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长期服役BAC滤池的有机物去除效能与运行优化 被引量：1
1
作者 张可佳 赖浩林 +3 位作者 岑程 周沛璇 张孝洪 傅舟跃 《长江科学院院报》 北大核心 2025年第4期87-96,共10页
生物活性炭(BAC)滤池长期服役存在有机物去除效能下降甚至失效的风险。为了探究长期服役BAC滤池的有机物去除效能并提出针对性的运行优化方案,选取了Z市LC水厂服役12 a的BAC滤池作为研究对象,采用总有机碳(Total Organic Carbon,TOC)去... 生物活性炭(BAC)滤池长期服役存在有机物去除效能下降甚至失效的风险。为了探究长期服役BAC滤池的有机物去除效能并提出针对性的运行优化方案,选取了Z市LC水厂服役12 a的BAC滤池作为研究对象,采用总有机碳(Total Organic Carbon,TOC)去除效果对其运行性能进行分析,并从臭氧(Ozone,O_(3))投加量和反冲洗方式等角度探究优化方案。结果表明:LC水厂对于有机物的去除效果存在较大波动,失效的风险较高。生物降解是长期服役BAC滤池去除有机物的主要机制,其贡献率为67%,而吸附作用的贡献率仅为33%;当O_(3)投加量为0.36~0.52 mg O_(3)/mg TOC时,LC水厂BAC滤池的运行性能较优,过低、过高的O_(3)投加量均不利于长期服役BAC滤池运行性能的提高;LC水厂表层和中上层BAC在反冲洗前均存在出水TOC升高的现象,使用含0.5 mg/L有效氯的水进行反冲洗有助于改善长期服役BAC滤池的运行性能。 展开更多
关键词 生物活性炭滤池 长期服役 有机物 去除效能 总有机碳 臭氧投加量 反冲洗方式 运行性能 优化方案
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基于杆状病毒Bac-to-Bac系统的VLP递送mRNA疫苗平台的建立
2
作者 马莉莉 王琼娴 +5 位作者 王晓丽 马孙婷 吕立新 徐彬 冯志新 欧阳伟 《中国动物传染病学报》 北大核心 2025年第5期41-50,共10页
噬菌体MS2 VLP(噬菌体病毒样颗粒)是不含病毒遗传物质的纳米颗粒,可以自组装成一个二十面体衣壳,适合靶向传递RNA。本研究利用Bac-to-Bac系统(杆状病毒表达系统)生产MS2 VLP包裹的eGFP mRNA。分别设计、合成MS2 VLP的表达框和eGFP mRNA... 噬菌体MS2 VLP(噬菌体病毒样颗粒)是不含病毒遗传物质的纳米颗粒,可以自组装成一个二十面体衣壳,适合靶向传递RNA。本研究利用Bac-to-Bac系统(杆状病毒表达系统)生产MS2 VLP包裹的eGFP mRNA。分别设计、合成MS2 VLP的表达框和eGFP mRNA的表达框,将MS2 VLP的表达框和eGFP mRNA的表达框同时插入pFastBac Dual载体中,获得重组供体质粒pFastBacDual-MS2-eGFP mRNA。转化DH10Bac感受态,通过三抗和蓝白斑(卡拉霉素/庆大霉素/四环素/IPTG/X-Gal)筛选以及PCR鉴定,获得重组的rBacmid-MS2-eGFP mRNA。将rBacmid-MS2-eGFP mRNA转染sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒vBacmid-MS2-eGFP mRNA。通过倒置荧光显微镜观察及Western blot检测表明eGFP获得表达。用vBacmid-MS2-eGFP mRNA感染High 5悬浮细胞进行MS2-eGFP mRNA的大量表达,经超速离心纯化,电镜观察可见大量的直径约30 nm的病毒样颗粒(VLP)。提取纯化的MS2 VLP中包裹的mRNA,通过RT-PCR及测序鉴定,结果表明MS2 VLP中包裹的mRNA为eGFP mRNA。将MS2-eGFP mRNA免疫BALB/c小鼠,进行免疫原性研究,通过ELISA测得的抗体效价为1∶819200,表明MS2-eGFP mRNA可以刺激小鼠产生较强的抗原特异性抗体应答。以上结果表明,利用杆状病毒Bac-to-Bac表达系统生产的MS2 VLP可以包裹外源mRNA,并可将外源mRNA递送到小鼠体内产生特异性体液免疫反应。本研究建立了基于杆状病毒Bac-to-Bac表达系统的VLP递送mRNA疫苗研究平台,为今后动物传染病的mRNA疫苗研发提供新的参考。 展开更多
关键词 bac-TO-bac MS2 VLP 递送系统 mRNA疫苗
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O_(3)-混凝沉淀-O_(3)/BAC-陶瓷膜联合工艺处理复合污染湖库水中试研究
3
作者 段冬 许一帆 +3 位作者 杨文建 郭庆 刘彦伶 夏圣骥 《给水排水》 北大核心 2025年第2期13-19,49,共8页
开展了O_(3)-混凝沉淀-O_(3)/BAC-陶瓷膜联合工艺中试,探究了联合工艺对于长荡湖水处理效果及不同工况条件对跨膜压差的影响。结果表明,该工艺出水浊度可控制在0.1NTU以下,对COD_(Mn)、DOC和UV_(254)的去除率分别为73%、57%和70%,对荧... 开展了O_(3)-混凝沉淀-O_(3)/BAC-陶瓷膜联合工艺中试,探究了联合工艺对于长荡湖水处理效果及不同工况条件对跨膜压差的影响。结果表明,该工艺出水浊度可控制在0.1NTU以下,对COD_(Mn)、DOC和UV_(254)的去除率分别为73%、57%和70%,对荧光物质的去除率为67%~80%,高温季节应注意生物污染。阐明了膜污染机理与进程,为开发处理高浊度、高有机物地表水的陶瓷膜联合工艺提供参考。 展开更多
关键词 饮用水 O_(3)/bac 陶瓷膜 膜污染
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北方低浊微污染原水O_(3)-BAC深度处理效能及机制
4
作者 权晨妍 郭媛 +3 位作者 张昭赫 李家科 刘珊珊 时文歆 《中国给水排水》 北大核心 2025年第23期55-63,共9页
为了探究臭氧-生物活性炭(O_(3)-BAC)深度处理工艺对北方低浊微污染原水的净化效能及其作用机制,选取我国北方某座同步运行常规工艺与O_(3)-BAC深度处理工艺的给水厂作为研究对象,考察了两种工艺在冬季低温、长期低浊和有机微污染的同... 为了探究臭氧-生物活性炭(O_(3)-BAC)深度处理工艺对北方低浊微污染原水的净化效能及其作用机制,选取我国北方某座同步运行常规工艺与O_(3)-BAC深度处理工艺的给水厂作为研究对象,考察了两种工艺在冬季低温、长期低浊和有机微污染的同一水源条件下的净水效果和污染物削减规律,同时分析了细菌群落结构及其变化特征与生物风险。结果表明,O_(3)-BAC深度处理工艺适用于处理我国北方低浊微污染原水,但实际运行效果易受季节更替的影响;在O_(3)-BAC与常规工艺协同作用下,可构建多级屏障以强化对污染物的去除,其中炭滤和砂滤填料上所附着的生物膜在降解有机微污染物中发挥了重要作用,例如Saprospiracea和Blastocatella菌属。 展开更多
关键词 饮用水处理 臭氧-生物活性炭 低浊原水 功能细菌 生物风险
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Bac-to-Bac TOPO系统表达甲型流感病毒核蛋白及其免疫原性评价
5
作者 孙可为 吴业红 +3 位作者 乔永波 尹婷 孙立影 邹墅 《中国生物制品学杂志》 2025年第3期257-263,共7页
目的采用Bac-to-Bac TOPO系统表达甲型流感病毒核蛋白(nucleoprotein,NP),并评价其免疫原性,以期为流感病毒NP疫苗的研究奠定基础。方法PCR法扩增甲型H1N1(A/Guangdong-Maonan/SWL1536/2019_CNIC-1909)流感病毒NP基因,连接至载体pFastBa... 目的采用Bac-to-Bac TOPO系统表达甲型流感病毒核蛋白(nucleoprotein,NP),并评价其免疫原性,以期为流感病毒NP疫苗的研究奠定基础。方法PCR法扩增甲型H1N1(A/Guangdong-Maonan/SWL1536/2019_CNIC-1909)流感病毒NP基因,连接至载体pFastBac^(TM)/CT-TOPO^(TM),转化感受态E.coli One Shot^(TM) Mach1^(TM) T1R,制备供体质粒,进行PCR及测序鉴定;将供体质粒转化感受态E.coli MAX Efficiency^(TM) DH10Bac^(TM),通过蓝白斑筛选阳性单克隆,提取重组杆粒,进行PCR鉴定。将重组杆粒转染Sf9昆虫细胞,制备重组杆状病毒,流式细胞术检测病毒滴度。重组杆状病毒经多轮增殖后感染Sf9细胞,获得重组NP,并进行镍离子亲和层析纯化。将重组NP及PBS经皮下分别接种雌性BALB/c小鼠,每组6只,ELISA法检测小鼠血清特异性抗体水平,流式细胞术检测小鼠脾细胞分泌IFNγ水平,酶联免疫斑点法检测小鼠脾细胞产生CD4^(+)和CD8^(+)T淋巴细胞水平。末次免疫后2周,用A/Guangdong-Maonan/SWL1536/2019_CNIC-1909流感病毒经小鼠鼻腔进行攻毒,监测攻毒后14 d内小鼠体质量变化及存活情况。结果PCR及测序鉴定结果证明,供体质粒构建正确;PCR鉴定结果证明,重组杆粒构建成功。重组杆状病毒滴度为2.875×10^(8) ivp/mL。重组NP可与鼠抗甲型流感病毒NP单克隆抗体发生特异性结合,纯化后纯度达91.3%。末次免疫后2周,与PBS组比较,NA组小鼠血清特异性抗体滴度(t=0.288,P<0.0001)、小鼠脾细胞产生IFNγ斑点平均数(t=9.235,P<0.0001)、产生CD4^(+)和CD8^(+)T淋巴细胞数量(t分别为10.870和6.200,P分别为0.0084和0.0250)均明显升高。PBS组小鼠感染病毒5 d后均死亡;NP组小鼠感染病毒5 d后死亡1只,剩余5只小鼠体质量下降但均存活。结论Bac-to-Bac TOPO系统表达的甲型流感病毒NP具有较高的免疫原性,能产生较强的体液和细胞免疫反应,可为小鼠抵御流感病毒感染提供一定的保护。 展开更多
关键词 bac-to-bac TOPO系统 流感病毒 核蛋白 免疫原性 杆状病毒 昆虫细胞
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高覆盖率水稻BAC库的构建及抗病基因相关克隆的筛选 被引量：25
6
作者 王文明 江光怀 +2 位作者 王世全 朱立煌 翟文学 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第2期102-128,共27页
利用含Xa4、xa5和xa13 3个水稻白叶枯病抗性基因的累加系IRBB56构建了一个水稻细菌人工染色体文库。该文库包含55 296个克隆，平均插入片段为132kb。按水稻基因组为450Mb计，该文库覆盖14倍基因组，筛选出任一水稻基因或序列的概率为99.... 利用含Xa4、xa5和xa13 3个水稻白叶枯病抗性基因的累加系IRBB56构建了一个水稻细菌人工染色体文库。该文库包含55 296个克隆，平均插入片段为132kb。按水稻基因组为450Mb计，该文库覆盖14倍基因组，筛选出任一水稻基因或序列的概率为99.99%。用均匀分布的3个叶绿体基因和4个线粒体基因克隆作探针筛选文库，结果显示该文库中含细胞器基因组DNA同源序列的克隆数小于1%。用分布于水稻3条不同染色体、分别与Xa4、xa5和xa13连锁的DNA标记筛选文库，分别检测出11～106个阳性克隆，为克隆这些基因打下了基础。 该文库对水稻基因组的高度覆盖率和较大的插入片段，非常适合于物理作图和基因的分离和克隆。 展开更多
关键词 细菌人工染色体(bac)文库 基因组 克隆 抗病 水稻 抗病基因
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O_3/BAC工艺应用于城市污水深度处理 被引量：15
7
作者 蒋以元 杨敏 +3 位作者 张昱 邓荣森 周军 広辻淳二 《中国给水排水》 CAS CSCD 北大核心 2004年第7期92-95,共4页
　为使再生水适合不同用途,对经过混凝沉淀和砂滤处理的再生水进行了臭氧—生物活性炭的深度处理。在臭氧消耗量和反应时间分别为5mg/L和10min,BAC空床停留时间(EBCT)为10min的条件下,臭氧—生物活性炭工艺对CODMn、DOC、UV254和色度平... 　为使再生水适合不同用途,对经过混凝沉淀和砂滤处理的再生水进行了臭氧—生物活性炭的深度处理。在臭氧消耗量和反应时间分别为5mg/L和10min,BAC空床停留时间(EBCT)为10min的条件下,臭氧—生物活性炭工艺对CODMn、DOC、UV254和色度平均去除率为32.4%、29.2%、48.6%和80.1%,出水CODMn、DOC、UV254和色度的平均值分别为3.3mg/L、4.0mg/L、0.05cm-1和2.0倍;臭氧生物活性炭工艺出水SDI<4,从而满足了反渗透系统的进水要求。 展开更多
关键词 城市污水 深度处理 再生回用 臭氧氧化 bac SDI
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带BAC质粒的重组伪狂犬病毒的构建及其体外生长特性研究 被引量：16
8
作者 彭金美 王瑜 +4 位作者 田志军 周艳君 陈瑾 安同庆 童光志 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期10-15,共6页
本研究通过基因克隆技术以伪狂犬病病毒(PRV)弱毒疫苗株Bartha K61株的部分TK基因作为同源重组序列,以绿色荧光蛋白基因(EGFP)作为筛选标记,构建了带LoxP位点的pUCTKAB-EGFP质粒,将pBeloBACII线性化后插入到pUCTKAB-EGFP中构建了转移载... 本研究通过基因克隆技术以伪狂犬病病毒(PRV)弱毒疫苗株Bartha K61株的部分TK基因作为同源重组序列,以绿色荧光蛋白基因(EGFP)作为筛选标记,构建了带LoxP位点的pUCTKAB-EGFP质粒,将pBeloBACII线性化后插入到pUCTKAB-EGFP中构建了转移载体pUCTK-EGFP-BACII。将PRV基因组和转移载体共转染Vero细胞,利用同源重组在Bartha K61株的TK基因中插入了BAC质粒和绿色荧光蛋白筛选标记,经过11轮噬斑纯化和鉴定证实获得了带BAC质粒的重组伪狂犬病毒rv-PRVBAC。通过噬斑试验和一步生长曲线测定等方法对重组伪狂犬病毒rv-PRVBAC的生长特性进行研究,结果发现带有BAC质粒及筛选标记的重组病毒rv-PRVBAC在体外细胞培养中的增殖速度与亲本毒Bartha K61株相比没有明显差别,说明大的基因片段的插入没有影响重组病毒在体外的繁殖速度。重组病毒rv-PRVBAC在Vero细胞上盲传18代,其绿色荧光蛋白仍能够稳定表达,通过PCR鉴定可以检测到插入的外源片段和插入位点两侧的病毒基因序列,表明所获得的重组病毒rv-PRVBAC得到了稳定遗传。本研究成功获得了带BAC质粒的重组伪狂犬病毒rv-PRVBAC,为进一步开展PRV的细菌人工染色体的构建奠定了基础。 展开更多
关键词 伪狂犬病毒 Bartha K61株 bac 重组病毒
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关于细菌人工染色体(BAC)文库载体DNA制备的研究 被引量：9
9
作者 姜涛 刘越 +1 位作者 孔秀英 贾继增 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第12期1126-1131,共6页
细菌人工染色体 (BAC)文库在基因组研究中起着关键作用。构建BAC文库的一个关键步骤就是BAC载体DNA的制备。制备高质量的BAC载体DNA受到包括酶切、脱磷等诸多因素的影响。以BAC载体pECBAC1为材料 ,分别采用限制性内切酶BamHⅠ和HK脱磷... 细菌人工染色体 (BAC)文库在基因组研究中起着关键作用。构建BAC文库的一个关键步骤就是BAC载体DNA的制备。制备高质量的BAC载体DNA受到包括酶切、脱磷等诸多因素的影响。以BAC载体pECBAC1为材料 ,分别采用限制性内切酶BamHⅠ和HK脱磷酶对其进行酶切和脱磷 ,并结合凝胶回收纯化技术 ,制备了可用于进一步构建BAC文库的线性载体DNA。并在此基础上 ,确定了制备BAC载体DNA的适宜条件 ,其中包括确定适宜限制内切酶用量及酶切时间 ,脱磷酶种类及浓度和凝胶回收纯化线性载体DNA等关键步骤。 展开更多
关键词 细菌人工染色体 bac 文库 载体DNA 制备 酶切 脱磷 凝胶回收纯化
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琯溪蜜柚BAC文库的构建和汁胞粒化相关基因的筛选 被引量：9
10
作者 潘腾飞 潘东明 +2 位作者 姜翠翠 陈桂信 郭志雄 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第18期3791-3797,共7页
【目的】构建琯溪蜜柚BAC文库,利用该文库筛选与汁胞粒化相关的基因。【方法】用温和的物理方法获得高分子量DNA,部分酶切后进行回收、连接、转化,超低温保存阳性克隆。构建DNA样品混合样,PCR法筛选文库,生物信息学分析DNA序列。【结果... 【目的】构建琯溪蜜柚BAC文库,利用该文库筛选与汁胞粒化相关的基因。【方法】用温和的物理方法获得高分子量DNA,部分酶切后进行回收、连接、转化,超低温保存阳性克隆。构建DNA样品混合样,PCR法筛选文库,生物信息学分析DNA序列。【结果】改进了适合琯溪蜜柚BAC文库构建的方法;构建的琯溪蜜柚BAC文库含有26112个单克隆,空载率小于1%,叶绿体DNA的污染率不超过1%,插入片段平均大小大约120kb,覆盖8倍的琯溪蜜柚基因组。利用与琯溪蜜柚汁胞粒化相关的EST序列设计PCR引物筛选文库,得到一段大小为1088 bp的DNA序列,该序列含有两段大小分别为122bp和172bp的内含子,经同源比对发现,该序列中部分序列与蓖麻(Ricinus communis)、杨树(Populus trichocarpa)多铜氧化酶(multicopper oxidase)cDNA序列分别有85%和71%的同源性;与毛叶番荔枝(Annona cherimola)和拟南芥(Arabidopsis thaliana)果胶酯酶(pectinesterase)cDNA序列分别有76%和73%的同源性。【结论】本研究构建的BAC文库适用于琯溪蜜柚功能基因组的研究,从BAC文库筛选获得的DNA序列与汁胞粒化相关的基因有高度同源性。 展开更多
关键词 琯溪蜜柚 bac文库 粒化 文库筛选
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一种新型家蚕核多角体病毒Bac to Bac系统的构建 被引量：7
11
作者 邓小昭 朱应 +2 位作者 刁振宇 齐义鹏 周宗安 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第2期155-160,共6页
用家蚕核型多角体病毒的全基因组DNA与AcBacmidDNA共转染家蚕BmN细胞,构建转座一穿梭载体BmBacmid。另一供体质粒以转座方式将乙肝病毒e抗原基因HBeAg整合到BmBacmid的attTn7位点上成为重组rBmHBe。结果表明BmBacmid既能在大肠杆菌中以... 用家蚕核型多角体病毒的全基因组DNA与AcBacmidDNA共转染家蚕BmN细胞,构建转座一穿梭载体BmBacmid。另一供体质粒以转座方式将乙肝病毒e抗原基因HBeAg整合到BmBacmid的attTn7位点上成为重组rBmHBe。结果表明BmBacmid既能在大肠杆菌中以质粒的形式复制,又能在家蚕BmN细胞和草地夜蛾Sf9细胞中复制,形成感染性病毒粒子。Southernblotting证实重组病毒的构建是正确的。BmN细胞能正确识别与切割HBeAg信号肽序列,SDSPAGE表明HBeAg基因在家蚕细胞中高效表达,ELISA测定培养上清中HBeAg效价达1∶32000,细胞内HBeAg效价为1∶2000,培养液及细胞内的HBcAg含量极低(〈1∶160)。 展开更多
关键词 BMNPV bac to bac策略 表达系统 HBCAG
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用Bac-to-Bac杆状病毒系统表达人生长激素 被引量：10
12
作者 耿朝晖 郜鹏 +4 位作者 刘莹 赵东明 张宝珠 俞新大 李建民 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期59-63,共5页
利用Bac to Bac杆状病毒载体表达系统将人生长激素 (humangrowthhormone ,hGH)基因cDNA克隆至转移载体pFastBac1中 ,得到pFastBac hGH ,再将其转化进入含穿梭载体Bacmid的受体菌DH10Bac中 ,发生转座作用 ,得到含hGH基因的重组穿梭载体rB... 利用Bac to Bac杆状病毒载体表达系统将人生长激素 (humangrowthhormone ,hGH)基因cDNA克隆至转移载体pFastBac1中 ,得到pFastBac hGH ,再将其转化进入含穿梭载体Bacmid的受体菌DH10Bac中 ,发生转座作用 ,得到含hGH基因的重组穿梭载体rBacmid hGH .纯化DNA ,直接转染培养的昆虫细胞Sf9,得到重组病毒rAcV Bac hGH .经酶切PCR及Southern杂交鉴定 ,hGH基因正确地插入病毒基因组的多角体蛋白基因启动子下 ,SDS PAGE测得产物蛋白分子量为 2 2kD左右 .用免疫化学发光法测得转染上清中hGH表达水平可达 18μg ml ,与用传统的BEVS表达hGH相比 ,转染上清中hGH表达水平提高 4 0 展开更多
关键词 bac-TO-bac系统 昆虫细胞 HGH 基因表达 杆状病毒 生长激素
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狂犬病病毒核蛋白在Bac-To-Bac/AcMNPV杆状病毒系统的表达 被引量：6
13
作者 尹伟 徐洁萍 +2 位作者 张金阳 颜焰 周继勇 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期86-89,115,共5页
为真核表达狂犬病病毒的核蛋白,本研究通过RT-PCR克隆狂犬病病毒ERA株核蛋白基因,将其克隆于杆状病毒转移载体pFastBacHTB中,构建重组质粒pFastBacHTB-NP并将其转化DH10Bac细胞,得到重组穿梭质粒reBacmid-NP;通过转染昆虫细胞sf9包装重... 为真核表达狂犬病病毒的核蛋白,本研究通过RT-PCR克隆狂犬病病毒ERA株核蛋白基因,将其克隆于杆状病毒转移载体pFastBacHTB中,构建重组质粒pFastBacHTB-NP并将其转化DH10Bac细胞,得到重组穿梭质粒reBacmid-NP;通过转染昆虫细胞sf9包装重组杆状病毒。SDS-PAGE、western blot和间接免疫荧光对表达的蛋白进行鉴定和反应原性分析。分别以重组杆状病毒表达的核蛋白、原核表达核蛋白为包被抗原进行ELISA检测。结果表明,在昆虫细胞中表达的狂犬病病毒重组核蛋白能与鼠抗RV核蛋白单克隆抗体和RV阳性血清特异性结合,其相对分子量约为50.5ku。以重组杆状病毒表达的核蛋白为抗原建立的rNP-ELISA的敏感性、特异性、符合率分别为86.36%,89.83%,90.00%,优于大肠杆菌表达的RV核蛋白。说明杆状病毒系统表达的核蛋白是建立RV核蛋白ELISA抗体检测方法的理想抗原。 展开更多
关键词 狂犬病病毒 核蛋白基因 bac—To—bac/AcMNPV杆状病毒表达系统.
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奶牛瘤胃微生物BAC文库中ACCase基因的筛选与生物信息学分析 被引量：5
14
作者 赵圣国 王加启 +3 位作者 卜登攀 刘开朗 朱雅新 周凌云 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期1015-1021,共7页
【目的】从奶牛瘤胃微生物BAC文库中筛选含乙酰CoA羧化酶(ACCase)基因的克隆子,并对其全长测序和生物信息学分析。【方法】利用PCR序列驱动筛选法,从瘤胃微生物BAC文库中筛选ACCase基因,鸟枪法测定基因序列后,进行基因注释、比对和系统... 【目的】从奶牛瘤胃微生物BAC文库中筛选含乙酰CoA羧化酶(ACCase)基因的克隆子,并对其全长测序和生物信息学分析。【方法】利用PCR序列驱动筛选法,从瘤胃微生物BAC文库中筛选ACCase基因,鸟枪法测定基因序列后,进行基因注释、比对和系统发育分析。【结果】筛选得到了含ACCase基因的克隆(U12),其插入片段序列(URE12)全长43 358 bp,GC含量为43.75%,经GeneMark程序预测含有38个基因,经Signature程序预测属于变形菌门。ACCase基因(Acc-32)编码159个氨基酸,与Elusimicrobium minutum的ACCase基因具有41%的相似度,编码蛋白分子量为17.89 kD,等电点为5.27,在距离Acc-32上游的33 kb区域,发现一段能编码ACCase连接酶的基因。Acc-32的结合位点氨基酸残基为GQVICVIEAMKVFNELKA,系统发育分析表明Acc-32属于ε-变形菌纲。【结论】得到了含有ACCase基因的序列片段,并且ACCase基因具有新的结构特征。 展开更多
关键词 瘤胃微生物 bac文库 乙酰CoA羧化酶 基因注释 生物信息学
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上向流BAC吸附池在净水生产中的应用 被引量：18
15
作者 查人光 徐兵 +1 位作者 朱海涛 张频 《给水排水》 CSCD 北大核心 2010年第6期14-17,共4页
嘉兴贯泾港水厂一期规模15万m3/d,采用生物预处理+加强常规+O3—BAC深度处理工艺。为了降低BAC吸附池出水微生物泄漏风险,引入了上向流BAC吸附池结合后续砂滤池的新型组合工艺。介绍了上向流BAC吸附池的应用情况和特点,总结了该工艺对... 嘉兴贯泾港水厂一期规模15万m3/d,采用生物预处理+加强常规+O3—BAC深度处理工艺。为了降低BAC吸附池出水微生物泄漏风险,引入了上向流BAC吸附池结合后续砂滤池的新型组合工艺。介绍了上向流BAC吸附池的应用情况和特点,总结了该工艺对活性炭选型的强度和粒径等要求,并指出在运行中应注意进水浊度和上升流速控制等问题。嘉兴贯泾港水厂砂滤出水、出厂水浊度均≤0.1 NTU,砂滤出水中≥2μm的颗粒数≤30个/mL,有效保障了城市供水水质安全。 展开更多
关键词 上向流bac吸附池 活性炭种类选择 水质安全
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牛抗菌肽Bac7-Bac5融合基因在大肠杆菌中的过表达,纯化及抑菌活性 被引量：9
16
作者 赵昆 刘思国 +9 位作者 王春来 宫强 迟磊 刘建东 王勇 云孟克 常月红 刘慧芳 周媛媛 孙延鸣 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期65-70,共6页
牛抗菌肽Bac7和Bac5是一种线性阳离子小分子多肽,在机体天然免疫和获得性免疫中都发挥着重要作用。根据Gen bank中公布的牛抗菌肽bac7和bac5成熟肽基因序列,人工合成了融合基因Bac7-Bac5片段,克隆于原核表达载体pET32(a+)中构建了重组... 牛抗菌肽Bac7和Bac5是一种线性阳离子小分子多肽,在机体天然免疫和获得性免疫中都发挥着重要作用。根据Gen bank中公布的牛抗菌肽bac7和bac5成熟肽基因序列,人工合成了融合基因Bac7-Bac5片段,克隆于原核表达载体pET32(a+)中构建了重组表达载体pET-B7-B5,将其转化于E.coli BL21(DE3)中实现了重组蛋白B7-B5(rB7-B5)的过表达,表达的rB7-B5以包涵体形式存在,rB7-B5表达量约占细菌总蛋白的36.6%,分子量大小为33kDa,与预测大小相符。以8mol/L尿素变性包含体后用Ni亲和层析柱纯化目的蛋白,经多步透析法复性的rB7-B5对猪胸膜肺炎放线杆菌和耐药性大肠杆菌具有很好的抑菌活性,为新型抗菌制剂的研制和开发奠定了基础。 展开更多
关键词 牛抗菌肽bac7和bac5 融合基因 重组表达 抑菌活性
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红莲型水稻不育系和保持系线粒体基因组BAC文库的构建 被引量：5
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作者 易平 汪莉 +1 位作者 万翠香 朱英国 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期756-759,共4页
以红莲型 (HL )细胞质雄性不育系和保持系为材料 ,构建了水稻线粒体基因组的 BAC文库。每个文库保存约2 30 0个菌落 ,外源插入片段介于 9～ 2 5 kb之间。以线粒体基因为探针对文库进行菌落原位杂交验证 ,均筛选到了阳性克隆。构建的两... 以红莲型 (HL )细胞质雄性不育系和保持系为材料 ,构建了水稻线粒体基因组的 BAC文库。每个文库保存约2 30 0个菌落 ,外源插入片段介于 9～ 2 5 kb之间。以线粒体基因为探针对文库进行菌落原位杂交验证 ,均筛选到了阳性克隆。构建的两个文库为进一步研究水稻线粒体基因组的结构特点 。 展开更多
关键词 水稻 保持系 细胞质雄性不育 线粒体基因组 bac文库 红莲型不育系
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O_3/BAC对氯化消毒副产物的控制作用 被引量：17
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作者 张金松 张红亮 +4 位作者 董文艺 汪义强 金立建 马军 范洁 《中国给水排水》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期16-20,共5页
采用臭氧化—生物活性炭 (O3/BAC)深度处理工艺去除水中消毒副产物前质的试验结果表明 ,该工艺能够有效去除水中消毒副产物前质 ,可控制氯化消毒副产物的生成 ,其中主臭氧化对三卤甲烷前质和卤乙酸前质均具有很好的去除效果 ,生物活性... 采用臭氧化—生物活性炭 (O3/BAC)深度处理工艺去除水中消毒副产物前质的试验结果表明 ,该工艺能够有效去除水中消毒副产物前质 ,可控制氯化消毒副产物的生成 ,其中主臭氧化对三卤甲烷前质和卤乙酸前质均具有很好的去除效果 ,生物活性炭对卤乙酸前质表现出较好的去除效果 ,但对三卤甲烷前质的去除效果有限 ;藻类、有机物等在滤层的累积使得砂滤池在同一工作周期中的不同阶段对水中三卤甲烷前质的去除效果有所不同 ,因而需要合理设置砂滤池的反冲洗周期。臭氧化—生物活性炭工艺充分发挥了臭氧化和生物活性炭两种技术的优点 ,并相互促进和补充 。 展开更多
关键词 臭氧化 生物活性炭 氯化消毒副产物 三卤甲烷前质 卤乙酸前质
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甘蓝型油菜-新疆野生油菜二体异附加系BAC文库的构建 被引量：8
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作者 陈书元 晁金泉 +5 位作者 徐有明 王太霞 闫晓红 王力军 胡琼 魏文辉 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期137-142,共6页
甘蓝型油菜-新疆野生油菜二体异附加系包含了甘蓝型油菜全基因组和新疆野生油菜一对染色体,携带有恢复基因;以该二体异附加系为材料,以CopyControlTM pCC1BACTM(HindⅢCloning-Ready)Vector为载体,构建了其基因组的BAC文库(bacterial ar... 甘蓝型油菜-新疆野生油菜二体异附加系包含了甘蓝型油菜全基因组和新疆野生油菜一对染色体,携带有恢复基因;以该二体异附加系为材料,以CopyControlTM pCC1BACTM(HindⅢCloning-Ready)Vector为载体,构建了其基因组的BAC文库(bacterial artificial chromosome library)。该文库含有69120个克隆,平均插入片段达110kb,相当于甘蓝型油菜单倍体基因组大小的6.336倍。随机挑选3个大于100kb的克隆进行稳定性继代实验,经100代后插入的DNA片段仍然稳定存在。该材料BAC文库的建成,为我们下一步开展甘蓝型油菜基因组学研究及相关重要功能基因的克隆等提供了必要的技术平台。 展开更多
关键词 甘蓝型油菜 新疆野生油菜 二体异附加系 bac文库
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大白菜开花相关基因FLC1的BAC克隆筛选及分析 被引量：5
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作者 石学萍 冯大领 +2 位作者 王彦华 轩淑欣 申书兴 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期1513-1516,共4页
采用改良的混合池构建方法构建大白菜BAC文库一级混合池和二级混合池,利用开花相关基因FLC1特异引物对其进行PCR筛选。通过三步PCR扩增、114个PCR反应,筛选了19200个克隆,获得了2个FLC1单克隆。克隆测序结果表明,其扩增产物的序列与大白... 采用改良的混合池构建方法构建大白菜BAC文库一级混合池和二级混合池,利用开花相关基因FLC1特异引物对其进行PCR筛选。通过三步PCR扩增、114个PCR反应,筛选了19200个克隆,获得了2个FLC1单克隆。克隆测序结果表明,其扩增产物的序列与大白菜FLC1的相似性达到99%,证实此克隆为含FLC1基因的BAC克隆。 展开更多
关键词 大白菜 bac克隆 开花相关基因 混合池 PCR筛选
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