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ERK1/2和p38MAPK介导BAPTA-AM抑制RANKL诱导小鼠骨髓巨噬细胞分化的机制研究 被引量:5
1
作者 周四桂 袁茜 +2 位作者 潘雪刁 金桂芳 徐立朋 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期1146-1150,共5页
目的探讨BAPTA-AM对RANKL诱导的小鼠骨髓巨噬细胞分化成破骨细胞能力的影响以及其信号通路机制的研究。方法体外分离培养小鼠骨髓巨噬细胞,建立RANKL诱导的小鼠骨髓巨噬细胞分化成破骨细胞的实验模型。应用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染... 目的探讨BAPTA-AM对RANKL诱导的小鼠骨髓巨噬细胞分化成破骨细胞能力的影响以及其信号通路机制的研究。方法体外分离培养小鼠骨髓巨噬细胞,建立RANKL诱导的小鼠骨髓巨噬细胞分化成破骨细胞的实验模型。应用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色法检测RANKL诱导的小鼠破骨细胞分化和存活的能力及BAPTA-AM对其的抑制作用;采用免疫印迹法(Western blot)测定ERK1/2和p38MAPK蛋白的磷酸化水平。结果 RANKL诱导的小鼠骨髓巨噬细胞胞质内可见多核,并能分化成为破骨细胞。不同浓度的BAPTA-AM(1、2μmol·L-1)对破骨细胞的形成具有明显的抑制作用,且随着浓度增加能明显地降低TRAP阳性细胞数目。RANKL对小鼠骨髓巨噬细胞的ERK1/2和p38MAPK具有明显的激活作用,诱导胞质ERK1/2和p38MAPK磷酸化,而不同浓度的BAPTA-AM可明显地抑制这种磷酸化作用。结论 BAPTA-AM能明显地抑制RANKL诱导的小鼠骨髓巨噬细胞分化成破骨细胞,这种抑制作用可能是通过ERK1/2和p38MAPK信号蛋白介导。 展开更多
关键词 bapta-AM ERK1/2 P38MAPK 巨噬细胞 RANKL 细胞分化
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BAPTA-AM对HepG-2细胞MT的保护作用及其机制 被引量:7
2
作者 付再林 宋必卫 +1 位作者 施水娟 杨毅 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期859-863,共5页
目的观察BAPTA-AM抗H2O2诱导的HepG-2细胞MT损伤作用并探讨其机制。方法采用四甲基偶氮唑盐比色(MTT)、Rhodamine 123(Rh 123))荧光染色、细胞色素C酶联免疫分析、Caspase-9活性检测试剂盒、活性氧ROS检测法分别测定HepG-2细胞活性、线... 目的观察BAPTA-AM抗H2O2诱导的HepG-2细胞MT损伤作用并探讨其机制。方法采用四甲基偶氮唑盐比色(MTT)、Rhodamine 123(Rh 123))荧光染色、细胞色素C酶联免疫分析、Caspase-9活性检测试剂盒、活性氧ROS检测法分别测定HepG-2细胞活性、线粒体(MT)膜电位、MT细胞色素C(CytC)的释放、Caspase-9的激活、活性氧(ROS)的产生量。结果 BAPTA-AM能抑制H2O2损伤HepG-2细胞所致MT跨膜电位的降低,减少CytC的释放,抑制Caspase-9激活和ROS的生成,提高受攻击H2O2的细胞活力。结论 BAPTA-AM通过减轻钙超载,保护MT,抑制凋亡通路的激活,产生抗细胞损伤、挽救细胞生命之效。 展开更多
关键词 bapta-AM HEPG-2细胞 线粒体膜电位 细胞色素C CASPASE-9 活性氧 凋亡通路
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BAPTA-AM的研究现状 被引量:13
3
作者 宋必卫 储昭兴 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期851-853,共3页
BAPTA-AM是一前药,进入细胞后在脂酶作用下释出BAPTA,快速与Ca2+络合,控制细胞内钙水平,是研究Ca2+对细胞功能调节作用的标准工具药。BAPTA-AM对缺血缺氧下的神经细胞和细胞毒攻击下肝细胞保护作用强,并且能作用于心血管系统和呼吸系统... BAPTA-AM是一前药,进入细胞后在脂酶作用下释出BAPTA,快速与Ca2+络合,控制细胞内钙水平,是研究Ca2+对细胞功能调节作用的标准工具药。BAPTA-AM对缺血缺氧下的神经细胞和细胞毒攻击下肝细胞保护作用强,并且能作用于心血管系统和呼吸系统,有望成为中风、肝功能衰竭、呼吸困难综合症等危重疾病的治疗药,具有很大的开发价值。 展开更多
关键词 bapta-AM 细胞保护 中风 钙络合剂 细胞凋亡 钙超载
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钙络合剂BAPTA-AM对胞外酸化诱导大鼠关节软骨细胞自噬作用的影响及其可能机制 被引量:3
4
作者 高文凡 陈飞虎 +4 位作者 葛金芳 邓子云 雷静 周仁鹏 王志森 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期655-659,共5页
目的观察BAPTA-AM对胞外酸化诱导大鼠关节软骨细胞自噬作用的影响,探讨其可能的作用机制。方法体外使用胰酶-Ⅱ型胶原酶消化法分离提取大鼠关节软骨细胞,分为正常组(p H 7.4)、酸化组(p H 6.0)、以及分别经BAPTA-AM处理的正常组和酸化组... 目的观察BAPTA-AM对胞外酸化诱导大鼠关节软骨细胞自噬作用的影响,探讨其可能的作用机制。方法体外使用胰酶-Ⅱ型胶原酶消化法分离提取大鼠关节软骨细胞,分为正常组(p H 7.4)、酸化组(p H 6.0)、以及分别经BAPTA-AM处理的正常组和酸化组,激光共聚焦技术检测软骨细胞胞内钙离子变化,实时荧光定量PCR法检测细胞自噬基因Beclin-1、ULK1 mRNA的表达,Western blot法检测自噬蛋白LC3的表达,吖啶橙染色分析细胞自噬溶酶体形成情况。结果与p H 7.4正常组比较,p H 6.0酸化刺激明显增加大鼠关节软骨细胞内Ca2+的浓度,且自噬标志物Beclin-1、ULK1 mRNA及LC3Ⅱ蛋白表达均明显升高,酸性自噬溶酶体形成增多,同时酸化刺激能引起Ca MKKβ及pAMPK蛋白表达水平增高,磷酸化蛋白p-m TOR水平明显降低。BAPTA-AM酸化组自噬水平和Ca MKKβ及p-AMPK表达明显降低,p-m TOR表达明显升高。结论 BAPTA-AM能明显减弱胞外酸化诱导软骨细胞自噬作用,其机制可能与抑制胞内Ca2+有关。 展开更多
关键词 bapta-AM 类风湿关节炎 关节软骨细胞 细胞自噬 CA2+ 胞外酸化
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LC-APCI-MS/MS法测定大鼠尿液和胆汁中的BAPTA-AM浓度 被引量:3
5
作者 郑枫 刘文英 +1 位作者 张薇 盛亮 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期243-247,共5页
目的:建立液相色谱-大气压化学离子化-串联质谱联用(LC-APCI-MS/MS)法测定大鼠尿液和胆汁中的BAPoTA-AM浓度。方法:尿液和胆汁样品经乙腈沉淀去蛋白,离心后取上清液进行LC-APCI-MS/MS分析。色谱柱:Zorbax C18柱(150mm×4.... 目的:建立液相色谱-大气压化学离子化-串联质谱联用(LC-APCI-MS/MS)法测定大鼠尿液和胆汁中的BAPoTA-AM浓度。方法:尿液和胆汁样品经乙腈沉淀去蛋白,离心后取上清液进行LC-APCI-MS/MS分析。色谱柱:Zorbax C18柱(150mm×4.6mm,5μm);流动相:含0.5%乙酸和75%甲醇的水溶液;流速:1mL/min。大气压化学离子化(APCI)离子源,以选择离子反应检测(SRM)方式进行检测。用于定量分析的检测离子对分别为:m/z 765.15→647.25(BAPTA-AM)和m/z 419.10→343.05(内标,尼莫地平)。结果:尿液和胆汁中BAPTA-AM在0.25-50n异/mL范围内线性关系良好,回收率大于90%,定量下限为0.25ng/mL.批内与批间RSD均小于10%。结论:建立的LC-APCI-MS/MS法符合生物样本测定要求,可用于大鼠静脉给予BAPTA-AM脂质体后,大鼠尿液和胆汁中BAPTA-AM浓度的测定。 展开更多
关键词 bapta-AM 液相色谱-大气压化学离子化-串联质谱联用 尿液 胆汁 含量测定
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BAPTA-AM在体外大鼠血浆中3个代谢产物的结构确证 被引量:3
6
作者 张薇 郑枫 刘文英 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期151-154,共4页
目的:确证BAPTA-AM在体外大鼠血浆中3个代谢产物的结构。方法:采用碱性催化水解法,制备得到BAP-TA-AM3个降解产物,并通过NMR和MS对其进行结构解析。比较体外代谢产物和制备的对照品的色谱和质谱行为,对体外代谢产物的结构予以确认。结... 目的:确证BAPTA-AM在体外大鼠血浆中3个代谢产物的结构。方法:采用碱性催化水解法,制备得到BAP-TA-AM3个降解产物,并通过NMR和MS对其进行结构解析。比较体外代谢产物和制备的对照品的色谱和质谱行为,对体外代谢产物的结构予以确认。结果和结论:BAPTA-AM在体外大鼠血浆中的3个代谢产物是:1,2-双(邻氨基酚氧基)乙烷-N,N,N′,N′-四乙酸-N-乙酰氧甲基酯、1,2-双(邻氨基酚氧基)乙烷-N,N,N′,N′-四乙酸-N,N′-二乙酰氧甲基酯和1,2-双(邻氨基酚氧基)乙烷-N,N,N′,N′-四乙酸-N,N,N′-三乙酰氧甲基酯。 展开更多
关键词 bapta-AM 代谢产物 LC-MS
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BAPTA-AM对OGD-再灌致HepG-2细胞损伤的保护作用研究 被引量:6
7
作者 宋必卫 骆钱芬 《浙江工业大学学报》 CAS 2013年第2期133-137,170,共6页
观察BAPTA-AM抗OGD-再灌对HepG-2细胞的损伤作用及其机制.在氧/糖剥夺环境中培养细胞12h后复糖复氧,检测培养液中乳酸脱氢酶(LDH)、谷丙转氨酶(ALT)及谷草转氨酶(AST)的活性,MTT法检测细胞活力,Annexin V-EGFP/PI荧光染色检测细胞死亡率... 观察BAPTA-AM抗OGD-再灌对HepG-2细胞的损伤作用及其机制.在氧/糖剥夺环境中培养细胞12h后复糖复氧,检测培养液中乳酸脱氢酶(LDH)、谷丙转氨酶(ALT)及谷草转氨酶(AST)的活性,MTT法检测细胞活力,Annexin V-EGFP/PI荧光染色检测细胞死亡率,A23187拮抗实验及Fura-2/AM测定细胞内游离钙浓度等方法,评价BAPTA-AM抗氧/糖剥夺-再灌注致HepG-2细胞损伤的作用.BAPTA-AM能明显抑制OGD-再灌引起的HepG-2细胞培养液中的LDH、ALT、AST水平的升高,抑制HepG-2细胞的坏死和细胞内游离钙浓度的升高,明显提高HepG-2细胞活力,A23187减弱BAPTA-AM保肝作用.BAPTA-AM通过降低细胞内游离钙浓度,明显减轻OGD-再灌对HepG-2细胞的损伤. 展开更多
关键词 bapta—AM HEPG-2细胞 OGD-再灌
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BAPTA-AM 脂质体通过恢复胞质钙稳态抑制D-GalN 致 HepG-2 细胞凋亡 被引量:2
8
作者 付再林 郑英 +2 位作者 陶蓉 潘丽玉 宋必卫 《解放军药学学报》 CAS 2014年第4期288-291,295,共5页
目的探讨1,2-二(2-氨基苯氧基)乙烷-N,N,N',N'-四乙酸四乙酰氧甲基酯(BAPTA-AM)恢复胞质钙离子稳态后对D-GalN诱导HepG-2细胞凋亡的影响。方法建立D-GalN诱导HepG-2细胞凋亡模型,采用MTT比色法、台盼蓝染色及AnnexinⅤ-EGFP、Ho... 目的探讨1,2-二(2-氨基苯氧基)乙烷-N,N,N',N'-四乙酸四乙酰氧甲基酯(BAPTA-AM)恢复胞质钙离子稳态后对D-GalN诱导HepG-2细胞凋亡的影响。方法建立D-GalN诱导HepG-2细胞凋亡模型,采用MTT比色法、台盼蓝染色及AnnexinⅤ-EGFP、Hoechst-33258荧光染色等考察HepG-2细胞活性及细胞凋亡情况;通过Fura-2/AM钙离子荧光探针法测定不同处理组细胞内游离钙浓度,初步评价钙离子稳态与细胞凋亡的关系。结果 BAPTA-AM脂质体能显著抑制D-GalN致胞质钙离子浓度的升高,恢复胞质钙稳态,维持细胞形态,减少D-GalN诱导细胞凋亡。在一定范围内,细胞内钙离子浓度的增加与细胞活性的提高呈负相关,且钙离子载体A23187能够拮抗BAPTA-AM脂质体对HepG-2细胞的保护作用。结论BAPTA-AM脂质体通过减轻钙超载,抑制D-GalN诱导HepG-2细胞凋亡。 展开更多
关键词 bapta-AM脂质体 HEPG-2细胞 钙离子稳态 钙超载 细胞形态 A23187
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BAPTA-AM对MDCK细胞的保护作用及其机制 被引量:4
9
作者 施水娟 宋必卫 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期255-260,共6页
目的观察BAPTA-AM抗D-氨基半乳糖(D-GalN)诱导MDCK细胞损伤作用,探讨其作用机制。方法采用MTT法,Annexin V-EGFP/PI与Hoechst33342/PI荧光染色,罗丹明123(Rhodamine 123)荧光染色,Caspase-8、Caspase-9活性测定及钙离子载体A23187诱导... 目的观察BAPTA-AM抗D-氨基半乳糖(D-GalN)诱导MDCK细胞损伤作用,探讨其作用机制。方法采用MTT法,Annexin V-EGFP/PI与Hoechst33342/PI荧光染色,罗丹明123(Rhodamine 123)荧光染色,Caspase-8、Caspase-9活性测定及钙离子载体A23187诱导细胞内高钙等方法,分别测定D-GalN攻击下MDCK细胞活性,细胞凋亡状况,线粒体膜电位(△Ψm)、Caspase-8、Caspase-9活性和细胞内游离钙浓度([Ca2+]i)变化等。结果 BAPTA-AM能明显抑制D-GalN所致的细胞活力下降、减少细胞凋亡、维持△Ψm,抑制Caspase-8、Caspase-9的激活,减轻A23187所致细胞损伤,降低[Ca2+]i。结论 BAPTA-AM通过减轻钙超载,保护线粒体、抑制外源及内源性凋亡通路的激活,发挥抗肾细胞凋亡作用。 展开更多
关键词 bapta-AM MDCK细胞 线粒体 CASPASE-8 CASPASE-9 A23187 细胞凋亡
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BAPTA-AM脂质体抗大鼠急性肾损伤作用 被引量:1
10
作者 宋必卫 何治宇 +2 位作者 樊俏玫 俞巧丽 郑彩云 《浙江工业大学学报》 CAS 2014年第5期491-495,共5页
为了观察BAPTA-AM脂质体(BAPTA-AM liposome,BA-L)抗大鼠缺血再灌注引起的急性肾损伤(Acute kidney injury,AKI)作用,采取夹闭双侧肾动脉45min后再灌注一定时间致大鼠AKI模型,BA-L治疗组于再灌注开始时立即尾静脉注射BA-L.再灌注24h,检... 为了观察BAPTA-AM脂质体(BAPTA-AM liposome,BA-L)抗大鼠缺血再灌注引起的急性肾损伤(Acute kidney injury,AKI)作用,采取夹闭双侧肾动脉45min后再灌注一定时间致大鼠AKI模型,BA-L治疗组于再灌注开始时立即尾静脉注射BA-L.再灌注24h,检测各组大鼠血清Cr,BUN,Cys C,LDH水平与肾组织匀浆MDA含量和SOD活性,HE染色观察肾组织病理学变化.给予BA-L治疗后AKI大鼠血清Cr,BUN,Cys C,LDH及肾组织匀浆MDA含量显著降低,SOD活性增强,肾功能明显改善,HE染色显示BA-L明显减轻肾小管损伤.结果表明BA-L能显著减轻缺血再灌注引起的大鼠急性肾损伤. 展开更多
关键词 bapta-AM CA2+ 缺血再灌注 急性肾损伤
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BAPTA-AM脂质体抗D-GalN/LPS所致的小鼠急性肝衰竭 被引量:2
11
作者 杨毅 宋必卫 《浙江工业大学学报》 CAS 2013年第3期280-285,共6页
观察BAPTA-AM脂质体(BA-L)对D-GalN/LPS诱导的小鼠急性肝功能衰竭(ALF)保护作用并探讨其保肝作用机制.建立D-GalN/LPS致小鼠ALF模型,测定给予BA-L小鼠的24h死亡率,肝指数,肝含水质量分数,血清ALT和NO水平,肝匀浆GSH,GSH-Px,SOD,MDA水平... 观察BAPTA-AM脂质体(BA-L)对D-GalN/LPS诱导的小鼠急性肝功能衰竭(ALF)保护作用并探讨其保肝作用机制.建立D-GalN/LPS致小鼠ALF模型,测定给予BA-L小鼠的24h死亡率,肝指数,肝含水质量分数,血清ALT和NO水平,肝匀浆GSH,GSH-Px,SOD,MDA水平,HE染色观察组织病理学改变,TUNEL法观察肝细胞凋亡并统计凋亡指数.结果表明:BA-L可显著减少小鼠死亡率,降低肝指数,血清ALT和NO值降低,可使肝匀浆GSH,GSH-Px,SOD升高,而MDA减少,HE染色可见肝组织病理情况明显改善,TUNEL染色可见肝细胞凋亡指数明显下降,其效果远优于甘草酸二铵,BA-L有上佳的抗ALF作用. 展开更多
关键词 bapta-AM 脂质体 急性肝功能衰竭 细胞凋亡 保肝作用
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BAPTA-AM脂质体抗大鼠重症急性胰腺炎的作用 被引量:1
12
作者 宋必卫 郑彩云 俞巧丽 《浙江工业大学学报》 CAS 北大核心 2015年第5期562-566,共5页
为观察BAPTA-AM脂质体(BA-L)抗重症急性胰腺炎(SAP)的作用,采用胰胆管逆行注射4%牛黄胆酸钠(TC)制作大鼠SAP模型.BA-L治疗组于造模后立即尾静脉注射相应剂量BA-L,给药24h后,观察各组大鼠的死亡情况,检测各组大鼠血清AMS,LDH,TNF-α水平... 为观察BAPTA-AM脂质体(BA-L)抗重症急性胰腺炎(SAP)的作用,采用胰胆管逆行注射4%牛黄胆酸钠(TC)制作大鼠SAP模型.BA-L治疗组于造模后立即尾静脉注射相应剂量BA-L,给药24h后,观察各组大鼠的死亡情况,检测各组大鼠血清AMS,LDH,TNF-α水平以及胰腺组织匀浆MDA水平及SOD活性,HE染色观察胰腺组织病理学改变.结果表明:给予BA-L治疗后SAP大鼠死亡率明显降低,血清AMS,LDH,TNF-α水平和胰腺组织匀浆MDA水平显著降低,SOD活性增高,HE染色组织切片显示BA-L明显减轻胰腺组织损伤.表明BA-L能显著减轻大鼠SAP,为开发BA-L成临床SAP治疗新药物提供必要的药效学依据. 展开更多
关键词 bapta-AM 急性胰腺炎 CA^2+ TNF-Α
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螯合抑制剂BAPTA在菱镁矿与方解石浮选分离中的作用机理 被引量:5
13
作者 印万忠 孙浩然 《矿产保护与利用》 2022年第2期100-106,共7页
由于菱镁矿和方解石具有相似的晶体结构和化学性质,故通过浮选较难实现二者的有效分离。BAPTA作为一种Ca-选择性螯合剂,被用以改善菱镁矿与方解石的浮选分离。浮选试验结果表明,在油酸钠体系下,BAPTA能选择性地抑制方解石上浮,且在矿浆p... 由于菱镁矿和方解石具有相似的晶体结构和化学性质,故通过浮选较难实现二者的有效分离。BAPTA作为一种Ca-选择性螯合剂,被用以改善菱镁矿与方解石的浮选分离。浮选试验结果表明,在油酸钠体系下,BAPTA能选择性地抑制方解石上浮,且在矿浆pH值11.0、BAPTA用量30 mg/L和油酸钠用量100 mg/L的条件下,可较好实现菱镁矿(回收率91.33%)与方解石(回收率11.25%)的浮选分离。利用Zeta电位、FTIR和XPS等检测方法研究了BAPTA的选择抑制机理,结果表明,BAPTA能选择性地与方解石表面的Ca发生反应,吸附并罩盖在方解石表面,阻止油酸钠在方解石表面吸附,消除油酸钠给方解石带来的零电点负移的影响,但BAPTA对菱镁矿表面的Mg作用较小,故对菱镁矿吸附油酸钠的影响较小。 展开更多
关键词 菱镁矿 方解石 bapta 选择性抑制 浮选分离
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BAPTA-AM脂质体注射液在大鼠和Beagle犬体内的药动学比较
14
作者 郑枫 刘文英 魏伟 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2010年第6期663-667,共5页
目的:比较研究BAPTA-AM脂质体注射液在大鼠和Beagle犬体内的药动学过程。方法:通过LC-MS/MS方法测定大鼠、Beagle犬血浆中BAPTA-AM的浓度,采用非房室模型计算BAPTA-AM注射液在大鼠、Beagle犬体内的药动学参数。结果:大鼠尾静脉注射1.5、... 目的:比较研究BAPTA-AM脂质体注射液在大鼠和Beagle犬体内的药动学过程。方法:通过LC-MS/MS方法测定大鼠、Beagle犬血浆中BAPTA-AM的浓度,采用非房室模型计算BAPTA-AM注射液在大鼠、Beagle犬体内的药动学参数。结果:大鼠尾静脉注射1.5、3.0、6.0mg/kgBAPTA-AM脂质体注射液后,体内消除半衰期分别为(255±140)、(290±260)、(376±257)min,AUC0-∞分别为(831±251)、(1467±528)、(3650±1664)μg.L-1.min;Beagle犬静脉注射0.5、1.0、2.0mg/kgBAPTA-AM脂质体注射液后,体内3个剂量的消除半衰期分别为(362±305)、(347±278)、(432±292)min,AUC0-∞分别为(400±118)、(569±139)、(1185±640)μg.L-1.min。结论:静脉注射给药后,BAPTA-AM脂质体注射液在大鼠和Beagle犬体内代谢较快,分布较广,在两种动物内的药动学过程无统计学差异。 展开更多
关键词 bapta-AM 脂质体 大鼠 BEAGLE犬 药代动力学
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高温下Bapta四酸甲酯对人红细胞的影响
15
作者 罗纪盛 杨琍苹 《华东师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 1991年第4期100-105,共6页
Bapta[1,2-双(邻一氨基酚氧基)乙烷-N,N,N',N'-四乙酸]酯可以透过细胞膜,近年来已成为研究细胞Ca^(2+)生理功能的有力工具.本文以含1mMBapta四酸甲酯的人红细胞悬液置于不同温度中保温60分钟,采用扫描电镜观察细胞形态变化,并... Bapta[1,2-双(邻一氨基酚氧基)乙烷-N,N,N',N'-四乙酸]酯可以透过细胞膜,近年来已成为研究细胞Ca^(2+)生理功能的有力工具.本文以含1mMBapta四酸甲酯的人红细胞悬液置于不同温度中保温60分钟,采用扫描电镜观察细胞形态变化,并测定细胞溶血作用,膜结合Na·K-ATP酶活力变化,分析不同温度下Bapta四酸甲酯对人红细胞的影响.实验结果表明,人红细胞形态和溶血作用实验组与对照组的变化相似,而Na·K-ATP酶活力变化实验组的均比对照组的低,其变化最大的为45℃高温处理组,对照组酶活力最高值为50℃处理组.实验结果看出,1mMBapta四酸甲脂对人红细胞无明显的破坏作用. 展开更多
关键词 红细胞 高温 四酸甲酯 bapta
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BAPTA-AM抗D-GalN致L-02细胞损伤作用 被引量:9
16
作者 蔡雁 付再林 +1 位作者 顾喜燕 宋必卫 《浙江工业大学学报》 CAS 北大核心 2010年第3期326-331,共6页
探讨了BAPTA-AM对D-氨基半乳糖(D-GalN)诱导的人胚肝细胞(L-02细胞)损伤的影响及其作用机制.加入不同浓度的BAPTA-AM1h后,用D-GalN诱导L-02损伤,通过倒置光学显微镜观察,检测培养液中乳酸脱氢酶(LDH)、谷丙转氨酶(ALT)及谷草转氨酶(AST... 探讨了BAPTA-AM对D-氨基半乳糖(D-GalN)诱导的人胚肝细胞(L-02细胞)损伤的影响及其作用机制.加入不同浓度的BAPTA-AM1h后,用D-GalN诱导L-02损伤,通过倒置光学显微镜观察,检测培养液中乳酸脱氢酶(LDH)、谷丙转氨酶(ALT)及谷草转氨酶(AST)的活性和丙二醛(MDA)的含量,MTT法检测细胞活力,Annexin V-EGFP荧光染色统计细胞凋亡率,Ca2+荧光指示剂Fura-2/AM测定细胞内游离钙浓度等方法,评价BAPTA-AM对D-GalN诱导的L-02细胞损伤的影响.实验表明BAPTA-AM能明显抑制D-Gal N引起的L-02细胞培养液中的LDH、ALT、AST和MDA水平的升高,能抑制L-02细胞的凋亡和细胞内游离钙浓度的升高,能明显提高L-02细胞活力.而且BAPTA-AM的效价强度是甘利欣的数百倍. 展开更多
关键词 bapta—AM L-02细胞 D-GALN
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控制细胞内游离[Ca^(2+)]的螯合剂BAPTA衍生物的合成及结构与性能关系 被引量:1
17
作者 杨利苹 屠惠萍 +2 位作者 傅红燕 张熊德 朱培宏 《华东师范大学学报(自然科学版)》 CSCD 1996年第1期45-51,共7页
控制细胞内游离[Ca2+]用的七种螯合剂BAPTA衍生物已合成成功。其中对[Ca2+]低亲和力的5,5'-二硝基BAPTA及中等亲和力的5,5'二溴BAPTA、5—溴—5'—甲基BAPTA已分别应用于控制不同体系的[... 控制细胞内游离[Ca2+]用的七种螯合剂BAPTA衍生物已合成成功。其中对[Ca2+]低亲和力的5,5'-二硝基BAPTA及中等亲和力的5,5'二溴BAPTA、5—溴—5'—甲基BAPTA已分别应用于控制不同体系的[Ca2+]测定.本文详述它们的合成方法、性能及苯环上不同取代基对EX、Em、Kd值影响的规律性。 展开更多
关键词 细胞 螯合剂 钙离子 衍生物 bapta
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BAPTA-AM通过抑制炎症和氧化损伤改善脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤 被引量:1
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作者 俞巧丽 莫泽君 宋必卫 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS 北大核心 2019年第12期1042-1049,共8页
目的探讨1,2-双(2-氨基苯氧基)-乙烷-N,N,N’,N’-四乙酸(BAPTA-AM)对急性肺损伤(ALI)的保护作用及机制。方法体外实验:A549细胞分为正常对照组、缺糖缺氧复糖复氧(OGD/R)模型组(A549细胞首先于无糖RPMI-1640培养液培养,37℃培养箱中缺... 目的探讨1,2-双(2-氨基苯氧基)-乙烷-N,N,N’,N’-四乙酸(BAPTA-AM)对急性肺损伤(ALI)的保护作用及机制。方法体外实验:A549细胞分为正常对照组、缺糖缺氧复糖复氧(OGD/R)模型组(A549细胞首先于无糖RPMI-1640培养液培养,37℃培养箱中缺氧培养12 h;然后用含2 g·L-1葡萄糖的RPMI-1640培养液并在正常含氧量培养箱内继续培养6 h)、BAPTA-AM 0.005,0.05,0.5和5 nmol·L-1组(加相应浓度BAPTA-AM,培养30 min后,同模型组处理)。噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活,用试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)和超氧化物歧化酶(SOD)活性及一氧化氮(NO)和丙二醛(MDA)含量,罗丹明123荧光探针检测线粒体膜电位(Δψ)。体内实验:ICR小鼠分为正常对照组、ALI模型组〔iv脂多糖(LPS)10 mg·kg-1〕、地塞米松(Dex)5 mg·kg-1阳性对照和BAPTA-AM纳米脂质体(BAPTA-AML)25,50,100μg·kg-1组(iv LPS10 mg·kg-1后立即给予相应浓度BAPTA-AML或Dex 5 mg·kg-1),6 h后采集标本,测定肺系数和肺组织湿干比,用试剂盒检测血清LDH活性、肺组织MDA含量、SOD和髓过氧化物酶(MPO)活性,ELISA法测定血清TNF-α和IL-6含量,HE染色观察肺组织病理变化。结果体外实验结果表明,BAPTA-AM能提高损伤细胞存活率(P<0.05),降低LDH的释放和NO的合成(P<0.05),改善细胞氧化损伤,稳定Δψ。体内实验结果表明,BAPTA-AML能减轻ALI小鼠肺系数和肺组织湿干比(P<0.05),降低血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素(IL-6)含量及MPO活性(P<0.05),降低ALI模型小鼠血清LDH活性和肺组织MDA含量(P<0.05),提高肺组织SOD活性(P<0.05),降低肺组织MPO活性(P<0.05)及血清TNF-α和IL-6含量(P<0.05),改善肺组织病理改变,降低肺损伤评分(P<0.05)。结论 BAPTA-AM通过改善炎症和氧化损伤,减轻肺水肿,保护肺组织,具有良好的治疗ALI作用。 展开更多
关键词 bapta-AM 急性肺损伤 炎症 氧化损伤
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NM—BAPTA法钙检测试剂盒的性能评价
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作者 刘健平 陈茶 +2 位作者 林城通 郑德想 李有强 《国际医药卫生导报》 2017年第13期2088-2090,共3页
目的对NM—BAPTA法钙检测试剂盒进行性能评价。方法根据美国临床与实验室协会(CLSI)指南文件EP15-A2、EP9-A2、EP6-A、C28-A2,验证日立7180生化分析仪上NM—BAPTA法钙检测试剂盒的精密度、准确度、线性范围、生物参考区间。结果高低... 目的对NM—BAPTA法钙检测试剂盒进行性能评价。方法根据美国临床与实验室协会(CLSI)指南文件EP15-A2、EP9-A2、EP6-A、C28-A2,验证日立7180生化分析仪上NM—BAPTA法钙检测试剂盒的精密度、准确度、线性范围、生物参考区间。结果高低2个浓度的血钙质控品批内精密度标准差(SD)分别为0.03mmol/L、0.02mmol/L,批问精密度标准差分别为0.08mmol/L、0.06mmol/L;准确度验证其血钙结果与参比系统cobas8000血钙结果呈良好的相关性,r2=0.9548,相对偏差〈12.5%;线性范围验证斜率为0.971,r2=0.999,线性范围为1.00—4.70mmol/L,线性理想;参考区间验证符合率100%。结论NM—BAPTA法钙检测试剂盒在日立7180生化分析仪上的分析性能符合质量目标要求,可应用于临床检测。 展开更多
关键词 总钙 NM—bapta 日立7180生化分析仪 性能验证
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钙信号与MDCK细胞活力的关系 被引量:1
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作者 田勇 乔键 +4 位作者 赵立红 胡云峰 金继昌 栾智华 王婷 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期1189-1192,1196,共5页
为探讨钙信号与犬肾上皮细胞(MDCK)活力之间的关系,采用MTT比色法观察了特异性钙调素拮抗剂-三氟拉嗪,胞内Ca2+螯合剂-BAPTA/AM以及Ca2+载体-A23187对MDCK细胞活力的影响。结果表明,12.5,25μmol/L三氟拉嗪和15μmol/L的BAPTA/AM作用72 ... 为探讨钙信号与犬肾上皮细胞(MDCK)活力之间的关系,采用MTT比色法观察了特异性钙调素拮抗剂-三氟拉嗪,胞内Ca2+螯合剂-BAPTA/AM以及Ca2+载体-A23187对MDCK细胞活力的影响。结果表明,12.5,25μmol/L三氟拉嗪和15μmol/L的BAPTA/AM作用72 h后分别使MDCK细胞活力降至对照组的51.4%,25.1%和34%,三氟拉嗪与BAPTA/AM对MDCK细胞活力的抑制作用随药物浓度增加和作用时间延长而增强;5μmol/L的A23187对MDCK细胞具有一定程度的刺激效应,但这种刺激效应随时间的延长而减弱;15μmol/L的BAPTA/AM可增强三氟拉嗪对MDCK细胞活力的抑制作用。说明Ca2+-钙调素系统在MDCK细胞生长和增殖过程中发挥重要作用。 展开更多
关键词 钙调素拮抗剂 MDCK 三氟拉嗪 A23187 bapta/am
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