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miR-762/BCL2L13分子轴在乳头状甲状腺癌组织中的表达及其对TPC-1细胞恶性生物学行为的影响
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作者 郭剑辉 李心红 《西部医学》 2026年第1期39-44,52,共7页
目的探讨抑制miR-762表达对乳头状甲状腺癌(PTC)细胞TPC-1增殖和凋亡的影响及其机制。方法采用qRT-PCR法检测83例PTC癌组织及癌旁组织中miR-762和Bcl-2样蛋白13(BCL2L13)mRNA的表达,并对两者表达水平进行相关性分析。采用生物信息学软... 目的探讨抑制miR-762表达对乳头状甲状腺癌(PTC)细胞TPC-1增殖和凋亡的影响及其机制。方法采用qRT-PCR法检测83例PTC癌组织及癌旁组织中miR-762和Bcl-2样蛋白13(BCL2L13)mRNA的表达,并对两者表达水平进行相关性分析。采用生物信息学软件和双荧光素酶报告基因实验分析miR-762与BCL2L13的靶向关系。采用脂质体法将miR-762 inhibitor和BCL2L13 siRNA干扰质粒(si-BCL2L13)转染至TPC-1细胞中,qRT-PCR检测细胞中miR-762和BCL2L13 mRNA表达水平;MTT法和BrdU染色检测细胞增殖水平;流式细胞仪检测细胞凋亡水平;Western blot检测细胞中BCL2L13、Cleaved-caspase-3以及线粒体和胞浆中细胞色素C(Cyt C)等蛋白表达水平。结果与癌旁组织比较,在PTC癌组织中miR-762表达水平升高,而BCL2L13 mRNA表达水平降低,且两者呈负相关性(r=-0.70,P<0.01)。双荧光素酶报告基因实验证实,BCL2L13是miR-762靶基因。抑制miR-762表达可明显下调TPC-1细胞中miR-762表达水平,上调BCL2L13 mRNA和蛋白表达,抑制细胞增殖,提高细胞凋亡水平,并上调Cleaved-caspase-3蛋白和胞浆中Cyt C蛋白表达水平,下调线粒体Cyt C蛋白表达。而干扰BCL2L13基因表达可显著下调TPC-1细胞中BCL2L13 mRNA和蛋白表达,促进细胞增殖,抑制细胞凋亡,上调线粒体Cyt C蛋白表达,下调Cleaved-caspase-3蛋白和胞浆中Cyt C蛋白表达。此外,干扰BCL2L13基因表达可显著逆转miR-762 inhibitor对TPC-1细胞增殖的抑制作用以及凋亡的促进作用。结论miR-762在人PTC组织中高表达,抑制miR-762表达可诱导TPC-1细胞凋亡和抑制细胞增殖,其机制可能与靶向上调BCL2L13基因表达有关。 展开更多
关键词 乳头状甲状腺癌 miR-762 bcl2l13 增殖 凋亡
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miR-222通过调控BCL2L13基因促进HBx-HepG2细胞生长
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作者 余桂芳 陈树娣 +2 位作者 陈雪竹 侯开连 梁敏 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期1389-1394,共6页
目的:探讨HBx-Hep G2细胞中微小RNA-222(mi R-222)对BCL2L13基因表达的调控作用以及对细胞生长和凋亡的影响,并研究其潜在的分子作用机制。方法:利用实时荧光定量PCR检测mi R-222的表达水平;MTT和集落形成实验检测细胞的生长;流式细胞... 目的:探讨HBx-Hep G2细胞中微小RNA-222(mi R-222)对BCL2L13基因表达的调控作用以及对细胞生长和凋亡的影响,并研究其潜在的分子作用机制。方法:利用实时荧光定量PCR检测mi R-222的表达水平;MTT和集落形成实验检测细胞的生长;流式细胞术检测细胞周期和凋亡;构建BCL2L13 3’UTR双萤光素酶报告载体,通过采用双萤光素酶报告实验验证mi R-222的靶基因。结果:与正常的肝细胞L02相比,mi R-222在HBx-Hep G2细胞过量表达(P<0.05)。mi R-222过表达可促进HBx-Hep G2细胞的生长,改变细胞周期,降低细胞的凋亡率;mi R-222表达下调可抑制HBx-Hep G2细胞的生长,改变细胞周期,增加细胞的凋亡率,和对照组相比差异有统计学显著性(P<0.05)。与正常肝细胞L02相比,BCL2L13在HBx-Hep G2细胞表达下调(P<0.05);mi R-222表达下调可促进BCL2L13的表达(P<0.05)。双萤光素酶报告实验和pc DNA3.1-BCL2L13转染实验结果提示mi R-222可以通过作用于BCL2L13的3’UTR区,负向调控其表达,从而促进细胞的生长。结论:mi R-222可以通过靶向调控BCL2L13基因进而促进HBx-HepG2细胞的生长。 展开更多
关键词 微小RNA-222 HBx-HepG2细胞 细胞生长 细胞周期 细胞凋亡 bcl2l13基因
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亚慢性苯吸入小鼠凋亡相关基因Survivin、Bcl2L13的表达与甲基化状态分析 被引量:4
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作者 林冲 刘政 +6 位作者 于秀远 彭春华 张亚亚 覃琼玉 朱华 杨新军 闫洪涛 《温州医学院学报》 CAS 2014年第7期480-484,共5页
目的:探讨亚慢性苯暴露小鼠凋亡相关基因Survivin、Bcl2L13的表达与启动子甲基化状态。方法:C57BL/6J雄性小鼠亚慢性动式吸入苯,暴露浓度分别为0 ppm(对照组)、1 ppm(低浓度组)和100 ppm(高浓度组)。收集骨髓细胞,流式细胞仪检测细胞周... 目的:探讨亚慢性苯暴露小鼠凋亡相关基因Survivin、Bcl2L13的表达与启动子甲基化状态。方法:C57BL/6J雄性小鼠亚慢性动式吸入苯,暴露浓度分别为0 ppm(对照组)、1 ppm(低浓度组)和100 ppm(高浓度组)。收集骨髓细胞,流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡,实时荧光定量PCR(qPCR)检测Survivin、Bcl2L13基因的表达,基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱分析技术(MALDI-TOF)测定基因启动子区CpG岛甲基化水平。结果:与对照组比较,苯暴露组的细胞凋亡比例明显增大(P<0.01),低浓度组S期细胞比例增加,高浓度组S期和G2/M期细胞的比例均显著降低。低浓度组Survivin mRNA表达下降,高浓度组Survivin、Bcl2L13 mRNA表达均显著降低。两基因启动子区CpG岛均呈低甲基化状态,其甲基化水平未受苯暴露影响。结论:亚慢性苯吸入染毒影响小鼠骨髓细胞周期,增加细胞凋亡,降低Survivin、Bcl2L13 mRNA的表达,但不影响其基因启动子的甲基化状态。 展开更多
关键词 Bc12L13 细胞凋亡 DNA甲基化 骨髓细胞 细胞周期 小鼠
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草原红牛Bcl2L13的CDS克隆及其在不同组织的表达规律研究
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作者 刘理想 高一 +5 位作者 秦立红 吕阳 薛佳佳 吴健 胡忠昌 张国梁 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2020年第7期69-75,共7页
本研究旨在初步探究草原红牛Bcl2L13的基因功能,并对其进行生物信息学分析,检测Bcl2L13在草原红牛不同组织中的表达差异。本实验以草原红牛为研究对象,根据GenBank公布的牛Bcl2L13基因序列(GenBank登录号:NM001078082.2)设计引物,PCR扩... 本研究旨在初步探究草原红牛Bcl2L13的基因功能,并对其进行生物信息学分析,检测Bcl2L13在草原红牛不同组织中的表达差异。本实验以草原红牛为研究对象,根据GenBank公布的牛Bcl2L13基因序列(GenBank登录号:NM001078082.2)设计引物,PCR扩增获得Bcl2L13的完整CDS并进行测序,利用分析软件进行序列同源性比对并构建系统进化树;获得对应的氨基酸序列并分析蛋白理化特性及蛋白亚细胞结构、蛋白亲疏水性和磷酸化位点;预测蛋白二级结构并进行蛋白质三级结构模型构建;采用实时荧光定量PCR方法检测Bcl2L13基因在草原红牛各组织中的表达规律。结果显示:草原红牛Bcl2L13基因核苷酸序列与普通牛和牦牛的同源性高(100%和99.3%),与瘤牛和亚洲水牛的同源性较高(91.8%、90.5%);Bcl2L13基因CDS大小为839bp,编码279个氨基酸,该蛋白质分子式为C1348H2108N348O439S5,分子量为30.374 ku,理论等电点为4.51,蛋白质不稳定指数为77.71,总平均亲水性为-0.250。亚细胞定位分析表明,Bcl2L13蛋白分布在内质网(4.3%)、线粒体(4.3%)、过氧化物酶体(8.7%)、细胞质(65.2%)、细胞骨架(4.3%)、细胞核(13.0%);磷酸化位点分析发现Bcl2L13蛋白存在33个磷酸化位点;二级结构主要形式有α-螺旋(22.4%)、β-转角(12.1%)、β折叠(31.0%)、无规则卷曲(34.5%),与三级结构预测相同;Bcl2L13在背最长肌中表达量最高,在肺组织中表达量最少。综上,Bcl2L13基因在生物进化过程中具有低保守性,其编码的氨基酸组成的蛋白质结构不稳定,属于水溶性蛋白,主要在细胞质中发挥作用,在草原红牛不同组织的表达量有显著差异。 展开更多
关键词 草原红牛 bcl2l13基因 克隆 生物信息学分析 表达差异
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