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题名小鼠xist探针载体的构建及鉴定
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作者
白光宇
申景岭
孙瑞珍
雷蕾
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机构
哈尔滨医科大学组织胚胎学教研室
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出处
《解剖科学进展》
CAS
2015年第4期364-366,共3页
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文摘
目的构建xist探针载体并检验其合成出的探针效果。方法 B6D2F1 BAC(R3026)经PCR扩增获得xist基因,与双酶切的pSPT19质粒连接,经转化及测序鉴定pSPT19-xist载体构建成功。将构建好的pSPT19-xist载体线性化,并体外转录为RNA探针,应用荧光原位杂交检测雌性B6D2F1小鼠成纤维细胞内的xist表达。结果经琼脂糖凝胶电泳,获得目的基因xist条带。基因测序证实所检测重组质粒序列与xist基因序列完全一致。体外雌性小鼠成纤维细胞检测到xist阳性表达。结论成功构建xist基因pSPT19-xist重组质粒和RNA探针,并在成纤维细胞阳性表达。
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关键词
B6D2F1鼠
载体构建
RNA探针
成纤维细胞
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Keywords
b6d2flmice
vector construction
RNA probe
fibroblast
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分类号
Q781
[生物学—分子生物学]
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题名GFP-Kdm6a表达载体的构建及鉴定
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作者
宋司航
白光宇
雷蕾
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机构
哈尔滨医科大学组织胚胎学教研室
哈尔滨医科大学大庆校区组织学与胚胎学教研室
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出处
《解剖科学进展》
2018年第2期181-183,共3页
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基金
国家自然科学基金(31671545)
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文摘
目的构建及鉴定GFP-Kdm6a表达载体。方法提取基因背景为B6D2F1的ES总RNA,逆转录合成cDNA,经PCR扩增获得Kdm6a基因,与双酶切的GFP-C1质粒连接,经转化及测序鉴定GFP-Kdm6a载体构建成功。将构建好的GFP-Kdm6a载体转染入293T细胞,检测载体的表达情况。结果经琼脂糖凝胶电泳,获得目的基因Kdm6a条带。基因测序证实所检测重组质粒序列与Kdm6a基因序列完全一致。经转染的293T细胞检测到GFP-Kdm6a表达。结论克隆B6D2F1鼠Kdm6a基因、获得成功GFP-Kdm6a重组质粒的构建,在293T细胞呈阳性表达。
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关键词
B6D2F1鼠
载体构建
Kdm6a
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Keywords
b6d2flmice
vector construction
Kdm6a
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分类号
Q782
[生物学—分子生物学]
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