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补阳还五汤治疗糖尿病周围神经病变疗效观察及对ATG13甲基化水平、自噬相关蛋白表达的影响
1
作者 潘菲 韩扬 +1 位作者 史佩玉 张灵建 《新中医》 2025年第14期20-24,共5页
目的:观察补阳还五汤治疗糖尿病周围神经病变(DPN)的临床疗效及对血清ATG13甲基化水平和外周血自噬相关蛋白(LC3-Ⅱ、Beclin-1)表达的影响。方法:收集2022年6月—2024年5月杭州市临安区中医院内分泌科门诊或住院的DPN患者96例,按随机数... 目的:观察补阳还五汤治疗糖尿病周围神经病变(DPN)的临床疗效及对血清ATG13甲基化水平和外周血自噬相关蛋白(LC3-Ⅱ、Beclin-1)表达的影响。方法:收集2022年6月—2024年5月杭州市临安区中医院内分泌科门诊或住院的DPN患者96例,按随机数字表法分为试验组和对照组各48例。对照组采用常规治疗,试验组在此基础上加用补阳还五汤治疗。比较2组临床疗效,以及治疗前后中医证候评分、运动神经传导速度(MCV)、感觉神经传导速度(SCV)、血清ATG13甲基化水平及LC3-Ⅱ、Beclin-1蛋白表达水平。结果:治疗后,试验组总有效率为93.75%(45/48),对照组为75.00%(36/48),2组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗后,2组中医证候评分均较治疗前降低(P<0.05),且试验组评分低于对照组(P<0.05)。治疗后,2组MCV、SCV水平均较治疗前升高(P<0.05),且试验组MCV、SCV水平高于对照组(P<0.05)。治疗后,2组ATG13DNA甲基化水平较治疗前降低,且试验组低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);2组Beclin-1、LC3-Ⅱ蛋白表达水平均较治疗前升高,且试验组高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:补阳还五汤联合常规西医治疗DPN能提高临床疗效,改善患者症状体征,有助于受损神经的修复,其机制可能与抑制ATG13甲基化,促进自噬有关。 展开更多
关键词 糖尿病周围神经病变 补阳还五汤 运动神经传导速度 感觉神经传导速度 atg13DNA甲基化 自噬蛋白
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丹红注射液对动脉粥样硬化小鼠主动脉自噬基因Atg13启动子区甲基化及PI3K/Akt/mTORC1信号通路的影响 被引量：12
2
作者 周明学 李思耐 +2 位作者 刘卫红 尚菊菊 刘红旭 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2019年第8期46-50,共5页
目的观察丹红注射液对动脉粥样硬化(AS)小鼠自噬基因Atg13启动子区甲基化及自噬信号通路PI3K/Akt/mTORC1的影响,探讨其可能的作用机制。方法40只8周龄雄性ApoE-/-小鼠高脂饲料喂养6周,随机分为模型组、阳性对照组和丹红注射液低、高剂量... 目的观察丹红注射液对动脉粥样硬化(AS)小鼠自噬基因Atg13启动子区甲基化及自噬信号通路PI3K/Akt/mTORC1的影响,探讨其可能的作用机制。方法40只8周龄雄性ApoE-/-小鼠高脂饲料喂养6周,随机分为模型组、阳性对照组和丹红注射液低、高剂量组,每组10只,各给药组给予相应药物干预。6周后RT-PCR检测AS小鼠主动脉自噬基因Atg13、Atg3和Atg4a的mRNA表达;Westernblot检测AS小鼠主动脉Beclin1、LC3Ⅱ/Ⅰ、PI3K、Akt、p-Akt、mTORC1和p-mTORC1的蛋白表达;采用亚硫酸氢盐测序法检测AS小鼠主动脉自噬基因Atg13启动子区甲基化水平。结果与模型组比较,丹红注射液高、低剂量组小鼠主动脉Beclin1蛋白表达明显升高,丹红注射液低剂量组小鼠主动脉LC3Ⅱ/Ⅰ表达明显升高(P<0.01),丹红注射液高、低剂量组小鼠主动脉Atg13、Atg3和Atg4a mRNA表达显著升高(P<0.01),丹红注射液高、低剂量组小鼠主动脉自噬基因Atg13启动子区甲基化水平明显降低(P<0.01),丹红注射液高、低剂量组小鼠主动脉p-Akt蛋白表达明显降低(P<0.01),丹红注射液高剂量组小鼠主动脉p-mTORC1蛋白表达明显降低(P<0.01)。结论丹红注射液防治AS的机制可能与降低模型小鼠主动脉Atg13启动子区甲基化水平、抑制PI3K/Akt/mTORC1信号通路和促进细胞自噬有关。 展开更多
关键词 动脉粥样硬化 丹红注射液 自噬 DNA甲基化 atg13 PI3K/Akt/mTORC1信号通路 小鼠
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竹节香附素A通过ULK1/Atg13及ROS途径调控肝癌细胞自噬的作用研究 被引量：4
3
作者 赵利 马向明 +3 位作者 王瑛 吉瑞更 付庆江 曹立瀛 《疑难病杂志》 CAS 2020年第10期999-1004,共6页
目的探讨竹节香附素A通过自噬激活激酶1(ULK1)/自噬相关蛋白13(Atg13)及活性氧(ROS)途径调控肝癌细胞自噬的作用。方法2019年8—9月于开滦总医院实验室进行实验,设肝癌HepG2细胞组、5-氟尿嘧啶组(80 mg/μl)、竹节香附素A低剂量组(100 ... 目的探讨竹节香附素A通过自噬激活激酶1(ULK1)/自噬相关蛋白13(Atg13)及活性氧(ROS)途径调控肝癌细胞自噬的作用。方法2019年8—9月于开滦总医院实验室进行实验,设肝癌HepG2细胞组、5-氟尿嘧啶组(80 mg/μl)、竹节香附素A低剂量组(100 mg/μl)、竹节香附素A高剂量组(200 mg/μl),4组每孔设6个平行样,培养72 h,培养结束后,测定细胞存活率、自噬、凋亡率,检测ULK1、Atg13 mRNA和蛋白水平,2,7-二氯二氢荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)测定ROS水平。结果与肝癌HepG2细胞组比较,5-氟尿嘧啶组及竹节香附素A低、高剂量组HepG2细胞OD值、存活率降低(P<0.01),自噬小体、HepG2细胞凋亡率、ULK1、Atg13 mRNA和蛋白表达、ROS水平升高(P<0.01);与5-氟尿嘧啶组比较,竹节香附素A低、高剂量组细胞OD值、存活率升高(t/P=21.214/0.000、19.547/0.000、18.547/0.000、25.478/0.000),自噬小体、凋亡率、ULK1、Atg13 mRNA和蛋白表达水平、ROS水平降低(t/P=16.325/0.000、22.547/0.000、9.874/0.000、16.589/0.000、13.654/0.000、14.654/0.000、16.589/0.000、21.247/0.000、21.687/0.000、18.324/0.000、18.541/0.000、19.587/0.000、19.654/0.000、24.052/0.000);与竹节香附素A低剂量组比较,竹节香附素A高剂量组细胞OD值、存活率降低(t/P=16.547/0.000、23.547/0.000),自噬小体、凋亡率、ULK1、Atg13 mRNA和蛋白表达水平、ROS水平升高(t/P=15.696/0.000、10.654/0.000、14.697/0.000、18.324/0.000、17.024/0.000、19.634/0.000、18.547/0.000)。结论竹节香附素A能明显抑制肝癌细胞增殖,促进肝癌细胞自噬及凋亡;其机制与竹节香附素A激活ULK1/Atg13及ROS通路有关。 展开更多
关键词 竹节香附素A ULK1/atg13通路 活性氧 肝癌细胞 自噬
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凡纳滨对虾ATG13基因克隆及其功能分析 被引量：1
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作者 黎国建 袁韵昊 +2 位作者 钟键 骆俊良 杨世平 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期1471-1479,共9页
【目的】克隆凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)自噬相关基因13(ATG13),并分析凡纳滨对虾ATG13基因的组织表达特征及其在外源刺激后的表达变化,为探究ATG13基因在凡纳滨对虾抗病原感染过程中的作用机制提供理论依据。【方法】采用PCR扩... 【目的】克隆凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)自噬相关基因13(ATG13),并分析凡纳滨对虾ATG13基因的组织表达特征及其在外源刺激后的表达变化,为探究ATG13基因在凡纳滨对虾抗病原感染过程中的作用机制提供理论依据。【方法】采用PCR扩增凡纳滨对虾ATG13基因,通过ProtParam、Softberry、SMART、InterProScan等在线软件进行生物信息学分析,并以实时荧光定量PCR检测凡纳滨对虾ATG13基因的组织表达特征及其在哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)和Poly(I:C)刺激后的表达变化。【结果】凡纳滨对虾ATG13基因开放阅读框(ORF)为1431 bp,共编码476个氨基酸残基;凡纳滨对虾ATG13蛋白相对分子量为52.4 kD,理论等电点(pI)为5.40,属于疏水性蛋白,不存在信号肽,但其N末端存在1个ATG13功能域(第94~167位氨基酸处)。凡纳滨对虾ATG13氨基酸序列与果蝇(Drosophila melanogaster)ATG13氨基酸序列的相似性高达97%,基于ATG13氨基酸序列相似性构建的系统发育进化树也显示凡纳滨对虾与果蝇的亲缘关系最近。ATG13基因在凡纳滨对虾肝胰腺、肌肉、鳃、中肠、血细胞、心脏、脑和皮肤等组织中均有不同程度的表达,以肝胰腺中的相对表达量最高,其次是肌肉和中肠,在皮肤和血细胞中的相对表达量较低。经哈维氏弧菌和poly(I:C)刺激后,凡纳滨对虾ATG13基因在肝胰腺、中肠和鳃组织中的相对表达量整体上呈先上升后下降的变化趋势,且在刺激后12、24或48 h达最高值,极显著高于对照组(PBS)(P<0.01)。【结论】受哈维氏弧菌或poly(I:C)等外源刺激后,凡纳滨对虾通过上调自噬相关基因ATG13表达以调控机体清除受损的细胞器和维持细胞稳态,即ATG13基因参与凡纳滨对虾抗病原感染的响应过程。 展开更多
关键词 凡纳滨对虾 atg13基因 自噬 哈维氏弧菌 Poly(I:C)
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三阴乳腺癌细胞中Atg13基因的过表达与化疗耐药的研究 被引量：2
5
作者 刘永波 邓丽 +1 位作者 郭怡辉 李艳萍 《肿瘤代谢与营养电子杂志》 2019年第3期310-315,共6页
目的探讨自噬相关基因13(Atg13)与三阴性乳腺癌的化疗耐药之间的关系。方法间歇刺激法构建对阿霉素耐受的MDA-MB-231 TNBC细胞株(命名为MDA-MB-231/Dox),并采用药物敏感实验和细胞凋亡实验(TUNEL染色)对耐药细胞株MDA-MB-231/Dox的耐药... 目的探讨自噬相关基因13(Atg13)与三阴性乳腺癌的化疗耐药之间的关系。方法间歇刺激法构建对阿霉素耐受的MDA-MB-231 TNBC细胞株(命名为MDA-MB-231/Dox),并采用药物敏感实验和细胞凋亡实验(TUNEL染色)对耐药细胞株MDA-MB-231/Dox的耐药表型进行鉴定;蛋白免疫印迹实验检测敏感细胞MDA-MB-231和耐药细胞MDA-MB-231/Dox中的自噬相关蛋白LC3A、LC3B的表达情况,免疫荧光法测定细胞内的LC3B荧光斑点数;脂质体转染重组干扰质粒sh-Atg13至耐药细胞MDA-MB-231/Dox中,并经嘌呤霉素筛选得到稳转细胞(命名为MDA-MB-231/Dox+sh-Atg13),蛋白免疫印迹实验检测稳转细胞MDA-MB-231/Dox+sh-Atg13及空载体对照细胞MDA-MB-231/Dox+control plasmid中的Atg13蛋白表达水平,同时检测细胞内的自噬水平(自噬相关蛋白LC3A、LC3B的表达量及LC3B荧光斑点数)及各组细胞对Dox的药物敏感性。结果成功构建对Dox耐药的TNBC细胞株MDA-MB-231/Dox,并且发现耐药细胞中的基础自噬水平显著高于亲本细胞MDA-MB-231(P<0.05)。重组干扰质粒sh-Atg13抑制Atg13基因表达后,使得耐药细胞MDA-MB-231/Dox中的自噬体标志分子LC3B蛋白表达量显著降低(P<0.05),且耐药细胞对Dox的药物敏感性增加(IC50值显著降低,P<0.05)。结论在TNBC细胞MDA-MB-231中,Atg13参与了细胞对Dox获得性耐药的产生。 展开更多
关键词 三阴性乳腺癌 自噬 atg13 化疗耐药
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牛源ATG13的克隆表达及功能分析 被引量：1
6
作者 王悦萦 李方琳 +2 位作者 粟雨芯 李凌浩 马忠仁 《甘肃畜牧兽医》 2019年第12期33-36,共4页
细胞自噬是细胞的一种自我保护机制。本研究选取牛源autophagy related gene 13(ATG13)为研究对象,通过分子生物学方法,对ATG13蛋白进行了鉴定与分析。原核表达及Westenblot鉴定发现,ATG13基因编码的蛋白大小为53k D左右。研究结果为研... 细胞自噬是细胞的一种自我保护机制。本研究选取牛源autophagy related gene 13(ATG13)为研究对象,通过分子生物学方法,对ATG13蛋白进行了鉴定与分析。原核表达及Westenblot鉴定发现,ATG13基因编码的蛋白大小为53k D左右。研究结果为研究牛源ATG13蛋白的生理功能及调控机制积累了前期实验数据,同时为生物医学与生物材料学领域中进一步开发利用牛源ATG13蛋白奠定了基础。 展开更多
关键词 atg13蛋白 克隆表达 重组蛋白 细胞自噬
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罗氟司特通过mTOR/ULK1/Atg13通路改善支气管哮喘小鼠气道炎症反应的研究 被引量：1
7
作者 沈文婷 秦建品 许诣 《实用临床医药杂志》 CAS 2022年第13期18-25,共8页
目的探讨罗氟司特对哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)/自噬激活激酶1(ULK1)/自噬相关蛋白13(Atg13)通路的调控作用,以及对支气管哮喘(BA)小鼠气道炎症反应的影响。方法将60只小鼠随机分为正常对照组、模型组、罗氟司特组(1.0 mg/kg)、自噬... 目的探讨罗氟司特对哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)/自噬激活激酶1(ULK1)/自噬相关蛋白13(Atg13)通路的调控作用,以及对支气管哮喘(BA)小鼠气道炎症反应的影响。方法将60只小鼠随机分为正常对照组、模型组、罗氟司特组(1.0 mg/kg)、自噬抑制剂(3-甲基腺嘌呤,3MA)组(10.0 mg/kg)、自噬激活剂[mTOR抑制剂雷帕霉素,1.0 mg/kg]组,罗氟司特+雷帕霉素组(1.0 mg/kg+1.0 mg/kg),每组10只。用卵清蛋白致敏法诱导建立小鼠BA模型,各组小鼠均给药4周。末次给药结束后,应用动物肺功能仪检测小鼠肺功能;取支气管肺泡灌洗液(BALF)检测炎症细胞数目;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测BALF中γ-干扰素(INF-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;苏木精-伊红(HE)及过碘酸-雪夫(PAS)染色检测肺组织结构变化及气道杯状细胞化生情况;透射电镜下观察自噬泡形成情况;TUNEL法检测气道上皮细胞凋亡情况;蛋白质印迹法(Western blot)检测Atg13、磷酸化Atg13(p-Atg13)、mTOR、磷酸化mTOR(p-mTOR)、ULK1特定位点Ser757蛋白(ULK1 Ser757)及其磷酸化蛋白(p-ULKl Ser757)、自噬标记蛋白微管相关蛋白轻链3B(LC3B)、自噬相关蛋白(Beclin1)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、白细胞介素-33(IL-33)、黏液高分泌性标志蛋白(黏蛋白MUC5AC)表达水平。结果与正常对照组相比,模型组小鼠肺功能下降,肺组织炎症细胞聚集及杯状细胞化生症状严重,mTOR/ULK1/Atg13通路磷酸化蛋白表达降低,自噬相关蛋白表达水平、炎症因子水平及凋亡率升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组相比,罗氟司特组及3MA组小鼠气道上皮细胞自噬及凋亡减少,mTOR/ULK1/Atg13通路磷酸化蛋白表达升高,差异有统计学意义(P<0.05)。雷帕霉素可逆转罗氟司特的上述缓解作用(P<0.05)。结论罗氟司特可通过促进mTOR/ULK1/Atg13通路磷酸化活化,阻断自噬,抑制气道炎症及上皮细胞凋亡的发生,进而缓解BA病理症状。 展开更多
关键词 罗氟司特 支气管哮喘 气道炎症 雷帕霉素 mTOR/ULK1/atg13通路
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