CCK-8对LPS作用下巨噬细胞B7.1和B7.2表达及其协同刺激功能的影响 被引量：3

1

作者 张风华 李淑瑾 +7 位作者 丛斌 张正茂 朱桂军 马春玲 丛军 刘宁 倪志宇 付丽红 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期1271-1275,共5页

目的探讨八肽胆囊收缩素（CCK-8）对LPS活化的巨噬细胞B7．1和B7．2表达及其协同刺激功能的影响。方法用CCK-8（10^-12～10^-6）mol·L^-1和（或）脂多糖（LPS）孵育小鼠腹腔巨噬细胞，采用流式细胞术分析细胞表面B7．1和B7．2含量... 目的探讨八肽胆囊收缩素（CCK-8）对LPS活化的巨噬细胞B7．1和B7．2表达及其协同刺激功能的影响。方法用CCK-8（10^-12～10^-6）mol·L^-1和（或）脂多糖（LPS）孵育小鼠腹腔巨噬细胞，采用流式细胞术分析细胞表面B7．1和B7．2含量的变化，用免疫磁珠从小鼠脾细胞分离CD4^＋T细胞，按4：1数量比与腹腔巨噬细胞[预先用LPS、CCK-8和（或）抗B7．1抗体、抗B7．2抗体、CCK1R拮抗剂CR1409、CCK2R拮抗剂CR2945孵育24h]共同体外培养，同时加入ConA5mg·L^-1，采用^3H参入法测定CD4^＋T细胞增殖反映巨噬细胞的协同刺激活性。结果CCK-8可以下调LPS诱导的巨噬细胞的B7．1和B7．2表达，抑制LPS活化的巨噬细胞的协同刺激活性。CCK-8的作用呈剂量依赖性，最大效应剂量在（10^-7-10^-9）mol·L^-1之间。CR1409及CR2945均能逆转CCK-8的上述作用，且CR1409的作用较CR2945更明显。抗B7．1抗体和抗B7．2抗体可减轻LPS活化的巨噬细胞协同刺激活性。结论CCK-8通过下调LPS诱导的巨噬细胞B7．1和B7．2表达而抑制其协同刺激活性，该作用由CCK1R及CCK2R介导，其中CCK1R起主要介导作用。 展开更多

关键词 CCK-8 B7.1 b7.2 LPS 巨噬细胞 协同刺激

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同时表达4-1BBL B7.1及B7.2三个共刺激分子基因小鼠肝癌细胞系的建立和意义 被引量：3

2

作者 李国强 王学浩 +1 位作者 印洁 俞悦 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2006年第22期1261-1264,共4页

目的:建立同时表达4-1BBL、B7.1及B7.2三个共刺激分子基因小鼠原发性肝细胞癌(hepatocellularcarcinoma,HCC)细胞系。方法:将B7.1和B7.2全长cDNA的质粒酶切,构建pcDNA3.1-B7.1-IRES-B7.2重组子,酶切法鉴定。用阳离子脂质体(Lipofectamin... 目的:建立同时表达4-1BBL、B7.1及B7.2三个共刺激分子基因小鼠原发性肝细胞癌(hepatocellularcarcinoma,HCC)细胞系。方法:将B7.1和B7.2全长cDNA的质粒酶切,构建pcDNA3.1-B7.1-IRES-B7.2重组子,酶切法鉴定。用阳离子脂质体(LipofectamineReagent)将重组子转染H22,经均霉素(Hygromycin,300!g/ml)筛选,阳性克隆命名为H22-CD80/CD86+细胞。逆转录-聚合酶链反应(reversetranscription-polymerasechainreaction,RT-PCR)检测目的基因在H22-CD80/CD86+变异株的表达。采用同样方法将pCI-neo-4-1BBL质粒转入H22-CD80/CD86+细胞,G418筛选,阳性克隆命名为H22-CD80/CD86/CD137L+细胞。流式细胞仪检测三种基因在细胞克隆中的表达。结果:pcDNA3.1-B7.1-IRES-B7.2重组子经酶切鉴定,同时获得B7.1(862bp)和B7.2(984bp)目的基因片段和5.6kbp线性化pcDNA3.1载体片段;重组子测序结果与Genebank中B7.1和B7.2序列相符,证实构建成功。RT-PCR及FCM检测结果显示B7.1、B7.2及4-1BBL基因分别在H22-CD80/CD86+细胞及H22-CD80/CD86/CD137L+细胞中获得稳定、高效联合表达。结论:pcDNA3.1-B7.1-IRES-B7.2重组子构建正确,H22-CD80/CD86/CD137L+变异株可同时稳定表达B7.1、B7.2和4-1BBL三个共刺激分子基因。 展开更多

关键词 基因重组 癌肝细胞 B7.1 b7.2 4-1BBL

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γ-干扰素调控慢性B淋巴细胞白血病B细胞B7.2分子表达 被引量：3

3

作者 戴振声 黄培林 +2 位作者 徐燕丽 谢弘 谢毅 《东南大学学报（医学版）》 CAS 2004年第3期180-183,共4页

目的 :研究观察γ 干扰素调控慢性B淋巴细胞白血病 (BCLL)B细胞B7.2分子的表达 ,并观察B7.2水平的变化对免疫反应的影响。方法 :用 5 0 0IU·ml- 1 浓度的γ 干扰素体外孵育BCLL患者外周血B细胞 48h ,流式细胞仪检测孵育前后B7.2表... 目的 :研究观察γ 干扰素调控慢性B淋巴细胞白血病 (BCLL)B细胞B7.2分子的表达 ,并观察B7.2水平的变化对免疫反应的影响。方法 :用 5 0 0IU·ml- 1 浓度的γ 干扰素体外孵育BCLL患者外周血B细胞 48h ,流式细胞仪检测孵育前后B7.2表达的百分率 ,电镜观察其形态变化 ;采用单向混合淋巴细胞反应 (MLR)技术观察B7.2水平的变化对淋巴细胞增殖的影响。结果 :BCLL患者外周血B细胞经 5 0 0IU·ml- 1 浓度的γ 干扰素体外孵育 48h后 ,B7.2的表达从 17%上升至 2 1% ;电镜观察 ,细胞未出现明显的树突状细胞的特征性改变 ;MLR观察 ,B7.2上调之后 ,实验组每分钟计数值增高 ,比较差异有显著性 (P <0 .0 5 )。结论 :γ 干扰素可轻度上调BCLLB细胞B7.2分子的表达水平 。 展开更多

关键词 Γ-干扰素 慢性B淋巴细胞白血病 B细胞 b7.2分子 流式细胞仪 检测

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γ-干扰素诱导Jurkat细胞表达B7.1/CD80、B7.2/CD86分子 被引量：2

4

作者 戴振声 陈勤奋 +1 位作者 谢弘 谢毅 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 2001年第6期287-289,共3页

目的研究观察γ 干扰素 (γ IFN)诱导Jurkat细胞株表达B7.1、B7.2分子的作用。方法不同浓度的γ IFN体外孵育Jurkat细胞 48h后 ,流式细胞仪检测细胞表达B7.1、B7.2的百分率。结果与对照组相比 ,γ IFN在312 .5～ 10 0 0 0u/ml浓度下有... 目的研究观察γ 干扰素 (γ IFN)诱导Jurkat细胞株表达B7.1、B7.2分子的作用。方法不同浓度的γ IFN体外孵育Jurkat细胞 48h后 ,流式细胞仪检测细胞表达B7.1、B7.2的百分率。结果与对照组相比 ,γ IFN在312 .5～ 10 0 0 0u/ml浓度下有轻微提高Jurkat淋巴白血病细胞表达B7.1、B7.2分子的作用。在 2 5 0 0u/ml浓度时达到高峰 ,B7.1的表达比对照组提高 3.47% ,B7.2表达提高 2 .39% ,B7.1与B7.2双表达提高 1.85 %。结论γ IFN可轻度诱导Jurkat细胞表达B7.1、B7. 展开更多

关键词 Γ-干扰素 JURKAT细胞株 B7.1 b7.2

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人B7.2(CD86)胞外区原核表达及其工程菌发酵培养的实验研究 被引量：1

5

作者 闫晓彩 来宝长 +4 位作者 郑瑾 马军 韩俊宏 王一理 司履生 《西安医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期4-7,共4页

目的　利用原核系统表达人B7.2 (IgV +C)并对工程菌发酵培养条件进行优化。方法　用聚合酶链反应 (PCR)技术从B7.2cDNA全长中克隆B7.2 (IgV +C) ,将PCR产物克隆入表达载体 pGEX 4T 3从而得到重组体 pGEX 4T 3 /hB7.2 (IgV +C) ,SDS PAGE... 目的　利用原核系统表达人B7.2 (IgV +C)并对工程菌发酵培养条件进行优化。方法　用聚合酶链反应 (PCR)技术从B7.2cDNA全长中克隆B7.2 (IgV +C) ,将PCR产物克隆入表达载体 pGEX 4T 3从而得到重组体 pGEX 4T 3 /hB7.2 (IgV +C) ,SDS PAGE及Westernblot用于检测目的蛋白的表达 ,同时对目的蛋白诱导表达时间及诱导剂浓度进行优化 ,对重组质粒的遗传稳定性进行鉴定。结果　Westernblot结果显示相应分子质量 5 5kD处有hB7.2 (IgV+C)与GST融合蛋白的高效表达 ,表达量占菌体总蛋白的 3 0 %左右。对工程菌进行发酵培养研究的结果表明 ,所构建的重组质粒在工程菌DH5α中传代稳定 ,未见质粒丢失 ,目的蛋白的表达不受影响 ,且在 3 7℃诱导 5h、IPTG终浓度为 4mmol·L- 1 时其表达量最多。结论　证明了利用原核系统表达人B7.2 (IgV +C)的可行性。 展开更多

关键词 b7.2(CD86) 共刺激 融合蛋白 GST 工程菌发酵培养 实验研究 抗原 原核表达

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转人B7.2基因的L929细胞对T细胞增殖和分泌IL-10的作用 被引量：1

6

作者 陈洁 邱玉华 +5 位作者 王勤 孙中文 陶怡 毛一香 陈永井 张学光 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期200-203,共4页

应用RT-PCR法,从由LPS刺激的人的DC细胞中抽提mRNA,扩增获得编码人B7.2分子的cDNA,并将其克隆到PMD18-T载体,经PCR、酶切及测序进行鉴定确证,进而构建PEGZ-term-B7.2的真核表达载体。脂质体法共转染包装细胞293T,用含有完整病毒颗粒的2... 应用RT-PCR法,从由LPS刺激的人的DC细胞中抽提mRNA,扩增获得编码人B7.2分子的cDNA,并将其克隆到PMD18-T载体,经PCR、酶切及测序进行鉴定确证,进而构建PEGZ-term-B7.2的真核表达载体。脂质体法共转染包装细胞293T,用含有完整病毒颗粒的293T细胞的上清感染L929细胞,经Zeocin筛选,建立稳定表达人B7.2分子的L929基因转染细胞株。并证实了B7.2基因转染细胞能有效地促进T细胞的体外增殖和促进IL-10的分泌。 展开更多

关键词 人的b7.2 基因转染 T细胞

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真核荧光蛋白表达载体pEGFP-C3-B7.2-MAGE-1的构建与表达 被引量：1

7

作者 艾敏 张巧 +1 位作者 赵国强 杨胜利 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2008年第5期943-947,共5页

目的:构建表达B7.2和MAGE-1的绿色荧光共表达载体pEGFP-C3-B7.2-MAGE-1,并在真核细胞中表达。方法:根据GenBank中的序列,对B7.2、MAGE-1各设计一对两端带有特定限制性酶切位点的引物,分别从乳腺组织、乳癌组织提取总RNA,进行RT-PCR后,... 目的:构建表达B7.2和MAGE-1的绿色荧光共表达载体pEGFP-C3-B7.2-MAGE-1,并在真核细胞中表达。方法:根据GenBank中的序列,对B7.2、MAGE-1各设计一对两端带有特定限制性酶切位点的引物,分别从乳腺组织、乳癌组织提取总RNA,进行RT-PCR后,将两扩增产物分别克隆在pGEM-T载体,经测序证实碱基序列无误后,双酶切pGEM-T载体,回收目的片段,将两目的片段亚克隆至真核绿色荧光蛋白共表达载体(pEGFP-C3)上,并转染真核细胞,观察其在真核细胞中表达。结果及结论:pEGFP-C3-B7.2-MAGE-1真核表达载体经酶切及基因序列分析验证,PCR扩增片段与选择的目的片段序列相符,pEGFP-C3-B7.2-MAGE-1真核表达载体构建成功。该表达载体转染EC9706细胞后,用免疫荧光显微镜观察和RT-PCR分析,该重组载体能够在真核细胞中广泛表达。 展开更多

关键词 b7.2 MAGE-1 真核表达载体 肿瘤免疫

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pEGFP-C3-B7.2-MAGE-1融合蛋白诱导特应性抗肿瘤免疫应答的研究

8

作者 艾敏 赵国强 +1 位作者 张巧 杨胜利 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期895-898,共4页

目的:构建重组表达载体pEGFP-C3-B7.2-MAGE-1,研究人B7.2/MAGE-1基因修饰的食管癌细胞作为瘤苗的抗肿瘤作用。方法:通过RT-PCR扩增B7.2和MAGE-1的cDNA,以pEGFP-C3为载体,构建pEGFP-C3-B7.2-MAGE-1重组载体,通过脂质体转染技术转染人食... 目的:构建重组表达载体pEGFP-C3-B7.2-MAGE-1,研究人B7.2/MAGE-1基因修饰的食管癌细胞作为瘤苗的抗肿瘤作用。方法:通过RT-PCR扩增B7.2和MAGE-1的cDNA,以pEGFP-C3为载体,构建pEGFP-C3-B7.2-MAGE-1重组载体,通过脂质体转染技术转染人食管癌细胞株EC9706,外周血来源的树突状细胞(DC)负载肿瘤抗原后,与自体T淋巴细胞共培养3天,获得细胞毒性T淋巴细胞(CTL),用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测CTL对转染和未转染pEGFP-C3-B7.2-MAGE-1的食管癌细胞EC9706的杀伤活性。结果:CTL对转染pEGFP-C3-B7.2-MAGE-1的肿瘤细胞的杀伤活性大于转染pEGFP-C3和未转染细胞的杀伤活性(P<0.05)。结论:成功构建了真核共表达载体pEGFP-C3-B7.2-MAGE-1,人B7.2/MAGE-1基因修饰的EC9706肿瘤细胞瘤苗,可诱导出明显的抗EC9706细胞的免疫效应。 展开更多

关键词 b7.2 MAGE-1 真核表达载体 肿瘤免疫

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约氏疟原虫子孢子感染对大鼠腹腔巨噬细胞B7.1、B7.2分子表达的影响

9

作者 宋蓓 张锡林 +1 位作者 段建华 吕杨 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第20期2024-2026,共3页

目的研究约氏疟原虫感染后协同刺激分子B7.1、B7.2在大鼠腹腔巨噬细胞的表达情况,探讨B7.1、B7.2分子在宿主抵抗疟原虫感染免疫中的作用。方法利用约氏疟原虫感染大鼠的动物模型,分别在感染约氏疟原虫子孢子后2、12、24、48、72h分离获... 目的研究约氏疟原虫感染后协同刺激分子B7.1、B7.2在大鼠腹腔巨噬细胞的表达情况,探讨B7.1、B7.2分子在宿主抵抗疟原虫感染免疫中的作用。方法利用约氏疟原虫感染大鼠的动物模型,分别在感染约氏疟原虫子孢子后2、12、24、48、72h分离获得大鼠腹腔巨噬细胞,通过免疫荧光及激光扫描共聚焦显微镜技术定量分析B7.1、B7.2分子表达情况。结果在宿主感染约氏疟原虫后巨噬细胞B7.1、B7.2分子表达增加;B7.1上调较缓慢,并在72h后出现回落;B7.2上调非常迅速,在48h达到峰值,从72h开始略有下降;在所选时间范围内B7.2的表达水平始终高于B7.1(P<0.05)。结论疟原虫子孢子感染大鼠后,B7.1、B7.2分子表达水平发生改变,提示协同刺激因子参与了宿主免疫系统活化,推测该现象与受疟原虫感染哺乳动物机体的免疫防御、免疫调控密切相关。 展开更多

关键词 B7.1 b7.2 约氏疟原虫 抗原递呈细胞 激光扫描共聚焦显微镜

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人B7.2/hTERT融合基因真核绿色荧光载体的构建

10

作者 丁丽 《郑州铁路职业技术学院学报》 2007年第2期49-51,共3页

目的:构建人共刺激分子(B7.2)和端粒酶邀转录酶(hTERT)融合基因真核绿色荧光表达载体。方法:应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法分别从乳腺组织、乳腺癌组织中扩增出B7.2和hTERT cDNA基因片段,经回收、纯化后,分别克隆入质粒pGEM-T,然... 目的:构建人共刺激分子(B7.2)和端粒酶邀转录酶(hTERT)融合基因真核绿色荧光表达载体。方法:应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法分别从乳腺组织、乳腺癌组织中扩增出B7.2和hTERT cDNA基因片段,经回收、纯化后,分别克隆入质粒pGEM-T,然后双酶切下两目的片段,回收后再克隆入真核表达质粒,并在中国仓鼠卵巢细胞(CHO)中表达。结果:通过PCR鉴定和序列分析证实插入片段序列正确。结论:应用分子生物学技术成功构建人B7.2/hTERT真核绿色荧光表达载体,为肿瘤的免疫治疗研究提供了物质基础。 展开更多

关键词 b7.2 HTERT 绿色荧光蛋白 载体构建

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人B7.2 cDNA的克隆及其真核表达 被引量：1

11

作者 郭建芬 司履生 +3 位作者 王一理 赵永同 巩岩 孙向乐 《西安医科大学学报》 CSCD 1999年第4期441-444,共4页

为克隆人 B7.2 c DNA,构建 B7.2真核表达质粒 ,并在哺乳动物细胞中表达。分离正常人淋巴结淋巴细胞 ,经 LPS诱导后 ,以 RT- PCR,克隆 B7.2 c DNA;构建真核表达质粒 p BCMGSNeo- B7.2 ,转染哺乳细胞 ,进行表达。结果成功克隆了 B7.2c DNA... 为克隆人 B7.2 c DNA,构建 B7.2真核表达质粒 ,并在哺乳动物细胞中表达。分离正常人淋巴结淋巴细胞 ,经 LPS诱导后 ,以 RT- PCR,克隆 B7.2 c DNA;构建真核表达质粒 p BCMGSNeo- B7.2 ,转染哺乳细胞 ,进行表达。结果成功克隆了 B7.2c DNA,并经测序证实 :所构建的 B7.2抗原真核表达质粒可在哺乳动物细胞中高效表达。表明经 LPS诱导的人淋巴细胞可表达 B7.2 m RNA,所建立的 p BCMGSNeo-B7.2哺乳动物真核表达质粒 ,可供进一步研究 B7.2结构和功能。 展开更多

关键词 克隆 b7.2 CDNA RT-PCR 真核表达

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人外周血单核细胞B7.2基因的克隆及其可溶剪接体的发现

12

作者 蔡荣钦 沈娟 +2 位作者 林克波 邵红伟 黄树林 《广东药学院学报》 CAS 2008年第1期65-68,共4页

目的研究B7.2基因在肿瘤免疫方面作用,从人外周血单核细胞中克隆人B7.2基因的全长基因,并构建含此基因的重组质粒。方法根据人B7.2基因序列设计特异引物,用RT-PCR、巢式PCR方法扩增B7.2基因的全长基因,并构建至PGEM-T载体中,测序鉴定后... 目的研究B7.2基因在肿瘤免疫方面作用,从人外周血单核细胞中克隆人B7.2基因的全长基因,并构建含此基因的重组质粒。方法根据人B7.2基因序列设计特异引物,用RT-PCR、巢式PCR方法扩增B7.2基因的全长基因,并构建至PGEM-T载体中,测序鉴定后进行序列分析。结果成功构建B7.2/PGEM-T重组载体,并发现一种新的B7.2异常的剪接体,保留第1,2,3,5外显子,第四外显子全部缺失,共144 bp,其编码蛋白质由此缺少一段跨膜结构。结论新剪接体在灵长类动物中的存在可能是个普遍现象,其对细胞功能有待进一步的研究,为研究B7.2编码蛋白质的结构和生物学功能及其在肿瘤中的作用奠定基础。 展开更多

关键词 b7.2 巢式PCR 基因克隆 剪接体

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慢性B淋巴细胞白血病B细胞B7.2分子表达缺陷的研究 被引量：2

13

作者 戴振声 徐晓武 +2 位作者 陈勤奋 谢弘 谢毅 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第17期1062-1065,共4页

目的　研究比较慢性B淋巴细胞白血病 (BCLL)与正常人外周血中B细胞的B7 1、B7 2分子的表达水平 ,探讨其表达与慢性B淋巴细胞白血病发病机制的关系。方法　将 2 3例BCLL患者分为 0～Ⅱ期、Ⅲ～Ⅳ期两组 ,并设正常对照组。乙聚蔗糖 泛影... 目的　研究比较慢性B淋巴细胞白血病 (BCLL)与正常人外周血中B细胞的B7 1、B7 2分子的表达水平 ,探讨其表达与慢性B淋巴细胞白血病发病机制的关系。方法　将 2 3例BCLL患者分为 0～Ⅱ期、Ⅲ～Ⅳ期两组 ,并设正常对照组。乙聚蔗糖 泛影钠淋巴细胞分离液分离出BCLL患者及正常人的外周血单个核细胞 ,体外培养 2 4h后 ,流式细胞仪检测B细胞B7 1、B7 2表达的百分率 ;BCLL组与对照组及 0～Ⅱ期组与Ⅲ～Ⅳ期组间分别进行t检验。结果　与正常对照组相比 ,Bell患者外周血B细胞B7 2分子的表达率 (2 0 %± 13% )明显低于正常人 (5 8%± 12 % ,P <0 0 5 ) ,B7 1单独表达率及B7 1、B7 2同时表达率在正常人与BCLL两组比较差异无显著意义 (P >0 0 5 ) ;BCLL组中 0～Ⅱ期组与Ⅲ～Ⅳ期组B7 2的表达率分别为 2 5 %± 17%及 17%± 8% (P >0 .0 5 )。结论　外周血B细胞B7 2分子的表达存在缺陷 。 展开更多

关键词 慢性B淋巴细胞白血病 B细胞 b7.2分子表达 流式细胞术

原文传递

B7.1和B7.2基因真核表达载体的构建及在肝癌细胞中表达的实验研究

14

作者 李国强 王学浩 +1 位作者 印洁 俞悦 《中华肝胆外科杂志》 CAS CSCD 2004年第3期187-190,共4页

目的　构建含鼠源性B7 1和B7 2真核表达载体体系 ,研究其在肝癌细胞系CBRH7919中获得高效、稳定表达的方法。方法　将目的基因全长cDNA分别亚克隆到真核表达载体PCI neo中 ,获得B7 1和B7 2正向单拷贝插入重组子PCI neo B7 1和PCI neo B7... 目的　构建含鼠源性B7 1和B7 2真核表达载体体系 ,研究其在肝癌细胞系CBRH7919中获得高效、稳定表达的方法。方法　将目的基因全长cDNA分别亚克隆到真核表达载体PCI neo中 ,获得B7 1和B7 2正向单拷贝插入重组子PCI neo B7 1和PCI neo B7 2 ,采用酶切法和测序法鉴定。采用阳离子脂质体将PCI neo B7 1/B7 2分别转染CBRH7919,经G4 18筛选 ,获得阳性克隆 ,命名为PCI neo B7 1/B7 2 CBRH7919+细胞。逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测目的基因在CBRH7919中的表达。结果　PCI neo B7 1/B7 2酶切后 ,电泳显示 918bp和 94 2bp的目的基因片段和 5 4kbp的线性化PCI neo载体片段 ;重组子测序结果与Genebank中B7 1和B7 2序列相符 ,证实构建成功。RT PCR检测结果显示B7 1和B7 2均在PCI neo B7 1/B7 2 CBRH7919+中获得稳定表达。结论　重组真核表达载体构建正确 ,并在肝癌细胞系CBRH7919中获得高效、稳定表达 ,为其在肝癌分子免疫治疗研究中应用奠定基础。 展开更多

关键词 B7.1 b7.2 基因 真核表达载体 肝癌 表达 实验研究

原文传递

约氏疟原虫感染大鼠肝脏、腹腔巨噬细胞B7·1、B7·2、TGF-β、IFN-γ基因表达研究 被引量：1

15

作者 宋蓓 张锡林 +1 位作者 段建华 黄复生 《寄生虫与医学昆虫学报》 CAS 2006年第4期193-198,共6页

建立约氏疟原虫——斯氏按蚊——哺乳动物模型，在感染约氏疟原虫后2h、12h、24h、48h、72h分别提取大鼠肝脏和腹腔巨噬细胞总RNA，通过RT-PCR定量分析发现在宿主体感染约氏疟原虫后2～72h时间段内，B7．1表达水平没有变化，而B7．2、T... 建立约氏疟原虫——斯氏按蚊——哺乳动物模型，在感染约氏疟原虫后2h、12h、24h、48h、72h分别提取大鼠肝脏和腹腔巨噬细胞总RNA，通过RT-PCR定量分析发现在宿主体感染约氏疟原虫后2～72h时间段内，B7．1表达水平没有变化，而B7．2、TGF-β、IFN-γ转录水平显著上调。该现象提示疟原虫子孢子入侵引起宿主体内免疫相关基因B7．1、B7．2、TGF-β、IFN-γ mRNA转录水平发生改变，可能与哺乳动物机体针对疟原虫感染产生的免疫防御、免疫调控密切相关。 展开更多

关键词 B7.1 b7.2 约氏疟原虫 APCs 转录水平

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融合基因pEGFP-C3-B7．2-hTERT诱导小鼠免疫应答及抑制肝癌移植瘤 被引量：1

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作者 艾敏 杨胜利 姜爱华 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2008年第1期51-55,共5页

目的:构建融合DNA疫苗pEGFP-C3-B7.2-hTERT,观察其诱导小鼠免疫应答的能力和抗小鼠肝癌H22细胞移植成瘤的作用。方法:通过RT-PCR扩增B7.2和hTERTcDNA,以pEGFP-C3为载体构建pEGFP-C3-B7.2-hTERT融合基因质粒,肌肉注射接种C57BL/6小鼠,间... 目的:构建融合DNA疫苗pEGFP-C3-B7.2-hTERT,观察其诱导小鼠免疫应答的能力和抗小鼠肝癌H22细胞移植成瘤的作用。方法:通过RT-PCR扩增B7.2和hTERTcDNA,以pEGFP-C3为载体构建pEGFP-C3-B7.2-hTERT融合基因质粒,肌肉注射接种C57BL/6小鼠,间隔7d,共3次,以注射接种pEGFP-C3-B7.2、pEGFP-C3-hTERT、pEGFP-C3和PBS为对照。检测免疫小鼠脾淋巴细胞CTL杀伤活性、脾细胞培养上清IL-2和IFN-γ水平、外周血淋巴细胞亚群变化及血清中抗hTERT抗体水平。将融合基因pEGFP-C3-B7.2-hTERT免疫已负荷肝癌细胞H22/hTERT或H22/B7.2的小鼠,观察小鼠成瘤时间、生存时间。结果:琼脂糖凝胶电泳、酶切及序列测定证实,成功构建了融合基因质粒pEGFP-C3-B7.2-hTERT。融合基因免疫小鼠的脾淋巴细胞对B7.2-hTERT阳性靶细胞的杀伤活性明显高于各对照组(P<0.01),每只pEGFP-C3-B7.2-hTERT免疫小鼠都产生了抗体,免疫鼠外周血CD4+、CD8+T细胞和脾细胞培养上清中Th1类细胞因子IFN-γ、IL-2水平较各对照组明显升高(均P<0.01)。pEGFP-C3-B7.2-hTERT融合基因质粒免疫已负荷肝癌细胞H22/hTERT或H22/B7.2的小鼠后,小鼠60d未成瘤,其他各组22d时所有小鼠均已成瘤,60d时均死亡。结论:DNA疫苗pEGFP-C3-B7.2-hTERT在体内能诱导出明显的B7.2-hTERT特异性的抗肿瘤免疫应答,且能抑制体内已经存在的少量肿瘤细胞的成瘤。 展开更多

关键词 DNA疫苗 b7.2 HTERT 免疫应答 移植瘤 免疫治疗

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CCK-8对内毒素血症小鼠腹腔巨噬细胞B7．1和B7．2表达及协同刺激功能的影响

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作者 张风华 李淑瑾 +6 位作者 丛斌 张正茂 朱桂军 丛军 马春玲 倪志宇 付丽红 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期2445-2449,共5页

目的:探讨八肽胆囊收缩素(CCK-8)对内毒素血症小鼠腹腔巨噬细胞B7.1和B7.2表达及其协同刺激活性的影响。方法:将BALB/c小鼠随机分组(n=4),分别腹腔注射生理盐水(0.2-0.3 mL/mouse),LPS(100μg/mouse)和/或CCK-8(5 nmol/mouse)及CR1409(... 目的:探讨八肽胆囊收缩素(CCK-8)对内毒素血症小鼠腹腔巨噬细胞B7.1和B7.2表达及其协同刺激活性的影响。方法:将BALB/c小鼠随机分组(n=4),分别腹腔注射生理盐水(0.2-0.3 mL/mouse),LPS(100μg/mouse)和/或CCK-8(5 nmol/mouse)及CR1409(100μg/mouse)、CR2945(100μg/mouse)。12 h后收集并纯化腹腔巨噬细胞。采用流式细胞术分析细胞表面B7.1和B7.2含量的变化。用免疫磁珠从小鼠脾细胞分离CD4+T细胞,按4∶1数量比与上述处理的腹腔巨噬细胞共同体外培养,同时加入ConA5 mg/L,采用[3H]掺入法测定CD4+T细胞增殖,反映巨噬细胞的协同刺激活性。结果:整体应用CCK-8作用小鼠腹腔巨噬细胞,与对照组相比,CCK-8可上调静息小鼠腹腔巨噬细胞B7.2的表达,而对B7.1的表达则无影响;并且CCK-8使CD4+T细胞[3H]-TdR的掺入率升高,即促进其增殖,增强巨噬细胞的协同刺激活性。CCK-8降低LPS活化的内毒素血症小鼠腹腔巨噬细胞B7.1和B7.2的表达并且降低CD4+T细胞的[3H]-TdR掺入率,即抑制其增殖,抑制其协同刺激活性。CR1409及CR2945均能逆转CCK-8的上述作用,且CR1409的作用较CR2945更明显。结论:CCK-8通过上调巨噬细胞B7.2表达而增强其协同刺激活性;并且降低LPS活化的内毒素血症小鼠腹腔巨噬细胞B7.1和B7.2的表达,抑制其协同刺激活性。该作用由CCK1R及CCK2R共同介导,其中CCK1R起主要介导作用。 展开更多

关键词 胆囊收缩素 巨噬细胞B7.1 巨噬细胞b7.2 内毒素血症

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国家药监局附条件批准卡度尼利单抗注射液上市

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《中国处方药》 2022年第8期I0001-I0001,共1页

近日,国家药品监督管理局通过优先审评审批程序附条件批准康方药业有限公司卡度尼利单抗注射液(商品名:开坦尼)上市。该药品为我国自主研发的创新双特异性抗体,适用于既往接受含铂化疗治疗失败的复发或转移性宫颈癌患者的治疗。卡度尼... 近日,国家药品监督管理局通过优先审评审批程序附条件批准康方药业有限公司卡度尼利单抗注射液(商品名:开坦尼)上市。该药品为我国自主研发的创新双特异性抗体,适用于既往接受含铂化疗治疗失败的复发或转移性宫颈癌患者的治疗。卡度尼利单抗注射液是一种靶向人PD-1和CTLA-4的双特异性抗体,可阻断PD-1和CTLA-4与其配体PD-L1/PD-L2和B7.1/B7.2的相互作用,从而阻断PD-1和CTLA-4信号通路的免疫抑制反应,促进肿瘤特异性的T细胞免疫活化,进而发挥抗肿瘤作用。 展开更多

关键词 双特异性抗体 T细胞免疫 肿瘤特异性 免疫抑制反应 治疗失败 宫颈癌患者 B7.1 b7.2

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