肺鳞癌组织中BLACAT1表达量显著高于癌旁组织;非小细胞肺癌细胞A549的BLACAT1表达量最高;敲低BLACAT1降低A549细胞活力、迁移和侵袭能力;BLACAT1作为海绵吸附miR-374b-5p;敲低BLACAT1增加miR-374b-5p的表达,抑制非小细胞肺癌细胞增殖、迁移和侵袭。结论:BLACAT1通过抑制miR-374b-5p促进非小细胞肺癌细胞增殖和转移。 展开更多

关键词 非小细胞肺癌 blacat1 miR-374b-5p 增殖 转移

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lncRNA BLACAT1通过调控细胞自噬途径增强下咽鳞状细胞癌放疗抵抗性

10

作者 迪丽努尔·尼加提 王珍 +1 位作者 刘浩 古丽娜尔·吐尔地 《西部医学》 2025年第12期1751-1757,共7页

目的 探究lncRNA BLACAT1表达对下咽鳞状细胞癌放疗抵抗性的影响。方法 将FaDu/RR细胞分为对照组、si-NC组、si-BLACAT1组。CCK8法检测0、4、8、12 Gy照射下细胞活力,流式细胞术检测4 Gy放射剂量下细胞凋亡水平,实时荧光定量PCR(qPCR)... 目的 探究lncRNA BLACAT1表达对下咽鳞状细胞癌放疗抵抗性的影响。方法 将FaDu/RR细胞分为对照组、si-NC组、si-BLACAT1组。CCK8法检测0、4、8、12 Gy照射下细胞活力,流式细胞术检测4 Gy放射剂量下细胞凋亡水平,实时荧光定量PCR(qPCR)检测人微管相关蛋白轻链3I(LC3I)、LC3II、p62、Beclin1基因表达水平,免疫荧光法及蛋白质免疫印记法检测LC3I、LC3II、p62、Beclin1蛋白水平。用FaDu/RR细胞构建人下咽鳞状癌细胞移植瘤裸鼠模型,分为si-NC组,si-BLACAT1组,测定肿瘤体积和质量,免疫组织化学法检测Ki67、VEGF-C、VEGFR-3蛋白水平,蛋白质免疫印记法检测自噬相关蛋白ATG5、ATG7、ATG12水平。结果 CCK8实验结果显示,相较于si-NC组,si-BLACAT1组FaDu/RR细胞活力在4、8、12 Gy照射下显著降低(P<0.05);细胞凋亡结果显示,FaDu/RR细胞经4 Gy放射剂量照射处理后,相较于si-NC组,si-BLACAT1组细胞凋亡水平显著升高(P<0.000 1);qPCR实验结果显示,si-NC组中LC3I基因表达水平高于si-BLACAT1组,si-BLACACT1组LC3II、p62、Beclin1基因表达水平高于si-NC组;蛋白质免疫印记及免疫荧光实验结果显示,si-BLACAT1组细胞内LC3II、p62、Beclin1蛋白水平高于si-NC组,而LC3I蛋白水平低于si-NC组。人下咽鳞状癌细胞移植瘤裸鼠模型结果显示,si-BLACAT1组中肿瘤重量及体积均显著性低于si-NC组(均P<0.000 1);此外,si-BLACAT1组肿瘤组织中Ki67、VEGF-C、VEGFR-3表达低于si-NC组,si-BLACAT1组肿瘤组织中自噬相关蛋白ATG5、ATG7、ATG12水平均高于si-NC组。结论 lncRNA BLACAT1通过调控FaDu/RR细胞中自噬途径增强下咽鳞状细胞癌放疗抵抗性。 展开更多

关键词 下咽鳞状细胞癌 lncRNA blacat1 自噬 放疗

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lncRNA BLACAT1通过靶基因调控膀胱癌细胞发生发展的机制研究

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作者 魏卓 刘小兵 +2 位作者 许艳东 马春清 祝存海 《国际泌尿系统杂志》 2023年第1期52-57,共6页

目的探讨长链非编码RNA膀胱癌相关转录本1(lncRNA BLACAT1)通过靶基因调控膀胱癌细胞发生发展的机制。方法采用qRT-PCR法检测正常膀胱细胞SV-HUC-1及膀胱癌细胞SW780中BLACAT1的表达水平;转染siRNA-NC、siRNA-BLACAT1至SW780细胞,设为si... 目的探讨长链非编码RNA膀胱癌相关转录本1(lncRNA BLACAT1)通过靶基因调控膀胱癌细胞发生发展的机制。方法采用qRT-PCR法检测正常膀胱细胞SV-HUC-1及膀胱癌细胞SW780中BLACAT1的表达水平;转染siRNA-NC、siRNA-BLACAT1至SW780细胞,设为siRNA-NC、siRNA-BLACAT1组,保留细胞不转染任何质粒设为空白对照组(NC组)。采用CCK-8法检测SW780细胞的增殖情况,采用流式细胞术检测SW780细胞的凋亡情况,采用双荧光素酶报告基因和qRT-PCR验证lncRNA BLACAT1的靶向基因,采用免疫印迹法检测BAMBI蛋白的表达量。结果LncRNA BLACAT1在膀胱癌细胞SW780中的表达水平显著高于正常膀胱上皮细胞SV-HUC-1,差异有统计学意义(P<0.05);siRNA-BLACAT1组中lncRNA BLACAT1 mRNA水平均低于siRNA-NC组、NC组(均P<0.05),而siRNA-NC组中lncRNA BLACAT1 mRNA水平低于NC组(P<0.05);三组SW780细胞的24 h的吸光度(OD)值比较,差异均无统计学意义(均P>0.05),而三组SW780细胞在48、72 h的OD值比较,差异均有统计学意义(均P<0.05),且siRNA-BLACAT1组在48、72 h时的OD值均低于siRNA-NC组、NC组(均P<0.05),而siRNA-NC组在48、72 h时的OD值均低于NC组(均P<0.05);siRNA-BLACAT1组中的细胞凋亡率均高于siRNA-NC组、NC组(均P<0.05);siRNA-NC组的细胞凋亡率高于NC组(P<0.05);lncRNA BLACAT1与BAMBI存在靶向结合位点,双荧光素酶报告基因实验结果显示,与BLACAT1+NC组相比,BLACAT1+BAMBI组的荧光活性明显增加(P<0.05),siRNA-BLACAT1组的BAMBI蛋白水平、BAMBI mRNA的相对表达量低于siRNA-NC组、NC组(均P<0.05),而siRNA-NC组的BAMBI蛋白水平、BAMBI mRNA的相对表达量低于NC组(P<0.05)。结论lncRNA BLACAT1可调控膀胱癌细胞增殖及促进细胞凋亡,其机制与靶向BAMBI有关。 展开更多

关键词 膀胱肿瘤 lncRNA blacat1 细胞增殖 细胞运动

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长链非编码核苷酸膀胱癌相关转录因子1在咽部鳞状细胞癌中的研究进展

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作者 开日麦·艾尼瓦尔 赵辉 《临床医学进展》 2024年第3期928-935,共8页

长链非编码核苷酸(long noncoding RNA, IncRNAs)是由200多个核苷酸组成的转录本,由于缺乏开放性阅读框架从而无法编码蛋白质。然而,lncRNAs以多种方式参与基因转录及转录后的多个层面,从而调控肿瘤的发生与发展。其中,长链非编码核苷... 长链非编码核苷酸(long noncoding RNA, IncRNAs)是由200多个核苷酸组成的转录本,由于缺乏开放性阅读框架从而无法编码蛋白质。然而,lncRNAs以多种方式参与基因转录及转录后的多个层面,从而调控肿瘤的发生与发展。其中,长链非编码核苷酸膀胱癌相关转录因子1 (lncRNA BLACAT1)被证实通过与miRNAs竞争性结合、参与Wnt/β-catenin信号通路和STAT3信号通路以及作用于相关蛋白和分子,从而在恶性肿瘤的发生发展过程中起重要的作用。本文中,我们将概括lncRNA BLACAT1在咽部鳞状细胞癌中的作用机制,并预测其将来有望成为咽部鳞状细胞癌的新型生物标志物和治疗靶点。 展开更多

关键词 长链非编码核苷酸(lncRNAs) 长链非编码核苷酸膀胱癌相关转录因子1 (lncRNA blacat1) 咽部鳞状细胞癌 生物标志物 治疗靶点

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长链非编码RNA膀胱癌相关转录物1对微小RNA-503-5p的靶向关系及对结直肠癌细胞增殖和凋亡的影响 被引量：7

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作者 黄荣 樊明湖 +2 位作者 黄芬 卢小菊 李新建 《安徽医药》 CAS 2021年第8期1637-1642,共6页

目的研究长链非编码RNA(lncRNA)膀胱癌相关转录物1(BLACAT1)对微小RNA(miR)-503-5p的靶向关系及结直肠癌细胞增殖和凋亡的影响。方法实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测结肠癌细胞株SW620,LOVO,HT29和人正常结肠黏膜上皮细胞株NCM460中BLACAT... 目的研究长链非编码RNA(lncRNA)膀胱癌相关转录物1(BLACAT1)对微小RNA(miR)-503-5p的靶向关系及结直肠癌细胞增殖和凋亡的影响。方法实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测结肠癌细胞株SW620,LOVO,HT29和人正常结肠黏膜上皮细胞株NCM460中BLACAT1和miR-503-5p的表达。在HT29细胞中转染si-BLACAT1、pcDNA-BLACAT1或miR-503-5p,噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,蛋白质印迹法(Western blotting)检测细胞核相关抗原Ki-67(Ki-67)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、活化的多聚ADP-核糖聚合酶(Cleaved PARP)和活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(Cleaved caspase-3)的表达,starbase预测和双荧光素酶报告分析BLACAT1与miR-503-5p之间的靶向关系。si-BLACAT1和anti-miR-503-5p共转染,观察干扰miR-503-5p对沉默BLACAT1诱导的结直肠癌细胞增殖和凋亡的影响。结果与NCM460细胞比较,SW620、LOVO和HT29中BLACAT1表达量明显增加[(4.93±0.58)、(5.66±0.53)、(6.17±0.66)比(1.03±0.22)],miR-503-5p表达量减少[(0.72±0.11)、(0.67±0.09)、(0.51±0.08)比(1.04±0.14)](P<0.05)。沉默BLACAT1或转染miR-503-5p明显减少HT29细胞的细胞存活率、Ki-67、CyclinD1蛋白表达量,提高细胞凋亡率、Cleaved PARP和Cleaved caspase-3蛋白水平(P<0.05),过表达BLACAT1则反之。BLACAT1靶向miR-503-5p调控其表达。干扰miR-503-5p部分逆转沉默BLACAT1抑制结直肠癌细胞增殖、Ki-67、CyclinD1蛋白表达和诱导结直肠癌细胞凋亡、Cleaved PARP、Cleaved caspase-3蛋白表达的作用。结论lncRNA BLACAT1在表达上调,沉默BLACAT1可通过靶向调控miR-503-5p的表达,来抑制结直肠癌细胞增殖,并诱导细胞凋亡。 展开更多

关键词 结直肠肿瘤 lncRNA blacat1 微小RNA-503-5p 增殖 凋亡

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长链非编码RNA膀胱癌相关转录本1靶向调控微小RNA-20b-5p对宫颈癌细胞自噬及顺铂敏感性的影响 被引量：7

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作者 柳月霞 魏菊红 刘小丽 《安徽医药》 CAS 2021年第4期789-793,共5页

目的探讨长链非编码RNA膀胱癌相关转录本1(LncRNA BLACAT1)对宫颈癌细胞自噬及顺铂敏感性的影响及其分子机制。方法本研究起止时间2018年6月至2019年10月,体外培养人正常宫颈上皮细胞HUCEC、宫颈癌细胞株ME180、C-33A、Hela与顺铂耐药... 目的探讨长链非编码RNA膀胱癌相关转录本1(LncRNA BLACAT1)对宫颈癌细胞自噬及顺铂敏感性的影响及其分子机制。方法本研究起止时间2018年6月至2019年10月,体外培养人正常宫颈上皮细胞HUCEC、宫颈癌细胞株ME180、C-33A、Hela与顺铂耐药宫颈癌细胞株Hela/DDP,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测细胞中BLACAT1、微小RNA-20b-5p(miR-20b-5p)的表达量。以Hela/DDP细胞为研究对象,分别将BLACAT1小分子干扰RNA(si-BLACAT1)及其阴性对照(siNC)、si-BLACAT1与miR-20b-5p特异性寡核苷酸抑制剂的阴性对照(anti-miR-NC)、si-BLACAT1与miR-20b-5p特异性寡核苷酸抑制剂(anti-miR-20b-5p)转染至Hela/DDP细胞。甲基噻唑基四唑(MTT)检测细胞抑制率为50%时的顺铂浓度(顺铂IC50值)以此评估顺铂敏感性;蛋白质印迹法(Western blotting)检测p62、微管相关蛋白轻链3I(LCB3-Ⅰ)、微管相关蛋白轻链3II(LCB3-Ⅱ)表达量。双荧光素酶报告实验验证BLACAT1与miR-20b-5p的靶向关系。结果与HUCEC相比,宫颈癌细胞株ME180、C-33A、Hela中BLACAT1的表达水平升高[(0.80±0.16)比(3.41±0.14)、(3.72±0.14)、(2.52±0.15)](P<0.05),miR-20b-5p的表达水平降低[(1.00±0.16)比(0.42±0.16)、(0.33±0.14)、(0.38±0.15)](P<0.05),Hela细胞与Hela/DDP细胞相比差异有统计学意义[(2.52±0.15)比(5.23±0.14);(0.38±0.15)比(0.21±0.11)](P<0.05);与si-NC组相比,si-BLACAT1组p62蛋白水平降低[(0.82±0.13)比(0.24±0.11)](P<0.05),LCB3-Ⅱ蛋白水平升高[(0.64±0.15)比(0.95±0.13)](P<0.05),顺铂IC50值降低[(16.82±3.24)比(6.21±1.25)](P<0.05);双荧光素酶报告实验证实BLACAT1能够靶向结合miR-20b-5p;与si-BLACAT1+antimiR-NC组相比,si-BLACAT1+anti-miR-20b-5p组p62蛋白水平升高[(0.27±0.13)比(1.66±0.15)](P<0.05),LCB3-Ⅱ蛋白水平降低[(2.60±0.15)比(0.85±0.12)](P<0.05),顺铂IC50值升高[(6.23±1.20)比(15.67±2.16)](P<0.05)。结论 LncRNA BLACAT1靶向抑制miR-20b-5p表达而调控宫颈癌细胞自噬从而降低顺铂敏感性。 展开更多

关键词 宫颈肿瘤 LncRNA blacat1 miR-20b-5p 自噬 顺铂敏感性

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