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BCSC-1与IQGAP1对乳腺癌细胞迁移的影响及其在浸润性导管癌中的临床意义
1
作者 张庆晨 马媛 +5 位作者 钟沛 任思凡 郝玮 潘依 鞠吉雨 赵春玲 《中国细胞生物学学报》 2025年第7期1512-1522,共11页
该研究旨在探讨BCSC-1与IQGAP1对乳腺癌细胞迁移的影响及其在乳腺浸润性导管癌中的临床意义。免疫沉淀实验检测乳腺癌细胞MCF-7中BCSC-1与IQGAP1是否存在相互作用;细胞免疫荧光实验检测MCF-7细胞中BCSC-1与IQGAP1的共定位情况;Western b... 该研究旨在探讨BCSC-1与IQGAP1对乳腺癌细胞迁移的影响及其在乳腺浸润性导管癌中的临床意义。免疫沉淀实验检测乳腺癌细胞MCF-7中BCSC-1与IQGAP1是否存在相互作用;细胞免疫荧光实验检测MCF-7细胞中BCSC-1与IQGAP1的共定位情况;Western blot检测BCSC-1、IQGAP1分别过表达对对方表达水平的影响;细胞划痕实验、细胞免疫荧光实验结合RNA干扰检测BCSC-1与IQGAP1在迁移的MCF-7、MDA-MB-231细胞中的定位情况及二者在细胞膜前缘定位的相互依赖性;Western blot检测各种乳腺癌细胞中BCSC-1与IQGAP1的蛋白表达情况;免疫组织化学染色法检测BCSC-1与IQGAP1在乳腺浸润性导管癌与癌旁组织中的表达情况及与乳腺浸润性导管癌临床病理特征关系的相关性。在MCF-7细胞中BCSC-1与IQGAP1存在相互作用及共定位;BCSC-1、IQGAP1的分别过表达并不影响彼此的表达水平;无论MCF-7和MDA-MB-231是处于随机迁移状态,还是处于定向迁移状态,BCSC-1都定位在乳腺癌细胞胞质以及膜前缘,与IQGAP1存在着共定位分布,且二者对将彼此募集到膜前缘具有相互依赖性;在多种乳腺癌细胞中,BCSC-1呈低表达而IQGAP1呈高表达;与癌旁组织相比,在浸润性导管癌组织中,BCSC-1的表达下调(P<0.05),IQGAP1的表达上调(P<0.05);在浸润性导管癌组织中,BCSC-1的表达水平与乳腺癌的组织学级别、淋巴结转移有关(P<0.05),与ER、PR和HER2的状态无关(P>0.05),而IQGAP1的高表达水平与淋巴结转移有关(P<0.05),与HER2的状态有关(P<0.05);BCSC-1和IQGAP1的表达呈负相关(R=–0.416,P<0.05)。BCSC-1和IQGAP1存在相互作用,协同调控乳腺癌细胞迁移,二者参与了乳腺浸润性导管癌的发展,并与其转移性相关。 展开更多
关键词 bcsc-1 IQGAP1 细胞迁移 浸润性导管癌
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BCSC-1基因异位表达抑制鼻咽癌细胞的恶性生物学行为 被引量：7
2
作者 陈双玲 周异群 +3 位作者 田云 鞠吉雨 刘音 朱立平 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期612-617,共6页
目的研究BCSC-1基因异位表达对人鼻咽癌细胞CNE-2L2恶性生物学行为的影响。方法RT-PCR扩增BCSC-1cDNA,分别构建原核重组表达载体pMAL-c2X-BCSC-1和真核重组表达载体pcDNA4/myc-HisA-BCSC-1。在原核细胞表达BCSC-1蛋白。用BCSC-1蛋白免... 目的研究BCSC-1基因异位表达对人鼻咽癌细胞CNE-2L2恶性生物学行为的影响。方法RT-PCR扩增BCSC-1cDNA,分别构建原核重组表达载体pMAL-c2X-BCSC-1和真核重组表达载体pcDNA4/myc-HisA-BCSC-1。在原核细胞表达BCSC-1蛋白。用BCSC-1蛋白免疫新西兰白兔,制备BCSC-1抗血清。采用实时定量RT-PCR与用BCSC-1抗血清免疫荧光染色确认野生型CNE-2L2细胞的BCSC-1基因低表达。藉脂质体把pcDNA4/myc-HisA-BCSC-1转染入野生型CNE-2L2细胞。Westernblot检测BCSC-1基因在野生型CNE-2L2细胞异位表达。用体外培养中的生长曲线和集落生成检测细胞生长。接种细胞于裸鼠,定时测量肿瘤大小。小鼠肺做连续组织切片,观察肿瘤的肺转移。结果制备了BCSC-1抗血清。明确BCSC-1基因在野生型CNE-2L2细胞的表达极低。制备了BCSC-1基因异位表达的CNE-2L2细胞。与对照细胞(野生型CNE-2L2细胞和转染pcDNA4/myc-HisA的CNE-2L2细胞)相比,BCSC-1基因异位表达的CNE-2L2细胞在培养中的生长、集落生成、细胞的成瘤性生长和所长肿瘤的肺转移均明显抑制。结论BCSC-1基因异位表达对CNE-2L2细胞的恶性生物学行为有明显抑制作用。 展开更多
关键词 bcsc-1基因 鼻咽癌 生长曲线 集落生成 成瘤性生长 转移
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腺病毒介导BCSC-1基因实验性治疗鼻咽癌 被引量：4
3
作者 周异群 鞠吉雨 +2 位作者 田云 刘音 朱立平 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期208-210,共3页
目的探讨抑癌基因BCSC-1对肿瘤的治疗作用。方法制备重组腺病毒Ad5-BCSC-1。用CellTiter 96 A-queous细胞增殖单一溶液检测试剂盒检测细胞增殖。肿瘤体内注射Ad5-BCSC-1,以注射Ad5-egfp或PBS作为对照,1周后重复注射,再2周后处死小鼠,称... 目的探讨抑癌基因BCSC-1对肿瘤的治疗作用。方法制备重组腺病毒Ad5-BCSC-1。用CellTiter 96 A-queous细胞增殖单一溶液检测试剂盒检测细胞增殖。肿瘤体内注射Ad5-BCSC-1,以注射Ad5-egfp或PBS作为对照,1周后重复注射,再2周后处死小鼠,称瘤重。结果Ad5-BCSC-1感染的CNE-2L2细胞的生长明显减慢,细胞在培养中聚集成大细胞团块。注射PBS、Ad5-egfp和Ad5-BCSC-1的小鼠CNE-2L2肿瘤的平均瘤重分别为(2·28±0·73)、(2·07±0·40)和(0·58±0·32)g。Ad5-BCSC-1组显著低于PBS和Ad5-egfp组(P<0·05)。结论瘤体内注射Ad5-BCSC-1能抑制CNE-2L2肿瘤的生长,提示BCSC-1基因治疗对BCSC-1基因缺失或表达低下的肿瘤可能有治疗作用。 展开更多
关键词 bcsc-1基因 肿瘤 基因治疗 腺病毒
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BCSC-1基因异位表达对人小细胞肺癌细胞增殖的抑制效应 被引量：4
4
作者 袁芳 鞠吉雨 +3 位作者 唐媛媛 邸大琳 王丽娜 孙萍 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期336-341,共6页
背景与目的:人乳腺癌候选抑制蛋白1(breast cancer suppressor candidate 1,BCSC-1)基因已被证实是一种新型抑癌基因,在多种肿瘤细胞均存在表达缺失的现象。该研究通过将BCSC-1基因转染至人小细胞肺癌细胞株NCI-H446,探讨BCSC-1基因异... 背景与目的:人乳腺癌候选抑制蛋白1(breast cancer suppressor candidate 1,BCSC-1)基因已被证实是一种新型抑癌基因,在多种肿瘤细胞均存在表达缺失的现象。该研究通过将BCSC-1基因转染至人小细胞肺癌细胞株NCI-H446,探讨BCSC-1基因异位表达对NCI-H446细胞增殖的抑制效应。方法:用PCR扩增BCSC-1 cDNA,构建真核重组表达载体pcDNA3.1/v5-HisB-BCSC-1。通过脂质体把pcDNA3.1/v5-HisB-BCSC-1和空质粒pcDNA3.1/v5-HisB转染入野生型NCI-H446细胞。以转染空质粒pcDNA3.1/v5-HisB的NCI-H446细胞为对照组,野生型NCI-H446细胞为空白对照组。采用流式细胞仪检测细胞周期;MTT法检测细胞增殖;免疫组化确认BCSC-1基因和CD44分子在NCI-H446细胞中的表达。结果:成功构建了真核重组表达载体pcDNA3.1/v5-HisB-BCSC-1,制备了BCSC-1基因异位高表达的NCI-H446稳定细胞株。细胞周期分析显示,异位表达BCSC-1的NCI-H446细胞大部分阻滞在G0/G1期,明显高于对照组和空白组(P<0.01)。MTT法检测显示,异位表达BCSC-1的NCI-H446细胞与对照组、空白组相比,生长速度明显减慢(P<0.05)。免疫组化显示异位表达BCSC-1的NCI-H446细胞CD44表达增高。结论:BCSC-1基因的异位表达对NCI-H446细胞的恶性增殖行为有明显的抑制作用,这种抑制作用可能与细胞周期阻滞和黏附分子CD44表达增高有关。 展开更多
关键词 bcsc-1基因 NCI H446细胞 生长曲线 细胞周期 CD44
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BCSC-1基因异位表达致鼻咽癌细胞CNE-2L2黏附性增强及细胞周期阻滞 被引量：3
5
作者 陈双玲 周异群 +3 位作者 田云 鞠吉雨 刘音 朱立平 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期533-537,共5页
目的探讨BCSC-1基因异位表达导致人鼻咽癌细胞CNE-2L2恶性行为减弱的机制。方法采用碘化丙啶染色DNA,流式细胞法检测细胞周期;Hoechest33258染色分析细胞分裂情况;细胞聚集实验检测细胞的黏附性;Western印迹分别检测E-钙黏蛋白、α-cate... 目的探讨BCSC-1基因异位表达导致人鼻咽癌细胞CNE-2L2恶性行为减弱的机制。方法采用碘化丙啶染色DNA,流式细胞法检测细胞周期;Hoechest33258染色分析细胞分裂情况;细胞聚集实验检测细胞的黏附性;Western印迹分别检测E-钙黏蛋白、α-catenin和p53的表达。结果细胞周期分析显示异位表达BCSC-1的CNE-2L2细胞、野生型CNE-2L2细胞和转染空载体的CNE-2L2细胞分别有55.1%、43.4%和39.4%处于G0/G1期,分别有25.2%、28.7%和30.9%处于S期,分别有19.7%、27.9%和29.7%处于G2/M期。野生型CNE-2L2细胞和转染空载体的CNE-2L2细胞有较多细胞处于有丝分裂相,异位表达BCSC-1的CNE-2L2细胞几乎见不到有丝分裂相。异位表达BCSC-1的CNE-2L2细胞的黏附性和E-钙黏蛋白、α-catenin及p53的表达水平均高于野生型CNE-2L2细胞和转染空载体的CNE-2L2细胞。结论异位表达BCSC-1的CNE-2L2细胞的黏附性增强可能与E-钙黏蛋白和α-catenin表达增强相关;异位表达BCSC-1的CNE-2L2细胞阻滞于G1期可能与p53表达增加相关。这些变化可能在细胞恶性行为减弱中发挥作用。 展开更多
关键词 人鼻咽癌细胞CNE-2L2 bcsc-1基因 黏附性 细胞周期 E-钙黏蛋白 Α-CATENIN p53
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BCSC-1基因异位表达对MDA-MB-231侵袭能力影响及其机制探讨 被引量：2
6
作者 邸大琳 陈蕾 +4 位作者 王丽娜 王洪伟 魏兵 王会东 鞠吉雨 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2014年第6期415-419,共5页
目的:利用已构建的乳腺癌候选抑制蛋白-1(breast cancer suppressor candidate 1,BCSC-1)基因真核表达质粒转染人乳腺癌细胞株MDA-MB-231,观察BCSC-1基因异位表达对MDA-MB-231细胞体外侵袭能力的影响,初步探讨其影响机制。方法:利用脂... 目的:利用已构建的乳腺癌候选抑制蛋白-1(breast cancer suppressor candidate 1,BCSC-1)基因真核表达质粒转染人乳腺癌细胞株MDA-MB-231,观察BCSC-1基因异位表达对MDA-MB-231细胞体外侵袭能力的影响,初步探讨其影响机制。方法:利用脂质体将pcDNA3.1/v5-HisB-BCSC-1和空质粒pcDNA3.1/v5-HisB转染野生型MDA-MB-231细胞,以转染空质粒pcDNA3.1/v5-HisB的MDA-MB-231细胞为对照组,野生型MDA-MB-231细胞为空白对照组,转染后经G418加压筛选获得稳定BCSC-1表达细胞株。细胞划痕和Transwell细胞侵袭实验分析转染前后细胞侵袭能力的改变,实时荧光定量PCR分析转染前后基因的变化,细胞免疫组化分析转染前后BCSC-1以及细胞间黏附分子-1(intercellular cell adhesion molecule-1,ICAM-1)的变化。结果:转染后成功获得BCSC-1基因异位高表达稳定细胞株。细胞划痕实验显示,转基因组细胞平均迁移距离为(105.33±13.61)μm,较对照组(225±18.02)μm和对照组(236±16.46)μm明显降低,F=60.50,P=0.002。细胞侵袭实验显示,转基因组24h平均穿膜细胞数为34.67±2.52,较空白对照组56.66±2.08和对照组63.33±4.16明显降低,F=72.33,P=0.005。实时定量荧光PCR结果显示,转基因组BCSC-1表达水平为32.66±2.51,较对照组2.33±1.52和空白对照组明显升高,F=333.12,P=0.001;转基因组ICAM-1表达水平为28.67±3.79,较对照组3.33±1.53和空白对照组明显升高,F=127.14,P=0.003。细胞免疫组化结果显示,转染后BCSC-1以及ICAM-1表达水平明显增高。结论:BCSC-1基因的异位表达对MDA-MB-231细胞体外转移和侵袭能力有明显的抑制作用,这种抑制作用可能与ICAM-1表达增高有关。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 bcsc-1基因 基因表达 MDA-MB-231细胞
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抑癌基因BCSC-1原核表达载体的构建及诱导表达
7
作者 袁芳 鞠吉雨 +3 位作者 王丽娜 邸大琳 刘艳菲 冯永堂 《潍坊医学院学报》 2010年第1期41-43,共3页
目的 构建BCSC-1基因原核表达载体并进行诱导表达、纯化.方法 PCR方法从腺病毒穿梭载体pDC316-BCSC-1扩增BCSC-1基因,构建原核表达载体ET30a-BCSC-1,转化感受态E.coli BL21（DE3）,并用IPTG进行诱导表达.SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳方法检... 目的 构建BCSC-1基因原核表达载体并进行诱导表达、纯化.方法 PCR方法从腺病毒穿梭载体pDC316-BCSC-1扩增BCSC-1基因,构建原核表达载体ET30a-BCSC-1,转化感受态E.coli BL21（DE3）,并用IPTG进行诱导表达.SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳方法检测目的 蛋白的表达,并用超声洗涤方法进行目的 蛋白洗涤纯化.结果 成功构建原核表达载体pET30a-BCSC-1;在IPTG诱导下在E.coli BL21（DE3）中高效表达相对分子质量（Mr）为86 000的重组BCSC-1蛋白,目的 蛋白主要以包涵体的形式存在于沉淀中,经超声洗涤纯化后,重组蛋白纯度可达85%以上.结论 利用构建的原核表达载体成功表达出BCSC-1蛋白,为进一步制备抗BCSC-1的单克隆抗体及在临床中的应用打下良好基础. 展开更多
关键词 bcsc-1蛋白 载体构建 原核表达
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BCSC-1基因慢病毒干扰载体的构建与鉴定
8
作者 王洪伟 刘义帅 +3 位作者 邸大琳 魏兵 吴国庆 鞠吉雨 《潍坊医学院学报》 2014年第1期1-4,共4页
目的构建BCSC-1基因慢病毒RNA干扰载体并感染人乳腺癌细胞MCF-7,实时荧光定量PCR(QPCR)检测干扰效果。方法 设计并合成两条针对人BCSC-1基因的干扰序列(BCSC-1 shRNA1和BCSC-1shRNA2)以及对照序列(NS),将其连接入载体PLKO.1-sp6-pgk-GF... 目的构建BCSC-1基因慢病毒RNA干扰载体并感染人乳腺癌细胞MCF-7,实时荧光定量PCR(QPCR)检测干扰效果。方法 设计并合成两条针对人BCSC-1基因的干扰序列(BCSC-1 shRNA1和BCSC-1shRNA2)以及对照序列(NS),将其连接入载体PLKO.1-sp6-pgk-GFP中,得到两个干扰载体和一个阴性对照载体。通过菌落PCR、双酶切和DNA序列测定等方法对其进行鉴定。将干扰载体与辅助包装质粒Lipofectamine2000共转染HEK293T细胞包装慢病毒并收取病毒上清。所获慢病毒颗粒感染人乳腺癌细胞MCF-7,QPCR方法检测两种干扰载体对BCSC-1基因的抑制效率。结果 菌落PCR结果显示目的片段插入PLKO.1-sp6-pgk-GFP载体,DNA测序证实插入序列无误。QPCR结果显示两种干扰载体感染人乳腺癌细胞MCF-7后,BCSC-1 shRNA1组和BCSC-1 shRNA2组BCSC-1基因表达水平分别为0.34±0.046和0.63±0.043,较空白对照组和NS组均有明显下降(P<0.05),且BCSC-1 shRNA1抑制效果优于BCSC-1 shRNA2(P<0.05)。结论 成功构建了两种BCSC-1基因慢病毒干扰载体,两载体均能下调人乳腺癌细胞MCF-7中BCSC-1基因表达水平。 展开更多
关键词 慢病毒载体 bcsc-1 基因 MCF-7细胞 实时荧光定量PCR
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BCSC-1过表达抑制肝癌Bel-7402细胞的增殖、侵袭、黏附和迁移
9
作者 田俊芳 邸大琳 +3 位作者 王洪伟 巩方 郇雪洁 鞠吉雨 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期661-666,共6页
目的:研究人乳腺癌候选抑癌蛋白1基因(breast cancer suppressor candidate 1,BCSC-1)过表达对肝癌Bel-7402细胞的增殖、侵袭、黏附和迁移的影响,并探讨其可能的机制。方法:将pcDNA3.1/v5-HisB-BCSC-1和空质粒pcDNA3.1/v5-HisB转染的Bel... 目的:研究人乳腺癌候选抑癌蛋白1基因(breast cancer suppressor candidate 1,BCSC-1)过表达对肝癌Bel-7402细胞的增殖、侵袭、黏附和迁移的影响,并探讨其可能的机制。方法:将pcDNA3.1/v5-HisB-BCSC-1和空质粒pcDNA3.1/v5-HisB转染的Bel-7402细胞作为BCSC-1组和空载体组,Bel-7402细胞为野生型组。MTT法、Transwell实验、体外黏附实验和划痕实验分别检测BCSC-1过表达对Bel-7402细胞增殖、侵袭、黏附和迁移的影响,Real-time PCR检测BCSC-1过表达对Bel-7402细胞中与细胞增殖、黏附相关的ICAM-1、PTTG、骨桥蛋白(osteopontin,OPN)mRNA表达的影响。结果:转染pcDNA3.1/v5-HisB-BCSC-1后Bel-7402细胞中BCSC-1 mRNA的表达水平显著高于空载体组和野生组细胞[(10.58±0.56)vs(1.10±0.22)、(1.00±0.01),均P<0.01],成功制备BCSC-1稳定过表达的Bel-7402细胞株。与空载体组和野生型组相比,BCSC-1组Bel-7402细胞生长速度明显减慢[72 h:(0.29±0.003)vs(0.34±0.014)、(0.35±0.013),均P<0.05];侵袭率[(76.20±1.85)%vs(93.42±3.24)%、(100.00±1.05)%,均P<0.01)]、黏附率[(58.57±0.84)%vs(97.14±0.84)%、(100.00±1.30)%,均P<0.01]显著降低,迁移距离显著降低[(116.60±10.58)vs(231.33±10.26)、(237.96±11.58)μm,均P<0.01];同时过表达BCSC-1的Bel-7402细胞的OPN mRNA表达量明显降低[(0.12±0.06)vs(0.95±0.14)、(1.00±0.08),均P<0.01],ICAM-1、PTTG mRNA表达无明显变化。结论:BCSC-1过表达能够抑制Bel-7402细胞的增殖、侵袭、黏附和迁移能力,其机制可能与OPN基因表达下降有关。 展开更多
关键词 乳腺癌候选抑癌蛋白1基因(bcsc-1基因) 肝癌 BEL-7402细胞 骨桥蛋白 增殖 侵袭 黏附 迁移
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不同乳腺癌细胞体外侵袭力差异及影响因素 被引量：1
10
作者 邸大琳 王丽娜 +3 位作者 付晓燕 魏兵 王会东 鞠吉雨 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期460-464,共5页
目的探讨不同乳腺癌细胞系体外侵袭能力的差异并筛选其影响基因。方法以2种常见的乳腺癌细胞系MCF-7(低转移株)和MDA-MB-231(高转移株)为研究对象,通过细胞划痕实验、细胞黏附实验以及Transw ell侵袭实验分析2种乳腺癌细胞体外侵袭能力... 目的探讨不同乳腺癌细胞系体外侵袭能力的差异并筛选其影响基因。方法以2种常见的乳腺癌细胞系MCF-7(低转移株)和MDA-MB-231(高转移株)为研究对象,通过细胞划痕实验、细胞黏附实验以及Transw ell侵袭实验分析2种乳腺癌细胞体外侵袭能力差异,实时荧光定量PCR筛选肿瘤侵袭转移相关基因在细胞间的表达差异并采用细胞免疫组化SP法进一步确认。结果 MDA-MB-231细胞24、48 h的平均迁移距离分别为(218.75±20.16)、(211.50±16.54)μm,明显高于MCF-7细胞的迁移距离[分别为(130±29.62)、(119.50±25.65)μm](P<0.01);MDA-MB-231细胞黏附能力明显高于MCF-7细胞;MDA-MB-231细胞24 h平均穿膜细胞数[(57.75±4.19)个]明显多于MCF-7细胞[(35.50±4.20)个](P<0.01);实时荧光定量PCR结果显示,与MCF-7细胞比较,MDA-MB-231细胞中细胞间黏附分子1(ICAM-1)及乳腺癌候选抑制蛋白1(BCSC-1)表达水平[分别为(0.09±0.01)、(0.15±0.03)]均明显降低(P<0.01),而基质金属蛋白酶14(MMP-14)表达水平(14.43±1.01)明显升高(P<0.01)。细胞免疫组化结果显示,MDA-MB-231细胞ICAM-1以及BCSC-1的表达水平明显低于M CF-7细胞,而M M P-14表达水平明显高于M CF-7细胞。结论乳腺癌细胞系M DA-M B-231的体外侵袭能力明显高于MCF-7细胞,细胞侵袭力可能与细胞内ICAM-1、BCSC-1低表达及MMP-14高表达有关。 展开更多
关键词 乳腺癌 侵袭能力 细胞间黏附分子1(ICAM-1) 乳腺癌候选抑制蛋白1(bcsc-1) 基质金属蛋白酶 14(MMP-14)
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