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基于NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3炎症小体信号筛选猴痘病毒调控炎症的关键蛋白
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作者 罗铭兴 裴晨辰 +4 位作者 龚李云 郑新雷 钱军 刘全 郑君 《中山大学学报(医学科学版)》 北大核心 2026年第2期259-268,共10页
【目的】筛选并鉴定猴痘病毒(MPXV)调控NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症小体信号的关键蛋白。【方法】以MPXV国内流行毒株的基因组为模板,构建可能具有炎症调控功能的病毒基因表达质粒库(共82个)。将NLRP3、凋亡相关斑点样蛋... 【目的】筛选并鉴定猴痘病毒(MPXV)调控NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症小体信号的关键蛋白。【方法】以MPXV国内流行毒株的基因组为模板,构建可能具有炎症调控功能的病毒基因表达质粒库(共82个)。将NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)、含有荧光素酶报告基因的白细胞介素1β前体(pro-IL-1β-Luc)蛋白的真核表达质粒以及病毒基因表达质粒共转染HEK293T细胞,通过检测细胞上清液中的荧光素酶活性来监测NLRP3炎症小体信号通路的活化,从而筛选明显抑制成熟IL-1β产生的病毒基因,通过蛋白质印迹(WB)等方法进一步鉴定其抑制作用,通过免疫共沉淀(Co-IP)等方法鉴定其与NLRP3炎症小体各组分的相互作用,通过关键位点突变的方法鉴定其相互作用的基序。【结果】成功构建并优化了NLRP3炎症小体信号筛选体系,使用该体系筛选MPXV表达质粒库,其中B10R抑制成熟IL-1β产生的效果最为明显(P<0.0001),其抑制作用呈现剂量依赖性,进一步鉴定发现B10R能够与pro-IL-1β结合,而B10R的C端基序突变体B10Rmut-C(T96A,Y97A,I98A)失去了与pro-IL-1β相互作用的能力。【结论】MPXV B10R蛋白能够与pro-IL-1β相互作用,进而抑制成熟IL-1β的产生,而B10R蛋白C端基序(T96,Y97,I98)对于其功能发挥至关重要。本研究为进一步解析MPXV调控NLRP3炎症小体信号的分子机制提供了线索和依据。 展开更多
关键词 NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3 炎症小体 猴痘病毒 白细胞介素1Β b10r
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D10R09B离心压缩机喘振分析与控制
2
作者 王贺荣 王承泉 《油气田地面工程》 北大核心 2005年第8期55-55,共1页
关键词 D10R09B离心压缩机 喘振现象 入口压力 天然气温度 管网设备 石油设备
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