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异源过表达森林草莓FveBBX32负调控拟南芥的叶绿素含量和开花时间
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作者 缪百灵 汪园园 +6 位作者 侯威威 张怡如 陈娟娟 李亮杰 张贺 朱庆松 董向向 《生物技术通报》 北大核心 2025年第11期293-300,共8页
【目的】解析森林草莓转录因子FveBBX32在调节叶绿素积累和开花时间中的功能,为花期调控和培育高光效草莓新品种提供理论依据和候选基因资源。【方法】以森林草莓‘Ruegen’cDNA为模板克隆FveBBX32,并进行生物信息学分析和组织表达分析... 【目的】解析森林草莓转录因子FveBBX32在调节叶绿素积累和开花时间中的功能,为花期调控和培育高光效草莓新品种提供理论依据和候选基因资源。【方法】以森林草莓‘Ruegen’cDNA为模板克隆FveBBX32,并进行生物信息学分析和组织表达分析,利用农杆菌侵染获得转基因拟南芥株系,观察并记录转基因材料的叶片颜色和开花表型,并利用RT-qPCR检测叶绿素和开花途径中相关基因的表达量。【结果】FveBBX32的CDS全长为795 bp,编码264个氨基酸,为亲水性蛋白,相对分子质量为28638.63 Da,含有1个B-box结构域,属于BBX第Ⅴ亚组,与月季的亲缘关系较近。FveBBX32在森林草莓根、茎、叶、花、果中均有表达,其中,在花和叶中表达较高。过表达FveBBX32拟南芥表现出叶色变黄和开花时间延迟的表型,过表达株系中叶绿素合成相关基因AtGUN4、AtCHLH、AtCHL27和开花相关基因AtFT、AtSOC1、AtFUL的表达量均有不同程度的降低。【结论】森林草莓FveBBX32是植物叶绿素积累和开花时间的负调控转录因子。 展开更多
关键词 草莓 bbx32 叶绿素 开花 转基因
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大豆BBX32基因生物信息学分析及基因编辑靶点设计 被引量:3
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作者 李泰 杜浩 +5 位作者 黎永力 程玉汉 南海洋 侯智红 程群 刘宝辉 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期602-611,共10页
BBX32基因是一种含锌指结构的转录因子,广泛的参与植物生长和发育过程,但在大豆中,BBX32基因的具体生物学功能还尚未被解析。为研究大豆BBX32基因在大豆中的分子机理和生物学功能,本研究通过同源比对分析发现,大豆中含有两个与拟南芥BB... BBX32基因是一种含锌指结构的转录因子,广泛的参与植物生长和发育过程,但在大豆中,BBX32基因的具体生物学功能还尚未被解析。为研究大豆BBX32基因在大豆中的分子机理和生物学功能,本研究通过同源比对分析发现,大豆中含有两个与拟南芥BBX32同源的基因,分别命名为GmBBX32a和GmBBX32b。同时,通过检索RNA-seq数据库,对GmBBX32a和GmBBX32b在大豆中不同组织的表达部位进行分析,结果发现GmBBX32a在花、叶和豆荚中具有较高的表达量,而GmBBX32b在豆荚和花中具有较高的表达量,说明GmBBX32a和GmBBX32b可能参与大豆的开花和籽粒大小形成。此外,利用CRISPR/Cas9技术,构建GmBBX32a和GmBBX32b基因的敲除载体,并转化到大豆毛根中进行靶点检测,最终获得了有编辑效率的基因编辑载体,为接下来获得稳定转基因材料提供有效编辑靶点信息。 展开更多
关键词 大豆 bbx32基因 生物信息学分析 CRISPR/Cas9技术 编辑靶点
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BBX32 dampens E3 ligase activity to promote greening in emerging seedlings
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作者 Kangwei Wang Yun Meng +8 位作者 Qian Tian Rong Zhou Shi-an Wu Jiashuai Wu Shameen Sajid Ying He Junjie Ling Haiyang Jiang Qingqing Wu 《Journal of Integrative Plant Biology》 2025年第8期2078-2099,共22页
Germinating seeds undergo elaborate de-etiolation developmental transitions upon initial soil emergence.As central transcription factors promoting cotyledon greening,the abundance of ETHYLENE-INSENSITIVE 3(EIN3)and PH... Germinating seeds undergo elaborate de-etiolation developmental transitions upon initial soil emergence.As central transcription factors promoting cotyledon greening,the abundance of ETHYLENE-INSENSITIVE 3(EIN3)and PHYTOCHROME-INTERACTING FACTOR 3(PIF3)are strictly controlled by physically associating themselves with the EIN3-BINDING F BOX PROTEINS 1 and 2(EBF1/2)for ubiquitination.Here,we report that the B-box zinc-finger protein BBX32,as a positive regulator during seedling de-etiolation.BBX32 is robustly elevated during the dark-to-light transitions.Constitutively expressing BBX32 ultimately protects against severe photobleaching damage by synchronizing the accumulation of protochlorophyllide(Pchlide)and the differentiation of etioplast–chloroplast apparatus in buried seedlings.Specifically,BBX32 directly interacts with EIN3,PIF3 and EBF1/2.These associations disrupt the assembly of the SCF^(EBF1/2)-EIN3/PIF3 E3 ligation protein complexes,thus dampening E3 ligase activity and robustly controlling EIN3/PIF3 stability.Under soil conditions,BBX32-ox largely rescues the greening deficiency of EBF1ox,and all EIN3ox/bbx32 seedlings override the bbx32 mutant defect and successfully turn green.Both biochemical findings and genetic evidence reveal a novel regulatory paradigm by which the B-box protein dampens the E3 ligase binding activity to achieve green seedlings upon changes in light or soil environmental conditions. 展开更多
关键词 bbx32 EIN3 GREENING light signaling PIF3 post-translational regulation
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