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APE1在PDT治疗非小细胞肺癌中的表达变化及疗效的关系 被引量：2
1
作者 杨镇洲 曾林立 +4 位作者 张云嵩 李梦侠 李增鹏 王东 王阁 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第20期2552-2554,共3页
目的探讨光动力疗法(PDT)治疗非小细胞肺癌对脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶(APE1)表达的影响及疗效的关系。方法以Western blot分析PDT处理调控作用影响A549细胞APE1表达变化的时效关系,构建Ad5/F35-APE1 siRNA腺病毒干扰载体,通过Western b... 目的探讨光动力疗法(PDT)治疗非小细胞肺癌对脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶(APE1)表达的影响及疗效的关系。方法以Western blot分析PDT处理调控作用影响A549细胞APE1表达变化的时效关系,构建Ad5/F35-APE1 siRNA腺病毒干扰载体,通过Western blot检测其对APE1蛋白的敲低作用,设空白对照组、Ad5/F35-APE1 siRNA感染组、PDT组和Ad5/F35-APE1 siRNA+PDT组,采用MTT法观察不同组对A549细胞的增殖抑制作用。结果PDT诱导A549细胞APE1蛋白表达增强在24h达到高峰,10MOI Ad5/F35-APE1 siRNA重组腺病毒感染A549细胞48h抑制APE1表达最为显著,MTT检测显示随光照剂量的增加增殖抑制作用显著增强,同时Ad5/F35-APE1 siRNA+PDT组对A549细胞具有明显的增殖抑制作用。结论Ad5/F35-APE1 siRNA重组腺病毒能有效抑制PDT诱导的肺癌细胞APE1表达增加,明显增强PDT对肺癌细胞的杀伤效应。 展开更多
关键词 ape1 光动力疗法 肺腺癌 Ad5/F35-ape1siRNA重组腺病毒
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APE1在非小细胞肺癌中的表达特点及其与预后的关系 被引量：12
2
作者 张云嵩 范士志 +5 位作者 王东 杨镇洲 向德兵 李增鹏 陈建明 蒋耀光 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期776-778,共3页
目的探讨脱嘌呤/嘧啶核酸内切酶(apurinic/apyrimidinic endonuclease,APE1)在非小细胞肺癌中的表达特点及其与患者预后的关系。方法应用免疫组化方法检测103例非小细胞肺癌组织和36例正常肺组织中APE1的表达情况,按染色强度将其分为低... 目的探讨脱嘌呤/嘧啶核酸内切酶(apurinic/apyrimidinic endonuclease,APE1)在非小细胞肺癌中的表达特点及其与患者预后的关系。方法应用免疫组化方法检测103例非小细胞肺癌组织和36例正常肺组织中APE1的表达情况,按染色强度将其分为低表达组和高表达组,并分析APE1在非小细胞肺癌表达情况与临床病理及患者预后的关系。结果正常肺组织及肺癌组织均有APE1表达,但正常肺组织以细胞核表达为主,肺癌组织主要在细胞质表达;APE1的表达与患者的年龄、性别、肿瘤大小、有无淋巴结转移及组织类型无明显关系;生存分析显示APE1的表达强弱与患者的预后明显相关。结论APE1蛋白表达增强与定位的改变与肺癌发生及发展有关,APE1基因表达增强可能是非小细胞肺癌患者预后不良的指标之一。 展开更多
关键词 ape1 非小细胞肺癌 DNA损伤与修复 免疫组化
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骨肉瘤中APE1的表达及其与血管生成的关系 被引量：9
3
作者 仲召阳 王东 +3 位作者 李增鹏 向德兵 张沁宏 肖华亮 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期1045-1048,共4页
目的　探讨APE1在骨肉瘤中的表达及其与肿瘤发生、发展以及血管生成的关系。方法　采用免疫组化S P法检测10例正常骨、10例良性骨瘤和60例骨肉瘤组织中APE1、CD3 4和FⅧ Rag等蛋白表达,并根据CD3 4和FⅧ Rag染色结果计数微血管密度。结... 目的　探讨APE1在骨肉瘤中的表达及其与肿瘤发生、发展以及血管生成的关系。方法　采用免疫组化S P法检测10例正常骨、10例良性骨瘤和60例骨肉瘤组织中APE1、CD3 4和FⅧ Rag等蛋白表达,并根据CD3 4和FⅧ Rag染色结果计数微血管密度。结果　APE1蛋白表达主要定位于肿瘤细胞的胞核,骨肉瘤中APE1显著高于正常骨(P <0 0 5 ) ,60例骨肉瘤中43例(72 % )呈高表达,17例呈低表达,APE1强表达组中的MVD显著高于弱表达组(P <0 0 1)。结论　APE1在骨肉瘤中过度表达与骨肉瘤分化以及微血管密度密切相关,有可能作为骨肉瘤抗血管生成治疗中一个新的靶向分子。 展开更多
关键词 骨肉瘤 ape1 血管生成 微血管密度 抗血管生成
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血清APE1自身抗体在结直肠癌诊断中的价值 被引量：14
4
作者 何乐 杨宇馨 +6 位作者 张诗珩 罗佳 戴楠 李梦侠 单锦露 王宏毅 王东 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期1297-1301,共5页
目的探讨血清中APE1自身抗体(apurinic/apyrimidinic endonuclease 1 autoantibodies,APE1-AAbs)在结直肠癌中的诊断价值。方法利用ELISA检测150例结直肠癌患者和170例健康体检人员(对照组)血清APE1-AAbs水平,采用蛋白芯片法检测相应的... 目的探讨血清中APE1自身抗体(apurinic/apyrimidinic endonuclease 1 autoantibodies,APE1-AAbs)在结直肠癌中的诊断价值。方法利用ELISA检测150例结直肠癌患者和170例健康体检人员(对照组)血清APE1-AAbs水平,采用蛋白芯片法检测相应的CEA、CA199和CA242浓度。运用Logistic回归和ROC曲线分析方法,将APE1-AAbs与CEA、CA199及CA242联合分析。结果 150例结直肠患者血清APE1-AAbs中位水平为2.697,显著高于对照组(P<0.001)。绘制ROC曲线,其AUC为0.797,灵敏度为62.67%,特异性为85.29%。APE1-AAbs分别与CEA、CA199及CA242联合后,AUC、诊断灵敏度和准确性均有所升高。结论血清APE1-AAbs对结直肠癌有辅助诊断价值,与临床上常用的结直肠癌肿瘤标志物联用可提高结直肠癌的诊出率。 展开更多
关键词 ape1自身抗体 结直肠癌 肿瘤标志物
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多发性骨髓瘤患者APE1蛋白表达的临床意义 被引量：8
5
作者 杨镇洲 陈幸华 +3 位作者 王东 向德兵 张曦 张沁宏 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期554-556,共3页
目的　检测多发性骨髓瘤(multiplemyeloma,MM)患者脱嘌呤 脱嘧啶核酸内切酶(apurinic apyrimidinicendonu clease,APE1)基因表达,探讨其临床意义。方法　采用免疫细胞化学、Westernblot分析在MM细胞系KM3、32例MM患者 和10例正常... 目的　检测多发性骨髓瘤(multiplemyeloma,MM)患者脱嘌呤 脱嘧啶核酸内切酶(apurinic apyrimidinicendonu clease,APE1)基因表达,探讨其临床意义。方法　采用免疫细胞化学、Westernblot分析在MM细胞系KM3、32例MM患者 和10例正常自愿者骨髓标本中检测APE1蛋白表达及定位,并且通过图像分析系统计算其积分光密度值。结果　在阳性 对照的MM细胞系KM3中胞核、胞核 胞浆、胞浆均有APE1表达,其中尤以胞核明显。APE1胞浆阳性分度在正常对照组、 初治组、复发或难治组间依次增高(P<0.01,0.05)。结论　APE1蛋白表达强度与MM疗效有关,APE1基因表达增强可能 是MM患者预后不良的指标之一。 展开更多
关键词 多发性骨髓瘤 ape1 DNA损伤修复
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pSilence APE1对骨肉瘤诱导血管内皮细胞迁徙抑制作用的实验研究 被引量：5
6
作者 王东 仲召阳 +2 位作者 李增鹏 卿毅 张沁宏 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期93-96,共4页
目的观察APE1siRNA表达载体pSilenceAPE1对骨肉瘤诱导血管内皮细胞迁徙的抑制作用及其与ES的协同作用。方法pSilenceAPE1转染骨肉瘤细胞9901和HOS;骨肉瘤和内皮细胞Transwell双室培养,计数迁移到内室膜背面的内皮细胞数,观察pSilenceAPE... 目的观察APE1siRNA表达载体pSilenceAPE1对骨肉瘤诱导血管内皮细胞迁徙的抑制作用及其与ES的协同作用。方法pSilenceAPE1转染骨肉瘤细胞9901和HOS;骨肉瘤和内皮细胞Transwell双室培养,计数迁移到内室膜背面的内皮细胞数,观察pSilenceAPE1及其联合ES对骨肉瘤细胞诱导内皮细胞迁徙的影响。结果ES低剂量组(350ng/ml)和高剂量组(700ng/ml)与正常对照组有明显差异(P<0·01)。2μgpSilenceAPE1和3μgpSilenceAPE1较单独脂质体组有显著性差异(P<0·01)。2μgpSilenceAPE1和ES低剂量(350ng/ml)联合组抑制内皮细胞迁徙的作用显著高于单独对照组(P<0·01)。结论pSilenceAPE1可显著抑制骨肉瘤细胞诱导的血管内皮细胞迁徙,并且可能与ES具有协同抗血管生成的作用。 展开更多
关键词 骨肿瘤 血管生成 pSilence ape1 内皮细胞 迁徙抑制作用
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肝细胞癌组织中DNA损伤修复基因APE1表达意义 被引量：8
7
作者 张沁宏 肖华亮 +4 位作者 李增鹏 仲召阳 何怡 卿毅 王东 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2005年第4期508-511,共4页
目的:探讨脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶(apurinic/apyrimidinic endonuclease,Apel),又称氧化还原因子(redox fac—tor-1,Ref-1)在肝细胞性肝癌(HCC)的表达特点及其与临床病理因素的关系. 方法:应用免疫组化S-P法分别检测正常肝组织10例、... 目的:探讨脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶(apurinic/apyrimidinic endonuclease,Apel),又称氧化还原因子(redox fac—tor-1,Ref-1)在肝细胞性肝癌(HCC)的表达特点及其与临床病理因素的关系. 方法:应用免疫组化S-P法分别检测正常肝组织10例、结节性肝硬化组织40例和HCC103例组织中Ape1表达情况. 结果:在HCC组织中Ape1在细胞核、细胞质均可表达, 其中细胞核/细胞质联合表达(49.5%)显著高于结节性肝硬化组(20%)和正常对照组(0%)(P<0.01).Apel细胞核和细胞质阳性分度在正常组、肝硬化组、HCC组之间依次增高,并与HCC组织学分级有密切关系(P<0.01或0.05). 结论:癌细胞过度表达Ape1蛋白可作为判断肝癌组织学分级的有用指标之一.Ape1基因在HCC的发生、发展中可能具有重要作用, 展开更多
关键词 HCC 表达 肝硬化 结节性 肝细胞癌组织 DNA损伤修复 ape 细胞核 细胞质 E1基因
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卵巢癌组织中APE1、VEGF的表达和MVD检测的临床意义 被引量：7
8
作者 张颖 牛力春 +4 位作者 赵雪静 梁静 王晓特 卢晓娟 辛晓燕 《现代肿瘤医学》 CAS 2016年第18期2940-2943,共4页
目的:研究脱嘌呤脱嘧啶核酸内切酶1(apurinic/apyrimidinic endonuclease 1,APE1)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和微血管密度(microvessel density,MVD)在上皮性卵巢癌组织中的表达情况及其临床意义。方... 目的:研究脱嘌呤脱嘧啶核酸内切酶1(apurinic/apyrimidinic endonuclease 1,APE1)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和微血管密度(microvessel density,MVD)在上皮性卵巢癌组织中的表达情况及其临床意义。方法:采用免疫组织化学SP法检测80例上皮性卵巢癌组织中APE1、VEGF表达和MVD计数情况,统计分析APE1和VEGF、MVD在上皮性卵巢癌组织中的相关性。结果:APE1在卵巢癌组织中表达阳性率为81.3%,VEGF在卵巢癌组织中表达阳性率为72.5%。APE1、VEGF表达均与卵巢癌FIGO分期、细胞分化程度、淋巴结转移有关(P<0.05)。MVD计数在中晚期(Ⅲ期+Ⅳ期)、低分化、淋巴结转移阳性的卵巢癌组织中显著高于早期(Ⅰ期+Ⅱ期)、高/中分化、淋巴结转移阴性的卵巢癌组织(P<0.05)。卵巢癌组织中APE1和VEGF表达、MVD计数之间均为正相关(P=0.000)。和APE1表达阴性的卵巢癌组织相比,APE1表达阳性的卵巢癌组织中MVD计数显著升高,具有统计学意义(37.2±12.4 vs 14.3±5.5,t=5.682,P=0.000)。结论:APE1可能通过促进卵巢癌组织中新生血管形成在卵巢癌发生发展中发挥重要作用。 展开更多
关键词 卵巢癌 ape1 VEGF MVD 免疫组织化学
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血清APE1蛋白在结直肠癌临床诊断中的作用及意义 被引量：5
9
作者 杨宇馨 何乐 +4 位作者 卢先锋 杨骁 仲召阳 王东 戴楠 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期88-93,共6页
目的探讨结直肠癌患者血清APE1蛋白的表达及其在临床诊断中的价值。方法利用ELISA法检测本院2010年1月至2015年9月肿瘤中心收治的202例结直肠癌患者和健康体检中心242例健康对照人群血清APE1蛋白的表达水平,通过免疫组化确定相应患者肿... 目的探讨结直肠癌患者血清APE1蛋白的表达及其在临床诊断中的价值。方法利用ELISA法检测本院2010年1月至2015年9月肿瘤中心收治的202例结直肠癌患者和健康体检中心242例健康对照人群血清APE1蛋白的表达水平,通过免疫组化确定相应患者肿瘤组织APE1蛋白的表达特征,同时采用C-12肿瘤蛋白芯片试剂盒检测上述人群CEA的表达水平。分析血清APE1蛋白与肿瘤组织APE1蛋白表达水平及年龄、性别、分期等临床指标的相关性,并绘制受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)评估血清APE1蛋白及CEA在结直肠癌诊断中的应用价值。结果 202例结直肠癌患者中位血清APE1蛋白浓度为0.331(0.007~4.359)ng/mL,显著高于对照组0.091(0~1.374)ng/mL(P<0.01)。Spearman相关分析显示血清APE1蛋白水平与肿瘤组织中APE1蛋白表达呈正相关(r=0.331,P=0.025),而与年龄、性别、分期等指标不相关。ROC曲线显示血清APE1蛋白的AUC为0.799(95%CI=0.756~0.843),灵敏度为76.20%,特异性为76.40%,血清CEA的AUC为0.736(95%CI=0.687~0.785),其灵敏度为51.00%,特异性为99.60%。血清APE1蛋白与CEA联合后其AUC为0.857(95%CI=0.819~0.896),灵敏度和特异性分别为72.30%和91.30%。结论结直肠癌患者血清APE1蛋白水平与肿瘤组织APE1表达呈正相关且较健康对照人群显著增高。血清APE1蛋白可与CEA联合作为结直肠癌辅助诊断的血清学标志物。 展开更多
关键词 ape1 结直肠癌 肿瘤标志物 诊断
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红景天苷对脑缺血再灌注大鼠脑神经元APE/Ref-1的影响 被引量：10
10
作者 刘晓梅 王淑英 刘斌 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期518-520,共3页
目的研究红景天苷对局灶性脑缺血/再灌注(I/R)损伤后神经可塑性和DNA修复酶APE/Ref表达的影响。方法Wistar大鼠随机分为假手术组,I/R模型组和红景天苷干预组,采用线栓法制造大鼠大脑局灶缺血(2h)/再灌注模型,于灌注后0.25、1、3、7d4个... 目的研究红景天苷对局灶性脑缺血/再灌注(I/R)损伤后神经可塑性和DNA修复酶APE/Ref表达的影响。方法Wistar大鼠随机分为假手术组,I/R模型组和红景天苷干预组,采用线栓法制造大鼠大脑局灶缺血(2h)/再灌注模型,于灌注后0.25、1、3、7d4个时间点断头取脑,HE和尼氏染色观察神经元形态学变化,免疫组化方法检测无嘌呤无嘧啶位点/氧化还原因子-1(APE/Ref-1)的表达。结果与其他两组比较,红景天苷组梗死灶范围明显减小,梗死灶周围皮质神经元损伤明显减轻(P<0.05);APE/Ref-1阳性细胞数表达显著增高(P<0.05)。结论红景天可以易化脑I/R损伤后中枢神经系统神经再生和修复的可塑性,抑制APE/Ref-1降低可能是其在I/R早期发挥神经保护作用的一条重要途径。 展开更多
关键词 红景天苷 脑缺血/再灌注 神经可塑性 ape/Ref
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XRCC1、PARP1和APE1多态性与晚期非小细胞肺癌铂类药物化疗敏感性的关系 被引量：5
11
作者 赵万 胡铃敏 +4 位作者 王铖 朱婷婷 魏娟 胡志斌 殷咏梅 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期1021-1026,共6页
目的:探讨碱基切除修复系统(BER)3个重要基因——X线修复互补基因(XRCC1)、多(ADP核糖)聚合酶(PARP1)及脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶(APE1)的单核苷酸多态性(SNPs)与晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者铂类药物化疗疗效的相关性。方法:对151例接... 目的:探讨碱基切除修复系统(BER)3个重要基因——X线修复互补基因(XRCC1)、多(ADP核糖)聚合酶(PARP1)及脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶(APE1)的单核苷酸多态性(SNPs)与晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者铂类药物化疗疗效的相关性。方法:对151例接受以铂类药物为基础化疗的晚期NSCLC患者进行临床疗效评价。采用TaqMan探针法对XRCC1G28152A(Arg399Gln)、XRCC1 C26304T(Arg194Trp)、PARP1 T2444C(Val762Ala)及APE1 T1349G(Asp148Glu)多态性位点进行基因型分析。比较不同基因型与铂类药物化疗效果之间的关系。结果:XRCC1 G28152A多态性与铂类化疗敏感性密切相关,GA杂合型患者临床受益率明显高于野生型,其化疗有效率为GG野生型的2.85倍(调整的OR=2.85,95%CI:1.291～6.277,P<0.05);至少携带1个变异等位基因A的患者(GA/AA)临床受益率为GG野生型携带者的2.48倍(调整的OR=2.48,95%CI:1.330～6.075,P<0.05)。XRCC1 26304位点及PARP1 2444位点的突变纯合基因型携带者,其化疗有效率都明显下降,XRCC126304的TT基因型有效率是CT/CC基因型的0.36倍(调整的OR=0.36,95%CI:0.040～3.298),PARP1 2444 CC基因型有效率是CT/TT基因型的0.37倍(调整的OR=0.37,95%CI:0.118～1.170),但均未见有统计学差异。未发现APE1 T1349G多态性与铂类化疗疗效之间存在关联。结论:BER修复通路XRCC1 G28152A多态性与晚期NSCLC患者铂类药物化疗临床受益相关,XRCC1 28152位点基因型检测有可能作为晚期NSCLC铂类化疗敏感性的预测指标。 展开更多
关键词 单核苷酸多态性 XRCC1 PARP1 ape1 非小细胞肺癌 化疗
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电离辐射诱导骨肉瘤细胞DNA损伤修复蛋白APE1线粒体定位研究 被引量：3
12
作者 李梦侠 王东 +3 位作者 向德兵 张云嵩 杨宇馨 龙在云 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第15期1458-1461,共4页
目的探讨电离辐射诱导骨肉瘤细胞脱嘌呤／脱嘧啶核酸内切酶（apurinic／aprimidinic endonuclease 1，APE1）线粒体定位表达情况，为进一步研究线粒体DNA修复在骨肉瘤放射治疗抵抗中的作用提供依据。方法应用激光共聚焦显微术和Western ... 目的探讨电离辐射诱导骨肉瘤细胞脱嘌呤／脱嘧啶核酸内切酶（apurinic／aprimidinic endonuclease 1，APE1）线粒体定位表达情况，为进一步研究线粒体DNA修复在骨肉瘤放射治疗抵抗中的作用提供依据。方法应用激光共聚焦显微术和Western blot观察正常对照组和12Gy X线照射后不同时相点骨肉瘤细胞株HOS细胞中APE1线粒体定位情况。结果对照组、12Gy X射线处理后1、2、3h APE1和线粒体有共定位现象，APE1细细胞质／细胞核荧光强度比值分别为：（0．78±0．04）、（1．04±0．03）、（1．14±0．05）、（1．80±0．38）。Western blot亦证实线粒体内APE1蛋白表达增高。结论放射后早期APE1向细胞质线粒体移位，从1～3h逐渐增高，提示APE1可能在电离辐射后骨肉瘤细胞线粒体DNA损伤修复中发挥重要作用。 展开更多
关键词 骨肿瘤 ape1 线粒体 放射治疗
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姜黄素对缺血/再灌注大鼠APE/Ref-1表达及细胞凋亡的影响 被引量：3
13
作者 王智 薛荣亮 +2 位作者 赵红霞 高慧 魏欣 《山东医药》 CAS 2013年第37期1-3,11,共4页
目的观察姜黄素对大鼠全脑缺血/再灌注损伤后海马神经元凋亡与DNA修复蛋白APE/Ref-1表达的影响,探讨其对脑缺血损伤后的保护作用。方法将144只雄性SD大鼠随机平均分为假手术组(SO组)、缺血/再灌注组(IR组)和姜黄素干预组(CU组)各48只。... 目的观察姜黄素对大鼠全脑缺血/再灌注损伤后海马神经元凋亡与DNA修复蛋白APE/Ref-1表达的影响,探讨其对脑缺血损伤后的保护作用。方法将144只雄性SD大鼠随机平均分为假手术组(SO组)、缺血/再灌注组(IR组)和姜黄素干预组(CU组)各48只。建立大鼠全脑缺血/再灌注模型,CU组于再灌注后即刻经腹腔注射姜黄素。分别于再灌注后2、6、12、24、48、72 h处死大鼠,提取大鼠脑组织。原位末端标记法检测海马CA1区的细胞凋亡情况;免疫组化SABC法检测APE/Ref-1的表达。结果 SO组神经元细胞凋亡较少,IR组凋亡的神经元细胞于再灌注6 h开始增多,48 h细胞凋亡率达到最高。与SO组比较,IR组细胞凋亡率增高(P<0.01)。CU组在再灌注6 h后的各时点神经元细胞凋亡较IR组少(P均<0.01)。SO组APE/Ref-1阳性细胞在各时点较多;IR组于再灌注后2 h APE/Ref-1阳性细胞开始出现明显减少,一直持续至72 h,与SO组比较有统计学差异(P均<0.01);CU组APE/Ref-1阳性细胞率各时点与IR组比较均有统计学差异(P均<0.01)。结论姜黄素发挥脑保护作用的机制可能与减缓DNA修复蛋白APE/Ref-1表达的下降和阻止脑缺血/再灌注损伤区神经元细胞的凋亡有关。 展开更多
关键词 再灌注损伤 ape REF-1 姜黄素 大鼠 脑
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APE1乙酰化调节电离辐射诱导的HeLa细胞自噬 被引量：3
14
作者 张志敏 杨镇洲 +5 位作者 何昊 蓝保华 李钱 吴艳 王帅 李娟 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期380-384,共5页
目的探讨脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶∕氧化还原因子(apurinic/aprimidinic endonuclease/redox factor-1,APE1/Ref-1)乙酰化对电离辐射诱导He La细胞自噬的调节作用。方法给予Elekta precise直线加速器处理He La细胞及子系细胞APE1WT和APE... 目的探讨脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶∕氧化还原因子(apurinic/aprimidinic endonuclease/redox factor-1,APE1/Ref-1)乙酰化对电离辐射诱导He La细胞自噬的调节作用。方法给予Elekta precise直线加速器处理He La细胞及子系细胞APE1WT和APE1K6R/K7R,应用免疫共沉淀(co-immunoprecipitation,Co-IP)的方法检测APE1乙酰化修饰及Beclin1/Bcl2的结合,流式细胞仪检测细胞自噬的水平,免疫荧光激光共聚焦检测LC3的聚集,Western blot检测APE1、LC3和p62的表达。结果 He La细胞APE1乙酰化水平随着照射剂量的增加和照射后时间的延长而逐渐升高(P<0.05)。He La细胞LC3Ⅱ的表达与照射剂量呈正相关,而与p62呈负相关(P<0.05);电离辐射促进细胞的自噬水平和LC3的聚集。电离辐射后,LC3Ⅱ上调;与对照组APE1WT相比,APE1K6R/K7R细胞Beclin1/Bcl2结合增强,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值降低,p62表达上调(P<0.05)。结论 APE1乙酰化通过Beclin1/Bcl2途径调节电离辐射诱导的He La细胞自噬。 展开更多
关键词 电离辐射 ape1乙酰化 自噬 宫颈癌
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RNA干扰抑制KM_3细胞APE1蛋白表达对其增殖与凋亡的影响 被引量：3
15
作者 谢家印 王东 +3 位作者 杨镇洲 王阁 向德兵 李增鹏 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第7期700-703,共4页
目的探讨脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶(apurinic/apyrimidinic endonuclease,APE1)基因RNA干扰对KM3人多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)细胞APE1蛋白表达及细胞增殖、凋亡的影响,以期为转基因治疗多发性骨髓瘤提供实验依据。方法将构建的A... 目的探讨脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶(apurinic/apyrimidinic endonuclease,APE1)基因RNA干扰对KM3人多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)细胞APE1蛋白表达及细胞增殖、凋亡的影响,以期为转基因治疗多发性骨髓瘤提供实验依据。方法将构建的APE1siRNA表达载体导入人多发性骨髓瘤细胞株KM3细胞,应用Western blot检测APE1蛋白表达的改变,并通过细胞增殖曲线、MTT法和流式细胞术、DNA片段化百分率检测观察靶细胞的增殖与凋亡。结果Western blot分析表明APE1siRNA表达载体使KM3细胞APE1蛋白表达下降,细胞生长曲线观察、MTT法检测显示,转染的KM3细胞生长受抑,流式细胞术和DNA片段化百分率检测观察到APE1RNA干扰使靶细胞凋亡明显增加。结论APE1RNA干扰通过降低APE1蛋白表达,抑制KM3细胞生长和促进其凋亡。 展开更多
关键词 多发性骨髓瘤 凋亡 ape1基因 RNA干扰 DNA损伤修复
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pSilence APE1联合中子射线治疗骨肉瘤的体外实验研究 被引量：3
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作者 卿毅 王东 +2 位作者 仲召阳 李增鹏 张沁宏 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期722-725,共4页
目的应用双功能基因脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶(APE1)小干扰RNA(siRNA)表达载体pSilence APE1“敲低”人骨肉瘤HOS细胞APE1的表达,观察pSilence APE1联合中子放射治疗对HOS细胞生长抑制的协同作用,并探讨其可能机制。方法用脂质体将pSilen... 目的应用双功能基因脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶(APE1)小干扰RNA(siRNA)表达载体pSilence APE1“敲低”人骨肉瘤HOS细胞APE1的表达,观察pSilence APE1联合中子放射治疗对HOS细胞生长抑制的协同作用,并探讨其可能机制。方法用脂质体将pSilence APE1质粒导入HOS细胞,同时给予不同剂量的锎-252中子射线照射,采用克隆形成分析法测算平均致死剂量(D0)、准域剂量(Dq)值,彗星分析法检测照射后细胞的DNA损伤情况,并用流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果克隆形成分析显示对照组与pSilence APE1转染组HOS细胞经锎-252中子射线照射后的D0值分别为2·80和1·89,Dq值分别为2·66和2·00。分别以2、5、10Gy锎-252中子射线照射对照组与pSilence APE1转染组HOS细胞后,碱性彗星尾力矩分别为6·664±0·648、20·322±1·433、33·909±1·245和7·997±0·542、25·238±1·185、39·191±1·052(P<0·01);细胞凋亡率分别为4·00%、5·91%、9·63%和5·68%、7·55%、13·51%(P<0·05)。结论pSilenceAPE1能显著提高HOS细胞对中子射线的敏感性,促进DNA损伤和细胞凋亡。pSilence APE1基因联合中子放疗可能成为今后骨肉瘤治疗的新方法。 展开更多
关键词 骨肿瘤 ape1 锎-252中子
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PC12细胞APE/ref-1cDNA的克隆和表达 被引量：3
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作者 谢振华 王爱民 +1 位作者 刘长振 马春 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期585-589,共5页
APE Ref 1是双功能核蛋白 ,它既能在碱基切除修复过程中切除脱嘌呤 脱嘌啶位点 ,又能促进包括AP 1、Myb和NF κB等受氧化还原调节的转录因子对DNA的结合 .从PC12细胞中抽提总RNA ,经逆转录PCR(RT PCR)扩增出APE ref 1cDNA并克隆到pQE3 ... APE Ref 1是双功能核蛋白 ,它既能在碱基切除修复过程中切除脱嘌呤 脱嘌啶位点 ,又能促进包括AP 1、Myb和NF κB等受氧化还原调节的转录因子对DNA的结合 .从PC12细胞中抽提总RNA ,经逆转录PCR(RT PCR)扩增出APE ref 1cDNA并克隆到pQE3 1表达质粒上的BamHⅠ和PstⅠ位点间 .经测序表明 ,PC12细胞的APE ref 1cDNA以正确的阅读框架重组进入表达质粒 ,表达重组质粒pQE3 1 APE在宿主菌BL2 1中得到稳定表达 .SDS PAGE鉴定表明 ,带 6个组氨酸的融合蛋白分子量为 3 8kD ,并经Ni NTA琼脂糖亲和纯化得到电泳纯融合蛋白 .Western印迹证明重组蛋白为APE ref 1融合蛋白 . 展开更多
关键词 PC12细胞 ape/REF-1 RT-PCR 克隆 表达 限速酶
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CME术后DC-CIK联合奥沙利铂、卡培他滨治疗结肠癌对血清HER2和APE1自身抗体水平的作用 被引量：13
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作者 李国华 张成建 +1 位作者 艾万朝 张军翔 《河北医药》 CAS 2020年第4期485-489,共5页
目的探讨完整结肠系膜切除(complete mesocolic excision,CME)术后树突状细胞-细胞因子诱导杀伤细胞(dendritic cell-cytokine induced killer,DC-CIK)联合奥沙利铂、卡培他滨治疗结肠癌对血清人类表皮生长因子受体-2(human epidermal g... 目的探讨完整结肠系膜切除(complete mesocolic excision,CME)术后树突状细胞-细胞因子诱导杀伤细胞(dendritic cell-cytokine induced killer,DC-CIK)联合奥沙利铂、卡培他滨治疗结肠癌对血清人类表皮生长因子受体-2(human epidermal growth factor receptor 2,HER2)和APE1自身抗体(apurinic/apyrimidinic endonuclease 1 autoantibodies,APE1-AAbs)水平的作用。方法以2014年9月至2016年7月就诊的82例结肠癌CME术后患者为研究对象,按随机数字表法分成对照组(n=41)和试验组(n=41)。对照组患者采用第1天,奥沙利铂,130 mg/m^2,溶于5%葡萄糖溶液500 ml中,静脉滴注;第1~14天,卡培他滨片,口服,1 g/m^2,2次/d,4周为1个周期,共治疗6个周期。试验组在对照组的基础上,分别在化疗开始前、化疗3周及6周期后各行1个周期DC-CIK免疫治疗,将制备完成的DC于腹股沟淋巴结处皮下注射,每周期3次共注入(3~5)×108个细胞,同时将制备完成的CIK行静脉输注,1次/d,每周期5次,共输注5×109个细胞。评价2组患者治疗2周及2年后在临床疗效(CEA水平及2年复发率)、免疫功能、血清HER2及APE1-AAbs水平及不良反应等变化情况。结果2组CEA水平在治疗2周后明显降低(P<0.05),试验组明显低于对照组(P<0.05),治疗2年后,2组CEA水平较治疗后2周明显升高,且对照组显著高于试验组(P<0.05);2年肿瘤复发率分别为9.76%、26.83%,试验组明显低于对照组(P<0.05);治疗2周后,对照组患者CD^+8、Treg出现明显下降,试验组患者CD^+3、CD^+4、CD^+8、CD^+19、CD^+3CD^+56均明显上升,Treg明显下降(P<0.05);治疗2年后,2组CD^+3、CD^+4、CD^+8、CD^+19、CD^+3CD^+56差异无统计学意义(P>0.05),对照组Treg明显高于试验组(P<0.05);治疗2周后,2组血清HER2及APE1-AAbs水平较治疗前均明显减低(P<0.05),且试验组显著低于对照组(P<0.05),治疗2年后,2组血清HER2及APE1-AAbs水平均较前升高(P<0.05),且对照组显著高于试验组(P<0.05)。试验组在骨髓抑制、消化道症状、外周神经损伤及手足综合征等不良反应方面明显低于对照组(P<0.05)。结论CME术后DC-CIK联合应用奥沙利铂、卡培他滨可提高结肠癌患者的疗效,改善机体免疫功能,降低结肠癌患者的血清HER2和APE1-AAbs水平。 展开更多
关键词 结肠癌 免疫治疗 化学治疗 人类表皮生长因子受体-2 ape1自身抗体
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吉西他滨对人肺癌A549细胞株CN-Ⅱ，APE／Ref-1mRNA和蛋白表达的影响 被引量：2
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作者 宋东 周曙光 +3 位作者 刘玥 李晓栋 王姗姗 唐小龙 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期246-249,共4页
【目的】研究人肺癌A549细胞株在吉西他滨化疗时CN-Ⅱ,APE/Ref-1基因表达的变化,并探讨其在肺癌化疗耐药中所起的作用。【方法】不同浓度吉西他滨0、10、20、40及60μmol/L作用人肺癌A549细胞株24h,分别以RT-PCR及Western blot方法测定... 【目的】研究人肺癌A549细胞株在吉西他滨化疗时CN-Ⅱ,APE/Ref-1基因表达的变化,并探讨其在肺癌化疗耐药中所起的作用。【方法】不同浓度吉西他滨0、10、20、40及60μmol/L作用人肺癌A549细胞株24h,分别以RT-PCR及Western blot方法测定用药后CN-Ⅱ和APE/Ref-1的mRNA及蛋白表达情况。【结果】吉西他滨作用人肺癌A549细胞株24h后,CN-Ⅱ和APE/Ref-1的mRNA及蛋白表达水平均明显上升,并与吉西他滨的浓度呈正相关(CN-ⅡRT-PCR:r=0.687,P=0.009;Western blot:r=0.594,P=0.021;APE/Ref-1RT-PCR:r=0.669,P=0.010;Western blot:r=0.562,P=0.029)。【结论】CN-Ⅱ和APE/Ref-1在肺癌化疗时表达明显增强,可能与化疗耐药性的产生有关,并提示针对CN-Ⅱ和APE/Ref-1的靶向干预可能有助于提高肺癌的化疗敏感性。 展开更多
关键词 吉西他滨 CN-Ⅱ ape/REF-1 肺癌 化疗耐药性
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APE/Ref-1在肿瘤治疗中的应用前景 被引量：5
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作者 张颖 王建 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2010年第3期363-369,共7页
脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶/氧化还原因子-1(APE/Ref-1)是碱基切除修复途径的关键酶,主要负责修复氧化剂和烷化剂造成的DNA损伤。同时APE/Ref-1还能通过氧化还原功能保持多种转录因子处于激活的还原状态,并通过调控其DNA结合活性参与肿瘤... 脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶/氧化还原因子-1(APE/Ref-1)是碱基切除修复途径的关键酶,主要负责修复氧化剂和烷化剂造成的DNA损伤。同时APE/Ref-1还能通过氧化还原功能保持多种转录因子处于激活的还原状态,并通过调控其DNA结合活性参与肿瘤发生发展,这些因子包括AP-1(Fos/Jun)、NF-κB、HIF-1α、p53等。本文综合近年来国外的众多文献,从APE/Ref-1的结构功能入手,回顾总结APE/Ref-1与肿瘤之间相关性及其临床研究进展,提示APE/Ref-1是非常有潜力的肿瘤治疗靶点,在临床应用中有良好的发展前景。 展开更多
关键词 ape1基因 肿瘤 基因治疗
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