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苦参碱上调LncRNA BDNF-AS抑制宫颈鳞癌细胞增殖的机制研究 被引量：13
1
作者 刘平 陈晓杰 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期1593-1599,共7页
目的探讨苦参碱抑制宫颈鳞癌细胞增殖的分子机制。方法 CCK-8法检测苦参碱对宫颈癌细胞Si Ha和C33A存活率的影响;流式细胞仪检测细胞周期;高通量测序技术检测苦参碱作用前后宫颈鳞癌细胞中差异表达的RNA。qRT-PCR和Western blotting法... 目的探讨苦参碱抑制宫颈鳞癌细胞增殖的分子机制。方法 CCK-8法检测苦参碱对宫颈癌细胞Si Ha和C33A存活率的影响;流式细胞仪检测细胞周期;高通量测序技术检测苦参碱作用前后宫颈鳞癌细胞中差异表达的RNA。qRT-PCR和Western blotting法检测人脑源性神经营养因子(BDNF)-AS、BDNF mRNA和蛋白在宫颈鳞癌细胞及异体种植瘤组织中的表达。收集2013年3月-2016年12月河南省南阳市第二人民医院32例宫颈鳞状细胞癌组织,运用q RT-PCR法检测宫颈鳞状细胞癌组织中BDNF-AS的表达。结果苦参碱能够明显抑制宫颈鳞癌细胞的增殖。苦参碱作用前后,共筛选出924个差异表达基因。其中637个(68.9%)基因表达水平上调,287个(31.1%)基因表达水平下调。苦参碱能上调BDNF-AS基因的表达水平。q RT-PCR显示BDNF-AS的表达与宫颈鳞状细胞癌病理分化程度和临床分期之间存在负相关(P<0.05),其表达与预后相关(P=0.04)。Cox回归多因素分析发现BDNF-AS可作为宫颈鳞状细胞癌患者独立的预后因子。结论 BDNF-AS在宫颈鳞状细胞癌的发生发展中可能发挥抑癌作用,苦参碱可能通过上调BDNF-AS抑制宫颈鳞状细胞癌的增殖。 展开更多
关键词 苦参碱 宫颈鳞状细胞癌 高通量测序 bdnf-as 人脑源性神经营养因子
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lncRNA BDNF-AS在氧糖剥夺/复氧复糖条件下的表达、定位及互作蛋白质分析
2
作者 李建明 唐亮 +2 位作者 向勤 杨大为 项炬 《生命科学研究》 CAS 2023年第1期1-8,共8页
脑缺血缺氧会引起长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)表达变化。为了探究lncRNA BDNF-AS在氧糖剥夺/复氧复糖条件下的表达、定位及互作蛋白质,将SH-SY5Y细胞缺氧缺糖8 h、复氧复糖24 h,构建氧糖剥夺/复氧复糖细胞模型;采用CCK-8... 脑缺血缺氧会引起长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)表达变化。为了探究lncRNA BDNF-AS在氧糖剥夺/复氧复糖条件下的表达、定位及互作蛋白质,将SH-SY5Y细胞缺氧缺糖8 h、复氧复糖24 h,构建氧糖剥夺/复氧复糖细胞模型;采用CCK-8(Cell Counting Kit-8)法检测细胞活力;采用qRT-PCR检测核质中lncRNA BDNF-AS表达水平;利用pull-down和质谱技术对lncRNA BDNF-AS互作蛋白质进行鉴定;利用基因本体论(Gene Ontology,GO)、京都基因和基因组数据库(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)分析互作蛋白质的功能及参与的通路;利用STRING数据库分析蛋白质-蛋白质相互作用网络。结果显示:氧糖剥夺/复氧复糖条件下,lncRNA BDNF-AS表达量显著升高,且胞质表达量显著高于胞核;氧糖剥夺/复氧复糖组有120种蛋白质可能与lncRNA BDNF-AS存在潜在的相互作用。进一步的生物信息学分析表明,lncRNA-BDNF-AS可能与UBA52、NKAP、TBK1、RAB1A、RPL38等蛋白质存在互作关系。综上可知,lncRNA BDNF-AS可能通过绑定自噬和凋亡相关蛋白质影响神经细胞功能。 展开更多
关键词 lncRNA bdnf-as 脑缺血 氧糖剥夺/复氧复糖(OGD/R) 互作蛋白质
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BDNF-AS基因及其突变体对HepG2细胞增殖和相关信号通路的影响 被引量：1
3
作者 董安妮 祝立权 +2 位作者 周品一 周勇 郭大伟 《现代肿瘤医学》 CAS 2019年第9期1495-1499,共5页
目的:探讨BDNF-AS基因对肝癌细胞HepG2增殖的作用,以及对细胞内信号通路的影响。方法:采用BDNF-AS过表达质粒或BDNF-AS与BDNF基因完全互补序列缺失突变质粒转染肝癌细胞系HepG2,建立过表达BDNF-AS及其突变体的稳转细胞系,采用qRT-PCR方... 目的:探讨BDNF-AS基因对肝癌细胞HepG2增殖的作用,以及对细胞内信号通路的影响。方法:采用BDNF-AS过表达质粒或BDNF-AS与BDNF基因完全互补序列缺失突变质粒转染肝癌细胞系HepG2,建立过表达BDNF-AS及其突变体的稳转细胞系,采用qRT-PCR方法检测HepG2细胞中BDNF-AS和BDNF mRNA水平,采用Western blot检测细胞中BDNF蛋白水平,采用EdU掺入实验评价细胞增殖情况,采用Western blot方法检测细胞内相关信号通路的活化情况。结果:稳定表达BDNF-AS及其突变体的细胞其BDNF-AS水平显著上调,而只有稳定表达BDNF-AS的细胞其BDNF mRNA水平显著下调,细胞增殖受到抑制。各组细胞BDNF蛋白水平无显著差异。各组细胞中PDK1和PKC底物的磷酸化水平上调,而过表达BDNF-AS组与突变组之间有差异。各组细胞中CK2底物的磷酸化水平下调,而过表达BDNF-AS组与突变组之间无显著差异。结论:HepG2细胞中稳定表达的BDNF-AS可能通过与BDNF基因的完全互补序列调控BDNF mRNA表达水平。稳定表达的BDNF-AS通过干扰CK2底物的磷酸化影响HepG2细胞的增殖能力,并且可能通过促进PDK1、PKC底物的磷酸化,影响HepG2细胞的其他生物学行为。 展开更多
关键词 bdnf-as 肝癌细胞 增殖 信号通路
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LncRNA BDNF-AS靶向miR-765影响缺氧缺糖诱导的PC12细胞神经损伤的实验研究 被引量：1
4
作者 蒋邦治 唐永刚 +2 位作者 韩志安 陈林坤 韦家俊 《河北医药》 CAS 2022年第20期3075-3078,3083,共5页
目的探讨LncRNA BDNF-AS对缺氧缺糖诱导的PC12细胞神经损伤的影响及分子机制。方法PC12细胞分为对照组、模型组、si-LncRNA BDNF-AS+模型组、si-NC+模型组、miR-765+模型组、miR-NC+模型组、anti-miR-NC+si-LncRNA BDNF-AS+模型组、anti... 目的探讨LncRNA BDNF-AS对缺氧缺糖诱导的PC12细胞神经损伤的影响及分子机制。方法PC12细胞分为对照组、模型组、si-LncRNA BDNF-AS+模型组、si-NC+模型组、miR-765+模型组、miR-NC+模型组、anti-miR-NC+si-LncRNA BDNF-AS+模型组、anti-miR-765+si-LncRNA BDNF-AS+模型组;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测LncRNA BDNF-AS和miR-765的表达水平;流式细胞术检测细胞凋亡;蛋白质印迹法检测蛋白表达;酶联免疫吸附法(ELISA)检测丙二醛(MDA)、超氧化歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)水平;双荧光素酶报告实验检测LncRNA BDNF-AS和miR-765的靶向关系。结果与对照组比较,模型组LncRNA BDNF-AS表达水平升高,miR-765表达水平降低,PC12细胞凋亡率以及Cleaved-caspase3、Bax表达水平升高,MDA含量升高,SOD和CAT活性降低(P<0.05)。抑制LncRNA BDNF-AS表达或过表达miR-765后,PC12细胞凋亡率、Cleaved-caspase3和Bax表达水平降低,MDA含量降低,SOD和CAT活性升高(P<0.05)。LncRNA BDNF-AS靶向调控miR-765;抑制miR-765可以逆转低表达LncRNA BDNF-AS对缺氧缺糖诱导的PC12细胞神经损伤的影响。结论抑制LncRNA BDNF-AS表达通过靶向调控miR-765抑制缺氧缺糖诱导的PC12细胞神经损伤。 展开更多
关键词 LncRNA bdnf-as miR-765 缺氧缺糖 PC12细胞 神经损伤
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lncRNA BDNF-AS和BDNF在精神分裂症患者血清中的表达及意义 被引量：8
5
作者 王璞 刘冠军 徐素霞 《精神医学杂志》 2020年第5期335-338,共4页
目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)脑源性神经营养因子反义RNA(BDNF-AS)和脑源性神经营养因子(BDNF)在精神分裂症患者血清中的表达及其在精神分裂症中作用。方法选取63例精神分裂症患者(研究组)和同时期60例健康体检者(对照组)。实时荧光定... 目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)脑源性神经营养因子反义RNA(BDNF-AS)和脑源性神经营养因子(BDNF)在精神分裂症患者血清中的表达及其在精神分裂症中作用。方法选取63例精神分裂症患者(研究组)和同时期60例健康体检者(对照组)。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测两组患者血清lncRNA BDNF-AS和BDNF mRNA表达水平。用阳性和阴性综合征量表(PANSS)评定精神分裂症患者精神症状,威斯康星卡片分类测验(WCST)评定认知功能。Pearson相关性分析精神分裂症患者血清中lncRNA BDNF-AS与BDNF mRNA的相关性及两者与PANSS、WCST评分的相关性。结果研究组血清中lncRNA BDNF-AS表达水平高于对照组(P<0.05),BDNF mRNA表达水平低于对照组(P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,研究组血清中lncRNA BDNF-AS与BDNF mRNA表达水平呈负相关(P<0.05)。研究组血清中lncRNA BDNF-AS表达与PANSS攻击危险性因子、WCST错误应答数和非持续性错误数均呈正相关(P<0.05);BDNF mRNA表达与PANSS阴性症状和攻击危险性因子及WCST错误应答数和非持续性错误数均呈负相关(P<0.05)。结论精神分裂症患者血清中lncRNA BDNF-AS呈高表达,BDNF mRNA呈低表达,且两者呈负相关,均与认知能力相关指标密切相关。 展开更多
关键词 精神分裂症 lncRNA bdnf-as BDNF 认知功能
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双相情感障碍患者血浆lnc RNA BDNF-AS和GOMAFU的检测水平及意义 被引量：9
6
作者 栾明友 王德军 +1 位作者 龚越鹏 苗贞勇 《国际精神病学杂志》 2020年第4期677-681,共5页
目的检测双相情感障碍患者血浆脑源性神经营养因子反义长链非编码lnc RNA(brainderived neurotrophic factor-antisense long-chain non-coding RNA,lnc RNA BDNF-AS)和GOMAFU[一种长链非编码RNA,又称为MIAT(myocardial infarction asso... 目的检测双相情感障碍患者血浆脑源性神经营养因子反义长链非编码lnc RNA(brainderived neurotrophic factor-antisense long-chain non-coding RNA,lnc RNA BDNF-AS)和GOMAFU[一种长链非编码RNA,又称为MIAT(myocardial infarction associated transcript,心肌梗死相关转录本)]水平,并探讨其临床意义。方法选取2016年9月~2018年9月本院收治的112例双相情感障碍患者(躁狂组58例,抑郁组54例)、46例精神分裂症患者及45例健康体检者为研究对象,采用qRT-PCR测定受试者血浆lnc RNA BDNF-AS、脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)和GOMAFU表达水平,分析BDNF-AS、GOMAFU诊断价值并探究两者与症状相关性。结果精神分裂组、双相情感障碍组血浆BDNF-AS水平较对照组显著升高(P<0.05),且双相情感障碍组较精神分裂组高,BDNF与GOMAFU水平较对照组显著降低,且双相情感障碍组较精神分裂组低(P<0.05);血浆BDNF-AS、GOMAFU水平诊断双相情感障碍的曲线下面积(area under the curve,AUC)分别为0.843、0.736,分界点分别为6.75、0.68,敏感度分别为79.83%、95.56%,特异度分别为79.76%、57.26%;狂躁组和抑郁组血浆BDNF-AS水平较对照组显著升高,且狂躁组较抑郁组高,而BDNF与GOMAFU水平较对照组显著降低,且狂躁组较抑郁组低(P<0.05);狂躁组、抑郁组血浆BDNF-AS和GOMAFU水平与杨氏躁狂评定量表(Young manic rating scale,YMRS)及汉密尔顿抑郁量表(Hamilton rating scale for depression,HAMD)评分相关性均无统计学意义(P>0.05)。结论双相情感障碍患者血浆lnc RNA BDNF-AS水平上调,GOMAFU水平下调,二者可能作为临床诊断潜在参考指标。 展开更多
关键词 双相情感障碍 bdnf-as GOMAFU 狂躁 抑郁
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BDNF-AS/miR-145-5p轴对高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤的影响 被引量：2
7
作者 贾倩倩 王东海 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 2022年第2期157-161,共5页
目的探讨脑源性神经营养因子反义RNA(brain-derived neurotrophic factor-antisense, BDNF-AS)对高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤的影响和可能机制。方法体外培养肾小管上皮细胞HK-2, 分别转染BDNF-AS小干扰RNA、miR-145-5p模拟物或共转染... 目的探讨脑源性神经营养因子反义RNA(brain-derived neurotrophic factor-antisense, BDNF-AS)对高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤的影响和可能机制。方法体外培养肾小管上皮细胞HK-2, 分别转染BDNF-AS小干扰RNA、miR-145-5p模拟物或共转染BDNF-AS小干扰RNA和miR-145-5p抑制剂, 之后采用30 mmol/L葡萄糖干预转染后的细胞24 h, 用RT-qPCR法检测细胞中BDNF-AS和miR-145-5p的表达, 用CCK-8法检测细胞增殖, 流式细胞术检测细胞凋亡, Western印迹法检测细胞中Bcl-2和Bax蛋白的表达, 酶联免疫吸附法检测细胞培养上清中IL-1β和IL-6的水平。用双荧光素酶报告基因实验验证BDNF-AS和miR-145-5p的调控关系。结果高糖处理促进了HK-2细胞中BDNF-AS的表达(P<0.05), 而抑制了miR-145-5p的表达(P<0.05)。干扰BDNF-AS或过表达miR-145-5p降低了高糖诱导的HK-2细胞抑制率、凋亡率及Bax蛋白、IL-1β和IL-6的表达(P<0.05), 促进了Bcl-2蛋白的表达(P<0.05)。干扰miR-145-5p逆转了干扰BDNF-AS对高糖诱导的HK-2细胞增殖、凋亡及IL-1β和IL-6表达的影响。BDNF-AS可靶向结合并负调控miR-145-5p。结论干扰BDNF-AS可能通过靶向负调控miR-145-5p促进高糖诱导的肾小管上皮细胞增殖, 并抑制细胞凋亡及炎症因子表达。 展开更多
关键词 肾小管上皮细胞 bdnf-as miR-145-5p 细胞凋亡 炎症
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