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题名拟南芥AtYbeY蛋白的原核表达及多克隆抗体制备
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作者
陈嘉伟
徐小峰
章晨晨
刘金文
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机构
温州大学生命与环境科学学院
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出处
《安徽农业科学》
2026年第6期89-95,共7页
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基金
浙江省自然科学基金项目(LY20C160010)。
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文摘
AtYbeY是拟南芥(Arabidopsis thaliana)含有PF0054和HAD的双结构域蛋白,行使内切核糖核酸酶功能,参与叶绿体rRNA加工和成熟,在70S核糖体的组装和核糖体的质量控制方面起到重要作用。基于TAIR公布的AtYbeY基因序列,同源克隆了PF0054结构域和HAD结构域的基因片段,利用双酶切法成功构建了pET32a-UPF0054和pET32a-HAD原核表达载体,成功表达了2个重组蛋白,经Ni 2+亲和层析法纯化重组蛋白,SDS-PAGE结果显示,目标蛋白分子量与预期值一致,纯化的目标蛋白满足免疫抗原要求。Western blot检测结果表明,制备的AtYbeY-UPF0054与AtYbeY-HAD 2个多克隆抗体可以与拟南芥和玉米(Zea mays)叶片中的YbeY抗原蛋白具有良好的特异性免疫反应,制备的2个抗体具有较好的特异性和保守性。该研究将为拟南芥AtYbeY蛋白功能的解析和不同结构域的进化系统分析奠定基础。
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关键词
拟南芥
atybey
原核表达
多克隆抗体
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Keywords
Arabidopsis
atybey
Prokaryotic expression
Polyclonal antibody
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分类号
S184
[农业科学—农业基础科学]
Q943.2
[生物学—植物学]
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