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小鼠Bicc1基因RNAi序列的筛选与鉴定 被引量:1
1
作者 周亮 杨君兴 《Zoological Research》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期84-88,共5页
通过网上提供的生物信息学分析软件进行搜索和比对,初步筛选到3个较好的针对小鼠双尾-C(Bicc1)基因的RNA干扰(RNAi)序列。合成这3个干涉序列片段后克隆到pRS-HushshRNA载体中。构建Bicc1基因的真核表达载体pEGFP-C3-Bicc1,将绿色荧光蛋... 通过网上提供的生物信息学分析软件进行搜索和比对,初步筛选到3个较好的针对小鼠双尾-C(Bicc1)基因的RNA干扰(RNAi)序列。合成这3个干涉序列片段后克隆到pRS-HushshRNA载体中。构建Bicc1基因的真核表达载体pEGFP-C3-Bicc1,将绿色荧光蛋白(GFP)标签标记在Bicc1蛋白上。利用细胞转染技术将pEGFP-C3-Bicc1与3个干涉序列载体共转染至体外培养的HEK-293细胞中,最后通过细胞荧光强度、半定量PCR和Westernblotting鉴定出其中两个序列(pRS-Hush-RNAi-Bicc1-N/-C)能明显降低Bicc1蛋白在HEK-293细胞中的表达水平,为下一步建立起低表达Bicc1的稳定细胞株和研究小鼠Bicc1的功能提供了良好的材料。 展开更多
关键词 小鼠bicc1基因 RNA干扰 pRS—Hush pEGFP—C3-bicc1 转染
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小鼠双尾C蛋白Bicc1多克隆抗体的制备及细胞内定位的初步研究 被引量:2
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作者 戴宝贞 周亮 +3 位作者 付玉龙 丁镇伟 李煜 吴冠青 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期1106-1109,共4页
目的:制备小鼠双尾C蛋白Bicc1的多克隆抗体并确定其在细胞内定位。方法:根据生物信息学分析结果,PCR扩增小鼠Bicc1编码61E-199A的cDNA片段。将该片段克隆到GST融合蛋白表达载体上,在IPTG诱导下产生Bicc1-N抗原。纯化目的蛋白并制备兔抗B... 目的:制备小鼠双尾C蛋白Bicc1的多克隆抗体并确定其在细胞内定位。方法:根据生物信息学分析结果,PCR扩增小鼠Bicc1编码61E-199A的cDNA片段。将该片段克隆到GST融合蛋白表达载体上,在IPTG诱导下产生Bicc1-N抗原。纯化目的蛋白并制备兔抗Bicc1蛋白多克隆抗体。Western blot鉴定抗体特异性,并以间接免疫荧光法初步分析该蛋白在细胞内定位。结果:成功构建Bicc1-N片段原核表达载体,在大肠杆菌中实现可溶性表达,制备小鼠Bicc1蛋白的多克隆抗体,并证实该蛋白主要表达于细胞质内。结论:成功制备了高效价并特异的兔抗Bicc1多克隆抗体,为进一步研究Bicc1基因产物的生物功能奠定了基础。 展开更多
关键词 小鼠双尾-C基因 bicc1 多克隆抗体 多囊肾
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基于TCGA数据库挖掘分析BICC1 mRNA在胃癌中的表达及其与预后的关系 被引量:4
3
作者 张喆 杨炜 《检验医学与临床》 CAS 2020年第14期2036-2038,共3页
目的通过研究双尾C基因(BICC1)mRNA在胃癌组织中的表达,阐明其对胃癌预后的影响。方法挖掘TCGA数据库中胃癌患者癌组织及癌旁组织的mRNA原始表达数据,用R软件及Strawberry Perl软件对上述下载数据进行整理,然后对BICC1 mRNA相对表达量... 目的通过研究双尾C基因(BICC1)mRNA在胃癌组织中的表达,阐明其对胃癌预后的影响。方法挖掘TCGA数据库中胃癌患者癌组织及癌旁组织的mRNA原始表达数据,用R软件及Strawberry Perl软件对上述下载数据进行整理,然后对BICC1 mRNA相对表达量进行分析,同时下载临床资料数据,进行临床分期和预后分析。结果通过TCGA数据库信息挖掘发现,BICC1 mRNA在胃癌组织中呈高表达,且与患者生存时间有关,较大的年龄、高水平的BICC1 mRNA表达是影响胃癌患者总生存时间的独立危险因素。结论该研究将为后续的胃癌相关研究提供重要的理论依据。 展开更多
关键词 bicc1基因 胃癌 TCGA数据库
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BICC1基因与胃癌进展和预后相关性的生物信息学分析
4
作者 宋雷 郭忠 +3 位作者 赵玉 李焱 付玉婷 赵晋 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期3261-3276,共16页
为探索胃癌中BICC1基因表达水平的临床预后意义及其在胃癌进展中的功能,通过分析肿瘤基因组图谱计划(the cancer genome atlas program,TCGA)中BICC1在胃癌及癌旁组织中转录水平表达的差异,回顾性研究了BICC1转录表达水平与临床病理特... 为探索胃癌中BICC1基因表达水平的临床预后意义及其在胃癌进展中的功能,通过分析肿瘤基因组图谱计划(the cancer genome atlas program,TCGA)中BICC1在胃癌及癌旁组织中转录水平表达的差异,回顾性研究了BICC1转录表达水平与临床病理特征及预后之间的关系。利用单样本基因集富集分析(single sample gene set enrichment analysis,ss GSEA)研究BICC1高表达与肿瘤免疫细胞浸润的相关性,用基因集富集分析(gene set enrichment analysis,GSEA)研究胃癌中BICC1高表达相关的信号通路。TCGA泛癌的数据集分析结果表明,多种肿瘤组织中BICC1的mRNA相对表达量显著高于癌旁组织(P<0.01)。进行Wilcoxon秩和检验和logistic回归分析,认为胃癌BICC1转录水平的高表达与肿瘤原发灶大小、Lauren分型、肿瘤分化期、人种等特征均显著相关(P<0.05)。通过Kaplan-Meier生存分析和多因素Cox回归,认为胃癌BICC1的高表达与患者更差的总生存期(overall survival,OS)显著相关(P<0.05),是影响总生存期的独立风险因素之一。通过ssGSEA分析,认为BICC1的表达与自然杀伤细胞、巨噬细胞、未成熟树突状细胞(immature dendritic cells,iDCs)、效应型记忆T细胞(effector memory T cells,Tem)浸润水平具有显著相关性(P<0.001)。通过GSEA分析,认为BICC1的高表达与肿瘤细胞TGF-β1、MAPK、Wnt、JAK-STAT和mTOR等信号通路显著富集有关(FDR<0.25,P<0.05)。综上所述,BICC1转录水平高表达与影响胃癌进展的恶性表型密切相关,其可能是一个可预测胃癌预后的独立风险因素。 展开更多
关键词 胃癌 基因集富集分析 总生存期 bicc1 免疫浸润
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BICC1对骨髓基质细胞定向分化的调控作用研究
5
作者 杨俊英 李晓霞 《天津医科大学学报》 2020年第3期199-203,共5页
目的:探讨BICC1在骨髓基质细胞向成骨细胞及脂肪细胞分化过程中的作用。方法:构建Bicc1过表达质粒Bicc1-pcDNA3.1,以pcDNA3.1为对照,分别转染小鼠骨髓基质细胞ST2。对两组细胞进行成脂和成骨诱导,在成骨诱导14 d时碱性磷酸酶染色检测成... 目的:探讨BICC1在骨髓基质细胞向成骨细胞及脂肪细胞分化过程中的作用。方法:构建Bicc1过表达质粒Bicc1-pcDNA3.1,以pcDNA3.1为对照,分别转染小鼠骨髓基质细胞ST2。对两组细胞进行成脂和成骨诱导,在成骨诱导14 d时碱性磷酸酶染色检测成骨分化情况,在成脂诱导5 d时利用油红O染色检测脂滴形成情况;采用qRT-PCR及Western blot技术检测细胞Bicc1过表达对成骨及成脂相关因子的影响。结果:酶切及测序结果显示Bicc1过表达质粒构建成功,将其转染到ST2细胞后,Bicc1 mRNA表达水平较对照组升高15.23倍(P<0.05)。成骨诱导条件下,Bicc1过表达组ST2细胞碱性磷酸酶染色增强,成骨相关因子Osterix、碱性磷酸酶、Osteopontin、Runt相关转录因子2(Runx2)和骨钙素的mRNA和/或蛋白表达水平显著上升(均P<0.05)。成脂诱导条件下,Bicc1过表达组ST2细胞中脂滴形成减少,油红OD520较对照组明显降低(P<0.01),成脂相关因子过氧化物酶体增殖物活化受体γ(PPARγ)、CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)、脂肪酸结合蛋白(FABP4/aP2)和adipsin的mRNA及蛋白表达水平显著下降(均P<0.05)。结论:BICC1可促进骨髓基质细胞向成骨细胞分化,抑制其向脂肪细胞分化。 展开更多
关键词 bicc1 骨髓基质细胞 分化 成骨细胞 脂肪细胞
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肺鳞癌血清外泌体hsa_circ_0018430的表达和临床意义 被引量:1
6
作者 王志鹏 张倩 +3 位作者 黄燕华 孙赟 方晓明 施宇佳 《中华肺部疾病杂志(电子版)》 2023年第6期774-778,共5页
目的分析血清外泌体环状RNA hsa_circ_0018430在肺鳞状细胞癌(lung squamous cell carcinoma,LSCC)的表达水平与临床意义。方法2021年3月至2022年10月期间收集46例LSCC患者的肿瘤组织与血清样本。提取血清外泌体,通过透射电镜、NTA以及w... 目的分析血清外泌体环状RNA hsa_circ_0018430在肺鳞状细胞癌(lung squamous cell carcinoma,LSCC)的表达水平与临床意义。方法2021年3月至2022年10月期间收集46例LSCC患者的肿瘤组织与血清样本。提取血清外泌体,通过透射电镜、NTA以及western blot对血清外泌体的形态与粒径分布进行了表征。利用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)法检测血清外泌体hsa_circ_0018430相对表达水平,采用受试者工作特征(ROC)曲线并结合患者临床特征分析hsa_circ_0018430对LSCC的诊断,采用ELISA检测LSCC患者BICC1蛋白的表达。结果LSCC患者血清外泌体呈具有皮膜结构的球状,粒径分布在30~180 nm之间,血清外泌体hsa_circ_0018430表达水平分布为3.928(2.553~5.303)。ROC分析表明血清外泌体hsa_circ_0018430的AUC值为0.881(95%CI:0.809~0.952,P<0.001),灵敏度86.51%,特异性91.37%。血清外泌体hsa_circ_0018430表达水平与肺鳞癌患者TNM分期、淋巴结转移和血清CEA基线水平有关(P<0.05)。TCGA数据库分析表明LSCC患者组织中BICC1呈低表达(P<0.05),BICC1的表达水平与TNM分期和总生存期无显著相关性。ELISA检测LSCC患者癌组织中BICC1的表达水平相比于癌旁组织显著下调(P<0.05)。结论LSCC患者血清外泌体hsa_circ_0018430表达水平升高,与癌症进展指标相关,有望成为LSCC诊断与治疗评估的新型生物标志物。 展开更多
关键词 肺鳞癌 血清外泌体 环状RNA hsa_circ_0018430 bicc1编码
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