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血清C5b-9水平与成人特发性膜性肾病患者病情相关性研究
1
作者 蔡淑宇 李贤 +3 位作者 沈婕 覃兰清 李菊英 杨桢华 《内科》 2025年第6期617-624,共8页
目的探讨血清C5b-9在成人特发性膜性肾病(IMN)患者中的水平及其与临床指标的关联,并评估其辅助诊断价值。方法纳入2020年7月至2022年11月于广西医科大学第一附属医院经肾穿刺活检确诊的成人IMN患者100例(IMN组)及同期健康体检者100例(... 目的探讨血清C5b-9在成人特发性膜性肾病(IMN)患者中的水平及其与临床指标的关联,并评估其辅助诊断价值。方法纳入2020年7月至2022年11月于广西医科大学第一附属医院经肾穿刺活检确诊的成人IMN患者100例(IMN组)及同期健康体检者100例(健康对照组),收集所有研究对象的基线临床资料及IMN患者的病理资料。根据改善全球肾脏病预后组织(KDIGO)指南评估肾功能进展风险,并将IMN患者分为低风险组与中高风险组;根据24 h尿蛋白定量将IMN患者分为非大量蛋白尿组(≤3.5 g/24 h)与大量蛋白尿组(>3.5 g/24 h)。比较组间血清C5b-9水平。采用Pearson相关分析及多元线性回归分析探讨血清C5b-9水平与临床指标的关联,采用logistic回归分析探究IMN患者发生大量蛋白尿的影响因素。绘制受试者操作特征(ROC)曲线评估血清C5b-9水平对IMN的诊断效能。结果IMN组患者血清C5b-9水平高于健康对照组[(174.57±33.19)ng/mL比(151.18±15.33)ng/mL,P<0.05]。在IMN患者中,中高风险组血清C5b-9水平高于低风险组[(181.56±31.06)ng/mL比(149.81±31.05)ng/mL,P<0.05],大量蛋白尿组高于非大量蛋白尿组[(182.41±31.51)ng/mL比(161.51±32.41)ng/mL,P<0.05],而不同肾脏病理特征组间血清C5b-9水平差异均无统计学意义(均P>0.05)。Pearson相关分析显示,血清C5b-9水平与24 h尿蛋白定量呈正相关,与血清免疫球蛋白G及白蛋白水平均呈负相关(均P<0.05)。多元线性回归显示,24 h尿蛋白定量是血清C5b-9水平的独立影响因素(P<0.05)。多因素二元logistic回归分析显示,血清C5b-9水平是IMN患者发生大量蛋白尿的独立危险因素(OR=1.014,95%CI:1.000~1.029,P<0.05)。ROC曲线分析显示,血清C5b-9水平诊断IMN的曲线下面积为0.717,最佳截断值为164.91 ng/mL,对应的灵敏度为75.02%,特异度为60.73%。结论血清C5b-9水平在成人IMN患者中较高,且其升高与更严重的临床表型(中高肾功能进展风险、大量蛋白尿)密切相关;血清C5b-9水平是成人IMN患者发生大量蛋白尿的独立危险因素,并与24 h尿蛋白定量呈正相关;此外,血清C5b-9水平对IMN具有一定的辅助诊断价值。 展开更多
关键词 特发性膜性肾病 C5b-9 蛋白尿 诊断
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血清纤维凝胶蛋白3、C5b-9对老年慢性心力衰竭合并肺部感染患者预后不良的预测价值
2
作者 黄琨 张红利 +2 位作者 徐晶晶 史艳霞 张春来 《转化医学杂志》 2025年第7期18-23,共6页
目的分析血清纤维凝胶蛋白3(Ficolin-3)、C5b-9对老年慢性心力衰竭(CHF)合并肺部感染患者预后不良的预测价值。方法选取2022年10月至2024年10月于唐山中心医院就诊的老年CHF合并肺部感染患者220例,根据随访预后情况分为预后不良组59例... 目的分析血清纤维凝胶蛋白3(Ficolin-3)、C5b-9对老年慢性心力衰竭(CHF)合并肺部感染患者预后不良的预测价值。方法选取2022年10月至2024年10月于唐山中心医院就诊的老年CHF合并肺部感染患者220例,根据随访预后情况分为预后不良组59例和预后良好组161例。比较两组一般资料、Ficolin-3、C5b-9差异,采用多因素Logistic逐步回归分析老年CHF合并肺部感染患者预后不良的影响因素,采用受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUC)评估Ficolin-3、C5b-9对老年CHF合并肺部感染患者预后不良的预测价值。结果预后不良组血清Ficolin-3水平显著低于预后良好组,C5b-9水平显著高于预后良好组[(13.47±2.30)μg/mL vs(18.72±3.51)μg/mL、(297.25±19.46)ng/mL vs(232.84±17.58)ng/mL,P<0.05]。多因素Logistic逐步回归分析显示,NYHA心功能分级Ⅲ~Ⅳ级、侵入性操作、降钙素原升高、C5b-9≥265.05 ng/mL是老年CHF合并肺部感染患者预后不良的危险因素(OR=2.795,95%CI:1.405~5.562,P=0.003;OR=2.861,95%CI:1.528~5.356,P=0.001;OR=1.850,95%CI:1.209~2.830,P=0.005;OR=2.793,95%CI:1.443~5.406,P=0.002);Ficolin-3≥16.10μg/mL是老年CHF合并肺部感染患者预后不良的保护因素(OR=0.393,95%CI:0.225~0.686,P=0.001)。Ficolin-3联合C5b-9预测老年CHF合并肺部感染患者预后不良的AUC为0.907,显著高于Ficolin-3、C5b-9单独预测的0.784、0.856(Z=10.072、9.864,P<0.001)。结论Ficolin-3降低、C5b-9升高与老年CHF合并肺部感染患者预后不良密切相关,两者联合检测的预测价值显著优于单独预测,可作为评估预后的生物学标志物。 展开更多
关键词 纤维凝胶蛋白3 C5b-9 老年 慢性心力衰竭 肺部感染
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补体C5b-9复合物促进树突状细胞成熟 被引量：1
3
作者 杨承英 陈永文 +5 位作者 傅晓岚 费蕾 靳廼斯 谢谆怡 汤玉渝 吴玉章 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期316-321,共6页
探讨补体C5b-9复合物对树突状细胞成熟及免疫学功能的影响。rhGM-CSF+rhIL-4体外诱导单核细胞分化为不成熟树突状细胞,体外于不成熟树突状细胞表面用补体蛋白纯品组装CSb-9,37℃,5%CO_2温育96 h,流式分析细胞表型及抗原捕获能力;与同种... 探讨补体C5b-9复合物对树突状细胞成熟及免疫学功能的影响。rhGM-CSF+rhIL-4体外诱导单核细胞分化为不成熟树突状细胞,体外于不成熟树突状细胞表面用补体蛋白纯品组装CSb-9,37℃,5%CO_2温育96 h,流式分析细胞表型及抗原捕获能力;与同种异体CD4^+和CD8^+T细胞共培养检测其免疫刺激功能;ELISA检测细胞因子分泌。结果显示,亚溶解型C5b-9处理DC表面标志CD83、HLA、CD80、CD86、B7-H1、B7-H3、B7-H4以及BTLA等表达上调;DC分泌IL-12及TNF-α上调,抗原捕获能力降低;C5b-9处理DC刺激CD4^+T细胞活化及分泌IFN-γ、IL-2能力增强。结论:补体C5b-9复合物可以促进树突状细胞成熟,衔接天然免疫和特异性免疫。 展开更多
关键词 补体终末复合物C5b-9 树突状细胞 成熟 亚溶解型C5b-9
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大鼠Thy-1肾炎增殖病变及sublytic C5b-9致其肾小球系膜细胞增生的实验研究 被引量：6
4
作者 赵聃 李妍 +3 位作者 周建博 张婧 邱文 王迎伟 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期1343-1350,共8页
目的:检查大鼠Thy-1肾炎(Thy-1 nephritis,Thy-1N)肾小球系膜细胞(glomerular mesangial cell,GMC)的增生病变及亚溶解型(sublytic)C5b-9复合物在GMC增殖中的作用。方法:复制大鼠Thy-1N模型,分别于注射Thy-1抗体后18 h、3 d和7 d时,取... 目的:检查大鼠Thy-1肾炎(Thy-1 nephritis,Thy-1N)肾小球系膜细胞(glomerular mesangial cell,GMC)的增生病变及亚溶解型(sublytic)C5b-9复合物在GMC增殖中的作用。方法:复制大鼠Thy-1N模型,分别于注射Thy-1抗体后18 h、3 d和7 d时,取肾组织,用real-time PCR和Western blot方法检查其肾组织中细胞增殖指标,即细胞周期蛋白D2(cyclin D2)和增殖细胞核抗原(proliferative cell nuclear antigen,PCNA)的mRNA丰度及蛋白表达水平。用免疫荧光观察肾小球中C5b-9复合物的沉积。同时,使用BrdU掺入法、光镜及电镜观察大鼠肾小球细胞的增殖情况。此外,体外培养大鼠GMC,进行不同分组处理后再给予sublytic C5b-9刺激,用3H-胸腺嘧啶核苷酸掺入法(3H-thymidine incorporation,3H-TdR)检查GMC的增殖情况。结果 :大鼠Thy-1N病变18 h,肾组织中cyclin D2、PCNA表达和肾内BrdU阳性细胞数均开始升高,实验3 d和7 d,其表达进一步提高。同时肾小球内可见C5b-9复合物沉积,部分C5b-9包绕的肾细胞形态完好。另形态学观察还发现,实验18 h,部分GMC溶解坏死,而实验3 d,GMC数量明显增多,7 d增加更为显著。体外实验中,大鼠GMC在sublytic C5b-9刺激后18 h,其细胞增殖水平显著增高,而用sublytic C5b-9刺激GMC产生的培养上清处理正常的GMC后,亦能轻度刺激GMC增殖。结论:大鼠Thy-1N肾小球病变存在早期增殖和继发增生的病理改变,而GMC的早期增殖可能与sublytic C5b-9作用有关。 展开更多
关键词 THY-1肾炎 肾小球系膜细胞 增殖 亚溶解型C5b-9复合物
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C5b-9在坏死性肌病肌肉组织血管中的表达及意义 被引量：4
5
作者 丛璐 蒲传强 +3 位作者 毛燕玲 刘洁晓 鲁向辉 汪茜 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期714-717,共4页
目的研究C5b-9在坏死性肌病肌肉小血管中的表达以探讨其发病机制。方法采用酶组织化学和免疫组织化学方法检测坏死性肌病患者肌肉组织肌纤维和血管的MHC-1和C5b-9表达。结果本组患者肌肉组织出现灶性或散在分布的肌纤维坏死,间有吞噬现... 目的研究C5b-9在坏死性肌病肌肉小血管中的表达以探讨其发病机制。方法采用酶组织化学和免疫组织化学方法检测坏死性肌病患者肌肉组织肌纤维和血管的MHC-1和C5b-9表达。结果本组患者肌肉组织出现灶性或散在分布的肌纤维坏死,间有吞噬现象,肌内、外衣和血管周围未见炎性细胞浸润,局部小血管数量减少,个别小血管管壁增厚。MHC-I免疫组化染色显示坏死的肌纤维、肌纤维间隙及血管均呈阴性。C5b-9免疫组化染色显示肌肉组织的小动脉与小静脉的血管壁,内皮细胞及平滑肌均出现明显的强阳性表达,同时相关的坏变和萎缩肌纤维也出现明显的表达。结论 C5b-9可能参与血管启动的坏死性肌病的发病机制。 展开更多
关键词 坏死性肌病 C5b-9 肌纤维 内皮细胞
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补体C5b-9抗血清对抗胸腺细胞血清性肾炎大鼠肾组织一氧化氮合成及其病变的影响 被引量：6
6
作者 王迎伟 何球藻 +2 位作者 秦慧莲 高丰光 汤仁仙 《中国病理生理杂志》 CSCD 北大核心 2000年第9期805-808,共4页
目的 :探讨抗鼠补体C5b - 9复合物抗血清对系膜增生性肾炎大鼠肾组织合成一氧化氮 (NO)及其病变的作用。方法 :复制大鼠系膜增生性肾小球肾炎即抗胸腺细胞血清性肾炎 (ATSN)模型 ,用抗大鼠C5b - 9复合物抗血清处理 ,观察其对ATSN大鼠NO... 目的 :探讨抗鼠补体C5b - 9复合物抗血清对系膜增生性肾炎大鼠肾组织合成一氧化氮 (NO)及其病变的作用。方法 :复制大鼠系膜增生性肾小球肾炎即抗胸腺细胞血清性肾炎 (ATSN)模型 ,用抗大鼠C5b - 9复合物抗血清处理 ,观察其对ATSN大鼠NO相关指标及其病变的影响。结果 :抗鼠C5b - 9复合物抗血清既能减少ATSN大鼠肾组织诱生性NO合酶 (iNOS)mRNA的表达和大鼠尿液中硝酸盐 /亚硝酸盐 (NO-3 /NO-2 )排泄量 ,还能减低大鼠肾组织病变的程度。NOS抑制剂L -NAME也可降低尿NO-3 /NO-3 排泄量 ,同时减轻肾组织病变程度。结论 :抗鼠C5b - 展开更多
关键词 肾小球肾炎 一氧化氮 大鼠 补体C5b-9
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亚溶解剂量的补体C5b-9复合物诱导肾小球系膜细胞增生及其NF-κB活化的作用 被引量：6
7
作者 佟建霞 王迎伟 +5 位作者 邱文 高玲娟 徐娟 吴宜琴 徐静华 徐闻欢 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期230-233,241,F0002,共6页
目的:研究亚溶解剂量补体C5b-9(SC5b-9)复合物刺激大鼠肾小球系膜细胞(GMCs)增生和细胞外基质(ECM)分泌的作用,并探讨NF-κB核转录因子是否介入SC5b-9的促增生效应。方法:体外纯培养大鼠GMCs,并行光镜、电镜及功能鉴定。质控SC5b-9后,将... 目的:研究亚溶解剂量补体C5b-9(SC5b-9)复合物刺激大鼠肾小球系膜细胞(GMCs)增生和细胞外基质(ECM)分泌的作用,并探讨NF-κB核转录因子是否介入SC5b-9的促增生效应。方法:体外纯培养大鼠GMCs,并行光镜、电镜及功能鉴定。质控SC5b-9后,将GMCs分为5组,即SC5b-9刺激组、SC5b-9+PDTC组(吡咯啉烷二甲基硫脲)、ATS组、灭活人血清组及完全营养液组。应用RT-PCR检测40minPCNA和FNmRNA水平;同时应用免疫组化检测18hGMCs增殖细胞核抗原(PCNA)、平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和纤维粘连蛋白(FN)及细胞核内NF-κBp65表达情况。结果:实验40min,SC5b-9刺激组PCNA和FNmRNA表达上调,PDTC处理后表达则明显下降,其余3组PCNA均呈阴性,另3组FN则均有一定基础表达。SC5b-9刺激组,GMCs免疫组化显示:PCNA、α-SMA、FN、NF-κBp65表达增加,PDTC处理后则4者表达明显下调,其余各组,PCNA、α-SMA、NF-κBp65均呈阴性,FN亦有一定的基础表达。结论:SC5b-9可能通过激活NF-κB促进GMCs增生和ECM分泌。 展开更多
关键词 亚溶解剂量补体C5b-9 肾小球系膜细胞 增殖细胞核抗原 平滑肌肌动蛋白 纤维粘连蛋白 核因子-κB
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抗胸腺细胞血清性肾炎模型大鼠肾小球中C5b-9的沉积及NO、TNFα含量分析 被引量：5
8
作者 王迎伟 徐静华 +1 位作者 汤仁仙 高丰光 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期54-59,共6页
目的 :探讨抗胸腺细胞血清性肾炎 (ATSN)大鼠肾小球内C5b -9复合物的沉积与某些炎症介质和细胞因子如 :一氧化氮 (NO)和肿瘤坏死因子α(TNFα)的含量情况。方法 :大鼠一次性静脉注射抗胸腺细胞抗血清(ATS)建立ATSN模型 ,定期对ATSN大鼠... 目的 :探讨抗胸腺细胞血清性肾炎 (ATSN)大鼠肾小球内C5b -9复合物的沉积与某些炎症介质和细胞因子如 :一氧化氮 (NO)和肿瘤坏死因子α(TNFα)的含量情况。方法 :大鼠一次性静脉注射抗胸腺细胞抗血清(ATS)建立ATSN模型 ,定期对ATSN大鼠肾小球中的补体C5b -9复合物进行免疫组化染色定位、显微图像扫描半定量分析 ;并对有C5b -9包绕的肾小球系膜细胞 (MC)进行计数。测定ATSN大鼠肾中诱生型NO合酶 (iNOS)mRNA的表达、尿液中NO的代谢产物 (NO-2 /NO-3 )及TNFα的排泄量。结果 :ATSN模型大鼠肾小球MC先溶解坏死后继发增生 ,病变早期 (溶解时相 )补体C5b -9复合物主要定位于肾小球系膜区及MC表面 ;随着病程的进展 ,被C5b -9包绕的MC逐渐减少 ,病程初期ATSN大鼠肾小球MC有明显的iNOSmRNA表达 ,尿液中NO-2 /NO-3 和TNFα的排泄量也明显增加。在ATSN病变的增生阶段 (一般 7d后 ) ,上述指标的变化逐渐趋缓。结论 :ATSN模型大鼠肾小球中MC逐渐溶解与补体C5b 展开更多
关键词 抗胸腺细胞血清性肾炎 补体膜攻击复合物 一氧化氮 肿瘤坏死因子Α 大鼠 肾小球 C5b-9 NO TNFΑ
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亚溶量C5b-9可诱导足细胞的保护性自噬应答 被引量：5
9
作者 吕倩影 周建华 +2 位作者 杨凤杰 蒲金赟 张瑜 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期59-63,共5页
目的:通过亚溶量补体C5b-9(s C5b-9)攻击足细胞的离体模型,探讨自噬在免疫介导足细胞损伤过程中的作用。方法:建立s C5b-9攻击足细胞体外模型,采用单丹磺酰尸胺(MDC)染色标记自噬泡,瑞氏-吉姆萨染色光镜下观察细胞形态,免疫荧光检测neph... 目的:通过亚溶量补体C5b-9(s C5b-9)攻击足细胞的离体模型,探讨自噬在免疫介导足细胞损伤过程中的作用。方法:建立s C5b-9攻击足细胞体外模型,采用单丹磺酰尸胺(MDC)染色标记自噬泡,瑞氏-吉姆萨染色光镜下观察细胞形态,免疫荧光检测nephrin的表达及分布,Western blotting检测LC3-II和LC3-I的表达,MTT法检测细胞存活率,Annexin V/PI双染法流式细胞术检测细胞凋亡。结果:成功建立s C5b-9攻击足细胞体外模型,将细胞溶破率≤5%定义为亚溶量攻击。MDC染色和自噬标志LC3-II的检测均显示造模后48 h足细胞的自噬活动明显活跃。抑制自噬可明显加重s C5b-9所致的足细胞形态异常。s C5b-9攻击可使足细胞nephrin的表达量明显减少,并且异常分布,而抑制自噬可进一步下调nephrin的表达。抑制自噬可促进s C5b-9所诱导的足细胞凋亡。结论:s C5b-9可直接诱导足细胞自噬活动增强,而自噬则在s C5b-9介导的足细胞损伤过程中发挥着保护作用。 展开更多
关键词 自噬 足细胞 亚溶量C5b-9
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4种肾炎模型大鼠尿液中补体C5b-9复合物排泄的比较研究 被引量：2
10
作者 王迎伟 简洁 +1 位作者 汤仁仙 黄水平 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期92-96,I003,共6页
目的 :探讨不同类型的免疫复合物肾炎大鼠尿液中补体C5b - 9复合物检出的意义。方法 :复制大鼠被动型Heymann肾炎 (PHN)、抗胸腺细胞血清性肾炎 (ATSN)、抗肾小球基底膜性肾炎(AGBMN)及慢性血清病肾炎 (CSDN) 4种动物模型。用双抗体夹心... 目的 :探讨不同类型的免疫复合物肾炎大鼠尿液中补体C5b - 9复合物检出的意义。方法 :复制大鼠被动型Heymann肾炎 (PHN)、抗胸腺细胞血清性肾炎 (ATSN)、抗肾小球基底膜性肾炎(AGBMN)及慢性血清病肾炎 (CSDN) 4种动物模型。用双抗体夹心ELISA法定期检测各种肾炎大鼠血液及尿液中补体C5b - 9的含量 ,同时观察大鼠肾小球中C5b - 9的沉积情况。结果 :4种肾炎模型鼠血浆C5b - 9复合物均见上升 ,肾小球内也有C5b - 9复合物的沉积 ,但尿液中C5b - 9含量升高仅见于罹患PHN的大鼠。此外 ,尿液中C5b - 9复合物的升高先于PHN大鼠尿蛋白的升高。结论 :尿液中C5b - 展开更多
关键词 肾炎 大鼠 尿液 补体 C5b-9复合物 比较研究
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人脐静脉内皮细胞的补体攻膜复合物C5b-9模型建立 被引量：2
11
作者 李阳 谢予朋 +3 位作者 闫荟 孙晓迪 石亚飞 孙世光 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期1317-1320,共4页
目的建立人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的补体攻膜复合物C5b-9模型并确定其亚溶破剂量。方法通过体外培养HUVEC,在其表面组装攻膜复合物C5b-9,激光共聚焦检测其组装情况;增加补体浓度,通过激光共聚焦定性观察细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)活... 目的建立人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的补体攻膜复合物C5b-9模型并确定其亚溶破剂量。方法通过体外培养HUVEC,在其表面组装攻膜复合物C5b-9,激光共聚焦检测其组装情况;增加补体浓度,通过激光共聚焦定性观察细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)活性定量检测,确定其亚溶破剂量。结果激光共聚焦结果显示C5b-9成功组装于HUVEC表面;当C5b6的浓度达到1.6 mg·L-1时,LDH的分泌量骤增,激光共聚焦显示该剂量下部分细胞胞膜破裂。结论成功建立人脐静脉内皮细胞的补体攻膜复合物C5b-9模型,为研究动脉粥样硬化药物防治奠定基础。 展开更多
关键词 动脉粥样硬化 人脐静脉内皮细胞 攻膜复合物 C5b-9 亚溶破剂量 激光共聚焦显微技术 乳酸脱氢酶
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C5b-9C_3免疫球蛋白在瘢痕疙瘩和正常瘢痕组织中的沉积 被引量：2
12
作者 刘肃 郭卫东 吴延芳 《中国皮肤性病学杂志》 CAS 北大核心 2005年第12期722-724,共3页
目的了解瘢痕疙瘩组织局部免疫状态的变化。方法SABC法检测24例瘢痕疙瘩和9例正常瘢痕中C5b-9的沉积,直接免疫荧光法检测14例瘢痕疙瘩和8例正常瘢痕中IgG、IgA、IgM、C3的沉积。结果瘢痕疙瘩组织IgA和C5b-9的沉积均显著高于正常瘢痕组... 目的了解瘢痕疙瘩组织局部免疫状态的变化。方法SABC法检测24例瘢痕疙瘩和9例正常瘢痕中C5b-9的沉积,直接免疫荧光法检测14例瘢痕疙瘩和8例正常瘢痕中IgG、IgA、IgM、C3的沉积。结果瘢痕疙瘩组织IgA和C5b-9的沉积均显著高于正常瘢痕组织。结论瘢痕疙瘩组织局部存在异常的免疫反应,该反应强于正常瘢痕愈合过程中的生理反应,故推测免疫因素在瘢痕疙瘩发病中具有重要作用。 展开更多
关键词 瘢痕疙瘩 正常瘢痕C5b-9 C3 免疫球蛋白
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YAP在特发性膜性肾病中的表达及其对C5b-9诱导足细胞损伤的作用 被引量：5
13
作者 史添立 罗贞 焦石 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2022年第3期1-8,共8页
目的 在特发性膜性肾病(IMN)中探究转录共激活因子Yes相关蛋白(YAP)的表达及其在膜攻击复合物C5b-9诱导足细胞损伤的作用。方法 免疫组织化学染色检测YAP蛋白在IMN患者肾组织及正常对照肾组织中的表达;选用亚溶解剂量的膜攻击复合物C5b... 目的 在特发性膜性肾病(IMN)中探究转录共激活因子Yes相关蛋白(YAP)的表达及其在膜攻击复合物C5b-9诱导足细胞损伤的作用。方法 免疫组织化学染色检测YAP蛋白在IMN患者肾组织及正常对照肾组织中的表达;选用亚溶解剂量的膜攻击复合物C5b-9(以下简称C5b-9)在体外建立人足细胞系MPC5的损伤模型,Western blot检测随C5b-9刺激时间的延长,足细胞中YAP蛋白的表达变化;使用siRNA瞬时转染技术,靶向沉默足细胞中YAP基因表达,qRT-PCR及Western blot检测转染效率;按足细胞处理的不同将其分为4组,正常培养的Control组,经C5b-9处理的C5b-9组,C5b-9处理转染si-NC或si-YAP的的C5b-9+si-NC组与C5b-9+si-YAP组;应用CCK-8实验检测上述各组细胞的增殖活力,Anenxin V-FITC双染色联合流式细胞数检测各组细胞的凋亡发生率,DCFH-DA法检测细胞中活性氧(ROS)含量,Western blot检测各组细胞中足细胞标志性蛋白Nephrin、WT1与紧密连接蛋白ZO-1、表型转换蛋白Snail及纤连蛋白Fibronectin的蛋白表达水平。结果 与正常对照肾组织相比,YAP在IMN中的表达显著增加(P<0.05);随C5b-9刺激时间的延长,足细胞中YAP蛋白的表达水平逐渐升高;转染si-YAP后,足细胞中YAP mRNA及蛋白水平均显著降低(P<0.05);与Control组相比,C5b-9组、C5b-9+si-NC组及C5b-9+si-YAP组细胞的增殖活力均显著降低(P<0.05),而凋亡率及ROS含量均显著增加(P<0.05);但与C5b-9组或C5b-9+si-NC组相比,C5b-9+si-YAP组细胞增殖活力显著增加(P<0.05),凋亡率及ROS含量显著减少(P<0.05);Western blot检测各组细胞中相关蛋白的表达结果显示,与Control组相比,C5b-9组、C5b-9+si-NC组及C5b-9+si-YAP组细胞中Nephrin、WT1及ZO-1蛋白表达均显著降低(P<0.05),Snail与Fibronectin蛋白表达均显著增加(P<0.05);而与C5b-9组或C5b-9+si-NC组相比,C5b-9+si-YAP组细胞中Nephrin、WT1及ZO-1蛋白表达显著增加(P<0.05),而Snail与Fibronectin蛋白表达显著减少(P<0.05)。结论 本研究结果表明YAP蛋白在IMN患者肾小球中的表达显著增加,而沉默足细胞中YAP基因表达能够明显改善C5b-9诱导的细胞功能损伤,并抑制其凋亡的发生。 展开更多
关键词 特发性膜性肾病 转录共激活因子Yes相关蛋白 膜攻击复合物C5b-9 足细胞
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补体攻膜复合物C5b-9处理后的树突状细胞对同种异体淋巴细胞的作用 被引量：2
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作者 吴佩泽 华树成 杨雪梅 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期78-81,共4页
目的:研究补体攻膜复合物C5b-9处理后的树突状细胞(DC)对同种异体淋巴细胞的作用。方法:于DC表面组装C5b-9,并用免疫磁珠分离CD4+T、CD8+T细胞,DC/T细胞共培养,流式细胞仪检测T细胞的活化标志,ELISA定量检测细胞因子的释放。结果:免疫... 目的:研究补体攻膜复合物C5b-9处理后的树突状细胞(DC)对同种异体淋巴细胞的作用。方法:于DC表面组装C5b-9,并用免疫磁珠分离CD4+T、CD8+T细胞,DC/T细胞共培养,流式细胞仪检测T细胞的活化标志,ELISA定量检测细胞因子的释放。结果:免疫磁珠成功分离出的高纯度的CD4+T、CD8+T细胞分别与补体攻膜复合物C5b-9处理后的DC混合培养72h后,CD4+T的CD25和CD69的表达率明显上升(P<0.05),分别为26.31%和52.73%;IFN-γ、IL-2分别由混合培养前的126.3ng·L-1和156.7ng·L-1上升为409.2ng·L-1和471.5ng·L-1(P<0.05);IL-10变化不明显,混合培养前后分别为104.3ng·L-1和107.1ng·L-1;CD8+T表达CD25、CD69和分泌细胞因子变化均不明显。结论:C5b-9可以调节DC的功能,进而调节T细胞免疫反应。 展开更多
关键词 C5b-9 树突状细胞 T细胞 免疫排斥 免疫耐受
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RNA干扰沉默p300基因对亚溶解型C5b-9诱导大鼠肾小球系膜细胞凋亡和ATF3乙酰化的影响 被引量：2
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作者 张婧 何风霞 +3 位作者 邱文 赵聃 卢燕来 王迎伟 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2017年第3期275-280,共6页
目的:构建大鼠p300基因短发夹状小干扰RNA(short hairpin RNA,shRNA)真核表达质粒,观察沉默p300基因对亚溶解型(sublytic)C5b-9诱导大鼠肾小球系膜细胞(glomerular messangial cell,GMC)凋亡和激活转录因子3(activating transcription f... 目的:构建大鼠p300基因短发夹状小干扰RNA(short hairpin RNA,shRNA)真核表达质粒,观察沉默p300基因对亚溶解型(sublytic)C5b-9诱导大鼠肾小球系膜细胞(glomerular messangial cell,GMC)凋亡和激活转录因子3(activating transcription factor 3,ATF3)乙酰化水平的影响。方法:用DNA重组技术针对p300基因不同位点设计3个shRNA序列,然后分别克隆到真核表达载体pGCsi-U6/Neo/GFP/shRNA中,经电转染入GMC,再给予sublytic C5b-9刺激。Western blot筛选干涉效果最佳的p300 shRNA,流式细胞术检测GMC凋亡率,免疫沉淀(immunoprecipitation,IP)和Western blot联合检查ATF3乙酰化水平。结果:核酸测序表明p300 shRNA重组质粒构建成功。Western blot显示p300 shRNA-2具有最佳沉默效率。p300 shRNA处理GMC后,由sublytic C5b-9诱导的GMC凋亡率显著下降,同时ATF3乙酰化水平也明显降低。结论:成功构建了大鼠p300 shRNA真核表达质粒,并初步证实了p300能够促进sublytic C5b-9诱导的GMC凋亡,其机制可能与p300乙酰化修饰ATF3有关。 展开更多
关键词 RNA干扰 P300 亚溶解型C5b-9 凋亡 乙酰化
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C5b-9的形成与膜性肾病发病机制的研究进展 被引量：10
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作者 邹德平 曹灵 《中国中西医结合肾病杂志》 2007年第6期365-367,共3页
关键词 C5b-9 病发病机制 膜性肾病 肾脏 抗原抗体复合物 膜攻击复合物 补体活化 补体调节
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血液疾病中血浆Sc_(5b-9)检测的临床意义 被引量：2
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作者 王晓莉 宋小平 +4 位作者 傅明伟 程洪波 汪鸿彬 张胜敏 罗敏智 《临床血液学杂志》 CAS 1999年第6期264-264,共1页
关键词 血液疾病 S蛋白5b-9 血浆 检测
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Sublytic C5b-9诱导肾小球系膜细胞产生的TSP-1和TGF-β1对其合成FN和collagenⅣ的影响 被引量：1
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作者 邱文 车楠 +3 位作者 周建博 李妍 赵聃 王迎伟 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期1543-1549,共7页
目的:探讨亚溶解型(sublytic)C5b-9复合物刺激大鼠肾小球系膜细胞(glomerular mesangial cell,GMC)后,诱生的血小板反应蛋白-1(thrombospondin-1,TSP-1)与转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)对其促进细胞外基质(... 目的:探讨亚溶解型(sublytic)C5b-9复合物刺激大鼠肾小球系膜细胞(glomerular mesangial cell,GMC)后,诱生的血小板反应蛋白-1(thrombospondin-1,TSP-1)与转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)对其促进细胞外基质(ex-tracellular matrix,ECM),如纤维连接蛋白(fibronectin,FN)和Ⅳ型胶原蛋白(collagenⅣ)合成的影响。方法:体外培养大鼠GMC,进行不同分组处理并给予sublytic C5b-9刺激,然后分别检查受刺激的GMC合成TSP-1和TGF-β1因子水平,同时检测GMC分泌FN和collagenⅣ的水平。此外,应用人工合成的TSP-1封闭肽段(GGWSHW)和TGF-β1中和抗体处理培养的大鼠GMC,研究TSP-1和TGF-β1在sublytic C5b-9诱导的GMC分泌上述ECM中的作用及其相互关系。结果:培养的大鼠GMC在sublytic C5b-9刺激后18 h,其FN和collagenⅣ表达水平均明显升高。同时,TSP-1蛋白表达和TGF-β1分泌(包括活化的TGF-β1含量)也显著增多。用TSP-1封闭肽段(GGWSHW)处理大鼠GMC后亦能显著抑制由sublytic C5b-9诱导的TGF-β1活化,并减少FN、collagenⅣ的产生。同样用TGF-β1中和抗体处理GMC后也能明显抑制由sublytic C5b-9导致的FN、collagenⅣ的分泌。结论:体外用sublytic C5b-9刺激大鼠GMC,能诱导其ECM分泌与TSP-1和TGF-β1的合成及活化,而sublytic C5b-9促进GMC分泌ECM的机制可能与其诱导TSP-1合成及活化的TGF-β1存在一定的关系。 展开更多
关键词 sublytic C5b-9 肾小球系膜细胞 血小板反应蛋白-1 转化生长因子-β1 纤维连接蛋白 Ⅳ型胶原蛋白
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补体C5b-9复合物诱导大鼠肾系膜细胞iNOS mRNA表达的实验研究 被引量：1
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作者 王迎伟 何球藻 +2 位作者 秦慧莲 高丰光 汤仁仙 《中国免疫学杂志》 CSCD 北大核心 2000年第5期238-240,共3页
观察人血清补体C5b 9复合物对大鼠肾小球系膜细胞 (MC)表达诱生性一氧化氮合酶 (iNOS)mRNA的影响。方法 :首先提取人血清补体C5b 9复合物 ,然后用人C5b 9复合物刺激培养的大鼠MC ,检测MC在受C5b 9复合物刺激后3、6、2 4和 48h时iNOSmRN... 观察人血清补体C5b 9复合物对大鼠肾小球系膜细胞 (MC)表达诱生性一氧化氮合酶 (iNOS)mRNA的影响。方法 :首先提取人血清补体C5b 9复合物 ,然后用人C5b 9复合物刺激培养的大鼠MC ,检测MC在受C5b 9复合物刺激后3、6、2 4和 48h时iNOSmRNA的表达情况。同时检测其培养上清液中一氧化氮 (NO)代谢产物———硝酸根 (NO3- )和亚硝酸根(NO2- )含量的变化。结果 :用人C5b 9复合物刺激培养大鼠的肾MC能使其表达iNOSmRNA ,培养上清液中NO3- NO2- 含量也明显升高。人C5b 9复合物对MC的刺激作用能部分被相应的抗人C5b 9复合物抗体和RNA合成抑制剂———放线菌素D所抑制。结论 :人补体C5b 9复合物具有刺激大鼠肾MC合成NO的作用。 展开更多
关键词 补体C5b-9复合物 肾小球系膜细胞 INOS mRNA
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补体C5b-9复合物对人视网膜色素上皮细胞TGF-β2表达的影响 被引量：2
20
作者 李文博 陈松 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2008年第11期819-822,共4页
目的观察补体C5b-9复合物对人视网膜色素上皮(RPE)细胞TGF-β2表达的影响。方法采用大鼠血清接触兔红细胞提取补体C5b-9复合物。提纯、鉴定后的补体C5b-9复合物作用于体外培养的人RPE细胞,用半定量RT-PCR法测量TGF-β2表达水平。结果补... 目的观察补体C5b-9复合物对人视网膜色素上皮(RPE)细胞TGF-β2表达的影响。方法采用大鼠血清接触兔红细胞提取补体C5b-9复合物。提纯、鉴定后的补体C5b-9复合物作用于体外培养的人RPE细胞,用半定量RT-PCR法测量TGF-β2表达水平。结果补体C5b-9复合物刺激质量浓度为80μg/mL和40μg/mL时,光学显微镜示REP细胞结构破坏;低于或等于20μg/mL时,光学显微镜未见REP细胞结构明显改变。20μg/mL补体C5b-9复合物作用RPE细胞4h后,TGF-β2mRNA表达水平可提高2倍。结论补体C5b-9复合物对RPE细胞的破坏作用有溶破量和亚溶破量之分,亚溶破量可诱导RPE细胞TGF-β2表达上调。 展开更多
关键词 补体C5b-9复合物 视网膜色素上皮 转化生长因子Β2 脉络膜新生血管
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