高性能预应力钢绞线盘条SWRH72BCr-1的开发 被引量：9

1

作者 李月云 胡磊 +1 位作者 王雷 童园 《金属热处理》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期31-36,共6页

通过降低碳含量以及Cr、V微合金化设计了盘条成分,并结合热模拟试验优化了轧制工艺,成功开发了高强度高韧性预应力钢绞线盘条SWRH72BCr-1。连续冷却转变曲线（动态CCT曲线）和等温转变曲线（动态TTT曲线）模拟结果表明：在1~5℃/s的冷... 通过降低碳含量以及Cr、V微合金化设计了盘条成分,并结合热模拟试验优化了轧制工艺,成功开发了高强度高韧性预应力钢绞线盘条SWRH72BCr-1。连续冷却转变曲线（动态CCT曲线）和等温转变曲线（动态TTT曲线）模拟结果表明：在1~5℃/s的冷速下冷却生成的组织为珠光体,珠光体的最佳转变温度为575~650℃,且在625℃附近转变时间最短,6 s即可完成转变。盘条试制结果表明：盘条的显微组织主要为索氏体加少量铁素体,抗拉强度大于1200 MPa,断面收缩率大于38%,拉拔时断丝率较低。 展开更多

关键词 SWRH72bcr-1盘条 动态CCT曲线 动态TTT曲线 力学性能 组织

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SH2-ODC/AZ1腺病毒的构建及对BCR-ABL蛋白的降解效应

2

作者 徐敏 高淼 +3 位作者 黄峥兰 陶崑 钟梁 冯文莉 《临床检验杂志》 CAS CSCD 2015年第4期301-305,共5页

目的构建重组腺病毒Ad-SH2-ODC和Ad-AZ1,检测共表达SH2-ODC和AZ1蛋白对BCR-ABL癌蛋白的降解效应。方法PCR扩增src同源结构域2(src homology 2,SH2)、鸟氨酸脱羧酶(ornithine decarboxylase,ODC)及抗酶蛋白1(antizyme 1,AZ1)基因,构建携... 目的构建重组腺病毒Ad-SH2-ODC和Ad-AZ1,检测共表达SH2-ODC和AZ1蛋白对BCR-ABL癌蛋白的降解效应。方法PCR扩增src同源结构域2(src homology 2,SH2)、鸟氨酸脱羧酶(ornithine decarboxylase,ODC)及抗酶蛋白1(antizyme 1,AZ1)基因,构建携带SH2-ODC(SO)或AZ1基因的p Ad Track-CMV腺病毒穿梭质粒,经双酶切和测序鉴定后与腺病毒骨架质粒p Ad Easy-1同源重组,获得重组腺病毒质粒。后者经PacⅠ酶切鉴定后,在人胚肾细胞系AD293中包装、扩增,获得重组腺病毒;腺病毒Ad-SO和Ad-AZ1共感染人白血病细胞系K562,western blot检测目的蛋白的表达。结果双酶切和测序证实,腺病毒穿梭质粒构建正确;PacⅠ酶切结果显示,重组腺病毒质粒构建成功;western blot证实目的蛋白在K562细胞中表达正确,共表达SO和AZ1可以降低BCR-ABL蛋白水平。结论成功构建了Ad-SO和Ad-AZ1重组腺病毒,共表达SO和AZ1可以降解K562细胞中的BCR-ABL蛋白。 展开更多

关键词 bcr-ABL 抗酶蛋白1 SH2结构域 鸟氨酸脱羧酶

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姜黄素对K562细胞增殖的影响及其与P210^(bcr/abl)激活的Ras信号途径的关系 被引量：35

3

作者 吴丽贤 许建华 +1 位作者 吴国华 陈元仲 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期33-37,共5页

目的　研究姜黄素 (Cur)对慢性粒细胞白血病 (CML)细胞株K5 62增殖的影响 ,并且探讨这种影响与P2 10 bcr/abl及其激活的Ras信号途径的关系。方法　应用MTT法检测Cur对细胞增殖的影响 ,应用Westernblot的方法检测蛋白含量的变化。结果　... 目的　研究姜黄素 (Cur)对慢性粒细胞白血病 (CML)细胞株K5 62增殖的影响 ,并且探讨这种影响与P2 10 bcr/abl及其激活的Ras信号途径的关系。方法　应用MTT法检测Cur对细胞增殖的影响 ,应用Westernblot的方法检测蛋白含量的变化。结果　Cur对P2 10 bcr/abl阳性的K5 62细胞抑制作用呈量效、时效关系 ,Cur 10mg·L-1作用 48h对K5 62细胞的抑制率高达 (81 9± 1 0 ) % ;相比之下 ,已知对P2 10 bcr/abl无影响的VP 16作为抗癌药对照 ,对K5 62细胞的抑制作用明显较弱。Cur和VP 16对K5 62细胞的不同作用提示Cur对K5 62细胞作用可能有特异性 ,而这个特异的作用靶点可能就是引起CML对多种化疗药物耐药的CML特征性的P2 10 bcr/abl蛋白。Westernblot的实验结果表明Cur使K5 62细胞P2 10 bcr/abl、MEK 1和c Jun蛋白含量明显减少 ,且呈量效关系 ,相比之下 ,VP 16对K5 62细胞P2 10 bcr/abl的蛋白含量无影响而仅轻微减少MEK 1和c Jun的蛋白含量 ,提示MEK 1和c Jun蛋白含量的减少是非特异性的 ,并且 ,在P2 10 bcr/abl阳性的K5 62细胞 ,Cur除了非特异性地抑制细胞中MEK 1及c Jun的表达外 ,Cur还可能通过特异性地抑制K5 62细胞的特异性靶点P2 10 bcr/abl的表达 ,从而下调其下游的Ras信号途径中的其它信号分子。 展开更多

关键词 细胞增殖 信息途径 姜黄素 P210^bcr/abl MEK-1 C-JUN

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黄连解毒汤通过抑制血红素加氧酶-1发挥逆转慢性粒细胞白血病加速期的作用 被引量：3

4

作者 刘尚勤 谭细友 +5 位作者 李倩 蔡惠丽 荣雯玉 曾宪斌 金小君 马梓 《武汉大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2009年第6期705-709,共5页

目的:探讨黄连解毒汤(HLJDT)对慢性粒细胞白血病(CML)加速期的治疗作用,以及HLJDT及其主要活性成份之一的黄芩素对血红素加氧酶-1(HO-1)表达的影响。方法:通过对1例CML的患者口服HLJDT治疗6个月的观察,外周血检查和骨髓穿刺分析治疗前... 目的:探讨黄连解毒汤(HLJDT)对慢性粒细胞白血病(CML)加速期的治疗作用,以及HLJDT及其主要活性成份之一的黄芩素对血红素加氧酶-1(HO-1)表达的影响。方法:通过对1例CML的患者口服HLJDT治疗6个月的观察,外周血检查和骨髓穿刺分析治疗前后外周血象和骨髓象的变化;流式细胞术分析HLJDT和黄芩素对CML细胞系K562的活细胞计数的影响;逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测患者骨髓单个核细胞HO-1基因的表达;蛋白印记检测经黄芩素处理后K562细胞HO-1蛋白的表达水平。结果:口服HLJDT对CML加速期的治疗有效,可明显降低骨髓和外周血原始粒细胞和早幼粒细胞数,使疾病重新回复到慢性期;并且在体内能降低肿瘤细胞HO-1基因的表达,在体外,HLJDT能抑制K562细胞的增殖,且其主要成份黄芩素亦有相同作用,并且下调HO-1蛋白的表达。结论:HLJDT具有治疗CML加速期的作用,其机理与抑制HO-1基因和蛋白的表达有关;因此,HLJDT具有潜在的临床应用价值。 展开更多

关键词 慢性粒细胞性白血病 血红素加氧酶-1 BCR/ABL融合基因 黄连解毒汤 黄芩素

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慢性粒细胞白血病Ph^1染色体和bcr/abl融合基因检测的意义 被引量：2

5

作者 张福明 袁长吉 +2 位作者 张淑芹 赖增新 王冠军 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期108-110,共3页

目的 :探讨 Ph1染色体和 bcr/ abl融合基因检测在慢性粒细胞白血病诊断中的意义。方法 :选择 95例慢性粒细胞白血病患者和 2 0例缺铁性贫血患者作为研究对象 ,采用骨髓细胞短期培养法制备染色体、采用RT- PCR法分析 bcr/ abl融合基因。... 目的 :探讨 Ph1染色体和 bcr/ abl融合基因检测在慢性粒细胞白血病诊断中的意义。方法 :选择 95例慢性粒细胞白血病患者和 2 0例缺铁性贫血患者作为研究对象 ,采用骨髓细胞短期培养法制备染色体、采用RT- PCR法分析 bcr/ abl融合基因。结果 :95例慢性粒细胞白血病患者中 ,Ph1染色体阳性者 83例 (87.4 % ) ,bcr/ abl阳性阳性者 90例 (94 .7% ) ,Ph1和 bcr/ abl均阳性 83例 (94 .7% ) ,Ph1阴性、bcr/ abl阳性 7例 (7.4 % ) ,Ph1 和 bcr/ abl均阴性 5例 (5 .3% )。 2 0例缺铁性贫血患者 Ph1 和 bcr/ abl均阴性。结论 :Ph1 染色体、 bcr/ abl融合基因的检测有助于慢性粒细胞白血病的诊断和鉴别诊断。 展开更多

关键词 白血病 髓性 慢性/诊断 Ph^1染色体 BCR/ABL融合基因 诊断 鉴别

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尼洛替尼诱导K562/A02细胞凋亡及对HO-1基因表达的影响 被引量：1

6

作者 柴柏胜 方琴 +2 位作者 王季石 陈珵 杨畅 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期728-732,共5页

目的研究尼洛替尼(nilotinib,AMN107)诱导K562/A02细胞凋亡及对血红素加氧酶-1(HO-1)基因表达的影响。方法采用荧光原位杂交(FISH)法检测K562/A02细胞中的BCR-ABL融合基因;用不同浓度的AMN107分别处理K562/A02细胞24 h后,通过实时荧光定... 目的研究尼洛替尼(nilotinib,AMN107)诱导K562/A02细胞凋亡及对血红素加氧酶-1(HO-1)基因表达的影响。方法采用荧光原位杂交(FISH)法检测K562/A02细胞中的BCR-ABL融合基因;用不同浓度的AMN107分别处理K562/A02细胞24 h后,通过实时荧光定量PCR(RQ-PCR)法检测BCR-ABL融合基因mRNA的表达水平;采用MTT法观察细胞增殖变化;通过An-nexin V/PI双染色法检测细胞凋亡和细胞周期;采用RT-PCR法和Western Blot法检测HO-1基因的表达。结果 FISH法分析结果显示,K562/A02细胞BCR-ABL融合基因阳性细胞占细胞总数98%;RQ-PCR法检测结果显示,0,5,10,20μmol.L-1AMN107作用于K562/A02细胞24 h后BCR-ABL融合基因表达随AMN107浓度增加而逐渐下降;MTT法和Annexin V/PI法显示与对照组相比,细胞存活率随AMN107浓度升高而下降,凋亡率逐渐增加;细胞周期分析显示,经AMN107处理的细胞,G0/G1期和S期细胞明显减少,细胞阻滞在G2/M期;RT-PCR法和Western blot法均检测到HO-1基因表达随AMN107浓度升高而降低。结论 AMN107可抑制BCR-ABL融合基因和HO-1基因表达,从而诱导慢性粒细胞白血病(CML)耐药细胞的凋亡,说明HO-1是CML细胞生长以及BCR-ABL基因存在的一个相关因子,HO-1基因是克服慢性粒细胞白血病耐药的一个潜在靶向。 展开更多

关键词 血红素加氧酶-1 尼洛替尼 K562/A02 bcr-ABL 慢性粒细胞白血病 凋亡

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BCR-ABL融合基因检测试剂盒质控品的建立 被引量：3

7

作者 曲守方 于婷 +5 位作者 张娟丽 胡小许 郭李平 赵金银 高尚先 黄杰 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期1629-1633,共5页

目的:建立BCR-ABL融合基因质控品,评价人类BCR-ABL融合基因突变检测试剂盒的性能。方法:根据人类BCR-ABL e1a2和e14a2型融合基因m RNA序列,设计覆盖断裂点序列,合成目的融合基因序列。用限制性内切酶BglⅡ和HindⅢ对含有目的融合基因的... 目的:建立BCR-ABL融合基因质控品,评价人类BCR-ABL融合基因突变检测试剂盒的性能。方法:根据人类BCR-ABL e1a2和e14a2型融合基因m RNA序列,设计覆盖断裂点序列,合成目的融合基因序列。用限制性内切酶BglⅡ和HindⅢ对含有目的融合基因的质粒和表达载体进行酶切,连接酶切产物。将连接产物转化DH5α感受态细胞,筛选单个阳性菌落进行验证。将正确的单个菌落进行超声诱导,制备假病毒溶液。用荧光逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法对假病毒溶液提取的RNA进行检测。结果:PCR结果和测序结果表明成功构建人类BCR-ABL融合基因e1a2和e14a2型假病毒质粒;荧光RT-PCR结果表明构建的e1a2和e14a2型假病毒质粒能够表达目的 RNA,并且能被市售试剂盒正确检出,可以作为RNA质控品。结论:本研究建立人类BCR-ABL融合基因RNA质控品,用于评价BCR-ABL融合基因突变检测试剂盒的性能,为BCR-ABL融合基因相关白血病的临床诊断及靶向治疗提供指导。 展开更多

关键词 靶向药物 分子靶向治疗 慢性粒细胞白血病标志物 埃布尔森小鼠白血病病毒癌基因同源物1 bcr-ABL 融合基因 RNA检测 荧光逆转录-聚合酶链反应 基因检测试剂 标准物质研究

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慢性髓系白血病细胞中SphK-1/S1P信号通路的初步研究 被引量：2

8

作者 黄文荣 王立生 +4 位作者 王华 段海峰 李庆芳 高春记 达万明 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2008年第4期730-733,共4页

慢性髓系白血病(CML)是一种以髓系细胞受累为主的多能造血干细胞的克隆性疾病。为探讨SphK-1/S1P信号通路元件在CML细胞中的表达情况,研究P210bcr/abl是否涉及到SphK-1/S1P信号通路,首先采用RT-PCR检测bcr/abl阳性的K562细胞和bcr/abl... 慢性髓系白血病(CML)是一种以髓系细胞受累为主的多能造血干细胞的克隆性疾病。为探讨SphK-1/S1P信号通路元件在CML细胞中的表达情况,研究P210bcr/abl是否涉及到SphK-1/S1P信号通路,首先采用RT-PCR检测bcr/abl阳性的K562细胞和bcr/abl阳性的原代CML细胞中SphK-1和S1P受体mRNA的表达。进一步利用P210bcr/abl特异抑制剂甲磺酸伊马替尼处理bcr/abl阳性的K562细胞和CML原代细胞,然后通过32P-ATP掺入法测定细胞内SphK-1的酶活性。结果表明:K562细胞经2.5μmol/L甲磺酸伊马替尼处理0.5、2、6、24和48小时后,对SphK-1活性抑制强度分别为0.007%、38.9%、34.6%、28.1%和76.1%;CML原代细胞在使用2.5μmol/L甲磺酸伊马替尼处理后SphK-1活性较对照下降(16.8-41.9)%。结论:CML细胞中存在SphK-1和S1P的表达,P210bcr/abl具有激活SphK-1的作用。 展开更多

关键词 慢性髓系白血病 P210^bcr/abl融合蛋白 鞘氨醇激酶-1 SphK-1/S1P信号通路

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尼洛替尼以PU.1非依赖性调节K562细胞活性

9

作者 李有强 曾建明 +3 位作者 姚子涛 肖倩 王丽娜 李沫 《检验医学与临床》 CAS 2015年第6期745-746,共2页

目的研究尼洛替尼对K562细胞活性和转录因子PU.1的影响。方法以不同浓度的尼洛替尼分别处理K562细胞48h后,采用CCK-8法观察K562细胞增殖活性的变化;采用Western blot法检测PU.1的表达情况。结果 CCK-8法显示细胞存活率随尼洛替尼浓度的... 目的研究尼洛替尼对K562细胞活性和转录因子PU.1的影响。方法以不同浓度的尼洛替尼分别处理K562细胞48h后,采用CCK-8法观察K562细胞增殖活性的变化;采用Western blot法检测PU.1的表达情况。结果 CCK-8法显示细胞存活率随尼洛替尼浓度的升高而下降,尼洛替尼对K562细胞株的半数抑制量(IC50)为51.9nmol/L;Western blot法显示尼洛替尼处理后PU.1的蛋白表达水平未见明显差异(P>0.05)。结论尼洛替尼可抑制K562细胞活性,但其作用方式非依赖于PU.1。 展开更多

关键词 尼洛替尼 K562细胞 bcr-ABL PU.1

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BCR—1条码尺

10

作者 李志敏 《条码与信息系统》 2000年第5期18-19,共2页

关键词 bcr-1 条码尺 商品条码 编码

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BCR/ABL融合蛋白对鞘氨醇激酶和1-磷酸鞘氨醇分泌的影响 被引量：1

11

作者 许尹 王超 +1 位作者 吴彬 秦宜德 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2009年第4期411-415,共5页

目的研究高表达BCR/ABL融合蛋白对人鞘氨醇激酶(SPK)表达、活性及1-磷酸鞘氨醇(S1P)分泌的影响。方法使用pLXSN和pLXSN-bcr/abl的重组逆转录病毒感染HL-60和ECV304细胞并筛选出pLXSN和pLXSN-bcr/abl的细胞。利用RT-PCR鉴定病毒转染。Wes... 目的研究高表达BCR/ABL融合蛋白对人鞘氨醇激酶(SPK)表达、活性及1-磷酸鞘氨醇(S1P)分泌的影响。方法使用pLXSN和pLXSN-bcr/abl的重组逆转录病毒感染HL-60和ECV304细胞并筛选出pLXSN和pLXSN-bcr/abl的细胞。利用RT-PCR鉴定病毒转染。WesternBlot检测SPK表达,γ-32P-ATP掺入法检测细胞SPK活性和培养上清的S1P含量。应用同样方法检测不同剂量Gleevec对K562细胞培养上清中S1P的影响。结果RT-PCR结果显示bcr/abl基因转染成功。高表达BCR/ABL融合蛋白的HL-60和ECV304均比转染空载体后的细胞SPK表达、活性和S1P分泌均显著提高。随着Gleevec浓度的增加,K562细胞培养上清中S1P的含量逐渐减少。结论BCR/ABL融合蛋白可提高细胞SPK表达、活性和S1P分泌。 展开更多

关键词 融合蛋白质类 bcr—abl 重组逆转录病毒 人鞘氨醇激酶 1-磷酸鞘氨醇

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趋化因子MIP-1α和MCP-1及其受体CCR-1和CCR-2在慢性髓系白血病细胞中的表达 被引量：2

12

作者 王伟良 沈悌 +2 位作者 惠玉荣 顾惜春 李蓉生 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2006年第3期433-436,共4页

本文旨在研究MIP-1α和MCP-1及其受体CCR-1和CCR-2在慢性髓系白血病细胞中的表达,同时观察P210bcr/abl融合蛋白中酪氨酸激酶对MIP-1α和MCP-1及其受体CCR-1和CCR-2mRNA表达的影响。在bcr/abl融合基因阴性和阳性慢性髓系白血病细胞中,采... 本文旨在研究MIP-1α和MCP-1及其受体CCR-1和CCR-2在慢性髓系白血病细胞中的表达,同时观察P210bcr/abl融合蛋白中酪氨酸激酶对MIP-1α和MCP-1及其受体CCR-1和CCR-2mRNA表达的影响。在bcr/abl融合基因阴性和阳性慢性髓系白血病细胞中,采用半定量RT-PCR方法检测MIP-1α、MCP-1、CCR-1、CCR-2mRNA的表达水平。结果表明MIP-1αmRNA和CCR-1mRNA在bcr/abl融合基因阳性细胞中不表达,但在bcr/abl融合基因阴性细胞中表达,而MCP-1mRNA和CCR-2mRNA在bcr/abl融合基因阳性和阴性细胞中均不表达。当P210bcr/abl融合蛋白中酪氨酸激酶被抑制后,MIP-1α和CCR-1的mRNA表达水平恢复至正常水平。结论:P210bcr/abl融合蛋白抑制慢性髓系白血病细胞中MIP-1α和CCR-1mRNA的表达,但对MCP-1和CCR-2mRNA的表达无影响。 展开更多

关键词 慢性髓系白血病 BCR/ABL融合基因 P210bcr/abl融合蛋白 MIP-1Α CCR-1 MCP-1 CCR-2

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罕见的慢淋伴Ph^1阳性、bcr/abl融合基因阳性

13

作者 张红 张惠英 《湖州师范学院学报》 2004年第2期102-103,共2页

临床上 ,Ph1阳性、bcr/abl阳性见于慢性粒细胞白血病的病人 .本病例则在外周血淋巴细胞绝对值、骨髓淋巴细胞形态和数值异常、免疫学B细胞表型的高表达以及临床表现等方面均符合慢性淋巴B细胞型白血病诊断的病人 ,染色体检查发现细胞Ph... 临床上 ,Ph1阳性、bcr/abl阳性见于慢性粒细胞白血病的病人 .本病例则在外周血淋巴细胞绝对值、骨髓淋巴细胞形态和数值异常、免疫学B细胞表型的高表达以及临床表现等方面均符合慢性淋巴B细胞型白血病诊断的病人 ,染色体检查发现细胞Ph染色体阳性 ,即t (9;2 2 ) ,经RTPCR检测 。 展开更多

关键词 Ph^1阳性 bcr/abl阳性 慢性淋巴B细胞型白血病

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酪氨酸激酶抑制剂通过下调Mcl-1和Bcl-xl诱导K562细胞凋亡 被引量：6

14

作者 张宝珍 任汉云 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2007年第6期1182-1185,共4页

本研究观察酪氨酸激酶抑制剂STI571对CML细胞增殖和凋亡以及抗凋亡蛋白Mcl-1表达的影响,探讨Mcl-1在BCR/ABL抗凋亡信号传导中的作用。应用STI571处理慢性髓系白血病K562细胞株,采用台盼蓝拒染法和MTT法检测STI571对K562细胞增殖的影响,... 本研究观察酪氨酸激酶抑制剂STI571对CML细胞增殖和凋亡以及抗凋亡蛋白Mcl-1表达的影响,探讨Mcl-1在BCR/ABL抗凋亡信号传导中的作用。应用STI571处理慢性髓系白血病K562细胞株,采用台盼蓝拒染法和MTT法检测STI571对K562细胞增殖的影响,用Annexin V和碘化丙锭双染法及流式细胞术检测K562细胞凋亡情况,蛋白印迹法检测STI571对细胞内蛋白酪氨酸磷酸化水平和凋亡相关蛋白表达的影响。结果发现:STI571可有效地抑制K562细胞增殖并诱导K562细胞凋亡,这种作用呈剂量和时间依赖性,同时降低细胞内蛋白酪氨酸磷酸化水平和下调抗凋亡蛋白Mcl-1和Bcl-xl的表达。STI571抑制K562细胞增殖和诱导凋亡与抗凋亡蛋白Mcl-1和Bcl-xl的表达下调一致。结论:STI571通过阻断CML细胞内信号传导途径,下调Mcl-1和Bcl-xl的表达,抑制K562细胞增殖并诱导凋亡,表明Mcl-1和Bcl-xl一起在CML抗凋亡过程中发挥重要作用。 展开更多

关键词 STl571 MCL-1 BCR/ABL K562细胞 细胞凋亡

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一种海洋来源的ETP类化合物HDN-1诱导K562细胞凋亡作用及机制初探 被引量：2

15

作者 柳晓春 戚欣 李静 《中国海洋药物》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期56-62,共7页

目的探讨南极土壤来源真菌的次级代谢产物HDN-1对人慢性粒细胞白血病K562细胞的增殖抑制,诱导凋亡作用及其机制。方法采用MTT法检测HDN-1对K562细胞的增殖抑制作用;DNA结合染料Hoechst 33342染色,Western Blotting以及DNA琼脂糖凝胶电... 目的探讨南极土壤来源真菌的次级代谢产物HDN-1对人慢性粒细胞白血病K562细胞的增殖抑制,诱导凋亡作用及其机制。方法采用MTT法检测HDN-1对K562细胞的增殖抑制作用;DNA结合染料Hoechst 33342染色,Western Blotting以及DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡以及凋亡相关蛋白的变化。结果 HDN-1能显著抑制K562细胞的增殖,并呈剂量-时间依赖性;HDN-1作用后,细胞核形态发生明显变化并且出现了基因组DNA的梯状剪切条带;Caspase-9、8、3逐渐被激活,Caspase3的作用底物PARP被活化裂解出现89kD的剪切条带,并且Caspase蛋白的激活可被特异性抑制剂所阻断;抑凋亡蛋白Bcl-2,Mcl-1的表达降低,促凋亡蛋白Bax的表达量增高。另外,融合蛋白Bcr-Abl的表达被HDN-1抑制并呈剂量依赖性。结论来源于南极土壤来源真菌的次级代谢产物HDN-1可能是通过抑制Bcr-Abl融合蛋白的表达进而诱导K562细胞凋亡,并且凋亡是通过Caspase依赖的线粒体途径和死亡受体途径共同介导发生的。 展开更多

关键词 K562细胞 HDN-1 bcr-ABL融合蛋白 细胞凋亡

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CML患者TGF-β1 mRNA与bcr/abl^(P210)融合基因转录本表达的关系 被引量：2

16

作者 许大兵 孙余婕 沈佐君 《检验医学》 CAS 2016年第8期671-674,共4页

目的通过分析慢性粒细胞白血病(CML)患者转化生长因子-β1(TGF-β1)mRNA与bcr/abl^(P210)融合基因转录本(简称bcr/abl^(P210))的表达水平,探讨两者在CML发病过程中可能的作用。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测73例CML患者外... 目的通过分析慢性粒细胞白血病(CML)患者转化生长因子-β1(TGF-β1)mRNA与bcr/abl^(P210)融合基因转录本(简称bcr/abl^(P210))的表达水平,探讨两者在CML发病过程中可能的作用。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测73例CML患者外周血和骨髓中TGF-β1 mRNA及bcr/abl^(P210)的表达水平,以22名健康体检者作为正常对照组。TGF-β1 mRNA与bcr/abl^(P210)的相关性采用Pearson相关分析。结果 CML患者骨髓和外周血样本中TGF-β1 mRNA、bcr/abl^(P210)的表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。正常对照组外周血中TGF-β1 mRNA的表达水平明显高于CML患者骨髓中TGF-β1 mRNA的表达水平(P<0.05),正常对照组TGF-β1 mRNA的表达水平是CML组的11.39倍。相关性分析显示CML患者TGF-β1 mRNA与bcr/abl^(P210)呈正相关(r=0.53,P<0.01)。结论骨髓TGF-β1 mRNA有可能作为一种新的CML诊疗指标。 展开更多

关键词 转化生长因子-β1 bcr/ablP210 融合基因 转录本

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调控血红素加氧酶-1诱导K562A02细胞增殖、凋亡及耐药机制研究 被引量：2

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作者 柴其翔 韦四喜 +2 位作者 王娅婷 方琴 王季石 《重庆医学》 CAS 北大核心 2016年第6期727-730,733,共5页

目的通过血红素加氧酶-1(HO-1)诱导剂Hemin及抑制剂ZNPP IX调控HO-1,并联合阿霉素逆转K562A02细胞化疗耐药机制的研究,为慢性髓系白血病(CML)的逆转耐药提供新的策略。方法培养K562及K562A02细胞,采用荧光原位杂交(FISH)法检测K562A02... 目的通过血红素加氧酶-1(HO-1)诱导剂Hemin及抑制剂ZNPP IX调控HO-1,并联合阿霉素逆转K562A02细胞化疗耐药机制的研究,为慢性髓系白血病(CML)的逆转耐药提供新的策略。方法培养K562及K562A02细胞,采用荧光原位杂交(FISH)法检测K562A02细胞中bcr-abl融合基因表达。分别用HO-1诱导剂Hemin及抑制剂ZNPP IX调控HO-1基因表达联合阿霉素处理K562A02细胞后;流式细胞术检测药物诱导细胞凋亡情况。Western blot检测耐药相关基因及凋亡基因蛋白表达水平。结果 K562A02细胞中bcr-abl融合基因阳性细胞占94%。阿霉素处理细胞后,随着阿霉素浓度的增加,HO-1表达下降,耐药相关基因MDR1、NF-κB(P65)、MRP1、TopoⅡα、ABCD2表达亦降低;用HO-1诱导剂Hemin、抑制剂ZNPP IX、阿霉素单药分别及联合处理K562A02细胞后,显示HO-1高表达后耐药相关基因表达升高,细胞凋亡率下降。而降低HO-1表达,耐药相关基因表达下降,细胞凋亡率增加。结论 HO-1可作为逆转耐药的靶基因,可以使K562A02对阿霉素重新敏感,起到增敏效应。 展开更多

关键词 白血病 髓系 慢性 bcr-ABL融合基因 阿霉素 K562 K562A02 血红素加氧酶-1

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X连锁凋亡抑制蛋白及其相关因子1在慢性粒细胞白血病中的表达研究 被引量：1

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作者 李治国 张继红 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第30期3367-3369,共3页

目的观察X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)及XIAP相关因子1(XAF1)在慢性粒细胞白血病(CML)中的表达情况,评估其在CML诊断及预后分析中的应用价值。方法选取CML患者42例,其中慢性期24例(CML慢性期组),进展期18例(CML进展期组,其中加速期7例,急变... 目的观察X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)及XIAP相关因子1(XAF1)在慢性粒细胞白血病(CML)中的表达情况,评估其在CML诊断及预后分析中的应用价值。方法选取CML患者42例,其中慢性期24例(CML慢性期组),进展期18例(CML进展期组,其中加速期7例,急变期11例)。应用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测患者骨髓细胞XIAP及XAF1 mRNA表达水平。对照组为非恶性血液病患者21例(非恶性血液病组)及急性白血病(AL)患者28例(AL组)。结果 CML进展期组患者骨髓中XIAP mRNA表达水平高于CML慢性期组(P<0.01)和非恶性血液病组(P<0.01);而CML进展期患者骨髓中XAF1 mRNA表达水平低于CML慢性期(P<0.05)和非恶性血液病组(P<0.01);化疗后获得骨髓缓解的CML患者骨髓中XIAP mRNA的表达水平显著低于化疗前,而XAF1 mRNA的表达水平显著高于化疗前;XIAP mRNA及XAF1 mRNA表达水平之间呈负相关。结论 CML患者进展期XIAP及XAF1的联合检测及动态观察可作为CML临床辅助诊断、分期及预后判断的指标之一。 展开更多

关键词 X连锁凋亡抑制蛋白 XIAP相关因子1 白血病 髓系 慢性 bcr-ABL阳性 细胞凋亡 反转录聚合酶链反应

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慢性粒细胞白血病病人Mcl-1和Bcr/Abl基因表达

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作者 张玉娟 杨颉 管洪在 《齐鲁医学杂志》 2011年第3期200-202,共3页

目的探讨慢性粒细胞白血病(CML)病人Mcl-1基因和Bcr/Abl融合基因的表达水平及临床意义。方法应用实时荧光定量PCR技术检测了41例CML病人(包括慢性期15例、加速期6例、急变期6例、伊马替尼治疗后遗传学完全缓解8例及非伊马替尼治疗的未... 目的探讨慢性粒细胞白血病(CML)病人Mcl-1基因和Bcr/Abl融合基因的表达水平及临床意义。方法应用实时荧光定量PCR技术检测了41例CML病人(包括慢性期15例、加速期6例、急变期6例、伊马替尼治疗后遗传学完全缓解8例及非伊马替尼治疗的未缓解的CML病人6例)骨髓标本Mcl-1基因、Bcr/Abl融合基因的表达水平,以10例正常人作为对照。结果 CML各组Mcl-1和Bcr/Abl mRNA的表达水平差异均有显著性(χ2=19.12～36.08,P<0.05)。伊马替尼治疗组与正常对照组Mcl-1 mRNA的表达明显低于其他各组(Z=2.547～3.254,P<0.05);加速期、急变期及非伊马替尼治疗组之间Mcl-1 mRNA的表达水平差异无显著性(Z=0.481～1.922,P>0.05),但均明显高于慢性期(Z=2.650～3.465,P<0.05)。Bcr/Abl mRNA在慢性期、加速期、急变期及非伊马替尼治疗组之间表达差异无显著性(Z=0.480～1.196,P>0.05)。CML病人Mcl-1与Bcr/AblmRNA的表达水平呈正相关(r=0.68,P<0.05)。结论 Mcl-1和Bcr/Abl与CML的病情密切相关,参与CML的发生和发展,是判断病情进展及预后的分子标记物。 展开更多

关键词 白血病 髓样 慢性 MCL-1基因 BCR/ABL融合基因 聚合酶链反应 伊马替尼

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GFI-1在慢性髓细胞白血病患者中的表达及意义

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作者 朱星星 刘红 《交通医学》 2016年第2期103-106,共4页

目的:研究慢性髓细胞白血病(CML)患者中GFI-1的表达情况及其与BCR-ABL定量之间的关系,以探讨GFI-1在CML中的意义。方法:收集82例CML患者的骨髓标本,其中初诊慢性期50例,急变期6例,加速期6例,经伊马替尼治疗后细胞遗传学缓解期20例。以2... 目的:研究慢性髓细胞白血病(CML)患者中GFI-1的表达情况及其与BCR-ABL定量之间的关系,以探讨GFI-1在CML中的意义。方法:收集82例CML患者的骨髓标本,其中初诊慢性期50例,急变期6例,加速期6例,经伊马替尼治疗后细胞遗传学缓解期20例。以20例正常人的外周血或骨髓标本作为正常对照。应用实时定量PCR、Western blot等方法检测CML患者GFI-1、BCR-ABL的表达情况,分析两者基因表达量之间的关系。结果:(1)CML慢性期、急变期/加速期GFI-1的表达均明显高于正常对照组(P<0.05);慢性期与急变期/加速期患者GFI-1的表达差异无统计学意义(P>0.05);慢性期患者的GFI-1较缓解期表达高,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)GFI-1与BCR-ABL定量之间成正相关(r2=0.7647,P<0.01)。结论 :CML患者GFI-1表达水平异常,可能参与CML的发生发展。 展开更多

关键词 独立生长因子1 慢性髓细胞白血病 bcr-ABL融合基因

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