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Enzyme-digested Colla Corii Asini(E’jiao) prevents hydrogen peroxide-induced cell death and accelerates amyloid beta clearance in neuronal-like PC12 cells 被引量:11
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作者 Li Xiao Feng Liao +4 位作者 Ryoji Ide Tetsuro Horie Yumei Fan Chikako Saiki Nobuhiko Miwa 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2020年第12期2270-2277,共8页
As an aging-associated degenerative disease,Alzheimer’s disease is characterized by the deposition of amyloid beta(Aβ),oxidative stress,inflammation,dysfunction and loss of cholinergic neurons.Colla Corii Asini(CCA)... As an aging-associated degenerative disease,Alzheimer’s disease is characterized by the deposition of amyloid beta(Aβ),oxidative stress,inflammation,dysfunction and loss of cholinergic neurons.Colla Corii Asini(CCA)is a traditional Chinese medicine which has been used for feebleness-related diseases and anti-aging.CCA might delay aging-induced degenerative changes in neurons.In the present study,we evaluated antioxidant activity,cytoprotective effects,and Aβremovability of enzyme-digested Colla Corii Asini(CCAD).Oxygen radical absorbance capacity(ORAC)activity assay showed that,as compared to gelatins from the skin of porcine,bovine and cold water fish,CCA exhibited the highest ORAC activity.The ORAC activity of CCA and CCAD was increased gradually by the length of time in storage.Ultrastructure analysis by scanning electron microscopy showed that among CCA manufactured in 2008,2013,2017 and gelatin from cold water fish skin,CCA manufactured in 2008 presented the smoothest surface structure.We further tested the protective effects of CCAD(manufactured in 2008)and enzyme-digested gelatin from cold water fish skin(FGD)on hydrogen peroxide(H2O2)-induced cell death in nerve growth factor-differentiated neuronal-like PC12 cells.Presto blue assay showed that both FGD and CCAD at 0.5 mg/m L increased cell viability in H2O2-treated neuronal-like PC12 cells.The protection of CCAD was significantly superior to that of FGD.Acetylcholinesterase(Ach E)assay showed that both FGD and CCAD inhibited Ach E activity in nerve growth factor-differentiated neuronal-like PC12 cells to 89.1%and 74.5%of that in non-treated cells,respectively.The data suggest that CCAD might be able to increase the neurotransmitter acetylcholine.Although CCAD inhibited Ach E activity in neuronal-like PC12 cells,CCAD prevented H2O2-induced abnormal deterioration of Ach E.ELISA and neprilysin activity assay results indicated that CCAD reduced amyloid beta accumulation and increased neprilysin activity in Aβ1–42-treated neuronal-like PC12 cells,suggesting that CCAD can enhance Aβclearance.Our results suggest that CCA might be useful for preventing and treating Alzheimer’s disease. 展开更多
关键词 acetylcholinesterase activity Alzheimer’s disease amyloid beta clearance antioxidant Colla Corii asini collagen NEUROPROTECTION PC12 cells
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Characterization of Aroma-Active Components and Antioxidant Activity Analysis of E-jiao(Colla CoriiAsini)from Different Geographical Origins 被引量:11
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作者 Shan Zhang Lu Xu +3 位作者 Yang-Xi Liu Hai-Yan Fu Zuo-Bing Xiao Yuan-Bin She 《Natural Products and Bioprospecting》 CAS 2018年第2期71-82,共12页
E-jiao(Colla Corii Asini,CCA)has been widely used as a healthy food and Chinese medicine.Although authentic CCA is characterized by its typical sweet and neutral fragrance,its aroma components have been rarely investi... E-jiao(Colla Corii Asini,CCA)has been widely used as a healthy food and Chinese medicine.Although authentic CCA is characterized by its typical sweet and neutral fragrance,its aroma components have been rarely investigated.This work investigated the aroma-active components and antioxidant activity of 19 CCAs from different geographical origins.CCA extracts obtained by simultaneous distillation and extraction were analyzed by gas chromatography-mass spectrometry(GC-MS),gas chromatography-olfactometry(GC-O)and sensory analysis.The antioxidant activity of CCAs was determined by ABTS and DPPH assays.A total of 65 volatile compounds were identified and quantified by GC-MS and 23 aroma-active compounds were identified by GC-O and aroma extract dilution analysis.The most powerful aroma-active compounds were identified based on the flavor dilution factor and their contents were compared among the 19 CCAs.Principal component analysis of the 23 aroma-active components showed 3 significant clusters.Canonical correlation analysis between antioxidant assays and the 23 aroma-active compounds indicates strong correlation(r=0.9776,p=0.0281).Analysis of aroma-active components shows potential for quality evaluation and discrimination of CCAs from different geographical origins. 展开更多
关键词 Colla Corii asini Aroma-active compounds Antioxidant activity CHEMOMETRICS
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基于UHPLC特征图谱结合化学计量学及游离氨基酸含量测定的阿胶质量评价研究
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作者 张雄 杨帅 +6 位作者 袁红飞 迟明艳 李月婷 王雨茜 魏茂陈 黄勇 郑林 《中草药》 北大核心 2025年第10期3668-3676,共9页
目的建立阿胶UHPLC特征图谱及游离氨基酸含量测定方法,并结合指纹图谱相似度评价、化学计量学对不同批次的阿胶进行质量评价。方法采用Waters BEH C_(18)(100 mm×2.1 mm,1.7μm)柱,以0.1%甲酸水(A)-乙腈(B)为流动相,梯度洗脱,体积... 目的建立阿胶UHPLC特征图谱及游离氨基酸含量测定方法,并结合指纹图谱相似度评价、化学计量学对不同批次的阿胶进行质量评价。方法采用Waters BEH C_(18)(100 mm×2.1 mm,1.7μm)柱,以0.1%甲酸水(A)-乙腈(B)为流动相,梯度洗脱,体积流量为0.3 mL/min,检测波长254 nm,柱温40℃,进样量2μL。对14批阿胶进行特征图谱建立,确定共有峰并进行相似度评价;基于特征图谱共有峰面积测定结果,结合化学计量学手段对14批阿胶进行质量评价;并对甘氨酸(Gly)、L-脯氨酸(Pro)、L-丙氨酸(Ala)、L-甲硫氨酸(Met)、L-缬氨酸(Val)、L-亮氨酸(Leu)、L-苯丙氨酸(Phe)进行含量测定。结果指纹图谱相似度评价结果表明,14批阿胶样品的相似度均≥0.927,说明各批次之间相似度良好,质量较稳定,共标定了9个共有峰,并指认了Gly、Pro、Ala、Met、Val、Leu、Phe 7个共有峰;化学计量学结果将14批阿胶划分为3类并筛选出导致不同批次间差异的差异性标志物为Met、Leu和Gly;Gly、Pro、Ala、Met、Val、Leu、Phe 7个成分的质量分数分别在319.8~1227.27μg/g、100.85~352.44μg/g、113.92~531.06μg/g、50.57~182.8μg/g、47.5~116.53μg/g、48.64~182.37μg/g、45.65~124.69μg/g。结论建立的方法快捷,准确可靠,可为阿胶质量控制进一步提升提供实验参考。 展开更多
关键词 阿胶 UHPLC 指纹图谱 含量测定 化学计量学 质量评价
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妊娠合并地中海贫血中医证型及中药用药规律的数据挖掘 被引量:1
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作者 苏丽珊 李艳芳 《广州中医药大学学报》 2025年第3期782-788,共7页
【目的】采用数据挖掘方法回顾性分析妊娠合并地中海贫血(简称“地贫”)的中医证型及中药用药规律。【方法】收集2022年2月至2024年2月期间广州中医药大学第一附属医院门诊收治的、采用中药复方治疗且有效的妊娠合并地中海贫血患者的病... 【目的】采用数据挖掘方法回顾性分析妊娠合并地中海贫血(简称“地贫”)的中医证型及中药用药规律。【方法】收集2022年2月至2024年2月期间广州中医药大学第一附属医院门诊收治的、采用中药复方治疗且有效的妊娠合并地中海贫血患者的病案资料,运用频次分析、关联规则分析、聚类分析等数据挖掘的方法进行中医证型及中药用药规律的分析。【结果】中医证型分析结果显示,地贫孕妇多被辨证为气虚证。本研究中共纳入处方64首,涉及中药51味,频次在35次以上的高频中药为白术、党参、茯苓、黄芪、山药、阿胶、炙甘草。所用药物的性味以甘平为主,归经以归脾经、肺经为主,功效以安胎为主。关联规则分析显示,“党参-白术”“茯苓-党参,白术”“黄芪-茯苓,党参,白术”为核心药物组合。聚类分析共得到5组聚类药物。【结论】地贫孕妇以气虚证多见。中药治疗妊娠合并地中海贫血遵循“气血同补,心脾同治,补而不滞”的原则,以平性甘味药为主,处方通常在八珍汤或归脾汤的补益基础上,根据虚热、水湿、血瘀以及风寒湿热等内外之邪兼夹的不同以进行加减,从而保证母体与胎儿的安全。 展开更多
关键词 妊娠合并地中海贫血 中药复方 气虚证 白术 党参 茯苓 黄芪 山药 阿胶 八珍汤 归脾汤 数据挖掘
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Collagen derived species-specific peptides for distinguishing donkey-hide gelatin(Asini Corii Colla) 被引量:6
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作者 Shuo Cai Ke-xuan Zhao +6 位作者 Meng-tong Jiang Shu-ying Han Yun-feng Zheng Xun Liu Ming Zhao Jin-ao Duan Rui Liu 《Chinese Herbal Medicines》 CAS 2021年第2期261-266,共6页
Objective:As an important food therapy product with traditional Chinese medicine(TCM) applications,donkey-hide gelatin(Asini Corii Colla,ACC) has been used for thousands of years.However,till now few effective strateg... Objective:As an important food therapy product with traditional Chinese medicine(TCM) applications,donkey-hide gelatin(Asini Corii Colla,ACC) has been used for thousands of years.However,till now few effective strategy had been proposed to distinguish ACC from other animal hide gelatins,especially closely related horse-and mule-hide gelatins,which was an embarrassment of ACC quality control.Methods:Combined mass spectrometry and bioinformatic methods have been applied to identify and verify two ACC-specific peptides(Pep-1 and Pep-2) capable of distinguishing ACC from other closely related animal gelatins with high selectivity.Results:It confirmed that these two peptides could be not only used for distinguishing ACC from highly homologous horse-hide and mule-hide gelatins as well as other animal hide gelatins.Conclusion:The present study provides a simple method for species-specific peptides discovery,which can be used for assessing the quality of animal gelatin products,and ensure they are authenticable and traceable. 展开更多
关键词 asini Corii Colla Biomarkers COLLAGEN PEPTIDOMICS species-specific peptides
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阿胶和阿胶糕不同极性溶剂提取物抗皮肤衰老功效探究
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作者 李聪 季萌萌 +5 位作者 孟苓凤 马雪莹 张建岭 袁玉娇 于群 范柳萍 《食品与发酵工业》 北大核心 2025年第17期82-92,共11页
阿胶与阿胶糕作为功能食品的开发具有广阔前景。基于功能成分表征、体外抗氧化和细胞实验的角度,评价阿胶和阿胶糕不同提取物抗皮肤衰老的功效。结果表明,体积分数为70%乙醇溶液相比水、正己烷、乙酸乙酯,最有利于阿胶糕中多酚类物质的... 阿胶与阿胶糕作为功能食品的开发具有广阔前景。基于功能成分表征、体外抗氧化和细胞实验的角度,评价阿胶和阿胶糕不同提取物抗皮肤衰老的功效。结果表明,体积分数为70%乙醇溶液相比水、正己烷、乙酸乙酯,最有利于阿胶糕中多酚类物质的溶出。相比阿胶醇提物,阿胶糕醇提物具有更高占比的抗氧化活性氨基酸和更小分子质量的肽段。抗氧化实验表明,阿胶和阿胶糕醇提物相比,其他提取物表现出更强的ABTS阳离子自由基、DPPH自由基、羟自由基以及超氧阴离子自由基清除作用。细胞活力实验表明,25~400μg/mL质量浓度的阿胶和阿胶糕提取物对细胞活力没有毒害作用。利用H_(2)O_(2)诱导氧化应激构建细胞衰老模型,发现200μg/mL阿胶和阿胶糕醇提物作用下,损伤HaCaT细胞内活性氧相比诱导组分别降低(28.41±2.06)%和(41.83±2.81)%,分别达到(84.16±3.21)%和(90.99±3.14)%的细胞存活率,表现出对损伤细胞的保护作用。该研究结果为阿胶和阿胶糕应用于抗细胞衰老的研究提供了一定的科学依据。 展开更多
关键词 阿胶 阿胶糕 抗氧化 抗衰老 HACAT细胞 损伤保护
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阿胶糕抗氧化与抗衰老活性机制研究
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作者 陆晓东 郭晓飞 +4 位作者 韩香 王腾 闫继爱 张烽 王周平 《食品与生物技术学报》 北大核心 2025年第4期88-97,共10页
【目的】研究以阿胶、核桃仁、黑芝麻、黄酒为原料制备而成的阿胶糕增强机体抗氧化、抗衰老的活性机制。【方法】在动物试验中,将50只SPF级雄性ICR小鼠随机分为5组(每组10只),分别为空白对照组、模型组与低剂量(1.67g/kgBW)、中剂量(3.3... 【目的】研究以阿胶、核桃仁、黑芝麻、黄酒为原料制备而成的阿胶糕增强机体抗氧化、抗衰老的活性机制。【方法】在动物试验中,将50只SPF级雄性ICR小鼠随机分为5组(每组10只),分别为空白对照组、模型组与低剂量(1.67g/kgBW)、中剂量(3.33g/kgBW)、高剂量(6.67g/kgBW)的试验组。连续饲料喂养30 d后,分别测定各组动物的血清超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、脂质过氧化产物丙二醛(MDA)和蛋白质羰基(PCO)等指标。人体试验中,分别将110例受试者随机分为试验组和对照组。试验组给予阿胶糕;对照组无任何干预,周期为3个月。分别测定SOD、GSH-Px、MDA以及皮肤水分、油分和VISIA测试。【结果】在动物试验中,试验组血清MDA和PCO显著降低,SOD和GSH显著升高;而在临床模型中,试验组人群血液SOD和GSH-Px与对照组人群相比均有显著增加,表明阿胶糕具有抗氧化作用。同时,人体面部指标测试结果显示,食用阿胶糕可有效增加皮肤水分和面部皮肤油脂分泌,可一定程度改善面部年龄、斑点和紫外线色斑等,有助于皮肤抗衰老。【结论】该研究为探究阿胶糕的抗氧化与抗衰老活性机制提供了依据。 展开更多
关键词 阿胶糕 抗氧化 抗衰老 临床试验 活性机制
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不同分子量阿胶的免疫调节作用比较
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作者 刘海滨 杜芬 +8 位作者 段小波 冯晓梅 王延涛 李八方 顾建军 付雪媛 田乐园 门翠翠 刘楚怡 《食品研究与开发》 2025年第17期55-61,共7页
为评价3种分子量不同的阿胶在增强免疫方面的作用,该研究通过不同工艺制备得到3种阿胶(Colla corii asini,CCA),即CCAS-1、CCAS-2和CCAS-3,在对其蛋白质含量、氨基酸组成和分子量分布进行分析的基础上,对其增强小鼠细胞免疫、体液免疫... 为评价3种分子量不同的阿胶在增强免疫方面的作用,该研究通过不同工艺制备得到3种阿胶(Colla corii asini,CCA),即CCAS-1、CCAS-2和CCAS-3,在对其蛋白质含量、氨基酸组成和分子量分布进行分析的基础上,对其增强小鼠细胞免疫、体液免疫、单核-巨噬细胞功能和自然杀伤细胞(NK细胞)活性能力进行评价。结果表明,CCAS-1、CCAS-2和CCAS-3的蛋白质含量和羟脯氨酸含量相近,但其分子量存在显著差异。重均分子量分别为19318、9117 Da和1404 Da。3种不同分子量阿胶产品均有助于增加体液免疫和NK细胞功能;并且CCAS-3有助于增强小鼠细胞免疫功能;CCAS-3、CCAS-2有助于增加单核巨噬细胞活性。CCAS-1、CCAS-2和CCAS-3均具有增强免疫功能的作用。 展开更多
关键词 阿胶 阿胶肽 细胞免疫 体液免疫 功能评价
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阿胶和阿胶肽对血管内皮细胞氧化损伤的作用研究
9
作者 段小波 杜芬 +8 位作者 王延涛 冯晓梅 刘海滨 王长伟 顾建军 李八方 刘明浩 王梦园 刘楚怡 《安徽农业科学》 2025年第8期162-167,180,共7页
[目的]分析阿胶和阿胶肽在血管内皮细胞氧化应激损伤中的作用,以及其发挥作用的机制。[方法]建立过氧化氢(H_(2)O_(2))所致的人脐静脉内皮细胞损伤模型,利用CCK-8检测阿胶和阿胶肽对建模前后人脐静脉内皮细胞(HUVEC)存活率的影响,并研... [目的]分析阿胶和阿胶肽在血管内皮细胞氧化应激损伤中的作用,以及其发挥作用的机制。[方法]建立过氧化氢(H_(2)O_(2))所致的人脐静脉内皮细胞损伤模型,利用CCK-8检测阿胶和阿胶肽对建模前后人脐静脉内皮细胞(HUVEC)存活率的影响,并研究阿胶和阿胶肽对细胞超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)、乳酸脱氢酶(LDH)酶活的影响,以及对丙二醛(MDA)、血管内皮生长因子(VEGF)、白细胞介素6(IL-6)、一氧化氮(NO)含量的影响。[结果]阿胶和阿胶肽能有效促进HUVEC的增殖、迁移,并能有效对抗氧化损伤造成的增殖抑制作用,200μg/mL阿胶和阿胶肽能显著抑制MDA和LDH的过量产生,200μg/mL阿胶能够显著提高GSH-px酶活、阿胶肽能够显著提高SOD的表达水平,修复HUVEC的氧化损伤;阿胶和阿胶肽均可有效促进血管内皮细胞分泌NO,保护血管内皮功能,并促进血管内皮细胞分泌VEGF和降低IL-6浓度,促进血管新生增多,降低炎症反应。[结论]阿胶和阿胶肽降低HUVEC氧化应激机制可能与改善细胞生长增殖状态、提高细胞抗氧化酶活性、促进血管内皮生长因子表达和促进血管内皮细胞分泌NO有关。 展开更多
关键词 阿胶 阿胶肽 过氧化氢 人脐静脉内皮细胞 氧化损伤
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基于皮肤细胞评价阿胶粉的延缓皮肤衰老作用
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作者 解晓 吴凡 +3 位作者 盘瑶 郭晓飞 孟苓凤 张建岭 《香料香精化妆品》 2025年第4期122-129,共8页
为探究阿胶粉对延缓皮肤衰老的作用,采用体外试验观察阿胶粉作用于HaCaT、HSF细胞后各指标变化。结果表明,0.156 25~2.5 mg/mL的阿胶粉对HaCaT、HSF细胞无细胞毒性,可显著促进HaCaT细胞迁移与增殖,并提升AQP3、FLG、LOR的表达水平,在增... 为探究阿胶粉对延缓皮肤衰老的作用,采用体外试验观察阿胶粉作用于HaCaT、HSF细胞后各指标变化。结果表明,0.156 25~2.5 mg/mL的阿胶粉对HaCaT、HSF细胞无细胞毒性,可显著促进HaCaT细胞迁移与增殖,并提升AQP3、FLG、LOR的表达水平,在增强皮肤屏障方面具有潜在功效。阿胶粉还可显著促进HSF细胞中COL-1、COL-3、ELN的表达,并抑制MMP-1的表达,对皮肤可能具有抗皱紧致的效果。总体而言,阿胶粉或可通过提高皮肤屏障功能,紧致皮肤达到延缓皮肤衰老的作用,可有效扩展阿胶在化妆品和保健食品行业的应用。 展开更多
关键词 阿胶粉 抗皱紧致 皮肤屏障 延缓衰老 体外试验
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扩散映射联合K最近邻法算法助力空间偏移可见近红外光谱快速鉴别阿胶种类
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作者 薛小瑞 张凯萍 《光散射学报》 北大核心 2025年第1期123-128,共6页
阿胶是一种传统名贵的中药材,主要原料有驴皮、牛皮等,不同的原材料决定了阿胶的药性功效。为实现阿胶原料的无损检测,本文采用空间偏移可见近红外光谱技术结合扩散映射联合K最近邻法算法开展阿胶原材料的鉴别分类研究。本研究实现了一... 阿胶是一种传统名贵的中药材,主要原料有驴皮、牛皮等,不同的原材料决定了阿胶的药性功效。为实现阿胶原料的无损检测,本文采用空间偏移可见近红外光谱技术结合扩散映射联合K最近邻法算法开展阿胶原材料的鉴别分类研究。本研究实现了一种基于空间跃迁理论的空间偏移可见近红外光谱技术,开展了驴皮、牛皮阿胶及其不同浓度混合物的空间偏移光谱实验,通过扩散映射算法实现了高维光谱数据的降维和光谱特征提取,然后基于K最近邻法算法完成了对驴皮和牛皮阿胶的鉴别,通过分类算法的综合评价指标-混淆矩阵和准确率评价了模型的识别效果。结果表明本研究提出的扩散映射联合K最近邻法算法对助力空间偏移可见近红外光谱技术识别阿胶种类具有很高的可行性和可靠性。本文提出并验证了一种快速鉴别阿胶种类的新方法,为相关技术人员提供了一种新的方法学参考。 展开更多
关键词 扩散映射 K最近邻法 空间偏移可见近红外光谱 阿胶
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阿胶珠连续化生产炮制工艺优选
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作者 胡雨 麻雨乐 +1 位作者 高波 郭志俊 《中医药学报》 2025年第10期35-40,共6页
目的:采用正交试验法,优选连续化炮制阿胶珠最佳工艺,并与传统炮制工艺进行比较研究。方法:以介质用量、介质温度、炒制频率3个因素为考察因素,以甘氨酸、丙氨酸、脯氨酸、L-羟脯氨酸等4种氨基酸及性状为评价指标,利用正交试验法确定连... 目的:采用正交试验法,优选连续化炮制阿胶珠最佳工艺,并与传统炮制工艺进行比较研究。方法:以介质用量、介质温度、炒制频率3个因素为考察因素,以甘氨酸、丙氨酸、脯氨酸、L-羟脯氨酸等4种氨基酸及性状为评价指标,利用正交试验法确定连续化生产炮制阿胶珠的最佳工艺。结果:连续化炮制阿胶珠的最佳工艺为:蛤粉用量160 kg,蛤粉温度210~215℃,炒制频率16 Hz。结论:与传统炮制方法比,连续化生产炮制工艺改善了阿胶珠的外观性状与氨基酸含量,为中药连续化炮制提供了一定的技术支持。 展开更多
关键词 阿胶珠 连续化 正交试验 外观性状 氨基酸
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阿胶低聚肽的自由基清除能力及对氧化损伤的成纤维细胞保护作用
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作者 冯俊 帖航 《广州化工》 2025年第21期87-91,共5页
前期研究表明,阿胶低聚肽(Colla corii asini oligopeptides,COP)中含有大量具有给质子能力的氨基酸及疏水性氨基酸,是其发挥抗氧化能力,进而延缓机体老化的物质基础。然而,其针对皮肤成纤维细胞的抗氧化活性至今未见报道。本研究采用... 前期研究表明,阿胶低聚肽(Colla corii asini oligopeptides,COP)中含有大量具有给质子能力的氨基酸及疏水性氨基酸,是其发挥抗氧化能力,进而延缓机体老化的物质基础。然而,其针对皮肤成纤维细胞的抗氧化活性至今未见报道。本研究采用体外生化手段测试了阿胶低聚肽的自由基清除能力,同时,采用过氧化氢诱导人成纤维细胞氧化应激模型,初步探讨了阿胶低聚肽对氧化应激细胞内氧化还原系统的影响,分析了阿胶低聚肽对人真皮成纤维细胞氧化损伤模型的保护作用效果。结果显示,阿胶低聚肽对DPPH、PTIO·、ABTS^(+)、·OH和·O_(2)^(-)等5种自由基均具有显著清除能力,且随着浓度升高,自由基清除能力越强。此外,阿胶低聚肽还能够通过提升GPx活力、降低MDA含量、抑制DNA氧化损伤,发挥对皮肤成纤维细胞的抗氧化保护作用。上述研究结果表明,阿胶低聚肽具有延缓由氧化应激引起的皮肤衰老的潜力。 展开更多
关键词 阿胶低聚肽 自由基清除 成纤维细胞 抗氧化活性
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UPLC-MS/MS法同时测定阿胶中18种核苷、游离氨基酸的含量 被引量:5
14
作者 杨帅 郑林 +4 位作者 迟明艳 巩仔鹏 李月婷 魏茂陈 黄勇 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期2140-2146,共7页
目的建立UPLC-MS/MS法同时测定阿胶中Asp、Guad、Adeno、Arg、Ade、Cyti、Phe、Leu、Ile、Glu、Ser、Gln、Gly、Ala、Hyp、Thr、Pro、Lys的含量。方法分析采用WatersBEHC18色谱柱(2.1mm×50mm,1.7μm);流动相乙腈(含0.1%甲酸)-水;... 目的建立UPLC-MS/MS法同时测定阿胶中Asp、Guad、Adeno、Arg、Ade、Cyti、Phe、Leu、Ile、Glu、Ser、Gln、Gly、Ala、Hyp、Thr、Pro、Lys的含量。方法分析采用WatersBEHC18色谱柱(2.1mm×50mm,1.7μm);流动相乙腈(含0.1%甲酸)-水;体积流量0.35mL/min;柱温45℃;电喷雾离子源;正离子扫描;多反应监测模式。再采用层次聚类分析、主成分分析和正交偏最小二乘判别分析进行化学模式识别。结果18种核苷、游离氨基酸在各自范围内线性关系良好(r≥0.9990),平均加样回收率98.0%~104.9%,RSD1.6%~4.9%。17批样品聚为2类,2种主成分累积方差贡献率为60.75%,Leu、Phe、Ade和Guad是潜在指标成分。结论该方法稳定可靠,可用于阿胶的质量控制。 展开更多
关键词 阿胶 核苷 游离氨基酸 含量测定 UPLC-MS/MS 化学模式识别
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酶解法制备阿胶蛋白肽工艺条件优化及抗氧化活性分析 被引量:5
15
作者 梁荣 徐乐 +2 位作者 樊琛 曹乐乐 郭兴峰 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2024年第10期217-224,共8页
目的:研究酶解法制备阿胶蛋白肽的工艺条件及阿胶蛋白肽的抗氧化活性。方法:以阿胶为原料,通过酶解实验优化碱性蛋白酶Alcalase 2.4L制备阿胶蛋白肽的酶解工艺条件。以酶解pH、酶与底物比、酶解温度作为考察因素,以阿胶的水解度为指标,... 目的:研究酶解法制备阿胶蛋白肽的工艺条件及阿胶蛋白肽的抗氧化活性。方法:以阿胶为原料,通过酶解实验优化碱性蛋白酶Alcalase 2.4L制备阿胶蛋白肽的酶解工艺条件。以酶解pH、酶与底物比、酶解温度作为考察因素,以阿胶的水解度为指标,在单因素实验的基础上,通过正交试验确定最佳工艺条件;利用高效凝胶色谱法测定酶解前后阿胶溶液的分子量分布情况,并通过检测对ABTS+和DPPH自由基的清除率,考察酶解前后阿胶溶液的抗氧化活性,从而综合分析酶解效果;采用4种不同大小孔径的超滤膜分离阿胶蛋白肽液,研究经超滤膜分离后不同分子量阿胶蛋白肽的抗氧化活性。结果:阿胶溶液的最佳酶解条件为:pH10.5、酶与底物比9%、酶解温度63℃,此条件下测得阿胶酶解液的水解度为15.93%±1.32%;酶解后阿胶溶液的分子量大部分分布在5000 Da以下;当浓度为10 mg/mL时,未酶解和酶解后的阿胶蛋白肽溶液ABTS+自由基清除率分别为75.83%±0.32%和93.16%±0.21%,DPPH自由基清除率为16.93%±2.41%和39.95%±1.27%;经超滤处理获得五组不同分子量的阿胶蛋白肽(>30 kDa、10~30 kDa、3~10 kDa、1~3 kDa和<1 kDa),分析比较发现低分子量的阿胶蛋白肽抗氧化效果较好。结论:碱性蛋白酶Alcalase 2.4L能够有效制备阿胶蛋白肽,且阿胶蛋白肽具有良好的抗氧化活性。试验结果为后续开展阿胶蛋白肽的抗氧化机制研究提供科学依据。 展开更多
关键词 阿胶 蛋白肽 碱性蛋白酶 酶解工艺 正交试验 抗氧化活性
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UPLC-MS/MS法同时测定阿胶中20种氨基酸含量及其化学模式识别分析 被引量:2
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作者 蒲健 杨帅 +4 位作者 祝扬帆 谭丹 郑林 迟明艳 黄勇 《中国药业》 CAS 2024年第22期87-94,共8页
目的建立阿胶中20种氨基酸的含量测定方法及不同产地阿胶的化学模式识别分析法。方法采用超高效液相色谱串联质谱(UPLC-MS/MS)法测定阿胶中氨基酸含量,分析柱为Waters BEHC_(18)柱(50 mm×2.1 mm,1.7μm),流动相为0.1%甲酸乙腈-0.1... 目的建立阿胶中20种氨基酸的含量测定方法及不同产地阿胶的化学模式识别分析法。方法采用超高效液相色谱串联质谱(UPLC-MS/MS)法测定阿胶中氨基酸含量,分析柱为Waters BEHC_(18)柱(50 mm×2.1 mm,1.7μm),流动相为0.1%甲酸乙腈-0.1%甲酸水溶液(5∶95,V/V),流速为0.35 mL/min,柱温为45℃,进样体积为5μL;采用电喷雾离子源(ESI),正离子模式下多反应监测(MRM)。采用层次聚类分析(HCA)法、主成分分析(PCA)法和正交偏最小二乘-判别分析(OPLS-DA)法分析测定结果。结果20种成分在相应质量浓度范围内与峰面积线性关系良好,检测限为0.002~0.075μg/mL,定量限为0.004~0.134μg/mL;精密度、稳定性、重复性试验的RSD均不超过4.70%,平均加样回收率为93.20%~107.80%,RSD为0.80%~3.90%。HCA法及PCA法均可将18个产地的药材样品分为2类;OPLS-DA法筛选出指标性成分异亮氨酸、丙氨酸、谷氨酰胺、天冬氨酸、谷氨酸、脯氨酸、精氨酸。结论所建方法可用于阿胶中氨基酸类成分的含量测定,筛选的7种成分可作为区分不同厂家阿胶的潜在指标。 展开更多
关键词 超高效液相色谱串联质谱法 阿胶 氨基酸 质量控制 指标性成分 化学模式识别
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阿胶多肽的组成及功能研究进展 被引量:2
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作者 陈瑛琪 任世利 +6 位作者 刘广志 王乐涛 李明 张翠翠 朱明月 史瑞瑞 王超 《山东农业大学学报(自然科学版)》 北大核心 2024年第2期288-294,共7页
文章综述了近年来阿胶多肽组成、性质和保健作用等方面取得的研究进展。通过生物信息学研究发现,阿胶主要成分是Ⅰ型胶原蛋白(COLIα1、COLIα2)、Ⅱ型胶原蛋白(COLIIα1)和血清白蛋白(ALB)等大分子量蛋白质。不同研究团队使用生物酶分... 文章综述了近年来阿胶多肽组成、性质和保健作用等方面取得的研究进展。通过生物信息学研究发现,阿胶主要成分是Ⅰ型胶原蛋白(COLIα1、COLIα2)、Ⅱ型胶原蛋白(COLIIα1)和血清白蛋白(ALB)等大分子量蛋白质。不同研究团队使用生物酶分解阿胶蛋白获得不同长度和种类的小分子量阿胶多肽序列。动物实验表明:阿胶多肽在不同层级的免疫调节中发挥重要作用;阿胶多肽能够促进贫血小鼠外周血白细胞、红细胞和血红蛋白数量的升高;同时,不同阿胶多肽表现的抗氧化能力有显著差异;另外,阿胶多肽在降低血压、改善阿尔兹海默症、抑制肿瘤等方面发挥重要作用。上述结果为今后研究阿胶多肽的产品研发和临床应用提供了重要理论依据。 展开更多
关键词 阿胶 阿胶多肽 免疫调节 抗氧化 补血 抗肿瘤
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不同工艺的阿胶对血虚证小鼠的血细胞成分及相关细胞因子影响的比较研究 被引量:1
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作者 宋国超 高云霄 +3 位作者 安峰鹏 程伟 任钧国 姜云耀 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2024年第7期1888-1898,共11页
目的本研究旨在评价高压蒸汽提取工艺阿胶与传统常压提取工艺阿胶产品的补血作用,探究不同工艺阿胶补血药理机制。方法将70只C57BL/6雌性小鼠随机分为正常对照组(Normal)、模型组(Model)、阿胶常压工艺低剂量组(aL)、阿胶常压工艺高剂量... 目的本研究旨在评价高压蒸汽提取工艺阿胶与传统常压提取工艺阿胶产品的补血作用,探究不同工艺阿胶补血药理机制。方法将70只C57BL/6雌性小鼠随机分为正常对照组(Normal)、模型组(Model)、阿胶常压工艺低剂量组(aL)、阿胶常压工艺高剂量组(aH)、阿胶高压工艺低剂量组(AL)、阿胶高压工艺高剂量组(AH)、阳性对照药维生素B12组(VB12),每组10只。除正常组外,其余各组均采用乙酰苯肼(Acetylphenylhydrazine,APH)联合环磷酰胺(Cyclophosphamide,CTX)构建血虚证小鼠模型,模型构建成功后,药物组给予相应药物连续灌胃14天,每天1次。治疗结束后,收集小鼠全血、肾脏及股骨组织。血液分析仪测定小鼠外周血象;ELISA法测定小鼠血清造血功能相关细胞因子水平;Western blot法测定小鼠血清及肾脏组织造血功能相关蛋白含量;HE染色观察骨髓组织病理学改变;免疫组化观察骨髓组织粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor,GM-CSF)及粒细胞集落刺激因子(Granulocyte colony-stimulating factor,G-CSF)蛋白表达水平。结果不同工艺的阿胶均可显著升高血虚证小鼠外周血红细胞、白细胞、血红蛋白及淋巴细胞含量,降低外周血中红细胞平均体积和平均血红蛋白含量等血液指标,显著改善血虚证小鼠造血细胞减少、脂肪组织增加等症状,增加小鼠骨髓有核细胞数量,提高骨髓G-CSF及GM-CSF的蛋白含量,增加血清促红细胞生成素(Erythropoietin,EPO)、白细胞介素-3(Interleukin-3,IL-3)及GM-CSF含量,增加肾脏EPO蛋白表达,降低血清肿瘤坏死因子(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)含量。与常压提取工艺生产的阿胶相比,高压蒸汽提取工艺生产的阿胶在提升血虚证小鼠外周血中血细胞含量,增加骨髓有核细胞数量,提高骨髓G-CSF和GM-CSF的蛋白含量,提升血清中EPO和G-CSF含量,降低IL-6含量等方面的效果更显著。结论不同工艺的阿胶均可明显升高血虚证小鼠血细胞数目及血红蛋白水平,高压蒸汽提取工艺的阿胶补血作用强于传统常压提取工艺的阿胶,其机制与上调小鼠血清中EPO、IL-3、GM-CSF、G-CSF等正向调控造血因子,提高肾脏EPO含量,增加骨髓GM-CSF、G-CSF的蛋白表达,降低TNF-α、IL-6等负向调控造血因子有关。 展开更多
关键词 阿胶 血虚证 环磷酰胺 乙酰苯肼 造血因子
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基于特征多肽抗原的阿胶基原鉴定 被引量:1
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作者 袁陈婷 杨容 +6 位作者 王立玮 景凌洁 陈璐阳 加羊卓玛 孙小祥 孙锦秀 杨欢 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期1214-1219,共6页
目的 以特征多肽为半抗原并制备多克隆抗体,鉴定阿胶原材料基原。方法 经文献调研及数据库比对筛选特征多肽,将多肽抗原与血蓝蛋白偶联并免疫Balb/c小鼠制备多克隆抗体,通过ELISA、dot blot和Western blot分析与验证多克隆抗体的产生、... 目的 以特征多肽为半抗原并制备多克隆抗体,鉴定阿胶原材料基原。方法 经文献调研及数据库比对筛选特征多肽,将多肽抗原与血蓝蛋白偶联并免疫Balb/c小鼠制备多克隆抗体,通过ELISA、dot blot和Western blot分析与验证多克隆抗体的产生、效价及特异性。结果 筛选所得5个特征多肽序列均具有T细胞表位和B细胞表位,亲水性-1~0,二级结构大多为无规则卷曲。多肽抗原ECS1、ECS3~ECS5在二次加强免疫后,效价分别为1∶6 400、1∶400、1∶12 800和1∶800。制备所得的多克隆抗体之间不产生交叉反应,而且多克隆抗体Ab-ECS3与驴皮及其伪品蛋白的结合显现出较大差异。结论 以特征多肽为半抗原制备所得的多克隆抗体可通过Western blot对驴皮进行真伪鉴别,为胶类中药的基原鉴定提供了参考。 展开更多
关键词 阿胶 特征多肽 多肽抗原 多克隆抗体 Western blot 基原鉴定
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阿胶治疗β-地中海贫血孕妇疗效及对EGR2表达的影响
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作者 杨烨耀 罗迪 +3 位作者 王颖 苏丽珊 周静文 李艳芳 《广州中医药大学学报》 CAS 2024年第6期1464-1471,共8页
【目的】观察阿胶治疗β-地中海贫血(简称β-地贫)患者妊娠期贫血的疗效及对早期生长反应因子2(EGR2)表达的影响。【方法】转录组测序(RNA-seq):将20例β-地贫孕妇按3∶1比例随机分配到治疗组15例(其中脱落1例,最终纳入14例)和对照组5例... 【目的】观察阿胶治疗β-地中海贫血(简称β-地贫)患者妊娠期贫血的疗效及对早期生长反应因子2(EGR2)表达的影响。【方法】转录组测序(RNA-seq):将20例β-地贫孕妇按3∶1比例随机分配到治疗组15例(其中脱落1例,最终纳入14例)和对照组5例,治疗组口服阿胶粉,对照组不予干预,疗程为4周。采集2组孕妇治疗前后的外周血进行RNA-seq分析,确定候选靶标。随后开展前瞻性临床随机对照试验(RCT):招募41例β-地贫孕妇,按3∶2比例随机分配到治疗组24例和对照组17例,治疗组口服阿胶粉,对照组口服阿胶粉模拟剂,疗程为4周。检测2组孕妇治疗前后的血液学参数,并采用实时聚合酶链反应(Real-time PCR)及蛋白免疫印迹(Western Blotting)法检测候选靶标的mRNA及蛋白表达量。【结果】(1)RNA-seq分析:基因型为βCD41-42(-TTCT)/β^(N)的治疗组治疗后EGR2表达显著上调(log2 FC=1.915;校正P值=9.84E-03),确定EGR2为候选靶标。(2)RCT试验:(1)治疗后,2组β-地贫孕妇平均血红蛋白(Hb)浓度变化无统计学差异(P>0.05),但基因类型为βCD41-42(-TTCT)/β^(N)的治疗组患者Hb浓度平均升高(6.54±4.74)g/L,较其他基因类型的β-地贫孕妇有显著性升高(P<0.05)。(2)基因类型为βCD41-42(-TTCT)/β^(N)的治疗组患者治疗后外周血EGR2 mRNA及蛋白表达量均显著升高(P<0.05);且2组β-地贫孕妇治疗前后Hb浓度差值与EGR2 mRNA及蛋白表达量差值均存在显著正相关关系,相关系数分别为0.701、0.683(P<0.001)。【结论】基因类型为βCD41-42(-TTCT)/β^(N)的地贫孕妇口服阿胶治疗效果最佳,其疗效可能与上调EGR2表达,激活RNA聚合酶Ⅱ启动子,促进核酸结合等发挥珠蛋白基因转录调控作用有关,从而最终有效改善贫血。 展开更多
关键词 地中海贫血 贫血 妊娠 阿胶 早期生长反应因子2(EGR2)
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