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烤烟B2F与B3F混级的原因及解决措施
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作者 徐伟 李福元 安泉成 《绿色科技》 2025年第1期114-119,共6页
烟叶等级中的B2F和B3F是2个关键等级,其质量差异对烟叶的市场价值和工业用途有着直接影响。但在实际的收购过程中,这2个等级的烟叶常常会被混淆,给工业企业的原料利用带来困难,并对烟农的利益产生不利影响。本文以河北中烟工业有限责任... 烟叶等级中的B2F和B3F是2个关键等级,其质量差异对烟叶的市场价值和工业用途有着直接影响。但在实际的收购过程中,这2个等级的烟叶常常会被混淆,给工业企业的原料利用带来困难,并对烟农的利益产生不利影响。本文以河北中烟工业有限责任公司向重庆市巫溪县调拨的上部烟叶为研究对象,系统地分析了B2F与B3F混级的现状、原因,并提出了相应的应对措施。通过实地调研和数据分析,发现混级现象主要由烟农分级技术不足、验级员标准执行不严以及经济利益驱动等因素导致。为有效减少混级问题,本文提出了加强烟农与验级员的培训,优化分级流程,并实施更加严格的监督机制等建议,并取得了一定的成效。 展开更多
关键词 烟叶 b2f B3F 混级现象 收购质量
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陈化过程中河南复烤片烟B2F和C3F理化指标的变化 被引量:21
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作者 胡有持 杨述元 +3 位作者 李炎强 马宇平 王昇 张俊领 《烟草科技》 EI CAS 2004年第5期11-15,共5页
研究了陈化过程中河南复烤片烟B2F和C3F物理性状、化学成分和吸味品质的变化。结果表明,随着陈化时间的增加,河南复烤片烟的静燃速率提高,单位重量叶丝的焦油产生量降低;醛酮类、酯类成分和酸性成分的含量呈增加趋势,而醇类成分和pH呈... 研究了陈化过程中河南复烤片烟B2F和C3F物理性状、化学成分和吸味品质的变化。结果表明,随着陈化时间的增加,河南复烤片烟的静燃速率提高,单位重量叶丝的焦油产生量降低;醛酮类、酯类成分和酸性成分的含量呈增加趋势,而醇类成分和pH呈明显下降趋势,吸味品质提高。 展开更多
关键词 陈化 复烤片烟 b2f C3F 物理指标 化学成分 PH值 感官质量
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烤烟B2F等级烟叶表面颜色区域性差异分析 被引量:3
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作者 王改丽 于建军 +4 位作者 郑宪滨 魏春阳 李悦 胡建军 甄焕菊 《山东农业科学》 2017年第4期15-20,共6页
为揭示烤烟B2F等级烟叶表面颜色的区域性差异,以2015年14个省份的B2F等级初烤烟叶为试验材料,采用多重比较和系统聚类法,对烟叶样品的表面颜色进行量化分析。结果表明:(1)烤烟表面颜色空间分布特征:明度(L*)为47.72~60.29;红度(a*)为15.... 为揭示烤烟B2F等级烟叶表面颜色的区域性差异,以2015年14个省份的B2F等级初烤烟叶为试验材料,采用多重比较和系统聚类法,对烟叶样品的表面颜色进行量化分析。结果表明:(1)烤烟表面颜色空间分布特征:明度(L*)为47.72~60.29;红度(a*)为15.61~18.89;黄度(b*)为39.00~50.62;颜色饱和度(C*)为42.41~53.76。(2)烤烟B2F等级烟叶表面颜色具有较强的区域性差异:长江中上游烟区的明度指数L*显著高于西南烟区和东南烟区,东南烟区的明度指数L*显著低于其它四大烟区,西南烟区红度指数a*显著高于东南、黄淮和北方烟区;长江中上游烟区黄度指数b*和颜色饱和度指数C*均显著高于东南、黄淮和北方烟区。(3)不同种植区烤烟B2F等级烟叶表面颜色特征可分为4类,并呈现较强的区域特征:第一类主要集中在黄淮和北方烟区,总体特征是烟叶表面颜色红色特性较弱;第二类主要集中在东南烟区,总体特征是烟叶表面明度较低,显色暗淡,黄色特性弱,饱和度不够。第三类主要集中在西南烟区和重庆等产区,总体特征是烟叶表面红色特性最为明显。第四类主要集中在四川凉山州和部分西南烟区,总体特征是烟叶表面颜色亮度较高,黄色显性较好,颜色饱和度高。 展开更多
关键词 烤烟 b2f等级烟叶 表面颜色 区域性差异
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烤烟B2F烟叶分选质量控制 被引量:6
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作者 刘军 齐永杰 《现代农业科技》 2013年第11期322-323,共2页
针对近年来B2F烟叶工商交接等级质量不高的问题,采取人工解把分选的方式进行改善,在分选过程中严格落实"三级质量把关"管理控制模式,事实证明效果显著,分选后霉烟、一类杂物含量为0,二、三类杂物含量得到了有效控制,B2F烟叶... 针对近年来B2F烟叶工商交接等级质量不高的问题,采取人工解把分选的方式进行改善,在分选过程中严格落实"三级质量把关"管理控制模式,事实证明效果显著,分选后霉烟、一类杂物含量为0,二、三类杂物含量得到了有效控制,B2F烟叶等级质量和工业可用性得到了明显提高。 展开更多
关键词 烟叶 b2f 分选 质量控制
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基于C2B2F农产品电子商务的销售模式研究 被引量:3
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作者 包文杰 《价值工程》 2018年第5期52-54,共3页
近几年,农产品电商的出现有效地拓宽农产品销售渠道,降低流通成本,同时解决了供销信息不对称等问题。本文在对C2B2F农产品电商模式研究的基础上,针对其不足,引入了金融机构,提出"C2B2F+金融"模式的概念。最后,详细介绍了该模... 近几年,农产品电商的出现有效地拓宽农产品销售渠道,降低流通成本,同时解决了供销信息不对称等问题。本文在对C2B2F农产品电商模式研究的基础上,针对其不足,引入了金融机构,提出"C2B2F+金融"模式的概念。最后,详细介绍了该模式的运营方式以及盈利模式并验证了该模式的可行性。 展开更多
关键词 农产品 C2b2f SWOT分析 金融服务
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零售业电子商务B2F转型模式研究
6
作者 杜美丽 《现代商业》 2017年第1期35-36,共2页
随着电子商务的发展,产生了一种引起社会广泛关注的电子商务升级模式——B2F。在零售业竞争环境和人力资源供给形势日益严峻的当下,在固定和移动互联网应用逐渐全方位渗透至零售消费体验的过程中,B2F新运营模式的出现不仅为零售企业开... 随着电子商务的发展,产生了一种引起社会广泛关注的电子商务升级模式——B2F。在零售业竞争环境和人力资源供给形势日益严峻的当下,在固定和移动互联网应用逐渐全方位渗透至零售消费体验的过程中,B2F新运营模式的出现不仅为零售企业开辟了新的营销渠道,更使企业可以以不同方式密切与细分市场的联系,深入洞察消费需求,从而第一次真正站在顾客角度思考管理问题,监控服务品质、引导产品创新、提升管理能力。 展开更多
关键词 零售业 b2f模式 互联网 平台
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提高长春烟区烤烟B2F等级质量技术措施
7
作者 李晓林 于洋 +2 位作者 徐轶群 王新航 吴铭 《吉林农业》 2016年第11期93-93,共1页
通过抽查吉林省长春烟区柳河县4个烟叶收购站B2F收购等级合格率情况,详细分析影响该等级质量的原因,提出提高该等级质量的具体措施,最终得出在烟叶生产收购过程中,通过提高上部叶采收成熟度、加强验级人员和专业化分级队员分级技术培训... 通过抽查吉林省长春烟区柳河县4个烟叶收购站B2F收购等级合格率情况,详细分析影响该等级质量的原因,提出提高该等级质量的具体措施,最终得出在烟叶生产收购过程中,通过提高上部叶采收成熟度、加强验级人员和专业化分级队员分级技术培训和指导、落实预检制度、实行专业化分级散叶收购和强化烟叶收购等级质量监督考核等措施,可以明显提高B2F的等级合格率。 展开更多
关键词 b2f 分级 等级质量
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C2B2F农村生鲜电商供应链模式研究 被引量:4
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作者 甄一阳 霍伟乐 +2 位作者 张英连 苏嘉怡 张庆平 《企业改革与管理》 2017年第11期59-61,共3页
在介绍C2B2F农村生鲜电商供应链模式基础上,即用户预定为首位,信息传回到B端,B端收集数据并整理,F端今日收到订单,次日发货,模式是T+1,C端涵括微信商城、PC端、PAD端、手机端,而终端则是自营的社区冷鲜柜或便利店,为供应链各参与主体(F... 在介绍C2B2F农村生鲜电商供应链模式基础上,即用户预定为首位,信息传回到B端,B端收集数据并整理,F端今日收到订单,次日发货,模式是T+1,C端涵括微信商城、PC端、PAD端、手机端,而终端则是自营的社区冷鲜柜或便利店,为供应链各参与主体(Farm、Electric Business、3PL、customer)提出相应建议,并给出成功实施该模式的保障。 展开更多
关键词 C2b2f 生鲜电商 供应链 模式
原文传递
嘉兴与丽水联动发展农业产业链的“W2F+B2M”模式研究
9
作者 陈杰 《全国流通经济》 2025年第6期129-132,共4页
2022年中央一号文件《中共中央国务院关于做好2022年全面推进乡村振兴重点工作的意见》明确要求大力推进数字农业建设,推进智慧农业发展;2022年12月23日至24日中央农村工作会议上习近平总书记指出“产业振兴是乡村振兴的重中之重,要落... 2022年中央一号文件《中共中央国务院关于做好2022年全面推进乡村振兴重点工作的意见》明确要求大力推进数字农业建设,推进智慧农业发展;2022年12月23日至24日中央农村工作会议上习近平总书记指出“产业振兴是乡村振兴的重中之重,要落实产业帮扶政策,做好‘土特产’文章,依托农业农村特色资源,向开发农业多种功能、挖掘乡村多元价值要效益,向一二三产业融合发展要效益,强龙头、补链条、兴业态、树品牌,推动乡村产业全链条升级,增强市场竞争力和可持续发展能力”。本文深刻领会习近平总书记、中央一号文件、中共浙江省委十五届二次全会精神,通过深入总结嘉兴与丽水近二十年开展“山海协作”的成功经验,并针对嘉兴与丽水联动发展特色农业产业链目前遇到的种养技术、销售模式、专家团队、高技能人才等瓶颈,提出构建“嘉兴农产品专业市场与丽水种养基地联动发展特色农业产业链的‘W2F+B2M’(Wholesale to Farmer+Business to Member,即嘉兴农产品专业市场与丽水种养基地+嘉兴专业市场商户与商户的会员联动)模式”,进一步完善嘉兴与丽水特色农业产业链的联动发展机制,助推嘉兴与丽水共同富裕。 展开更多
关键词 乡村振兴 联动发展机制 农业产业链 “W2F+B2M”模式
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B_2F_2分子异构体结构的量子化学计算研究 被引量:8
10
作者 于海涛 黄旭日 +4 位作者 池玉娟 傅宏刚 丁益宏 李泽生 孙家锺 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2002年第5期888-892,共5页
采用ab initio方法对B2F2分子异构体的结构进行了计算研究,并与Al2F2分子进行了比较.结果表明,B2F2具有D h对称性,3 g电子态的直线型结构FBBF是B2F2分子的最稳定异构体,对文献的结果进行了修正.在UCCSD(T,full)/6-311+G(2df)水平下,F—... 采用ab initio方法对B2F2分子异构体的结构进行了计算研究,并与Al2F2分子进行了比较.结果表明,B2F2具有D h对称性,3 g电子态的直线型结构FBBF是B2F2分子的最稳定异构体,对文献的结果进行了修正.在UCCSD(T,full)/6-311+G(2df)水平下,F—B和B—B键长分别为0.129 42和 0.148 20 nm,振动频率出现在 1860.00和 1320.62 cm-1处.在 UQCISD(T,full)/6-311+G(2df)//UMP2(full)/6-311+G(d)+ ZPVE水平下,3 g态的线性FBBF分子的垂直电离势为 848.58 kJ/mol,而由3 g电子态的BF二聚为3 g态的线性FBBF分子的焓变为 59.86 kJ/mol,此二聚化反应是放热反应,说明二聚化过程在能量上是有利的. 展开更多
关键词 b2f2分子 分子异构体 分子结构 量子化学计算 从头算 二聚化反应焓 氟化硼
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农产品流通电商化新模式构建 被引量:10
11
作者 陈德宝 《商业时代》 北大核心 2013年第32期23-24,共2页
本文从农产品传统流通模式的问题出发,深入分析了农产品流通电商化一般模式以及存在的问题,创造性的提出了解决问题的新模式——P2C2B2F模式,以期为解决农产品流通的问题做出应有的贡献。
关键词 农产品流通 电商化 P2C2b2f模式
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农村市场电子商务的新模式——BtoF交易平台构建研究 被引量:5
12
作者 吴崑 《现代商业》 2007年第27期231-234,共4页
20世纪90年代以来,伴随互联网技术的迅速发展和普及,电子商务和网络经济日益受到国家、行业和企业的关注,逐步进入高速发展期。本文从我国电子商务发展现状入手,分析其在农业领域的应用,并就发展农村市场电子商务,建立B2F(Business to F... 20世纪90年代以来,伴随互联网技术的迅速发展和普及,电子商务和网络经济日益受到国家、行业和企业的关注,逐步进入高速发展期。本文从我国电子商务发展现状入手,分析其在农业领域的应用,并就发展农村市场电子商务,建立B2F(Business to Farmer)电子商务交易平台提出建议。 展开更多
关键词 现代农业 电子商务 b2f(Business to Farmer) 电子商务交易平台
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电子商务环境下生鲜配送的问题分析与对策研究——以上海食行生鲜公司为例 被引量:6
13
作者 欧阳芳 袁烨 《农村经济与科技》 2016年第19期116-117,共2页
生鲜配送对提高食材质量、改善民生、推进农业产业化具有重要的意义。在分析上海食行生鲜公司运用电商平台,采用产地到社区的特色配送模式的基础上,提出生鲜配送的发展思路:依托信息技术,优化生鲜配送路线;严格包装标准,实施生鲜包装多... 生鲜配送对提高食材质量、改善民生、推进农业产业化具有重要的意义。在分析上海食行生鲜公司运用电商平台,采用产地到社区的特色配送模式的基础上,提出生鲜配送的发展思路:依托信息技术,优化生鲜配送路线;严格包装标准,实施生鲜包装多元化;优化运营成本,联盟冷链物流企业;推进财税支持,加强冷链基础建设。 展开更多
关键词 生鲜配送 电商平台 C2b2f模式
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S异步恒延伸轧制产品B_2F钢的正电子湮没研究
14
作者 邹柳娟 张才国 +1 位作者 王桂兰 王铭宗 《华中理工大学学报》 CSCD 北大核心 1989年第1期121-124,共4页
本文用正电子湮没技术研究了PV-E轧制产品B_2F钢,测得了正电子寿命与轧制压力及机械性能间的对应关系,为PV-E轧制工艺提供了依据。实验表明,轧制过程中B_2F钢中存在大量位错和空位团缺陷,且正电子寿命与速比有一定对应关系,揭示了速比... 本文用正电子湮没技术研究了PV-E轧制产品B_2F钢,测得了正电子寿命与轧制压力及机械性能间的对应关系,为PV-E轧制工艺提供了依据。实验表明,轧制过程中B_2F钢中存在大量位错和空位团缺陷,且正电子寿命与速比有一定对应关系,揭示了速比对机械性能的影响。 展开更多
关键词 轧制 正电子湮没 b2f 带钢
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Comparison on the Chemical Compositions in the K326 Tobacco from Different Tobacco-planting Areas of Yunnan Province 被引量:12
15
作者 王岚 杨继周 +8 位作者 蒋美红 段俊杰 卢叶 敖金成 马彦清 李继飞 王涛 林楠 邓国宾 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2012年第1期139-142,共4页
[Objective] To compare the regional differences of the conventional chemi- cal compositions in the K326 B2F tobacco from different tobacco-planting areas of Yunnan Province. [Methed] Continuous flow analyzer was used ... [Objective] To compare the regional differences of the conventional chemi- cal compositions in the K326 B2F tobacco from different tobacco-planting areas of Yunnan Province. [Methed] Continuous flow analyzer was used to detect the con- ventional chemical compositions, and SPSS 17.0 statistical package was used to conduct data statistical analysis and variance analysis. [Result] Significant differences were existed among most of the indicators for conventional chemical compositions of K326 tobacco in different areas: the differences of total sugar, reducing sugar and nicotine reached a high Significant level; potassium ion and total nitrogen differences reached a significant level, while there was no significant difference in chlorine ion. Most of the conventional chemical compositions in K326 B2F tabacco planted in Yuxi region and those planted in Qujing, Dali and Chuxiong were significantly different. The total sugar, reducing sugar and nicotine contents of tobacco planted in eastern Yunnan, central Yunnan and western Yunnan were significantly different; while the conventional chemical compositions contents in the tobacco planted in Chuxiong and Dali, which all belong to western Yunnan, showed no obvious significant difference, indicating different ecological environments in large area had a great impact on the tobacco of Yunnan Province. [Conclusion] It revealed the regional characteristics of the conventional chemical compositions in K326 flue-cured tobacco leaves from Yunnan Province, providing references for the cigarette blending and production of high-quality tobacco with characteristics. 展开更多
关键词 K326 b2f Conventional chemical compositions DIFFERENCE
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云南省不同烟区K326烟叶的常规化学成分比较 被引量:4
16
作者 王岚 杨继周 +8 位作者 蒋美红 段俊杰 卢叶 敖金成 马彦清 李继飞 王涛 林楠 邓国宾 《安徽农业科学》 CAS 2012年第3期1369-1371,共3页
[目的]比较云南不同烟区K326 B2F烟叶常规化学成分的地区差异性。[方法]常规化学成分采用连续流动分析仪检测,并利用SPSS 17.0统计软件包进行数据的统计分析和方差分析。[结果]不同地区K326的各项常规化学成分指标大多存在显著差异,其... [目的]比较云南不同烟区K326 B2F烟叶常规化学成分的地区差异性。[方法]常规化学成分采用连续流动分析仪检测,并利用SPSS 17.0统计软件包进行数据的统计分析和方差分析。[结果]不同地区K326的各项常规化学成分指标大多存在显著差异,其中总糖、还原糖和烟碱差异达到了极显著水平;钾和总氮差异达到了显著水平,氯则无显著差异。玉溪地区的K326 B2F烟叶大部分常规化学成分与曲靖、大理和楚雄间均存在显著差异。滇东、滇中和滇西3个烟区的总糖、还原糖和烟碱含量的差异明显;而同属滇西的楚雄和大理间常规化学成分含量差异并不明显,这说明云南省不同大区域间生态环境的差异对烟叶的影响较大。[结论]揭示了云南省K326初烤烟叶常规化学成分特性的区域特征,为卷烟配方和特色优质烟叶的生产提供了参考依据。 展开更多
关键词 K326 b2f 常规化学成分 差异性
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肿瘤细胞裂解物抗小鼠B16F10黑色素瘤的作用研究 被引量:3
17
作者 路蕾 陈科 +7 位作者 刘彬 王泽宇 葛驰宇 侯景 金亮 邢芸 曹荣月 刘景晶 《药物生物技术》 CAS CSCD 2012年第3期232-237,共6页
反复冻融B16F10肿瘤细胞制备裂解物,以白喉毒素(Diphtheria toxin,DT)为载体,OK432和来源于结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)热休克蛋白70(HSP70)第407-426(mHSP70407~426,M)的两段串联重复序列M2为佐剂,制备了肿瘤细胞疫苗B1... 反复冻融B16F10肿瘤细胞制备裂解物,以白喉毒素(Diphtheria toxin,DT)为载体,OK432和来源于结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)热休克蛋白70(HSP70)第407-426(mHSP70407~426,M)的两段串联重复序列M2为佐剂,制备了肿瘤细胞疫苗B16F10-DT-M2-OK432(BDTMOK),探讨其能否抑制小鼠B16黑色素瘤,并且对其抗肿瘤的作用机理进行部分探讨。以制备的BDTMOK免疫C57BL/6小鼠,分别检测体液免疫应答和细胞免疫应答。通过ELISA法,从血清中检测到高滴度的抗B16肿瘤细胞裂解物(B16 tumor cell lysate,B16TCL)类抗体。淋巴细胞增殖实验的结果显示,BDTMOK的免疫能够有效的刺激脾淋巴细胞的增殖。预防结合治疗性实验的结果显示,BDTMOK激发的免疫应答对于B16肿瘤攻击起到有效的保护作用,与PBS阴性对照组比较,皮下注射BDTMOK可以延长皮下移植瘤发生的潜伏期(P<0.05),并且平均瘤重显著降低(P<0.05);抑制了小鼠皮内肿瘤模型中的血管新生(P<0.01)。疫苗BDTMOK能有效的抑制小鼠B16黑色素瘤的生长。 展开更多
关键词 肿瘤细胞疫苗 B16F10-DT-M2-OK432 B16F10黑色素瘤
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B_2O_3·TiO_2/Ti催化剂对水中腐殖酸吸附行为研究 被引量:7
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作者 姜艳丽 姜兆华 刘惠玲 《高校化学工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第6期954-958,共5页
TiO2光电催化氧化有机物的反应被认为是表面反应,有机物在TiO2表面的吸附是其降解的先决条件,因此系统研究有机物在TiO2表面的吸附行为,可以为进一步的光电催化降解提供实验依据。现采用阳极氧化法在基体钛表面原位合成B2O3·TiO2/T... TiO2光电催化氧化有机物的反应被认为是表面反应,有机物在TiO2表面的吸附是其降解的先决条件,因此系统研究有机物在TiO2表面的吸附行为,可以为进一步的光电催化降解提供实验依据。现采用阳极氧化法在基体钛表面原位合成B2O3·TiO2/Ti催化剂为吸附剂,系统地研究了腐殖酸在膜催化剂上的吸附行为,探讨了温度、溶液pH值、腐殖酸初始浓度、外加偏压等因素对吸附的影响,结果表明:低温、酸性条件下有利于腐殖酸在膜催化剂上吸附,吸附量随初始浓度、外加偏压的增加而增大,B2O3·TiO2/Ti催化剂吸附腐殖酸的等温线数据可用Freundlich等温吸附方程描述,吸附过程遵循Lagergren二级吸附动力学模型。 展开更多
关键词 吸附等温方程 吸附反应动力学 B2O3·TiO2F/Ti催化剂 腐殖酸
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温度、pH值、盐度交互作用优化福氏志贺氏菌F2b培养条件 被引量:1
19
作者 张亚琼 宁喜斌 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期408-412,共5页
研究温度、pH值、盐度3个因素交互作用下食源性致病微生物福氏志贺氏菌F2b的最优培养条件。在温度、pH值、盐度单因素试验的基础上,应用Box-Behnken中心组合试验原理,设计三因素交互作用试验。以温度、pH值、盐度为响应因子,以菌液的OD... 研究温度、pH值、盐度3个因素交互作用下食源性致病微生物福氏志贺氏菌F2b的最优培养条件。在温度、pH值、盐度单因素试验的基础上,应用Box-Behnken中心组合试验原理,设计三因素交互作用试验。以温度、pH值、盐度为响应因子,以菌液的OD550为响应值,采用响应面法处理试验数据。结果表明,在所选的因素水平范围内,温度、pH值对F2b生长影响显著,温度、pH值之间交互作用显著。获得志贺氏菌F2b的最佳生长条件为温度35.8℃,pH值7.7,盐度0.76g/dL。经过验证,实测值和预测值之间偏差为1.1%,表明响应面法优化F2b培养条件真实、快速、有效。 展开更多
关键词 福氏志贺氏菌F2b Box—Behnken 响应面法 温度 PH值 盐度
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羊口疮病毒榆林株B2L和F1L串联基因在昆虫杆状病毒系统的表达 被引量:4
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作者 冯平 李云章 +2 位作者 孙丰廷 屈雷 闫海龙 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2018年第6期1-8,共8页
【目的】克隆分析羊口疮病毒(ORFV)榆林株(ORFV-Yulin)的F1L基因序列,通过昆虫杆状病毒表达B2L和F1L串联基因。【方法】采用PCR方法扩增ORFV-Yulin株F1L全长基因,测序后对其进行序列分析和遗传进化分析。扩增ORFV-Yulin株B2L融合基因(r ... 【目的】克隆分析羊口疮病毒(ORFV)榆林株(ORFV-Yulin)的F1L基因序列,通过昆虫杆状病毒表达B2L和F1L串联基因。【方法】采用PCR方法扩增ORFV-Yulin株F1L全长基因,测序后对其进行序列分析和遗传进化分析。扩增ORFV-Yulin株B2L融合基因(r B2L)和F1L融合基因(c F1L),利用碱基linker连接,通过重叠PCR方法扩增获得ORFV r B2L-linker-c F1L重组基因(r B2Lc F1L),将其与昆虫杆状病毒表达载体pBac5连接构建表达载体pBac-rB2LcF1L。将pBac-rB2LcF1L包装出杆状病毒,侵染sf9细胞,通过SDS-PAGE、Western-blotting以及质谱鉴定等方法验证目的基因r B2Lc F1L的表达。【结果】克隆获得了1 029bp的F1L全长基因,该基因高度保守,与FJ-MH2015株的序列相似性最高,核苷酸和氨基酸的相似性分别为99.0%和99.4%。系统进化分析表明,ORFV-Yulin株与XP(KU199840.1)、FJ-MH2015(KM675409.1)以及Shanxi(HQ221964.1)株同处于一个分支。PCR扩增获得了855bp的c F1L基因、1 180bp的r B2L基因及1 983bp的r B2Lc F1L基因,成功构建了pBacrB2LcF1L载体,并包装出相应的杆状病毒。B2L和F1L串联基因通过昆虫杆状病毒表达系统获得成功表达,表达产物的分子质量为80ku,且有部分重组蛋白能分泌到细胞培养基中。【结论】ORFV-Yulin株的B2L和F1L串联基因在昆虫杆状病毒系统表达成功。 展开更多
关键词 羊口疮病毒 F1L基因 F1L+B2L串联表达 昆虫杆状病毒 基因表达
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