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金黄色葡萄球菌双组分系统反应调节蛋白AgrA的原核表达、纯化及活性鉴定 被引量:2
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作者 张旭宁 权春善 +3 位作者 廖颖玲 柳科欢 熊文 范圣第 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期32-40,共9页
AgrA作为金黄色葡萄球菌双组分信号转导系统(two-component signal transduction system,TCST)的反应调节因子,能调控细菌毒力因子的表达,在金黄色葡萄球菌致病过程中起着重要的作用。采用无限制克隆法构建AgrA表达载体,在AgrA蛋白的C... AgrA作为金黄色葡萄球菌双组分信号转导系统(two-component signal transduction system,TCST)的反应调节因子,能调控细菌毒力因子的表达,在金黄色葡萄球菌致病过程中起着重要的作用。采用无限制克隆法构建AgrA表达载体,在AgrA蛋白的C端融合绿色荧光蛋白(GFP)标签,通过实时监测GFP的荧光强度来快速检测重组蛋白的表达水平。首先利用单因素实验,筛选出宿主菌株BL21-(DE3)-PlysS;其次,结合Box-Behnken试验设计,筛选出最优蛋白质表达条件:诱导时间为22h、转速为222r/min、诱导剂浓度为0.5mmol/L,AgrA产量达到5.56mg/L。最后,基于AgrA蛋白LytTR区域的非放射性凝胶阻滞实验(non-radioactive electrophoretic mobility shift assay,EMSA)验证了AgrA的生物活性。提出了反应调节蛋白AgrA在大肠杆菌高效可溶性表达的策略,为双组分信号转导系统的体外研究奠定基础,也为其他反应调节蛋白的可溶性表达与分离纯化提供了一个可行借鉴。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 agra GFP 响应面分析 EMSA
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大肠杆菌S12无细胞系统合成AgrA蛋白的研究
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作者 瞿晓晶 权春善 《大连民族学院学报》 CAS 2013年第5期493-496,共4页
利用无细胞合成方法,对AgrA蛋白进行了生物体系外合成,且研究了不同反应温度和时间对蛋白合成的影响。结果表明,AgrA蛋白在无细胞系统中成功被合成,且30℃、4 h条件下蛋白合成效果较好。
关键词 金黄色葡萄球菌 无细胞系统 agra GFP
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金黄色葡萄球菌AgrA/C双组分信号转导模型的构建与功能评价 被引量:1
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作者 权春善 张旭宁 +3 位作者 金黎明 张丽影 赵晶 范圣第 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期856-865,共10页
【背景】抗生素的无序使用加剧了耐药性金黄色葡萄球菌超级菌株的出现,由其引发的感染已成为最难解决的感染性疾患。在生物体系外构建AgrA/C双组分系统的跨膜信号转导过程,对解决金黄色葡萄球菌的耐药性问题和发现新型抗菌药物具有重要... 【背景】抗生素的无序使用加剧了耐药性金黄色葡萄球菌超级菌株的出现,由其引发的感染已成为最难解决的感染性疾患。在生物体系外构建AgrA/C双组分系统的跨膜信号转导过程,对解决金黄色葡萄球菌的耐药性问题和发现新型抗菌药物具有重要的研究意义。【目的】人工模拟构建金黄色葡萄球菌AgrA/C双组分信号转导模型,为生物体外研究金黄色葡萄球菌双组分信号转导的机制及以其为靶点的药物筛选提供新途径。【方法】在大肠杆菌宿主细胞中大量表达AgrA和Agr C蛋白,利用亲和层析和分子筛凝胶层析对其进行分离纯化,利用非放射性凝胶阻滞实验(EMSA)检测AgrA蛋白活性,并检测Agr C激酶活性;进而利用脂质体介导法在体外组装AgrA/C双组分信号转导模型,应用EMSA方法进行评价。【结果】分离纯化得到AgrA和Agr C蛋白,二者纯度均达到90%以上,均具有活性。在生物体系外构建了金黄色葡萄球菌AgrA/C双组分信号转导模型,该系统可增强AgrA对DNA的延滞作用,具有信号传递功能。【结论】初步构建AgrA/C双组分信号转导模型,该模型具有信号传递能力,有望作为针对金黄色葡萄球菌开发新型抗菌药物的筛选平台。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 agra/C双组分信号转导系统 凝胶阻滞实验 群体感应
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Dichlorodiphenyltrichloroethane (DDT) and its metabolites in dairy milk and milk products of Agra City, India 被引量:3
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作者 Anoop Kumar PE Joseph 《Chinese Journal Of Geochemistry》 EI CAS 2006年第B08期179-179,共1页
关键词 牛奶 代谢物 印度 DDT 有机污染物 环境污染
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面板数据下的灰色指标关联聚类模型与应用 被引量:9
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作者 李雪梅 党耀国 王俊杰 《控制与决策》 EI CSCD 北大核心 2015年第8期1447-1452,共6页
针对面板数据聚类研究存在的问题及现实需要,构建面板数据下新的灰色指标关联聚类(AGRA)模型.构造所有指标不同对象下时间序列的累加生成序列,用生成序列的平均生成速率表征原序列的动态变化趋势;单个指标所有对象的平均生成速率构成该... 针对面板数据聚类研究存在的问题及现实需要,构建面板数据下新的灰色指标关联聚类(AGRA)模型.构造所有指标不同对象下时间序列的累加生成序列,用生成序列的平均生成速率表征原序列的动态变化趋势;单个指标所有对象的平均生成速率构成该指标的平均生成速率序列,从而综合偏离、差离和分离的三重差异信息,构建指标关联分析模型;提出面板数据下Mean-AGRA灰色指标关联聚类算法,并应用于我国区域生态环境评价指标的降维问题.分析结果验证了所提出模型的实用性和有效性. 展开更多
关键词 灰色关联聚类 灰色关联分析 面板数据 agra模型
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大疆T20植保无人机在防治柑橘害虫中的应用研究 被引量:8
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作者 詹欣坚 黄锐浩 +3 位作者 徐淡云 肖朝锦 陈佳明 罗薇 《南方农机》 2022年第21期32-36,共5页
为了调查植保无人机在柑橘害虫防治中的作用,并对比其与传统人工施药成本,本研究利用大疆T20植保无人机进行药剂喷雾防治柑橘木虱、锈蜘蛛、介壳虫的试验。结果表明,利用大疆T20植保无人机对柑橘木虱进行飞防试验,防治效果达到100%,效... 为了调查植保无人机在柑橘害虫防治中的作用,并对比其与传统人工施药成本,本研究利用大疆T20植保无人机进行药剂喷雾防治柑橘木虱、锈蜘蛛、介壳虫的试验。结果表明,利用大疆T20植保无人机对柑橘木虱进行飞防试验,防治效果达到100%,效果显著,可以成为代替传统人工防治柑橘木虱的方法之一。但是在果园郁闭情况下,无人机对锈蜘蛛、介壳虫的防治效果则不理想。另外,无人机施药的单位成本比人工施药更低,可以节省96%的药液量,节省69.65%的单位成本。综上,大疆T20植保无人机在防治柑橘害虫方面有较大的推广应用价值。 展开更多
关键词 大疆T20植保无人机 柑橘 柑橘木虱 锈蜘蛛 介壳虫
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Commemorating a modest,rigorous,and great scientist for Neurorestoratology——Dr.Stephen D.Skaper,(1948-2018),Department of Pharmaceutical and Pharmacological Sciences University of Padua,Italy
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作者 Lin Chen Hari Sharma 《Journal of Neurorestoratology》 2018年第1期81-83,共3页
Recently,we are devastated to know that Prof.Steven Skaper passed away(22nd June,2018).He was a great loss to our association.He will always be remembered by those who knew him and of his work.He was the first and for... Recently,we are devastated to know that Prof.Steven Skaper passed away(22nd June,2018).He was a great loss to our association.He will always be remembered by those who knew him and of his work.He was the first and foremost a polite,elderly affectionate great friend.We still clearly remember the invitation of Prof.Hari Sharma to the Amity University in New Delhi after the annual meeting of the International Association for Neurorestoratology(IANR)in Mumbai,India in 2014.The visits to New Delhi and Agra were very harmonious and successful(Fig.1).We recall his daily life as friendly and humble to everyone including the car drivers,friends,local students,schoolteachers,and colleagues.This is still fresh in our memory. 展开更多
关键词 polite New Delhi elderly Stephen D Skaper friend Amity University affectionate agra
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