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牛泡沫病毒BFV3026细胞感染性的确立及包装细胞系的建立 被引量:1
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作者 余荭 孔晓红 +3 位作者 李汀 马永钢 陈启民 耿运琪 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期330-335,共6页
分别将牛泡沫病毒BFV3026接种于胎牛肺细胞(FBL)、牛肺细胞系(BL12)、新生牛肾细胞(NBK)、兔肺细胞(RL)、人乳腺癌上皮细胞(MCF)、293T、HeLa、CV-1、CHO等9种细胞,通过对它们及其传代细胞的病变观察与RT-PCR检测,确立BFV3026对这9种细... 分别将牛泡沫病毒BFV3026接种于胎牛肺细胞(FBL)、牛肺细胞系(BL12)、新生牛肾细胞(NBK)、兔肺细胞(RL)、人乳腺癌上皮细胞(MCF)、293T、HeLa、CV-1、CHO等9种细胞,通过对它们及其传代细胞的病变观察与RT-PCR检测,确立BFV3026对这9种细胞的感染。并以BFV3026原病毒DNA为模板,通过PCR构建以pcD NA3 1(-)为载体的gag-pol、env真核表达质粒共转染BL12细胞,经G418持续筛选,获得8个NeoR细胞克隆。RT-PCR及包装实验证实:其中7个细胞克隆能有效行使包装辅助功能。 展开更多
关键词 牛泡沫病毒 bfv3026细胞 感染性 包装细胞系
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RU5区对BFV3026基因表达的调控
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作者 孔晓红 余荭 +4 位作者 宣成昊 辛丹 王金忠 陈启民 耿运琪 《中国病毒学》 CAS CSCD 2004年第2期129-132,共4页
以牛泡沫病毒(Bovine foamy virus, BFV)中国株BFV3026原病毒DNA为材料,构建R区系列缺失质粒, 通过对其转染细胞中RT水平及对缺失质粒与luc报告质粒共转染细胞中萤火虫荧光素酶活性的测定,确立U5区对于BFV3026两类启动子LTR和IP均具有... 以牛泡沫病毒(Bovine foamy virus, BFV)中国株BFV3026原病毒DNA为材料,构建R区系列缺失质粒, 通过对其转染细胞中RT水平及对缺失质粒与luc报告质粒共转染细胞中萤火虫荧光素酶活性的测定,确立U5区对于BFV3026两类启动子LTR和IP均具有负调控作用;同时将带有不同R区的BFV3026结构基因片段克隆于异源启动子CMV之下,通过对其转染细胞293T中RT酶活性的测定,确立R区对于病毒结构基因pol的表达具有一定的调节作用,并将其功能区域初步界定在R区5′端100bp内。 展开更多
关键词 牛泡沫病毒 RU5区 bfv3026 基因 表达 调控 转染细胞 萤火虫荧光素酶 基因治疗
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牛泡沫病毒BFV3026 gag基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达(英文)
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作者 余荭 孔晓红 +4 位作者 马永刚 李汀 王金忠 陈启民 耿运琪 《南开大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期84-90,共7页
从牛泡沫病毒 BFV3 0 2 6感染的胎牛肺细胞中提取 Hirt DNA,PCR扩增 BFV3 0 2 6gag基因 .序列分析确证后 ,将其克隆于原核表达载体 p ET3 2 A,重组质粒转化大肠杆菌 BL2 1 (DE3 ) ,经 IPTG诱导 ,使 Gag蛋白得以高效表达 .SDS-PAGE及 Wes... 从牛泡沫病毒 BFV3 0 2 6感染的胎牛肺细胞中提取 Hirt DNA,PCR扩增 BFV3 0 2 6gag基因 .序列分析确证后 ,将其克隆于原核表达载体 p ET3 2 A,重组质粒转化大肠杆菌 BL2 1 (DE3 ) ,经 IPTG诱导 ,使 Gag蛋白得以高效表达 .SDS-PAGE及 Western blot证实 :表达蛋白占菌体总蛋白的 40 % .本工作的完成为 Gag蛋白功能的研究奠定基础 . 展开更多
关键词 牛泡沫病毒 bfv3026 GAG基因 基因克隆 基因表达 序列分析 大肠杆菌
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Characterization of a full-length infectious clone of bovine foamy virus 3026 被引量:2
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作者 Tiejun Bing Hong Yu +4 位作者 Yue Li Lei Sun Juan Tan Yunqi Geng Wentao Qiao 《Virologica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2014年第2期94-102,共9页
The biological features of most foamy viruses(FVs) are poorly understood, including bovine foamy virus(BFV). BFV strain 3026(BFV3026) was isolated from the peripheral blood mononuclear cells of an infected cow in Zhan... The biological features of most foamy viruses(FVs) are poorly understood, including bovine foamy virus(BFV). BFV strain 3026(BFV3026) was isolated from the peripheral blood mononuclear cells of an infected cow in Zhangjiakou, China. A full-length genomic clone of BFV3026 was obtained from BFV3026-infected cells, and it exhibited more than 99% amino acid(AA) homology to another BFV strain isolated in the USA. Upon transfection into fetal canine thymus cells, the full-length BFV3026 clone produced viral structural and auxiliary proteins, typical cytopathic effects, and virus particles. These results demonstrate that the full-length BFV3026 clone is fully infectious and can be used in further BFV3026 research. 展开更多
关键词 bovine foamy virus infectious clone SYNCYTIUM electron microscopy
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