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禽致病性大肠埃希菌及其PhoP/Q缺失株对鸡小肠内AvBD6的诱导表达
1
作者 李少参 王惠珂 +5 位作者 祁克宗 张煜 薛挺 涂健 周秀红 刘红梅 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2017年第2期44-48,55,共6页
【目的】分析雏鸡感染禽致病性大肠埃希菌(Avian pathogenic Escherichia coli,APEC)及其PhoP/Q缺失株后β-防御素6(AvBD6)在小肠内的分布和表达规律。【方法】将14日龄雏鸡随机分为对照组、APEC攻毒组和PhoP/Q缺失株攻毒组,其中对照组... 【目的】分析雏鸡感染禽致病性大肠埃希菌(Avian pathogenic Escherichia coli,APEC)及其PhoP/Q缺失株后β-防御素6(AvBD6)在小肠内的分布和表达规律。【方法】将14日龄雏鸡随机分为对照组、APEC攻毒组和PhoP/Q缺失株攻毒组,其中对照组雏鸡腿肌注射生理盐水0.5mL/只,APEC和PhoP/Q缺失株攻毒组雏鸡腿肌分别接种相同剂量1×106 CFU/mL的菌液,分别于攻毒后0,6,12,24,36和48h采集各组鸡小肠样品,用荧光定量PCR(FQPCR)方法对各组织内AvBD6mRNA的表达量进行检测,同时采用免疫组化(IHC)技术对AvBD6蛋白分布进行观察。【结果】FQ-PCR结果显示,感染后24~48h,APEC攻毒组雏鸡十二指肠、空肠、回肠的AvBD6mRNA表达量显著高于对照组(P<0.05),于48h达到峰值且显著高于0h(P<0.05);在同一时间下,PhoP/Q缺失株攻毒组AvBD6mRNA的表达量显著高于APEC攻毒组(P<0.05)。IHC结果显示,AvBD6主要分布于各小肠段的绒毛上皮细胞和肠腺部分。【结论】APEC能够诱导雏鸡肠道内AvBD6的表达,且PhoP/Q可能参与APEC调控AvBD6的抗感染作用。 展开更多
关键词 禽致病性大肠埃希菌 PhoP/Q二元调控系统 雏鸡小肠 β-防御素6
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雏鸡感染鸡白痢沙门菌后禽β-防御素6和鸡Toll样受体15在肠道转录与定位研究 被引量：4
2
作者 王燕 周秀红 +3 位作者 祁克宗 涂健 刘红梅 潘孝成 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期1711-1717,共7页
旨在分析雏鸡感染鸡白痢沙门菌后,禽β-防御素6(AvBD6)和鸡Toll样受体15(ChTLR15)在小肠内的分布及表达规律。本研究用鸡白痢沙门菌感染14日龄的雏鸡,感染后不同时间点采取雏鸡的小肠组织(十二指肠、空肠和回肠),利用实时荧光定量RT-PC... 旨在分析雏鸡感染鸡白痢沙门菌后,禽β-防御素6(AvBD6)和鸡Toll样受体15(ChTLR15)在小肠内的分布及表达规律。本研究用鸡白痢沙门菌感染14日龄的雏鸡,感染后不同时间点采取雏鸡的小肠组织(十二指肠、空肠和回肠),利用实时荧光定量RT-PCR和原位杂交方法,检测AvBD6和ChTLR15在小肠组织内的定位和mRNA的转录水平变化。结果显示,雏鸡感染鸡白痢沙门菌后,AvBD6和ChTLR15在各肠段组织中均有转录,其中在十二指肠相对转录量最高,在0~24h内呈上升趋势,24~48h相对转录量呈下降趋势,在24h的转录量极显著高于0和6h(P<0.01),且AvBD6在24h的转录量显著高于12h(P<0.05)。AvBD6和ChTLR15mRNA在小肠内均有不同程度的分布,其主要分布在肠绒毛的中央乳糜管中,在十二指肠中荧光信号最强。结果表明,雏鸡感染鸡白痢沙门菌后,AvBD6和ChTLR15mRNA在鸡小肠中的分布和表达具有一定的规律性,并参与肠道免疫调节功能。 展开更多
关键词 鸡白痢沙门菌 荧光定量RT-PCR 原位杂交 禽β-防御素6 鸡Toll样受体15
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检测禽β-防御素6夹心ELISA法的建立及应用
3
作者 梁瑞 梁盈 +2 位作者 祁克宗 王爱荣 彭开松 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期176-180,共5页
为定量检测禽β-防御素6（avian beta-defensin6,AvBD6）,建立了AvBD6的双抗体夹心ELISA法,并应用于鸡血清中AvBD6浓度的检测。研究结果显示,包被抗体（鼠抗AvBD6 B细胞线性表位的多克隆抗体）、检测抗体（兔抗AvBD6氮端的多克隆抗体）... 为定量检测禽β-防御素6（avian beta-defensin6,AvBD6）,建立了AvBD6的双抗体夹心ELISA法,并应用于鸡血清中AvBD6浓度的检测。研究结果显示,包被抗体（鼠抗AvBD6 B细胞线性表位的多克隆抗体）、检测抗体（兔抗AvBD6氮端的多克隆抗体）和辣根过氧化酶（HRP）标记羊抗兔IgG的最佳工作稀释倍数分别为2 500、2 000和10 000,AvBD6在20-320 ng/mL的线性范围内,标准曲线回归方程为：y=12 024x-2 583,（R^2=0.984 2）。对不同状态下鸡血清AvBD6浓度检测结果显示：ACTH（25 IU/kgBW）注射1 d后,对照组AvBD6浓度高于ACTH组;连续注射ACTH 5 d,对照组AvBD6浓度低于ACTH组,但二者间差异均不显著（P〉0.05）。大肠杆菌感染后24 h和沙门氏菌感染后3 h、24 h,感染组AvBD6浓度均显著地高于对照组（P〈0.05）,表明AvBD6参与对大肠杆菌和沙门氏菌系统感染的抵抗。 展开更多
关键词 avbd6 夹心ELISA ACTH 大肠杆菌 沙门氏菌
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