不结球白菜BcAP1的克隆及其启动子分析

1

作者 米闵 渠天慧 +4 位作者 徐新凤 李英 侯喜林 王建军 刘同坤 《南京农业大学学报》 北大核心 2025年第6期1243-1251,共9页

[目的]本文旨在探究BcAP1基因在不结球白菜早、晚开花品种中是否存在结构和表达差异。[方法]以早开花品种‘菜心’以及晚开花品种‘五月慢’为试验材料,通过同源克隆2个品种中的BcAP1基因和启动子序列,对2个品种的氨基酸序列进行比对和... [目的]本文旨在探究BcAP1基因在不结球白菜早、晚开花品种中是否存在结构和表达差异。[方法]以早开花品种‘菜心’以及晚开花品种‘五月慢’为试验材料,通过同源克隆2个品种中的BcAP1基因和启动子序列,对2个品种的氨基酸序列进行比对和系统进化分析;利用亚细胞定位技术研究BcAP1基因的空间表达;利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)分别对2个品种花蕾期和开花期BcAP1的表达量进行分析;通过双荧光素酶试验对2个品种中BcAP1启动子的活性进行分析;此外对转基因拟南芥进行β-D-葡糖醛酸酶(GUS)染色并利用PlantCARE在线软件预测‘菜心’BcAP1启动子的插入片段结构域。[结果]‘菜心’和‘五月慢’BcAP1 CDS序列仅有1个碱基不同,但两端序列翻译所得氨基酸序列完全一致。系统进化分析表明,BcAP1与拟南芥之间同源性最高。亚细胞定位显示其表达位置在细胞核上。定量结果显示,在花蕾期和开花期,早抽薹品种‘菜心’中的BcAP1基因表达量显著高于同期的晚抽薹品种‘五月慢’。2个品种的BcAP1基因启动子序列存在较大差异且‘菜心’的启动子序列存在896 bp的插入序列。双荧光素酶试验结果表明,‘菜心’BcAP1启动子的活性远高于‘五月慢’BcAP1启动子的活性。GUS染色结果显示,GUS蛋白在pCX BcAP1-BcAP1-GUS转基因拟南芥中表达更强。‘菜心’BcAP1启动子插入片段结构域分析发现BcAP1启动子插入片段含有参与生物钟调控的顺式作用元件和赤霉素反应因子。[结论]克隆的BcAP1基因定位于细胞核,与拟南芥的同源性最高;‘菜心’BcAP1启动子比‘五月慢’BcAP1启动子多一段长度为896 bp的插入序列,插入片段中含有与开花相关的元件,且‘菜心’BcAP1启动子活性比‘五月慢’高。 展开更多

关键词 不结球白菜 bcap1基因 克隆 启动子分析

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BCAP31对食管鳞癌细胞的增殖和迁移的影响

2

作者 贾峰峰 王飞 《科技创新与生产力》 2025年第5期21-25,共5页

本研究通过生物信息学手段探讨BCAP31在食管鳞癌(Esophageal Squamous Carcinoma,ESCC)中的表达水平及其与患者预后和临床病理特征的相关性,并在实验室条件下检验BCAP31对ESCC细胞系KYSE150和KYSE70的生物功能的影响。利用GEPIA数据库分... 本研究通过生物信息学手段探讨BCAP31在食管鳞癌(Esophageal Squamous Carcinoma,ESCC)中的表达水平及其与患者预后和临床病理特征的相关性,并在实验室条件下检验BCAP31对ESCC细胞系KYSE150和KYSE70的生物功能的影响。利用GEPIA数据库分析BCAP31在ESCC与正常食管组织中的表达差异及其与患者生存率的关系,并通过UALCAN数据库评估BCAP31表达与ESCC临床病理特征的相关性。将KYSE150、KYSE70细胞分为对照组和si-BCAP31组,采用CCK-8、划痕实验检测细胞增殖和愈合能力。由结果可知:BCAP31在ESCC中的表达显著高于正常组织,且为影响ESCC患者预后的独立危险因素。si-BCAP31组细胞增殖、愈合能力显著降低。可以得出如下结论:BCAP31在ESCC中高表达且与患者预后不良相关,沉默BCAP31可显著抑制ESCC细胞的增殖和迁移,可作为ESCC的潜在生物标志物。 展开更多

关键词 食管鳞癌 bcap31 生物信息学 细胞增殖 细胞迁移

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40种香豆素类化合物对人表皮癌细胞系A432细胞株和人乳腺癌细胞系BCAP细胞株增殖抑制活性的筛选 被引量：23

3

作者 杨秀伟 徐波 +3 位作者 冉福香 王瑞卿 吴俊 崔景荣 《中国现代中药》 CAS 2006年第12期9-10,18,共3页

目的从中药中筛选有抗肿瘤活性的化合物、类药或先导化合物。方法应用人表皮癌细胞系A432细胞株和人乳腺癌细胞系BCAP细胞株筛选40种香豆素类化合物对其增殖的抑制活性。结果花椒毒素、前胡素、虎耳草素、牛防风素和甘草香豆素对人表皮... 目的从中药中筛选有抗肿瘤活性的化合物、类药或先导化合物。方法应用人表皮癌细胞系A432细胞株和人乳腺癌细胞系BCAP细胞株筛选40种香豆素类化合物对其增殖的抑制活性。结果花椒毒素、前胡素、虎耳草素、牛防风素和甘草香豆素对人表皮癌细胞系A432细胞株增殖具有弱的抑制作用,且呈浓度-效应关系;其IC50值分别为8.40×10-4、5.00×10-5、7.30×10-5、1.00×10-5、5.00×10-5mol.L-1。蛇床素、欧前胡素、香柑内酯、羌活烯醇、紫苜蓿酚和考迈斯托醇对人乳腺癌细胞系BCAP细胞株增殖具有弱的抑制作用,且呈浓度-效应关系;其IC50值分别为6.70×10-5、2.11×10-4、2.77×10-5、6.62×10-5、4.16×10-5、2.26×10-4mol.L-1。结论某些香豆素类化合物具有潜在的抗肿瘤活性,可能发展成为类药或先导化合物。 展开更多

关键词 中药 香豆素类 人表皮癌细胞系A432细胞株 人乳腺癌细胞系bcap细胞株

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蒺藜皂苷对乳腺癌细胞Bcap-37的体外抑制作用 被引量：28

4

作者 孙斌 瞿伟菁 柏忠江 《中药材》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期104-106,共3页

采用生长曲线法、MTT法、蛋白质含量测定以及形态学方法观察了蒺藜皂苷(STT)对于体外培养Bcap-37细胞抑制作用,结果显示:STT对于Bcap-37细胞增殖有较强的抑制作用,且呈明显的剂量与时间依赖关系,经STT作用后,细胞形态学表现为细胞变圆... 采用生长曲线法、MTT法、蛋白质含量测定以及形态学方法观察了蒺藜皂苷(STT)对于体外培养Bcap-37细胞抑制作用,结果显示:STT对于Bcap-37细胞增殖有较强的抑制作用,且呈明显的剂量与时间依赖关系,经STT作用后,细胞形态学表现为细胞变圆、皱缩,核固缩、浓聚。 展开更多

关键词 蒺藜皂苷 乳腺癌 bcap-37细胞株 中药 细胞毒作用

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沙棘籽渣黄酮类化合物诱导人乳腺癌Bcap-37细胞凋亡的研究 被引量：6

5

作者 章平 孙斌 +4 位作者 杨煌建 庄秀园 柏忠江 王露 瞿伟菁 《华东师范大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期91-96,共6页

探讨了沙棘籽渣黄酮类化合物(flavonoids from seed residues of Hippophae rhamnoidesm L.FHR)对人乳腺癌Bcap-37细胞凋亡的影响和其作用机制.采用MTT法、Wright染色法、流式细胞术及免疫细胞化学等方法,观察在不同浓度和作用时间时,FH... 探讨了沙棘籽渣黄酮类化合物(flavonoids from seed residues of Hippophae rhamnoidesm L.FHR)对人乳腺癌Bcap-37细胞凋亡的影响和其作用机制.采用MTT法、Wright染色法、流式细胞术及免疫细胞化学等方法,观察在不同浓度和作用时间时,FHR对Bcap-37细胞生长抑制和细胞凋亡效应.结果显示FHR在10～1000μg/mL等浓度范围内可以诱导人乳腺癌细胞Bcap-37产生典型的凋亡形态学变化;1000μg/mL FHR处理24 h、48 h和72 h后使Bcap-37细胞周期S期减少,G0/G1期增加;FHR处理实验组p53蛋白表达较对照组明显增加,bcl-2蛋白表达较对照组降低.提示FHR对人乳腺癌Bcap-37细胞的生长抑制主要通过诱导细胞凋亡,且p53蛋白的增加和bcl-2蛋白的减少是其诱导细胞凋亡的机制之一. 展开更多

关键词 沙棘 黄酮类化合物 人乳腺癌bcap-37细胞 细胞凋亡

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三种藻胆蛋白对人乳腺癌Bcap-37细胞的光动力杀伤效果 被引量：7

6

作者 陈小强 龚兴国 +2 位作者 梁倩 史锋 陈勇 《浙江大学学报（理学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期438-441,447,共5页

从高等红藻坛紫菜中提取R-藻红蛋白(R-PE)、R-藻蓝蛋白(R-PC),从低等蓝藻钝顶螺旋藻中提取C-藻蓝蛋白(C-PC).研究10、25、50和100μg/mL的R-PE、R-PC和C-PC介导的光动力效应对乳腺癌细胞Bcap-37的生存率的影响,MTT法测定结果,探讨这三... 从高等红藻坛紫菜中提取R-藻红蛋白(R-PE)、R-藻蓝蛋白(R-PC),从低等蓝藻钝顶螺旋藻中提取C-藻蓝蛋白(C-PC).研究10、25、50和100μg/mL的R-PE、R-PC和C-PC介导的光动力效应对乳腺癌细胞Bcap-37的生存率的影响,MTT法测定结果,探讨这三种藻胆蛋白对癌细胞的光动力杀伤效应与其光敏性质差异的相关性.三种藻胆蛋白的光动力作用对Bcap-37细胞具有显著杀伤并显示出剂量效应,质量浓度在25μg/mL以上时,杀伤效果依次为:R-PE>R-PC>C-PC;仅用激光处理(497nm,632.8nm),Bcap-37细胞的生存率达到88.6%和91.3%;仅用藻胆蛋白处理,培养24h后,R-PE<25μg/mL,R-PC、C-PC<50μg/mL时,对Bcap-37细胞具有一定的促进生长作用,R-PE≥25μg/mL,R-PC、C-PC≥50μg/mL时,抑制细胞生长. 展开更多

关键词 R-藻红蛋白 R-藻蓝蛋白 C-藻蓝蛋白 乳腺癌bcap-37细胞 光动力学疗法

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26种生物碱类化合物对人乳腺癌细胞系BCAP细胞株增殖抑制活性的筛选 被引量：4

7

作者 杨秀伟 王瑞卿 +1 位作者 冉福香 孙士勇 《中国现代中药》 CAS 2007年第3期9-11,共3页

目的:从中药中筛选有抗肿瘤活性的化合物。方法:应用人乳腺癌细胞系BCAP细胞筛选26种生物碱类化合物对其增殖的抑制作用。结果:小檗胺和喜树碱对人乳腺癌细胞株BCAP细胞增殖有一定程度的抑制作用;其次为马兜铃酸I和利血胺;西萝芙木碱、... 目的:从中药中筛选有抗肿瘤活性的化合物。方法:应用人乳腺癌细胞系BCAP细胞筛选26种生物碱类化合物对其增殖的抑制作用。结果:小檗胺和喜树碱对人乳腺癌细胞株BCAP细胞增殖有一定程度的抑制作用;其次为马兜铃酸I和利血胺;西萝芙木碱、番茄碱和那可丁仅有较弱的抑制活性;它们的抑制活性皆呈浓度-效应关系。士的宁、β-可鲁勃林、依卡金、萝芙木辛、育亨宾、柯楠碱、蛇根精、长春胺、骆驼蓬碱、茵芋碱、白藓碱、γ-崖椒碱、4-甲氧基-1-甲基-2-喹诺酮、去氢贝母碱N-氧化物、倒千里光碱、毛果芸香碱、DL-N-甲基四氢罂粟碱、左旋麻黄碱和左旋去甲基伪麻黄碱在本实验条件下无效。结论:小檗胺、喜树碱、马兜铃酸I、番茄碱和利血胺可能是含有该生物碱的、有抗肿瘤活性中药的有效成分,亦可能成为开发抗肿瘤新药的候选药物。 展开更多

关键词 中药 生物碱类 人乳腺癌细胞株bcap

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黄芩总黄酮对S180、Hep-A-22和Bcap-37肿瘤细胞的抑制作用 被引量：5

8

作者 绳娟 杨振 +1 位作者 姜红柳 洪铁 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期401-404,共4页

目的:研究黄芩总黄酮对S180、Hep-A-22和Bcap-37肿瘤细胞增殖及S180和Hep-A-22荷瘤小鼠肿瘤生长的抑制作用。方法:将S180、Hep-A-22和Bcap-37肿瘤细胞分别加入终浓度为12.5、25.0、50.0及100.0 mg.L-1的黄芩总黄酮,采用四氮唑盐衍生物(X... 目的:研究黄芩总黄酮对S180、Hep-A-22和Bcap-37肿瘤细胞增殖及S180和Hep-A-22荷瘤小鼠肿瘤生长的抑制作用。方法:将S180、Hep-A-22和Bcap-37肿瘤细胞分别加入终浓度为12.5、25.0、50.0及100.0 mg.L-1的黄芩总黄酮,采用四氮唑盐衍生物(XTT)、MTT法测定细胞增殖抑制率;将S180和Hep-A-22荷瘤小鼠分为空白对照组、环磷酰胺(CTX)阳性药对照组(30 mg.kg-1,隔日给药)、黄芩总黄酮大(200 mg.kg-1.d-1)、中(100 mg.kg-1.d-1)和小剂量组(50 mg.kg-1.d-1),连续给药15 d后剥离肿瘤,称取瘤重,计算其肿瘤生长的抑制率。观察各给药组Hep-A-22荷瘤小鼠连续用药10 d后生命延长率。结果:黄芩总黄酮对S180、Hep-A-22和Bcap-37肿瘤细胞的抑制率随给药浓度的增加而显著升高,其IC50值分别为16.04、17.74和9.05 mg.L-1;与空白对照组比较,黄芩总黄酮大、中、小剂量组S180、Hep-A-22荷瘤小鼠的肿瘤重量均明显低于空白对照组(P<0.05或P<0.01),随给药剂量的增加,其肿瘤抑制率增加(P<0.05或P<0.01)。黄芩总黄酮大、中、小剂量组的Hep-A-22荷瘤小鼠的平均生存天数均显著高于空白对照组(P<0.01),其生命延长率较空白对照组显著增加(P<0.01)。结论:黄芩总黄酮对S180、Hep-A-22和Bcap-37肿瘤细胞的增殖及S180和Hep-A-22荷瘤小鼠肿瘤生长均具有抑制作用。 展开更多

关键词 黄芩总黄酮 S180 Hep-A-22 bcap-37 肿瘤抑制作用

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BCL—2蛋白不能抑制VP16诱导的乳腺癌细胞(Bcap37)凋亡 被引量：4

9

作者 陈德喜 马丽萍 +1 位作者 曹国栋 王申五 《实用肿瘤学杂志》 CAS 1999年第1期6-7,共2页

目的 为了解BCL—2在Bcap37细胞表达增高能否抑制足叶乙甙诱导的细胞凋亡,把重组的逆转录表达载体pLXSN—bcl—2和pLXSN—neo转染Bcap37细胞,经G418筛选获得表达细胞(Bcap37—bcl—2,Bcap37—neo)。方法 经RT—PCR和Western blotting检... 目的 为了解BCL—2在Bcap37细胞表达增高能否抑制足叶乙甙诱导的细胞凋亡,把重组的逆转录表达载体pLXSN—bcl—2和pLXSN—neo转染Bcap37细胞,经G418筛选获得表达细胞(Bcap37—bcl—2,Bcap37—neo)。方法 经RT—PCR和Western blotting检测bcl—2基因的表达,并用不同浓度的VP16处理两种细胞16小时,经细胞形态观察、细胞凋亡原位显示、MTT实验检测细胞的凋亡变化。结果 两种细胞的凋亡变化没有显著差异。结论 BCL—2高表达不能阻滞VP16诱导的Bcap37细胞凋亡,这与我们以前所做的关于BCL—2能阻滞VP16诱导的K562细胞凋亡作用相反,推测BCL—2的抗凋亡作用可能和细胞类型有关,可能还有其它因素参与BCL—2对细胞凋亡的调节。 展开更多

关键词 BCL蛋白 VP16 bcap37细胞 乳腺癌 细菌凋亡

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天麻素在Caco-2细胞及Bcap37、Bcap37/MDR1细胞模型中的转运和摄取(英文) 被引量：5

10

作者 王晓丹 曾苏 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1497-1502,共6页

天麻素是传统中药天麻的有效活性成分。本研究以Caco-2细胞、Bcap37和Bcap37/MDR1为模型,体外评价天麻素在Caco-2细胞模型上的转运过程以及天麻素与P-糖蛋白之间的相互作用。在50～500μmol.L?1浓度内,天麻素的表观渗透系数(Papp)比值&l... 天麻素是传统中药天麻的有效活性成分。本研究以Caco-2细胞、Bcap37和Bcap37/MDR1为模型,体外评价天麻素在Caco-2细胞模型上的转运过程以及天麻素与P-糖蛋白之间的相互作用。在50～500μmol.L?1浓度内,天麻素的表观渗透系数(Papp)比值<2.0,与转运方向无关,且不受P-糖蛋白的经典抑制剂(维拉帕米和GF120918)的影响。天麻素在Bcap37、Bcap37/MDR1细胞中的积聚呈浓度依赖性,且不干扰罗丹明123在Bcap37/MDR1细胞中的积聚。结果表明,天麻素在Caco-2细胞模型上的转运方式以被动转运为主,天麻素不是P-糖蛋白的底物和抑制剂。 展开更多

关键词 天麻素 P-糖蛋白 CACO-2细胞 bcap37细胞

原文传递

金黄色葡萄球菌对Bcap-37细胞TLR2和IL-1β、TNF-α以及NF-κB表达的影响 被引量：2

11

作者 张爱莲 喻艳坤 +3 位作者 刘赋佩 王丹阳 周浩 张富春 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期488-491,共4页

目的观察金黄色葡萄球菌对Bcap-37细胞Toll样受体2(TLR2)的表达以及对促炎性细胞因子、核因子κB(NF-κB)的影响。方法用金黄色葡萄球菌处理Bcap-37细胞,采用RT-PCR检测TLR2 mRNA的表达,流式细胞术检测TLR2蛋白的表达,ELISA分别检测IL-... 目的观察金黄色葡萄球菌对Bcap-37细胞Toll样受体2(TLR2)的表达以及对促炎性细胞因子、核因子κB(NF-κB)的影响。方法用金黄色葡萄球菌处理Bcap-37细胞,采用RT-PCR检测TLR2 mRNA的表达,流式细胞术检测TLR2蛋白的表达,ELISA分别检测IL-1β和TNF-α的分泌,Western blot检测NF-κB的表达变化。结果金黄色葡萄球菌作用于Bcap-37细胞后,TLR2 mRNA和蛋白水平的表达量随着作用时间延长而逐渐增高,分别在4 h和6 h达到高峰,之后又逐渐下降(P<0.05)。IL-1β、TNF-α的表达呈现明显的时间依赖性增高(P<0.05),IL-1β在12 h到达峰值后下降,TNF-α在16 h表达仍然很高。NF-κB的表达随着刺激时间的延长也呈现时间依赖性增高,在12 h时表达量最高,14 h开始下降。结论金黄色葡萄球菌能上调Bcap-37细胞TLR2 mRNA和蛋白的表达,激活Bcap-37细胞NF-κB的表达,促进IL-1β和TNF-α的分泌。 展开更多

关键词 金黄色葡萄球菌 bcap-37细胞 TLR2 NF-ΚB

原文传递

eIF4E基因下调对人乳腺癌Bcap37细胞凋亡的影响 被引量：3

12

作者 林宇 许惠玉 +2 位作者 邹宇 崔红霞 刘吉成 《医学研究杂志》 2012年第4期41-43,共3页

目的应用化学合成的siRNA干扰乳腺癌Bcap37细胞真核细胞翻译起始因子4E(eukaryotic translation initiationfactor 4E,eIF4E)的表达,探讨其对乳腺癌细胞凋亡和生长周期的影响。方法化学合成eIF4E基因的siRNA,转染人乳腺癌Bcap37细胞,采... 目的应用化学合成的siRNA干扰乳腺癌Bcap37细胞真核细胞翻译起始因子4E(eukaryotic translation initiationfactor 4E,eIF4E)的表达,探讨其对乳腺癌细胞凋亡和生长周期的影响。方法化学合成eIF4E基因的siRNA,转染人乳腺癌Bcap37细胞,采用Western blotting法及RT-PCR法检测转染前后Bcap37细胞中eIF4E蛋白和mRNA表达;应用流式细胞技术检测转染前后细胞周期的变化;AO/EB双染色法检测细胞凋亡;酶标仪检测caspase-3活性。结果 RT-PCR与Western blot-ting法检测结果显示,转染eIF4E-siRNA-3#组细胞eIF4E基因的mRNA和蛋白表达均明显下降(P<0.01);eIF4E-siRNA转染组G1期细胞比例显著增加,S期细胞比例相对减少,差异显著(P<0.05);转染eIF4E-siRNA可诱导细胞凋亡,caspase-3活性亦增强。结论 eIF4E-siRNA可下调eIF4E基因在乳腺癌Bcap37细胞中的表达水平,诱导细胞凋亡。 展开更多

关键词 真核细胞翻译起始因子 细胞凋亡 bcap37

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亚硒酸钠对Bcap-37人乳腺癌细胞体外增殖及3种酶细胞化学的影响 被引量：1

13

作者 覃红斌 裴百康 +2 位作者 唐军民 唐岩 苏衍萍 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期401-404,共4页

目的　观察体外培养中亚硒酸钠的浓度变化和培养时间的延长对Bcap 37人乳腺癌细胞增殖及酶活性的影响。　方法　在体外培养Bcap 37人乳腺癌细胞中加入不同浓度的亚硒酸钠 ,常规染色显示其形态和增殖情况及各组Bcap 37人乳腺癌细胞内的... 目的　观察体外培养中亚硒酸钠的浓度变化和培养时间的延长对Bcap 37人乳腺癌细胞增殖及酶活性的影响。　方法　在体外培养Bcap 37人乳腺癌细胞中加入不同浓度的亚硒酸钠 ,常规染色显示其形态和增殖情况及各组Bcap 37人乳腺癌细胞内的酸性磷酸酶、碱性磷酸酶和非特异性酯酶活性。　结果　 2 μmol L的亚硒酸钠对肿瘤细胞的生长具有一定的抑制作用 ,而 10 μmol L、5 0 μmol L的亚硒酸钠具有一定的细胞毒性。Bcap 37人乳腺癌细胞内的酸性磷酸酶、碱性磷酸酶、非特异性酯酶活性随着硒浓度的加大 ,培养时间的延长呈下降趋势 ,并且10 μmol L、5 0 μmol L亚硒酸钠培养 2d后 ,3种酶的活性完全消失。 　结论　硒对肿瘤细胞的生长和酶的活性都具有抑制作用 ,并且两者之间存在着一致性。 展开更多

关键词 亚硒酸钠 bcap-37人乳腺癌细胞 酶组织化学

原文传递

苦参碱诱导人乳腺癌Bcap-37细胞发生自噬与自噬相关蛋白mTOR相关性研究 被引量：11

14

作者 任莉莉 王霖玲 王晓稼 《浙江中西医结合杂志》 2016年第9期783-786,共4页

目的探讨苦参碱是否可通过抑制mTOR活性阻断PI3K/Akt信号通路,诱导人乳腺癌Bcap-37细胞自噬发生。方法苦参碱(终浓度为0、1、2mg/m L)±氯喹(chloroquine)(自噬抑制剂)处理乳腺癌Bcap-37细胞24h,运用免疫印迹(Western-blot)法检测PI... 目的探讨苦参碱是否可通过抑制mTOR活性阻断PI3K/Akt信号通路,诱导人乳腺癌Bcap-37细胞自噬发生。方法苦参碱(终浓度为0、1、2mg/m L)±氯喹(chloroquine)(自噬抑制剂)处理乳腺癌Bcap-37细胞24h,运用免疫印迹(Western-blot)法检测PI3K/Akt信号通路自噬相关蛋白mTOR、p-mTOR、p70S6K、p-p70S6、e IF4E表达。苦参碱(终浓度为0、1、2mg/m L)±Bafilomycin A1(自噬抑制剂)/Rapamcin(自噬诱导剂)处理乳腺癌Bcap-37细胞24h,Western-blot法检测e IF4E蛋白的表达。结果苦参碱剂量依赖性抑制mTOR、p70S6k磷酸化,同时降低e IF4E蛋白表达;当苦参碱联合氯喹(CQ)作用于乳腺癌Bcap-37细胞时,则对上述蛋白表达均无明显抑制作用。苦参碱联合Bafilomycin A1作用于Bcap-37细胞时,e IF4E蛋白表达同样无明显改变;苦参碱联合Rapamcin时,e IF4E蛋白表达则呈剂量依赖性降低。结论苦参碱可通过抑制mTOR活性阻断PI3K/Akt信号通路,从而诱导人乳腺癌Bcap-37细胞自噬发生。 展开更多

关键词 苦参碱 bcap-37细胞 自噬 MTOR P70S6K EIF4E

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苦参碱对人乳腺癌Bcap-37细胞增殖的影响及其作用机制探讨 被引量：2

15

作者 郑如珍 张静宜 +1 位作者 邵喜英 王晓稼 《浙江中西医结合杂志》 2012年第12期945-947,共3页

目的:观察苦参碱对人乳腺癌Bcap-37细胞增殖的影响,并探讨其作用机制。方法:用MTT法检测苦参碱对Bcap-37细胞的抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Western blot法检测Caspase-3、Bax、Bcl-2蛋白表达。结果:苦参碱对Bcap-37细胞增殖具有... 目的:观察苦参碱对人乳腺癌Bcap-37细胞增殖的影响,并探讨其作用机制。方法:用MTT法检测苦参碱对Bcap-37细胞的抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Western blot法检测Caspase-3、Bax、Bcl-2蛋白表达。结果:苦参碱对Bcap-37细胞增殖具有明显抑制作用,且具有剂量和时间依赖性。与对照组比较,药物作用24、48、72h后,苦参碱组的凋亡率均明显增高(P<0.01),并以作用48h最明显。Caspase-3、Bax蛋白表达增高,Bcl-2蛋白降低。结论:苦参碱对Bcap-37细胞生长具有明显抑制作用,其作用机制可能与上调Caspase-3、Bax蛋白,下调Bcl-2蛋白表达,促进细胞凋亡有关。 展开更多

关键词 苦参碱 乳腺癌 bcap-37细胞 细胞凋亡

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RNAi沉默β-arrestin2基因对人乳腺癌Bcap37细胞凋亡的影响 被引量：1

16

作者 胡美琴 高琨 《现代肿瘤医学》 CAS 2018年第9期1337-1340,共4页

目的:通过体外实验观察β-arrestin2的小分子干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)对人乳腺癌Bcap37细胞凋亡的影响。方法:针对β-arrestin2基因设计siRNA序列,克隆到空载体PGPU6/GFP/Neo,转化DH5α菌株,提取质粒,进行测序分析。在脂质... 目的:通过体外实验观察β-arrestin2的小分子干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)对人乳腺癌Bcap37细胞凋亡的影响。方法:针对β-arrestin2基因设计siRNA序列,克隆到空载体PGPU6/GFP/Neo,转化DH5α菌株,提取质粒,进行测序分析。在脂质体lipofectamineTM2000的介导下转染Bcap37细胞,同时转染空白对照组及阴性对照组。转染后用定量Western blot检测Bcap37细胞β-arrestin2蛋白的表达情况,流式细胞仪检测Bcap37细胞的凋亡情况。结果:我们的研究表明,β-arrestin2的siRNA能有效下调β-arrestin2的表达,与对照组相比,β-arrestin2干扰组β-arrestin2的表达明显下降(P<0.05);β-arrestin2干扰组Bcap37细胞凋亡率显著高于对照组。结论:β-arrestin2干扰组能有效降低β-arrestin2的表达,有效促进Bcap37细胞凋亡;β-arrestin2可能成为乳腺癌基因治疗的一个新靶点。 展开更多

关键词 β-arrestin2 小分子干扰RNA bcap37细胞 细胞凋亡

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灭活仙台病毒Tianjin株诱导人乳腺癌细胞系BCAP37凋亡研究

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作者 韩哲 王顺达 +2 位作者 陈曦腾 赵杰 石立莹 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2014年第8期565-569,共5页

目的:研究灭活仙台病毒Tianjin株诱导人乳腺癌细胞系BCAP37凋亡的作用。方法:用紫外线灭活不同浓度仙台病毒Tianjin株感染人乳腺癌BCAP37细胞,设立活病毒对照孔及正常细胞对照孔,感染后不同时间收集细胞,MTT法检测细胞存活率,琼脂糖凝... 目的:研究灭活仙台病毒Tianjin株诱导人乳腺癌细胞系BCAP37凋亡的作用。方法:用紫外线灭活不同浓度仙台病毒Tianjin株感染人乳腺癌BCAP37细胞,设立活病毒对照孔及正常细胞对照孔,感染后不同时间收集细胞,MTT法检测细胞存活率,琼脂糖凝胶电泳检测DNA片段降解情况,Hoechst染色观察细胞凋亡形态学变化,AnnexinⅤ/PI标记流式细胞仪检测细胞凋亡百分率,蛋白质印迹法检测Caspase-9及Caspase-3蛋白的表达。结果:MTT检测发现灭活仙台病毒Tianjin株对人乳腺癌细胞系BCAP37有明显的生长抑制作用,且呈剂量-时间依赖性;DNA片段琼脂糖凝胶电泳显示灭活病毒组呈典型的细胞凋亡梯形条带;Hoechst染色显示灭活病毒能够诱导BCAP37凋亡,显微镜下可见细胞核固缩,破裂,溶解,凋亡小体形成等形态学改变;流式细胞仪检测灭活病毒组细胞凋亡率为(15.1±1.1)%,明显高于正常细胞对照组,P<0.001;蛋白质印迹法结果显示,灭活病毒作用24h即出现Caspase-3及Caspase-9活化片段,与正常细胞组比较均明显升高,P值均<0.001。结论:灭活仙台病毒Tianjin株能够诱导人乳腺癌BCAP37细胞凋亡,其机制可能与Caspase-9和Caspase-3活化有关。 展开更多

关键词 仙台病毒Tianjin株 乳腺肿瘤 bcap37 凋亡

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纳米氧化铈对人乳腺癌Bcap-37细胞裸鼠移植瘤的生长抑制作用

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作者 李宁 王春燕 +6 位作者 郑辉 邵帅 佟鹏 齐雪松 曲功霖 田梅 苟巧 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2015年第11期1163-1166,共4页

目的探讨纳米氧化铈(nm-Ce O2)对人乳腺癌Bcap-37细胞裸鼠移植瘤的生长抑制作用。方法建立人乳腺癌Bcap-37细胞裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为阴性对照组(等体积双蒸水)、阳性药组[九州虫草2 000 mg/(kg·次)]、nm-Ce O2高、中、低剂... 目的探讨纳米氧化铈(nm-Ce O2)对人乳腺癌Bcap-37细胞裸鼠移植瘤的生长抑制作用。方法建立人乳腺癌Bcap-37细胞裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为阴性对照组(等体积双蒸水)、阳性药组[九州虫草2 000 mg/(kg·次)]、nm-Ce O2高、中、低剂量组[300、100、33.33 mg/(kg·次)],共5组,各组荷瘤裸鼠均经口灌胃给药,每天1次,共17 d,观察各组裸鼠移植瘤生长情况,计算肿瘤体积(VT)、肿瘤生长抑制率,称量肿瘤重量,观察移植瘤组织病理变化,采用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记(terminal dexynucleotidyl transferase mediated d UTP nick end la beling,TUNEL)法检测移植瘤细胞凋亡率。结果与阴性对照组比较,nm-Ce O2各剂量组均具有抑制人乳腺癌Bcap-37细胞裸鼠皮下移植瘤生长的作用,并能促进瘤细胞的变性、坏死和凋亡(P<0.05)。nm-Ce O2高剂量组的肿瘤生长抑制作用低于阳性药组(P<0.05),但nm-Ce O2高、中剂量组促进肿瘤细胞凋亡的作用高于阳性药组(P<0.05)。结论 nm-Ce O2对人乳腺癌Bcap-37细胞裸鼠皮下移植瘤具有显著的生长抑制作用。 展开更多

关键词 纳米氧化铈 乳腺癌 bcap-37细胞 肿瘤

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维生素E琥珀酸酯联合阿霉素对乳腺癌细胞株Bcap-37的生长抑制作用

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作者 张伟 张军初 +3 位作者 朱大乔 徐昕昀 张玲珍 王强 《实用癌症杂志》 2005年第3期232-234,共3页

目的检测维生素E琥珀酸酯(VES)联合阿霉素(ADM)对乳腺癌细胞生长抑制作用。方法以VES联合ADM作用于人乳腺癌Bcap-37细胞24h和36h,VES浓度为5、10、20mg/L,ADM的浓度分别为0.25、1、2mg/L。采用MTT法测定对细胞增殖的抑制作用,以流式细... 目的检测维生素E琥珀酸酯(VES)联合阿霉素(ADM)对乳腺癌细胞生长抑制作用。方法以VES联合ADM作用于人乳腺癌Bcap-37细胞24h和36h,VES浓度为5、10、20mg/L,ADM的浓度分别为0.25、1、2mg/L。采用MTT法测定对细胞增殖的抑制作用,以流式细胞仪分析药物联合作用前后乳腺癌细胞凋亡率的变化和对细胞表面Fas表达的影响。结果VES联合ADM对乳腺癌Bcap-37细胞具有显著的生长抑制和凋亡诱导作用。流式细胞仪分析细胞周期,Bcap-37细胞的自然凋亡率为0.7%,5mg/L和20mg/LVES作用24h后凋亡率分别为10.1%和19.2%,1mg/L和2mg/LADM作用24h后的凋亡率分别为16.0%和23.3%。5mg/LVES联合1mg/LADM以及20mg/LVES联合2mg/LADM作用24h后的凋亡率分别升高至31.1%和40.7%。VES联合ADM作用24h后Bcap-37细胞表面Fas表达增强。结论VES联合ADM对乳腺癌Bcap-37细胞具有显著的生长抑制作用,其机制可能与细胞表面Fas表达上调有关。 展开更多

关键词 维生素E琥珀酸酯 阿霉素 乳腺癌 bcap-37细胞株

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冬凌草甲素对人乳腺癌Bcap-37细胞的增殖抑制作用及其机制 被引量：8

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作者 杜海爽 郭玲玲 +3 位作者 顾振纶 蒋小岗 苏晓燕 郭次仪 《苏州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2010年第3期473-476,共4页

目的观察冬凌草甲素对人乳腺癌细胞株Bcap-37细胞的生长抑制作用,初步探讨冬凌草甲素调控乳腺癌细胞增殖的分子机制。方法 MTT比色法检测冬凌草甲素对Bcap-37细胞的增殖抑制作用,相差显微镜观察细胞形态变化,流式细胞仪分析细胞周期分布... 目的观察冬凌草甲素对人乳腺癌细胞株Bcap-37细胞的生长抑制作用,初步探讨冬凌草甲素调控乳腺癌细胞增殖的分子机制。方法 MTT比色法检测冬凌草甲素对Bcap-37细胞的增殖抑制作用,相差显微镜观察细胞形态变化,流式细胞仪分析细胞周期分布,RT-PCR检测p21、cdc2和cyclin B1 mRNA表达。结果冬凌草甲素对Bcap-37细胞有显著的增殖抑制作用,呈时间剂量依赖趋势(P<0.01);处理后的Bcap-37细胞发生明显的形态改变;作用24h后,Bcap-37细胞在G2/M期阻滞;冬凌草甲素作用Bcap-37细胞后,p21 mRNA水平的表达增加,而cdc2、cyclin B1 mRNA的表达降低(均P<0.05)。结论冬凌草甲素可抑制乳腺癌细胞的增殖,该作用可能与p21 mRNA表达上调及cdc2、cyclin B1 mRNA表达下调有关。 展开更多

关键词 冬凌草甲素 细胞周期 人乳腺癌bcap-37细胞株

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