短双歧杆菌对单核细胞增生李斯特菌及其侵染BeWo细胞的拮抗作用

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作者 谭强来 吴伟菁 +6 位作者 郑伊婷 吴兰兰 林木丁 何义姝 蔡依婕 罗娜 曾臻 《中国微生态学杂志》 北大核心 2025年第6期630-637,655,共9页

目的探究短双歧杆菌对单核细胞增生李斯特菌及其侵染BeWo细胞的拮抗作用,开发安全可靠的抗生素替代品防治单核细胞增生李斯特菌侵染。方法制备短双歧杆菌SHBCC D11205、动物双歧杆菌乳亚种SHBCC D15854及动物双歧杆菌动物亚种GDMCC 1.16... 目的探究短双歧杆菌对单核细胞增生李斯特菌及其侵染BeWo细胞的拮抗作用,开发安全可靠的抗生素替代品防治单核细胞增生李斯特菌侵染。方法制备短双歧杆菌SHBCC D11205、动物双歧杆菌乳亚种SHBCC D15854及动物双歧杆菌动物亚种GDMCC 1.169等3株双歧杆菌的无细胞发酵上清液,以超氧阴离子自由基清除能力、总抗氧化能力为指标评估其体外抗氧化活性,采用牛津杯扩散实验评估其体外抑菌活性;建立单核细胞增生李斯特菌侵染BeWo人胎盘绒毛膜癌细胞模型,利用Calcein AM细胞活性检测试剂盒、跨膜电阻值(transepithelial electrical resistance,TEER)、荧光定量PCR法分析短双歧杆菌干预对胎盘屏障结构与功能的改善作用及机制。结果短双歧杆菌具有良好的体外抗氧化活性和抑菌能力。感染复数=10的单核细胞增生李斯特菌侵染比例可使BeWo细胞活性显著下降。短双歧杆菌处理能显著提高单核细胞增生李斯特菌侵染后BeWo细胞的活力,使TEER回升,并上调紧密连接蛋白的表达,此外,短双歧杆菌还可刺激上调BeWo细胞TNF-α、IL-6等炎症因子的表达,以应对单核细胞增生李斯特菌侵染。结论短双歧杆菌SHBCC D11205可能具有防治单核细胞增生李斯特菌侵染BeWo细胞的潜力。 展开更多

关键词 短双歧杆菌 单核细胞增生李斯特菌侵染 bewo人胎盘绒毛膜癌细胞 胎盘屏障 拮抗 抗氧化

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基于代谢组学方法研究生半夏和姜半夏对BeWo细胞的毒性机制 被引量：12

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作者 申士富 单进军 +3 位作者 谢辉辉 徐建亚 汪小蓉 狄留庆 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期295-300,共6页

目的通过气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术分析生半夏和姜半夏干预后细胞内代谢物改变,来评价生半夏和姜半夏潜在的发育毒性。方法采用胎盘组织来源的BeWo细胞系构建体外胎盘模型,运用GC-MS检测细胞经生半夏及姜半夏干预后细胞内所含代谢... 目的通过气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术分析生半夏和姜半夏干预后细胞内代谢物改变,来评价生半夏和姜半夏潜在的发育毒性。方法采用胎盘组织来源的BeWo细胞系构建体外胎盘模型,运用GC-MS检测细胞经生半夏及姜半夏干预后细胞内所含代谢物及其相对含量的变化。结果细胞代谢物中共鉴定出甘氨酸、氨基丙二酸、脯氨酸、葡萄糖、半乳糖、硬脂酸在、肌醇等九种差异性代谢物。结论运用GC-MS代谢组学技术评价半夏及姜半夏的发育毒性具有可行性。 展开更多

关键词 气相色谱-质谱联用 半夏 姜半夏 bewo细胞 发育毒性

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1.3倍乙型肝炎病毒全基因真核表达载体的构建及其在Bewo细胞中的表达 被引量：6

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作者 资捷 王前 +2 位作者 郑磊 熊石龙 蔡贞 《热带医学杂志》 CAS 2010年第2期126-129,共4页

目的构建1.3倍乙型肝炎病毒(HBV)全基因的真核表达载体pcDNA3.1(+)-HBV1.3,并观察其在Bewo细胞中的表达。方法以质粒pMD18T-HBV上的HBV DNA序列为模板,构建1.3倍HBV全基因序列,将其插入到真核表达载体pcDNA3.1(+),用酶切、PCR及测序鉴定... 目的构建1.3倍乙型肝炎病毒(HBV)全基因的真核表达载体pcDNA3.1(+)-HBV1.3,并观察其在Bewo细胞中的表达。方法以质粒pMD18T-HBV上的HBV DNA序列为模板,构建1.3倍HBV全基因序列,将其插入到真核表达载体pcDNA3.1(+),用酶切、PCR及测序鉴定,并把该载体转染Bewo细胞,以Western免疫印迹、微粒子酶免疫分析法(MEIA)和荧光定量PCR法分别检测胞内和上清中HBsAg、HBeAg蛋白的表达及HBV DNA水平。结果通过酶切、PCR及测序鉴定,成功构建1.3倍HBV全基因表达载体,该载体可以在Bewo细胞系中表达和分泌HBsAg与HBeAg,并可检测到高水平的HBV DNA。结论成功构建了1.3倍HBV全基因真核表达载体pcDNA3.1(+)-HBV1.3,为研究胞内HBV宫内感染奠定了基础。 展开更多

关键词 乙型肝炎病毒 1.3倍HBV基因组 真核表达载体 bewo细胞

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乙型肝炎病毒感染人胎盘绒毛膜癌BeWo细胞体外培养模型的建立 被引量：2

4

作者 丁洋 白菡 +2 位作者 盛秋菊 马力 窦晓光 《中国感染控制杂志》 CAS 2012年第1期12-16,共5页

目的建立乙型肝炎病毒(HBV)感染人绒毛膜癌滋养层细胞(BeWo)体外培养模型,探讨HBV宫内感染机制。方法应用高病毒载量的HBV阳性血清感染BeWo细胞并传代,应用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术检测感染初代细胞和传代细胞内以及上清液中H... 目的建立乙型肝炎病毒(HBV)感染人绒毛膜癌滋养层细胞(BeWo)体外培养模型,探讨HBV宫内感染机制。方法应用高病毒载量的HBV阳性血清感染BeWo细胞并传代,应用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术检测感染初代细胞和传代细胞内以及上清液中HBV DNA量;应用化学发光微粒子免疫法检测感染后初代细胞和传代细胞的上清液中乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎e抗原(HBeAg)量;应用SABC免疫组化检测感染细胞内HBsAg、乙型肝炎核心抗原(HBcAg)的表达。结果感染初代各时间点细胞内和上清液中HBVDNA量随时间延长而增加,120 h HBV DNA量最高;传代细胞内和上清液中HBV DNA量随传代次数增加逐渐降低,5代后检测均为阴性。感染初代各时间点细胞的上清液中HBsAg量随时间延长而增加;传代细胞的上清液中HBsAg量在1～3代为阳性,但量逐渐降低,4代后均为阴性。感染初代各时间点细胞和传代细胞的上清液中HBeAg量均为阴性;1～3代细胞HBsAg、HBcAg染色可见阳性细胞。结论 HBV可以感染BeWo细胞,且能在传代细胞中表达;BeWo细胞可用于HBV宫内感染机制的研究。 展开更多

关键词 肝炎病毒 乙型 滋养层细胞 bewo细胞 宫内感染 母婴传播

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HBeAg真核表达载体的构建及其在Bewo细胞中的表达 被引量：2

5

作者 资捷 王前 +2 位作者 郑磊 熊石龙 蔡贞 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期54-56,68,共4页

目的构建乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)的真核表达载体pcDNA3.1(+)-HBe,并观察其在Bewo细胞中的表达。方法用PCR方法从质粒pMD18T-HBV中扩增HBeAg基因,克隆到pcDNA3.1(+),构建真核表达载体pcDNA3.1(+)-HBe,通过酶切、PCR及测序鉴定,并将该... 目的构建乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)的真核表达载体pcDNA3.1(+)-HBe,并观察其在Bewo细胞中的表达。方法用PCR方法从质粒pMD18T-HBV中扩增HBeAg基因,克隆到pcDNA3.1(+),构建真核表达载体pcDNA3.1(+)-HBe,通过酶切、PCR及测序鉴定,并将该载体转染Bewo细胞,72h后,用Western免疫印迹和微粒子酶免疫分析法(MEIA)检测HBeAg蛋白在胞内和上清中的表达。结果通过酶切、PCR及测序鉴定,成功构建HBeAg表达载体,该载体可以在Bewo细胞系中表达HBeAg,并可分泌HBeAg。结论构建了HBeAg真核表达载体pcDNA3.1(+)-HBe,为研究胞内HBeAg对Bewo细胞Toll样受体表达的作用奠定了基础。 展开更多

关键词 乙型肝炎病毒 乙型肝炎病毒E抗原 真核表达载体 bewo细胞

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土贝母皂苷甲作用线粒体途径促进人绒毛膜癌Bewo细胞凋亡 被引量：4

6

作者 黄霈 于超 +4 位作者 刘洪涛 杨竹 丁裕斌 王应雄 何俊琳 《细胞生物学杂志》 CSCD 2009年第6期831-836,共6页

为了研究土贝母苷甲(TBMS1)诱导人绒毛膜癌Bewo细胞凋亡的作用及机制,分别采用MTT法检测细胞增殖的抑制作用,流式细胞术测定药物对细胞周期、凋亡及线粒体跨膜电位(△Ψm)的影响,DNA琼脂糖凝胶电泳分析DNA含量变化和DNA断裂的情况,蛋白... 为了研究土贝母苷甲(TBMS1)诱导人绒毛膜癌Bewo细胞凋亡的作用及机制,分别采用MTT法检测细胞增殖的抑制作用,流式细胞术测定药物对细胞周期、凋亡及线粒体跨膜电位(△Ψm)的影响,DNA琼脂糖凝胶电泳分析DNA含量变化和DNA断裂的情况,蛋白质免疫印迹法及RT-PCR法检测细胞凋亡相关基因表达的变化。研究结果显示,TBMS1呈浓度依赖性显著抑制Bewo细胞的生长;流式细胞术分析显示TBMS1能促进细胞凋亡,将细胞周期阻滞在G1期,并导致线粒体跨膜电位降低,细胞色素c(Cyt c)释放,caspase-3表达增强;DNA梯状区带验证了药物诱导细胞凋亡的发生;Bax表达上调,Bcl-2及磷酸化的p38表达下调等结果表明,TBMS1可能是通过p38/MAPK信号通路调控作用,导致线粒体功能紊乱,从而影响凋亡相关基因表达,有效诱导Bewo细胞凋亡。 展开更多

关键词 土贝母皂苷甲 细胞凋亡 线粒体 bewo细胞

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乙型肝炎病毒感染Bewo细胞模型的建立 被引量：1

7

作者 刘明慧 魏俊妮 +4 位作者 郭珍 杨佳 张玥 张临瑞 王素萍 《中国妇幼保健》 CAS 北大核心 2011年第31期4901-4903,共3页

目的:建立乙型肝炎病毒(HBV)感染人胎盘滋养层细胞系Bewo的细胞模型,为HBV母婴传播过程中胎盘细胞感染机制的研究提供体外细胞模型。方法:选择人胎盘滋养层细胞系Bewo进行体外培养,用高浓度HBV DNA阳性血清(5×106/拷贝.ml-1)与Bew... 目的:建立乙型肝炎病毒(HBV)感染人胎盘滋养层细胞系Bewo的细胞模型,为HBV母婴传播过程中胎盘细胞感染机制的研究提供体外细胞模型。方法:选择人胎盘滋养层细胞系Bewo进行体外培养,用高浓度HBV DNA阳性血清(5×106/拷贝.ml-1)与Bewo细胞共培养48 h后,采用选择性PCR技术检测培养细胞中HBVrcDNA和HBVcccDNA。结果:HBV DNA阳性血清与Bewo共培养48 h,Bewo细胞中HBV rcDNA和HBV cccDNA均呈现阳性结果(243 bp和373 bp)。HBVDNA阳性血清与Bewo共培养对细胞形态无明显影响。结论:HBV能够直接感染人胎盘滋养层细胞系Bewo,该细胞系可用于进行HBV母婴传播过程中胎盘细胞感染机制的研究。 展开更多

关键词 乙型肝炎病毒 人胎盘滋养层细胞系 bewo HBVCCCDNA 母婴传播

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14-3-3tau蛋白通过ERK信号通路调控BeWo细胞的侵袭功能 被引量：1

8

作者 程琰 胡蓉 +2 位作者 金红 马开东 李笑天 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期563-567,共5页

目的:探讨14-3-3tau蛋白对滋养细胞侵袭功能的影响及可能机制。方法:免疫组化法检测人早孕期绒毛、蜕膜以及人绒癌滋养细胞株BeWo中14-3-3tau的表达。RNA干扰方法下调BeWo细胞14-3-3tau的表达,RT-PCR和Western blotting方法检测E钙黏附... 目的:探讨14-3-3tau蛋白对滋养细胞侵袭功能的影响及可能机制。方法:免疫组化法检测人早孕期绒毛、蜕膜以及人绒癌滋养细胞株BeWo中14-3-3tau的表达。RNA干扰方法下调BeWo细胞14-3-3tau的表达,RT-PCR和Western blotting方法检测E钙黏附素及转录因子snail的表达变化,Transwell小室方法检测侵袭细胞数目的变化。用U0126特异性阻断胞外信号调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)信号通路,观察下调14-3-3tau对BeWo细胞侵袭能力的变化。结果:(1)14-3-3tau在早孕期绒毛外细胞滋养细胞和侵袭入蜕膜组织的游离型滋养细胞以及BeWo细胞中均有表达。(2)下调BeWo细胞14-3-3tau表达后,E钙黏附素表达下降,Snail表达增加,穿过Transwell小室的细胞数增加(P<0.05)。(3)U0126阻断14-3-3tau下调引起的BeWo细胞侵袭增加(P<0.05)。结论:14-3-3tau通过ERK1/2信号通路抑制滋养细胞的侵袭能力。 展开更多

关键词 蛋白质14-3-3tau 滋养细胞 bewo细胞 侵袭 ERK1/2信号通路

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BeWo细胞模型及其在胎盘转运机制研究中的应用 被引量：2

9

作者 郭洁 宋殿荣 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第21期3193-3197,共5页

妊娠期胎盘屏障调控了母儿间的物质交换,研究药物的胎盘转运机制对解析药物有效性、安全性和毒性具有重要意义。BeWo细胞来源于人绒毛膜癌细胞,可形成滋养层单层细胞,是有效评价营养物质和药物摄取、外排和转运的胎盘屏障体外模型,该文... 妊娠期胎盘屏障调控了母儿间的物质交换,研究药物的胎盘转运机制对解析药物有效性、安全性和毒性具有重要意义。BeWo细胞来源于人绒毛膜癌细胞,可形成滋养层单层细胞,是有效评价营养物质和药物摄取、外排和转运的胎盘屏障体外模型,该文详细介绍了BeWo细胞模型的特点和建立方法,以及应用该模型在营养物质和药物转运机制的研究进展。 展开更多

关键词 bewo细胞模型 胎盘屏障 转运体 转运机制 滋养层细胞

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不同缺氧方法诱导BeWo细胞缺氧诱导因子 1α表达的实验研究 被引量：4

10

作者 吴维光 陈亚琼 +1 位作者 王玉萍 张明静 《武警医学院学报》 CAS 2005年第2期86-89,共4页

【目的】探讨用于滋养细胞缺氧研究的缺氧方法及滋养细胞模型。【方法】滋养细胞来源的BeWo细胞系,分4组培养:正常对照组、低氧浓度组、二氯化钴组和去铁敏组。培养4 8h后收集细胞,应用实时定量PCR方法,检测BeWo细胞HIF- 1αmRNA表达水... 【目的】探讨用于滋养细胞缺氧研究的缺氧方法及滋养细胞模型。【方法】滋养细胞来源的BeWo细胞系,分4组培养:正常对照组、低氧浓度组、二氯化钴组和去铁敏组。培养4 8h后收集细胞,应用实时定量PCR方法,检测BeWo细胞HIF- 1αmRNA表达水平;应用Westernblot方法,检测BeWo细胞HIF -1α蛋白的表达水平。【结果】与正常对照组相比,低氧浓度组、二氯化钴组和去铁敏组的HIF- 1α蛋白和mRNA表达均明显升高;与低氧浓度组比较,二氯化钴组和去铁敏组HIF 1α蛋白和mRNA表达水平无明显差异。【结论】环境缺氧和细胞缺氧均可诱导BeWo细胞HIF 1α的表达,二氯化钴或去铁敏可以作为缺氧方法用于滋养细胞缺氧方面的研究,BeWo细胞也可作为一种细胞模型用于HIF -1α表达的研究。 展开更多

关键词 缺氧 bewo细胞 HIF-1Α

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缺氧对BeWo细胞系中缺氧诱导因子2及其靶基因VEGF表达的影响

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作者 范小斌 姚元庆 +2 位作者 李东红 张伟 尹国武 《实用妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期242-244,共3页

目的:探讨缺氧对体外培养的BeWo细胞中血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响,以及应用反义寡核甘酸封闭缺氧诱导因子2α(HIF- 2α)后,VEGF表达的变化。方法:将BeWo细胞分4组进行体外培养:常氧组、缺氧组、HIF -2α正义组和HIF- 2α反义组... 目的:探讨缺氧对体外培养的BeWo细胞中血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响,以及应用反义寡核甘酸封闭缺氧诱导因子2α(HIF- 2α)后,VEGF表达的变化。方法:将BeWo细胞分4组进行体外培养:常氧组、缺氧组、HIF -2α正义组和HIF- 2α反义组。检测HIF- 2α蛋白、HIF -2αmRNA和VEGFmRNA表达。结果:与常氧组相比,缺氧组的HIF- 2α蛋白、mRNA、VEGF的mRNA水平均升高;与缺氧组相比,反义组的HIF -2α蛋白、HIF-2αmRNA、VEGFmRNA表达均降低。结论:缺氧可诱导BeWo细胞中VEGF的表达,这种作用可能是通过HIF- 展开更多

关键词 缺氧 bewo细胞 缺氧诱导因子2a 血管内皮生长因子

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双特异性磷酸酶5对人胎盘滋养层细胞系BeWo增殖和凋亡的影响 被引量：1

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作者 戴小燕 李新哲 +3 位作者 黄团明 王婉 俞丽丽 郑英如 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期659-663,共5页

目的探讨双特异性磷酸酶5(dual specificity phosphatase 5,DUSP5)基因过表达对人胎盘滋养层细胞系BeWo增殖和凋亡的影响及其可能机制。方法以携带人DUSP5基因的重组慢病毒感染BeWo细胞,用流式细胞仪分选建立过表达DUSP5的BeWo细胞模型... 目的探讨双特异性磷酸酶5(dual specificity phosphatase 5,DUSP5)基因过表达对人胎盘滋养层细胞系BeWo增殖和凋亡的影响及其可能机制。方法以携带人DUSP5基因的重组慢病毒感染BeWo细胞,用流式细胞仪分选建立过表达DUSP5的BeWo细胞模型,以携带空载体的慢病毒感染的细胞以及未经任何处理的细胞作对照。经荧光实时定量PCR和Western blot检测DUSP5基因mRNA和蛋白的表达,经CCK-8实验和流式细胞术检测BeWo细胞增殖和凋亡的变化,经Western blot检测磷酸化ERK(p-ERK)、p-p38及p-JNK的变化。结果①经荧光实时定量PCR和Western blot证实,成功构建了DUSP5过表达的人胎盘滋养层细胞BeWo细胞模型;②CCK-8实验结果显示DUSP5过表达组在第3、4、5天的光密度值D(490)与其他两对照组相比明显增高(P<0.01);流式细胞仪结果显示顺铂作用48 h后,DUSP5过表达组与空病毒载体组相比,正常细胞的百分比显著增加而早期凋亡细胞百分比则显著减少(P<0.01);Western blot结果显示DUSP5过表达组中p-ERK1/2水平显著下降,而p-p38和p-JNK未见明显变化。结论 DUSP5可促进人胎盘滋养细胞系BeWo增殖、抑制细胞凋亡,以上作用可能与DUSP5抑制ERK信号通路有关。 展开更多

关键词 双特异性磷酸酶5 bewo细胞 细胞增殖 细胞凋亡 ERK1 2信号通路

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单核细胞增生李斯特菌感染对Bewo细胞炎症因子及迁移能力的影响 被引量：2

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作者 朱昱蓉 史倩 +6 位作者 卢叶 凌薇 袁琳 杨诗娴 王蓓蕾 姜旭淦 陈盛霞 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期94-99,共6页

目的研究单核细胞增生李斯特菌(Lm)感染致Bewo细胞炎症因子表达及迁移能力的变化,并探讨其可能的机制。方法Lm以MOI=10感染Bewo细胞,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测Bewo细胞炎症因子IL-1β、IL-6及TNF-α的mRNA水平;划痕试验及Transwell... 目的研究单核细胞增生李斯特菌(Lm)感染致Bewo细胞炎症因子表达及迁移能力的变化,并探讨其可能的机制。方法Lm以MOI=10感染Bewo细胞,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测Bewo细胞炎症因子IL-1β、IL-6及TNF-α的mRNA水平;划痕试验及Transwell试验检测Bewo细胞的迁移能力;Western Blot检测Bewo细胞迁移相关蛋白(MMP2,MMP9,TIMP-1)以及MAPK家族蛋白(p-p38MAPK,p38MAPK,p-ERK1/2,ERK1/2)的表达水平。结果Lm感染Bewo细胞后炎症因子IL-1β、IL-6及TNF-α的mRNA水平与感染1 h相比均升高。Western Blot结果表明,随着感染时间的延长,迁移相关蛋白MMP2逐渐升高;MMP9和TIMP-1变化趋势一致,先上升后下降;Lm感染致MAPK家族p38MAPK及ERK1/2蛋白磷酸化水平升高。结论Lm感染Bewo细胞后导致细胞迁移能力增强,MMP2在调控细胞迁移能力的变化中起主要作用,Lm感染可以激活Bewo细胞MAPK家族p38MAPK及ERK1/2信号通路。 展开更多

关键词 单核细胞增生李斯特菌 bewo细胞 基质金属蛋白酶 细胞迁移

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基于基因芯片整合分析筛选及验证BeWo细胞合体化相关调控因子 被引量：1

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作者 顾珺巍 丁裕斌 +3 位作者 付利娟 王永恒 王应雄 刘太行 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期1041-1048,共8页

目的:合体滋养层细胞(syncytiotrophoblast,STB)是一类多核化上皮细胞位于人类胎盘最外层,由单核滋养细胞(cytotrophoblast,CTB)分化、融合而来,肩负妊娠维持关键激素的分泌和母胎间营养交换的重要职责,也是母胎屏障重要组成部分之一。... 目的:合体滋养层细胞(syncytiotrophoblast,STB)是一类多核化上皮细胞位于人类胎盘最外层,由单核滋养细胞(cytotrophoblast,CTB)分化、融合而来,肩负妊娠维持关键激素的分泌和母胎间营养交换的重要职责,也是母胎屏障重要组成部分之一。然而,目前关于胎盘滋养细胞的合体化过程的调控机制仍不明确。本研究即利用生物信息学的方法筛选并初步验证潜在调控绒毛膜癌BeWo细胞合体化调控的关键基因。方法:从GEO数据库检索并下载BeWo细胞合体化前后的基因芯片数据集,并利用生物信息学分析方法对所有相关数据集进行综合分析,筛选出差异表达基因并进行GO及KEGG聚类分析,进一步通过PPI蛋白互作网络寻找节点基因,最后利用qRT-PCR验证候选基因在合体化前后的差异表达。结果:从2组数据中共筛选出137个差异表达基因,其中25个差异基因为2组数据集共有,参与细胞迁移、细胞黏附、激素代谢、MAPK信号通路等。进一步借助蛋白质互作网络分析,得到3个候选基因并通过qRT-PCR验证,结果与信息分析结果一致。结论:本研究为滋养细胞合体化研究提供了潜在靶基因,也为解析其分子调控机制提供了线索。 展开更多

关键词 bewo 合体化 基因芯片 生物信息

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乙型肝炎病毒e抗原对Bewo细胞Toll样受体3表达的影响 被引量：2

15

作者 资捷 王前 +2 位作者 郑磊 罗红 王芳 《热带医学杂志》 CAS 2010年第8期924-926,955,共4页

目的探讨乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)对Bewo细胞Toll样受体3(TLR3)表达的影响。方法首先用TLR3配体polyI∶C处理Bewo细胞,观察细胞TLR3 mRNA表达的动力学变化。然后将2μg和8μg HBeAg重组质粒pcDNA3.1(+)-HBe转染Bewo细胞,48 h后,用TLR3... 目的探讨乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)对Bewo细胞Toll样受体3(TLR3)表达的影响。方法首先用TLR3配体polyI∶C处理Bewo细胞,观察细胞TLR3 mRNA表达的动力学变化。然后将2μg和8μg HBeAg重组质粒pcDNA3.1(+)-HBe转染Bewo细胞,48 h后,用TLR3配体polyI∶C处理12 h。最后,用不同浓度的IFN-β处理Bewo细胞12 h。采用实时荧光定量RT-PCR和ELISA分别检测细胞TLR3 mRNA表达及细胞上清IFN-β水平。结果 polyI∶C可显著诱导Bewo细胞TLR3 mRNA表达(P<0.05或0.001),且呈时间和剂量依赖性;与对照组相比,转染8μg HBeAg重组质粒组polyI∶C诱导Bewo细胞TLR3表达及IFN-β水平显著下降(P<0.001),IFN-β可显著诱导Bewo细胞表达TLR3 mRNA(P<0.001),且呈剂量依赖性。结论 HBeAg可能通过下调IFN-β的产生而抑制Bewo细胞TLR3 mRNA的表达,为防治HBV宫内感染提供了新的途径。 展开更多

关键词 TOLL样受体3 乙型肝炎病毒E抗原 bewo细胞 Β-干扰素

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低氧对BeWo细胞骨桥蛋白表达的影响 被引量：4

16

作者 夏俊霞 乔福元 +1 位作者 吉琼梅 苏放明 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期48-52,共5页

目的体外模拟子痫前期胎盘缺氧的低氧环境培养滋养细胞,研究低氧对滋养细胞骨桥蛋白(osteopontin,OPN)表达的影响,以进一步深入研究OPN在子痫前期发病机制中的作用。方法利用气体混配缺氧装置(QT-MTX-3)模拟子痫前期的发生发展过程,配... 目的体外模拟子痫前期胎盘缺氧的低氧环境培养滋养细胞,研究低氧对滋养细胞骨桥蛋白(osteopontin,OPN)表达的影响,以进一步深入研究OPN在子痫前期发病机制中的作用。方法利用气体混配缺氧装置(QT-MTX-3)模拟子痫前期的发生发展过程,配置不同氧浓度,采用细胞免疫组化和实时荧光定量PCR检测人胎盘绒毛膜癌滋养细胞系BeWo细胞在不同氧浓度下OPN蛋白及其mRNA的表达。结果①在不同氧浓度的环境下,显微镜观察BeWo细胞的生长情况,发现其对低氧反应敏感,细胞形态发生明显的改变。②细胞免疫组化检测结果显示:OPN在各组BeWo细胞中均有表达,其免疫反应产物主要表达定位于胞质和胞膜中;缺氧24h各组的OPN蛋白表达无明显变化;但低氧48h后,低氧组OPN蛋白的表达水平均明显下降,且2%O2组OPN蛋白下降更显著。③实时荧光定量PCR检测结果表明低氧对滋养细胞OPN mRNA的表达影响呈现出浓度时间依赖性,即随着氧浓度的降低和低氧时间的延长,OPN mRNA的表达呈显著下降趋势。结论低氧使BeWo细胞OPN的表达降低,且呈浓度时间依赖性,类似于OPN在子痫前期胎盘组织的表达随病情加重而进一步降低,这可能是子痫前期胎盘中缺氧对滋养细胞功能影响的重要机制之一。 展开更多

关键词 低氧 bewo细胞 骨桥蛋白 子痫前期

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Toll样受体4介导抑制Bewo细胞中乙型肝炎病毒的复制 被引量：1

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作者 资捷 王前 +1 位作者 郑磊 王芳 《中国热带医学》 CAS 2011年第12期1445-1447,共3页

目的探讨Toll样受体4(TLR4)介导的天然免疫对Bewo细胞中乙型肝炎病毒(HBV)复制的影响。方法首先用TLR4配体LPS处理Bewo细胞,观察细胞TLR4 mRNA表达的动力学。然后将2μg 1.3倍HBV全基因重组质粒pcDNA3.1(+)-HBV1.3转染Bewo细胞,12h后,以... 目的探讨Toll样受体4(TLR4)介导的天然免疫对Bewo细胞中乙型肝炎病毒(HBV)复制的影响。方法首先用TLR4配体LPS处理Bewo细胞,观察细胞TLR4 mRNA表达的动力学。然后将2μg 1.3倍HBV全基因重组质粒pcDNA3.1(+)-HBV1.3转染Bewo细胞,12h后,以LPS处理3d。最后,用抗TLR4处理Bewo细胞1h后,加入10μg/ml LPS刺激。采用荧光定量RT-PCR、微粒子酶免疫分析法(MEIA)和荧光定量PCR法分别检测细胞TLR4 mRNA表达、HBsAg、HBeAg及HBV DNA水平。结果 LPS可显著诱导Bewo细胞TLR4 mRNA表达(P<0.05),呈时间和剂量依赖性;与对照组比较,LPS可显著抑制HBV复制(P<0.001),LPS对HBV DNA、HBsAg及HBeAg的抑制率(%)分别为29.70±6.03、32.12±5.98和33.89±1.28。抗TLR4可显著逆转LPS对HBV复制的抑制作用(P<0.01)。结论 TLR4介导的天然免疫可一定程度地抑制Bewo细胞中HBV复制,为防治HBV宫内感染提供了新的途径。 展开更多

关键词 TOLL样受体4 bewo细胞 乙型肝炎病毒 复制

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基于代谢组学方法研究乌头碱和苯甲酰乌头原碱对BeWo细胞的毒性机制 被引量：15

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作者 谢辉辉 谢彤 +5 位作者 徐建亚 沈存思 赖子娟 徐牛生 汪受传 单进军 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2015年第12期1808-1813,共6页

以BeWo细胞建立体外胎盘模型,采用基于气相色谱与质谱联用技术(GC-MS/MS)的代谢组学方法,研究乌头碱及其代谢产物苯甲酰乌头原碱的生殖毒性机制。收集不同时间点(0,6,12,24和36 h)药物干预后的BeWo细胞裂解液,通过GC-MS/MS分析获得细胞... 以BeWo细胞建立体外胎盘模型,采用基于气相色谱与质谱联用技术(GC-MS/MS)的代谢组学方法,研究乌头碱及其代谢产物苯甲酰乌头原碱的生殖毒性机制。收集不同时间点(0,6,12,24和36 h)药物干预后的BeWo细胞裂解液,通过GC-MS/MS分析获得细胞代谢轮廓;正交偏最小二乘法-判别分析(OPLSDA)显示,BeWo细胞内代谢物在药物干预后呈动态变化。进一步通过变量重要性投影(VIP)值和单因素方差分析筛选差异性代谢物,最终鉴定出脯氨酸、甘氨酸、苏氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、乙酰谷氨酰胺、赖氨酸、组氨酸、葡萄糖、半乳糖、琥珀酸共11个差异性代谢物。经Metaboanalyst分析,主要涉及谷氨酰胺和谷氨酸代谢,甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢,丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢,赖氨酸降解,精氨酸和脯氨酸代谢,组氨酸代谢等6条代谢通路。实验结果表明,乌头碱和苯甲酰乌头原碱主要通过影响氨基酸代谢对BeWo细胞产生生殖毒性作用。 展开更多

关键词 乌头碱 苯甲酰乌头原碱 气相色谱-质谱联用 代谢组学 Be Wo细胞 胚胎毒性

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Toll样受体3介导抑制Bewo细胞中乙型肝炎病毒复制 被引量：1

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作者 资捷 王前 +2 位作者 郑磊 熊石龙 王芳 《中国优生与遗传杂志》 2011年第10期16-18,111,共4页

目的探讨Toll样受体3(TLR3)介导的天然免疫对Bewo细胞中乙型肝炎病毒(HBV)复制的影响。方法首先用TLR3配体polyI:C处理Bewo细胞,观察细胞TLR3 mRNA表达的动力学。然后将2μg 1.3倍HBV全基因重组质粒pcDNA3.1(+)-HBV1.3转染Bewo细胞,12h... 目的探讨Toll样受体3(TLR3)介导的天然免疫对Bewo细胞中乙型肝炎病毒(HBV)复制的影响。方法首先用TLR3配体polyI:C处理Bewo细胞,观察细胞TLR3 mRNA表达的动力学。然后将2μg 1.3倍HBV全基因重组质粒pcDNA3.1(+)-HBV1.3转染Bewo细胞,12h后,以polyI:C处理3d。最后,用抗TLR3处理Bewo细胞1h后,加入25μg/ml polyI:C刺激。采用荧光定量RT-PCR、微粒子酶免疫分析法(MEIA)和荧光定量PCR法分别检测细胞TLR3mRNA表达、HBsAg、HBeAg及HBV DNA水平。结果 polyI:C可显著诱导Bewo细胞TLR3 mRNA表达(P<0.05),呈时间和剂量依赖性;与对照组比较,polyI:C可显著抑制HBV复制(P<0.001),抗TLR3可显著逆转polyI:C对HBV复制的抑制作用(P<0.01)。结论 TLR3介导的天然免疫能一定程度抑制Bewo细胞中HBV复制,为防治HBV宫内感染提供了新的途径。 展开更多

关键词 TOLL样受体3 bewo细胞 乙型肝炎病毒 复制

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乙酰普鲁兰纳米粒子BeWo b30细胞毒性及摄取研究

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作者 蒋子雯 周志敏 +3 位作者 唐红波 杜博 张其清 代荫梅 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2016年第4期418-423,共6页

目的通过乙酰普鲁兰纳米粒子对人绒毛膜癌细胞（BeWo b30）的细胞毒性以及细胞摄取研究,为普鲁兰基纳米药物跨胎盘屏障机制及妊娠期用药提供科学依据。方法以透析法制备异硫氰酸荧光素标记的乙酰普鲁兰纳米粒子（fluorescein isothiocya... 目的通过乙酰普鲁兰纳米粒子对人绒毛膜癌细胞（BeWo b30）的细胞毒性以及细胞摄取研究,为普鲁兰基纳米药物跨胎盘屏障机制及妊娠期用药提供科学依据。方法以透析法制备异硫氰酸荧光素标记的乙酰普鲁兰纳米粒子（fluorescein isothiocyanate labelled pullulan acetate nanoparticles,PA-FITC NPs）,分别利用激光粒度分析仪、扫描电镜、透射电镜考察乙酰普鲁兰纳米粒子粒径、Zeta电位、形貌及结构;用细胞计数试剂盒-8（cell counting kit-8,CCK-8）检测细胞生长曲线,考察不同浓度纳米粒子（0.4~2.0 mg/m L）对BeWo b30细胞的细胞毒性;考察纳米粒子浓度、孵育时间、孵育温度对BeWo b30细胞摄取纳米粒子的影响。结果 PA-FITC纳米粒子水合直径为（348.0±114.3）nm,Zeta电位为（-26.0±5.1）m V,呈表面光滑、内部结构规整的球形。PA-FITC纳米粒子在0.4~2.0 mg/m L浓度范围内细胞存活率为95.0%~100.5%,差异无统计学意义（P〉0.05）;BeWo b30细胞摄取实验表明：细胞吞噬纳米粒子的量随着PA-FITC NPs的浓度升高和孵育时间延长而增大;当孵育温度从37℃降低至4℃,PA-FITC NPs的细胞摄取量显著降低（P〈0.05）。结论乙酰普鲁兰纳米粒子呈球形,对BeWo b30细胞无明显细胞毒性;BeWo b30细胞摄取PA-FITC纳米粒子与纳米粒子浓度、孵育时间和孵育温度呈正相关。 展开更多

关键词 普鲁兰 bewo b30细胞 纳米药物 妊娠期用药

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