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黄曲霉毒素G1人工抗原的合成 被引量:5
1
作者 张金阳 李培武 +5 位作者 张文 丁小霞 马良 吴文华 张献忠 李涛 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第6期194-197,共4页
以间氯过氧苯甲酸(m-chloroperbenzoic acid,MCPBA)为氧化剂,使黄曲霉毒素G1(Aflatoxin G1,AFG1)转化为其8,9-环氧化物,与牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)在两相反应体系中实现偶联,得到复合物AFG1-BSA。复合物紫外扫描结果显... 以间氯过氧苯甲酸(m-chloroperbenzoic acid,MCPBA)为氧化剂,使黄曲霉毒素G1(Aflatoxin G1,AFG1)转化为其8,9-环氧化物,与牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)在两相反应体系中实现偶联,得到复合物AFG1-BSA。复合物紫外扫描结果显示其扫描图谱与BSA和黄曲霉毒素G1的图谱有明显差异,同时复合物与BSA荧光强度的差异,这表明BSA与黄曲霉毒素G1偶联。AFG1-BSA中AFG1与BSA的摩尔比为4.29:1。以合成人工抗原免疫小鼠,制备了特异性的鼠抗AFG1多克隆抗血清。用间接ELISA法测得抗体血清的最高效价可达1:16000,并测定了抗体的敏感度以及特异性。 展开更多
关键词 黄曲霉毒素g1 人工抗原 ELISA
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Effects of Sterigmatocystin, Deoxynivalenol and Aflatoxin G_1 on Apoptosis of Human Peripheral Blood Lymphocytes in vitro 被引量:7
2
作者 SunXM等 ZhangXH 《Biomedical and Environmental Sciences》 SCIE CAS CSCD 2002年第2期145-152,共8页
Objective To explore the effects of Sterigmatocystin (ST), Deoxynivalenol (DON) and Aflatoxin G1 (AFG1) on apoptosis of human peripheral blood lymphocytes (HPBLs) in vitro and thus to further elucidate the putative r... Objective To explore the effects of Sterigmatocystin (ST), Deoxynivalenol (DON) and Aflatoxin G1 (AFG1) on apoptosis of human peripheral blood lymphocytes (HPBLs) in vitro and thus to further elucidate the putative roles of these three mycotoxins on human immunosystem. Methods The effects of ST, DON and AFG1 on apoptosis of HPBLs were studied with cell culture, flow cytometric (FCM) DNA analysis and DNA agarose gel electrophoresis. Results DNA agarose gel electrophoresis results showed the characteristic 'ladder' pattern of apoptosis in HPBLs treated with ST, DON and AFG1. Flow cytometric DNA analysis revealed that typical subdiploid peaks of apoptosis in DNA histogram could be seen in all groups treated with the three mycotoxins. Significant time-effect and dose-effect relationships were found between the apoptosis rates and treatment time as well as concentrations of the three mycotoxins. Conclusion ST, DON and AFG1 can induce apoptosis of HPBLs in vitro and may have some negative effects on human immunosystem. 展开更多
关键词 STERIGMATOCYSTIN DEOXYNIVALENOL aflatoxin g1 APOPTOSIS Human LYMPHOCYTES
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黄曲霉毒素G1诱导的炎症反应介导的SOD-2高表达对肺腺癌增殖影响 被引量:2
3
作者 易力 刘宏雷 +1 位作者 贾欣 郝增方 《热带医学杂志》 CAS 2022年第1期22-27,146,共7页
目的探讨黄曲霉毒素G1(AFG1)诱导的炎症反应对肺腺癌细胞增殖的影响和超氧化物歧化酶(SOD-2)高表达在其中发挥的作用。方法免疫组织化学及蛋白免疫印迹(Western Blot)方法检测AFG1诱导小鼠肺腺癌组织中增殖相关指标的表达。体外模拟AFG... 目的探讨黄曲霉毒素G1(AFG1)诱导的炎症反应对肺腺癌细胞增殖的影响和超氧化物歧化酶(SOD-2)高表达在其中发挥的作用。方法免疫组织化学及蛋白免疫印迹(Western Blot)方法检测AFG1诱导小鼠肺腺癌组织中增殖相关指标的表达。体外模拟AFG1诱导的炎症反应,给予AFG1、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)刺激A549细胞,Western Blot方法检测增殖相关蛋白的表达,CCK8方法及克隆形成实验检测细胞增殖能力;使用siRNA沉默SOD-2,给予上述刺激,再次检测增殖相关指标的表达情况及细胞增殖能力。结果免疫组化结果显示,AFG1诱导小鼠肺腺癌组织中增殖相关指标Survivin、B细胞淋巴瘤/白血病-xl(Bcl-xl)、增殖细胞核抗原(PCNA)和细胞周期蛋白D1(CyclinD1)均阳性表达,Western Blot结果显示以上蛋白表达均升高。体外分别给予AFG1和TNF-α+IL-6处理A549细胞,Survivin、Bcl-xl、PCNA和CyclinD1蛋白表达均无变化,CCK8和克隆形成实验结果显示细胞增殖能力没有提高。而使用siRNA转染抑制SOD-2表达后,再给予TNF-α+IL-6刺激,A549细胞增殖相关各项指标均高表达,细胞增殖能力提高。结论AFG1诱导的小鼠肺腺癌组织中增殖相关指标高表达。体外实验中AFG1和TNF-α+IL-6作用均不影响A549细胞增殖,敲低SOD-2后TNF-α+IL-6作用使A549细胞增殖能力增加,说明SOD-2是炎症反应中影响A549细胞增殖的关键指标。 展开更多
关键词 黄曲霉毒素g1 炎症 超氧化物歧化酶 肺腺癌
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HPLC同时测定食品中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2 被引量:37
4
作者 冯靓 蔡增轩 +2 位作者 谭莹 王天娇 任一平 《中国卫生检验杂志》 CAS 2007年第3期511-513,共3页
目的:分析常见种类食物中黄曲霉毒素的含量,为建立食品中黄曲霉毒素的限量指标提供数据,并为大众的健康饮食提供参考。方法:以黄曲霉毒素B1的平均含量为参考选择黄曲霉毒素含量较多的常见食物种类,使用高效液相色谱仪及荧光检测器分析... 目的:分析常见种类食物中黄曲霉毒素的含量,为建立食品中黄曲霉毒素的限量指标提供数据,并为大众的健康饮食提供参考。方法:以黄曲霉毒素B1的平均含量为参考选择黄曲霉毒素含量较多的常见食物种类,使用高效液相色谱仪及荧光检测器分析食物中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的含量。结果:花生酱中含有的黄曲霉毒素最多,平均为2.41μg/kg;大米中黄曲霉毒素的含量次之,平均为0.15μg/kg;花生中黄曲霉毒素的平均含量为0.04μg/kg。结论:高效液相色谱法测定食物中黄曲霉毒素其重现性较好,而且可以一次分别测定出黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的含量,从结果看来尽管多数食品中均含有黄曲霉毒素,但是其含量均没有超过国家限量标准,其中花生酱中的黄曲霉毒素含量较高。这些数据均可以为大众的健康饮食提供参考。 展开更多
关键词 黄曲霉毒素 黄曲霉毒素B1 黄曲霉毒素B2 黄曲霉毒素g1 黄曲霉毒素G2 高效液相色谱仪
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Toll样受体4参与介导黄曲霉毒素G1对大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的致损伤作用 被引量:1
5
作者 杨红 陈成水 《实用医药杂志》 2012年第8期727-730,共4页
目的在基因水平上探讨Toll样受体4(TLR4)参与介导黄曲霉毒素G1(AFG1)对肺泡Ⅱ型上皮细胞的致损伤生物学效应,及其作用机制和途径。方法分离、纯化、培养大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞并配置3个不同浓度的AFG1液体。实验随机分为正常组、实验组... 目的在基因水平上探讨Toll样受体4(TLR4)参与介导黄曲霉毒素G1(AFG1)对肺泡Ⅱ型上皮细胞的致损伤生物学效应,及其作用机制和途径。方法分离、纯化、培养大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞并配置3个不同浓度的AFG1液体。实验随机分为正常组、实验组、溶剂对照组,每组6个样本。正常组加入同等量的无菌生理盐水;实验组加入不同浓度的AFG1液(高、中、低浓度分组),溶剂对照组加入同等量的二甲基亚砜(DMSO),终浓度为0.4 ml/L;同时处理24 h后在上述5组提取细胞mRNA,采用RT-PCR法检测各组TLR4 mRNA、NF-κBmRNA、TNF-αmRNA和IL-6mRNA的表达水平。结果正常组肺泡Ⅱ型上皮细胞上TLR4 mRNA、NF-κBmRNA、TNF-αmRNA和IL-6mRNA的表达量较低。实验组经AFG1液作用后,各项指标的表达量显著高于正常组(P<0.05)和溶剂对照组(P<0.05),且呈浓度依赖性增高。溶剂对照组各项指标的表达量与正常对照组相比,无显著性差异(P>0.05)。结论 TLR4→NF-κB→炎症介质信号转导通路参与AFG1对AT-Ⅱcells的损伤作用。 展开更多
关键词 肺泡Ⅱ型上皮细胞 肺损伤 黄曲霉毒素g1 TOLL样受体4 核因子(NF)-κB
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高效液相色谱-柱后衍生法测定食品中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2 被引量:7
6
作者 王志强 《河南预防医学杂志》 2018年第11期828-831,共4页
目的建立适用于基层实验室适用的高效液相色谱-柱后衍生法测定食品中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的检测方法。方法试样经乙腈—水提取,离心,取上清液过多功能净化柱,净化液用氮吹吹干,20%乙腈—水溶液定容,过0.22μm滤膜后进样,柱后碘溶液... 目的建立适用于基层实验室适用的高效液相色谱-柱后衍生法测定食品中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的检测方法。方法试样经乙腈—水提取,离心,取上清液过多功能净化柱,净化液用氮吹吹干,20%乙腈—水溶液定容,过0.22μm滤膜后进样,柱后碘溶液(0.05%)衍生,荧光检测器检测,外标法定量。结果在0.01 ng/mL~40 ng/mL时,线性关系良好,相关系数在0.999以上,加标回收率在85%~95%之间,相对标准偏差3.87%~5.00%。结论该方法能够准确可靠的测食品中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的含量,且灵敏度较高,0.05%碘溶液柱后衍生方法对仪器条件要求不高,方法操作简单,便于满足基层实验室对黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的测定。 展开更多
关键词 高效液相色谱 黄曲霉毒素B1、B2、g1、G2 柱后衍生
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薏苡仁中黄曲霉毒素G1的动态表面增强拉曼光谱检测 被引量:10
7
作者 任菲 于治国 陆峰 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期612-616,共5页
中药具有不良反应少,疗效独特等优点,越来越受到国内外的关注。但中药在生产、采集、加工、运输、贮藏等方面极易发生霉变而污染黄曲霉毒素。黄曲霉毒素具有很强的毒性,不仅影响中药质量和疗效还会对人体肝脏等器官造成极大损害。该文... 中药具有不良反应少,疗效独特等优点,越来越受到国内外的关注。但中药在生产、采集、加工、运输、贮藏等方面极易发生霉变而污染黄曲霉毒素。黄曲霉毒素具有很强的毒性,不仅影响中药质量和疗效还会对人体肝脏等器官造成极大损害。该文建立了中药材薏苡仁中黄曲霉毒素G1(Aflatoxin G1,AFG1)的动态表面增强拉曼光谱(Dynamic Surface-enhanced Raman Spectroscopy,D-SERS)的快速分析方法。采用简单擦拭法提取薏苡仁表面的黄曲霉毒素G1,因此SERS图谱中干扰峰较少。并且以金纳米颗粒为增强基底,优化了检测条件,进行了黄曲霉毒素G1的D-SERS的检测与分析。结果表明,方法的线性范围为8~320μg/kg,线性方程为y=0.0293x+1.7307,相关系数(r2)为0.9884。检出限(LOD)为5.5μg/kg,相对标准偏差(RSD)为11%。该方法的线性良好,灵敏度和重现性均能满足薏苡仁中黄曲霉毒素G1的快速检测要求,且操作简单、快速、节约成本,对中药材中黄曲霉毒素G1的现场实时快速分析具有良好的应用潜力。 展开更多
关键词 擦拭法 黄曲霉毒素g1 薏苡仁 动态表面增强拉曼光谱
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食品中的黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的超高效液相色谱—串联质谱检测 被引量:4
8
作者 蔡潼玲 林长虹 董超先 《广东化工》 CAS 2016年第7期192-194,共3页
建立用超高效液相色谱-串联质谱检测器测定食品中的黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的方法。样品中残留的黄曲霉毒素经过乙腈(乙腈∶水=84∶16)提取,取经过4000 r/min离心机离心过的上层清液,经装有反相离子交换吸附剂的多功能净化柱,去除脂... 建立用超高效液相色谱-串联质谱检测器测定食品中的黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的方法。样品中残留的黄曲霉毒素经过乙腈(乙腈∶水=84∶16)提取,取经过4000 r/min离心机离心过的上层清液,经装有反相离子交换吸附剂的多功能净化柱,去除脂肪、蛋白质、色素及碳水化合物等干扰物质,氮吹定容后上机至液相质谱联用仪,根据色谱图出峰时间及与之相应标物的特征离子对作对比,对黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2定性,再根据标准系列得出的标准曲线,换算出各黄曲霉毒素的含量。 展开更多
关键词 黄曲霉毒素B1、B2、g1、G2 超高效液相色谱-串联质谱
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免疫亲和净化HPLC柱后光化学衍生荧光法测定动物药中黄曲霉毒素 被引量:46
9
作者 刘丽娜 李耀磊 +1 位作者 金红宇 马双成 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期1220-1224,共5页
目的采用免疫亲和净化HPLC柱后光化学衍生荧光检测法测定动物药中黄曲霉毒素,考察该方法在动物药黄曲霉毒素测定中的可行性。并对动物药中黄曲霉毒素污染情况进行筛查,为动物药的监管提供依据。方法样品经有机溶剂提取、免疫亲和柱净化... 目的采用免疫亲和净化HPLC柱后光化学衍生荧光检测法测定动物药中黄曲霉毒素,考察该方法在动物药黄曲霉毒素测定中的可行性。并对动物药中黄曲霉毒素污染情况进行筛查,为动物药的监管提供依据。方法样品经有机溶剂提取、免疫亲和柱净化后,利用高效液相色谱-光化学衍生-荧光检测器进行分析测定。对部分动物药,尤其是可能污染黄曲霉毒素的动物药进行加样回收率考察,测定动物药中黄曲霉毒素残留量,并对测定结果进行分析。结果动物药中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的回收率均在70%~120%。16种64批动物药中有6种24批动物药检出了黄曲霉毒素,检出率为37.5%,其中4种13批动物药均出现了超过《中国药典》2015年版限度的现象,不合格率为20.3%。结论免疫亲和净化HPLC柱后光衍生荧光检测法适用于动物药中黄曲霉毒素的测定。动物药的个别品种黄曲霉毒素污染情况较为严重,应尽快完善动物药的质量标准,保障用药安全。 展开更多
关键词 黄曲霉毒素 免疫亲和柱 黄曲霉毒素B1 黄曲霉毒素B2 黄曲霉毒素g1 黄曲霉毒素G2 动物药 风险评估
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黄曲霉毒素G_1与β-环糊精及其衍生物超分子体系的荧光光谱研究 被引量:6
10
作者 马良 张敏 +2 位作者 张宇昊 胡媛媛 周瑶 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第12期143-148,共6页
研究β-环糊精及其衍生物对AFG1的超分子包合作用及反应体系荧光响应值的影响。经研究:AFG1-HE-β-CD二元包合物反应体系荧光响应值大幅提高,在溶剂为2%的甲醇溶液,HE-β-CD浓度0.05mol/L、反应时间3min时体系可以达到最大的荧光值。根... 研究β-环糊精及其衍生物对AFG1的超分子包合作用及反应体系荧光响应值的影响。经研究:AFG1-HE-β-CD二元包合物反应体系荧光响应值大幅提高,在溶剂为2%的甲醇溶液,HE-β-CD浓度0.05mol/L、反应时间3min时体系可以达到最大的荧光值。根据Benesi-Hildebrand法确定HE-β-CD与AFG1形成1:1包络物。紫外吸收光谱、荧光光谱、KI淬灭实验以及热力学参数表明,AFG1进入HE-β-CD空腔从而荧光得到保护。AFG1在2~40μg/kg范围内与体系荧光呈良好线性关系,相关系数为0.9998,检出限为0.079μg/kg。将HE-β-CD应用于花生样品AFG1分析,准确度和精密度良好。 展开更多
关键词 Β-环糊精 黄曲霉毒素g1 荧光增敏 超分子包络物
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HPLC-MS/MS法测定中药桃仁中黄曲霉毒素G_2、G_1、B_2、B_1 被引量:25
11
作者 王少敏 许勇 +3 位作者 毛丹 郑荣 王柯 季申 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期907-911,共5页
目的:建立中药桃仁中黄曲霉毒素G2、G1、B2、B1的HPLC-MS/MS测定方法。方法:样品经有机溶剂提取及免疫亲和柱净化后,以高效液相色谱-串联三重四极杆质谱进行分析测定。采用Phenomenex SB-C18(2.0 mm×50 mm,4μm)色谱柱,流动相... 目的:建立中药桃仁中黄曲霉毒素G2、G1、B2、B1的HPLC-MS/MS测定方法。方法:样品经有机溶剂提取及免疫亲和柱净化后,以高效液相色谱-串联三重四极杆质谱进行分析测定。采用Phenomenex SB-C18(2.0 mm×50 mm,4μm)色谱柱,流动相为甲醇-10 mmol.L-1醋酸铵溶液,梯度洗脱,流速0.5 mL·min^-1;质谱条件为电喷雾离子源(ESI源),正离子模式检测,扫描方式为多反应监测(MRM),黄曲霉毒素G2、G1、B2、B1的定量分析离子分别为m/z331.1→313.1、m/z329.1→243.1、m/z315.0→287.1、m/z313.1→241.0。结果:黄曲霉毒素G2、B2进样量在0.375-30 pg范围内与峰面积呈良好的线性关系,黄曲霉毒素G1、B1进样量在1.25-100 pg范围内与峰面积呈良好的线性关系,r〉0.999;回收率在88.5%-103.9%之间。结论:本法灵敏、快速、准确,专属性强,可用于中药桃仁中黄曲霉毒素的测定。 展开更多
关键词 黄曲霉毒素G2、g1、B2、B1 高效液相色谱-4质谱 桃仁 中药
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支气管内给予黄曲霉毒素G_1对大鼠肺组织的作用 被引量:3
12
作者 申海涛 张祥宏 +5 位作者 吕平 郝庆卯 王丽 邢凌霄 严霞 王俊灵 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期323-328,共6页
目的探讨一次性支气管内给予黄曲霉毒素G1(AFG1)对大鼠肺组织的影响。方法经支气管一次性给予30μg.kg-1AFG1处理雄性SD大鼠。AFG1处理1,3,7和14 d后,分别处死实验动物,以扫描电镜方法观察大鼠肺组织超微结构变化,采用原位杂交方法检测... 目的探讨一次性支气管内给予黄曲霉毒素G1(AFG1)对大鼠肺组织的影响。方法经支气管一次性给予30μg.kg-1AFG1处理雄性SD大鼠。AFG1处理1,3,7和14 d后,分别处死实验动物,以扫描电镜方法观察大鼠肺组织超微结构变化,采用原位杂交方法检测肺组织肿瘤坏死因子-α(TNFα-)mRNA表达情况,测定H2O2的降低量代表抗氧化能力。结果溶剂对照组肺组织超微结构、TNFα-mRNA表达和抗氧化能力和对照组比较未见明显改变。AFG1处理后,扫描电镜观察可见肺泡壁增厚且粗细不均,肺泡腔表面细胞有隆起,细胞肿胀,Ⅱ型肺泡上皮细胞表面微绒毛变短、消失,病变以AFG1处理后7和14 d为明显。原位杂交法结果表明,AFG1处理后1,3,7和14 d组肺组织肺泡细胞TNF-αmRNA表达的阳性细胞数分别为(22.1±4.0)%,(20.3±4.2)%,(32.3±4.2)%和(24.7±3.8)%,明显高于溶剂对照1 d组(1.2±0.3)%(n=5,P<0.01)。AFG1处理后除d 1外,d 3,7和14肺组织抗氧化能力分别为(53.4±12.4),(42.7±10.8)和(47.2±11.0)mo.lm in-1.g-1蛋白,明显低于溶剂对照1 d组(61.9±4.3)mo.lm in-1.g-1蛋白(n=5,P<0.05)。结论AFG1对大鼠肺组织有一定的损伤作用,降低肺组织抗氧化能力,上调肺泡细胞TNFα-mRNA的表达。 展开更多
关键词 黄曲霉毒素g1 肿瘤坏死因子-Α 上皮细胞 肺泡 活性氧
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黄曲霉毒素G_1对原代培养人食管鳞状上皮细胞HLA-Ⅰ分子表达影响的研究 被引量:2
13
作者 李增宁 崔晋峰 +1 位作者 张祥宏 王俊灵 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期50-52,56,共4页
目的探讨黄曲霉毒素G1(AFG1)对体外培养的人食管鳞状上皮细胞表面HLA-Ⅰ分子表达的影响。方法采用原代培养、免疫印迹(Western blot)和反转录聚合酶链反应(RT-PCR)分析方法研究不同浓度AFG1(50、100、1000和2000μg/L)处理后人食管鳞状... 目的探讨黄曲霉毒素G1(AFG1)对体外培养的人食管鳞状上皮细胞表面HLA-Ⅰ分子表达的影响。方法采用原代培养、免疫印迹(Western blot)和反转录聚合酶链反应(RT-PCR)分析方法研究不同浓度AFG1(50、100、1000和2000μg/L)处理后人食管鳞状上皮细胞表面HLA-Ⅰ分子表达的变化。结果免疫印迹结果表明,经不同浓度AFG1(50、100、1000、2000μg/L)处理细胞24h后,100、1000、2000μg/L AFG1处理组HLA-ABC的蛋白表达均明显低于溶剂对照组(P<0.05),而且在100~2000μg/L浓度范围内,人食管鳞状上皮细胞表面HLA-Ⅰ分子的表达逐渐降低,两者呈明显的负相关关系(r=-0.921,n=3,P<0.01)。RT-PCR检测在mRNA水平进一步证实了AFG1对HLA-ABC表达的影响。其中100、1000、2000μg/L AFG1处理细胞后,HLA-A mRNA的表达明显低于溶剂对照组(P<0.05);2000μg/L处理组HLA-B mRNA的表达较溶剂对照组降低(P<0.05);而各AFG1处理组HLA-C mRNA的表达没有明显影响。结论 AFG1处理可以抑制人食管鳞状上皮细胞表面HLA-Ⅰ分子的表达。 展开更多
关键词 黄曲霉毒素g1 人白细胞表面抗原-Ⅰ 人食管鳞状上皮细胞
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固相萃取-高效液相色谱/串联质谱检测谷物中黄曲霉毒素B_1、B_2、G_1、G_2和M_1 被引量:13
14
作者 王岩松 范世华 +3 位作者 李华锋 张凤清 贺明睿 崔相勇 《分析试验室》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期63-67,共5页
建立了高效液相色谱/串联质谱(LC-MS/MS)同时检测谷物中的黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2和M1的方法。并优化了液相色谱条件和质谱的相关参数。谷物样品经研磨成粉末后,直接经甲醇-水(V:V=10:90)提取,Oasis HLB固相萃取净化,乙腈-水(0.2%甲酸... 建立了高效液相色谱/串联质谱(LC-MS/MS)同时检测谷物中的黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2和M1的方法。并优化了液相色谱条件和质谱的相关参数。谷物样品经研磨成粉末后,直接经甲醇-水(V:V=10:90)提取,Oasis HLB固相萃取净化,乙腈-水(0.2%甲酸)梯度洗脱,选择电喷雾离子源(ESI),正离子扫描多反应监测(MRM)模式,外标法定量。黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2和M1的定量下限分别为0.1、0.1、0.2、0.3、0.2 ng/g,平均回收率在74.6%~89.6%之间,测试精密度(RSD)在5.2%~11.3%之间。方法已用于谷物样品检测,黄曲霉毒素残留量最高达到B1 5.86 ng/g、G1 8.6 ng/g、M1 4.0 ng/g,B2和G2未检出。 展开更多
关键词 高效液相色谱-串联质谱 固相萃取 黄曲霉毒素B1、B2、g1、G2、M1 谷物
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光化学衍生-高效液相色谱法测定粮谷类样品中黄曲霉毒素 被引量:10
15
作者 朱鹏飞 刘文卫 +3 位作者 凌霞 周闰 姚誉阳 孔令灿 《食品安全质量检测学报》 CAS 2016年第5期1798-1802,共5页
目的建立光化学衍生-高效液相色谱荧光法测定粮谷类样品中的黄曲霉毒素(AFT)含量。方法样品经Romer Labs免疫亲和柱净化,经SW-3光化学柱后衍生,经高效液相色谱分离和荧光检测器测定,分析其中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的含量。同时对... 目的建立光化学衍生-高效液相色谱荧光法测定粮谷类样品中的黄曲霉毒素(AFT)含量。方法样品经Romer Labs免疫亲和柱净化,经SW-3光化学柱后衍生,经高效液相色谱分离和荧光检测器测定,分析其中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的含量。同时对免疫亲和柱洗脱条件、流动相的洗脱程序进行了优化。结果在0.5~10 ng/mL(AFT B1,G1)和0.15~3.0 ng/mL(AFT B2,G2)线性范围内,所得回归方程的相关系数均大于0.999。黄曲霉毒素B1、G1方法检出限为0.15 ng/g,黄曲霉毒素B2、G2方法检出限为0.05 ng/g,加标回收率为89.5%~107%,精密度为1.4%~7.2%。采集粮谷类样品222件,其中有5件样品检出AFT,但均未超过国家限值标准。结论该方法灵敏度和准确度较高,可适用于粮谷类食品中黄曲霉毒素的检测。 展开更多
关键词 黄曲霉毒素B1、B2、g1、G2 粮谷 免疫亲和柱 光化学衍生 高效液相色谱法
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高效液相色谱-串联三重四极杆质谱分析法测定刀豆中黄曲霉毒素G_2、G_1、B_2、B_1 被引量:9
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作者 许勇 王少敏 +3 位作者 郑荣 毛丹 王柯 季申 《中国卫生检验杂志》 CAS 2011年第1期41-43,共3页
目的:建立刀豆中黄曲霉毒素G2、G1、B2、B1的测定方法。方法:样品经70%甲醇提取、HLB柱净化后,用高效液相色谱-串联质谱进行分析测定。结果:黄曲霉毒素G2、B2在0.75~30 pg范围内与峰面积呈良好的线性关系,黄曲霉毒素G1、B1在2.5 pg^100... 目的:建立刀豆中黄曲霉毒素G2、G1、B2、B1的测定方法。方法:样品经70%甲醇提取、HLB柱净化后,用高效液相色谱-串联质谱进行分析测定。结果:黄曲霉毒素G2、B2在0.75~30 pg范围内与峰面积呈良好的线性关系,黄曲霉毒素G1、B1在2.5 pg^100 pg范围内与峰面积呈良好的线性关系,r>0.999。回收率在66.9%~86.7%之间。结论:本法简便快速、结果准确、重现性好,可用于刀豆中黄曲霉毒素的测定。 展开更多
关键词 刀豆 黄曲霉毒素G2、g1、B2、B1 高效液相色谱-串联三重四极杆质谱
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黄曲霉毒素G_1与人血清白蛋白的结合机理及分子对接 被引量:1
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作者 钟红 王佳曼 +1 位作者 马良 江涛 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第5期86-91,共6页
在模拟人体血液p H 7.4的条件下,用分子对接及其荧光光谱、3D荧光、圆二色谱等方法研究黄曲霉毒素G1(aflatoxin G_1,AFG_1)与人血清白蛋白(human serum albumin,HSA)的相互作用。结果发现,根据双对数方程得出AFG1与HSA结合反应猝灭机制... 在模拟人体血液p H 7.4的条件下,用分子对接及其荧光光谱、3D荧光、圆二色谱等方法研究黄曲霉毒素G1(aflatoxin G_1,AFG_1)与人血清白蛋白(human serum albumin,HSA)的相互作用。结果发现,根据双对数方程得出AFG1与HSA结合反应猝灭机制为静态猝灭,4个温度条件下结合常数数量级均为104,结合位点数近似为1。通过分子对接和热力学参数计算,AFG1结合在HSA的ⅠB疏水腔中,二者结合力主要为疏水作用和氢键。通过研究体内金属离子对AFG1-HSA反应的影响,Fe^(3+)、Mg^(^(2+))能增大AFG1对HSA的亲和力,而Zn^(2+)、Cu^(2+)、Mn^(2+)离子则能大大降低AFG1与HSA的亲和力。基于F?rster’s能量转移,二者反应距离为3.26 nm。3D荧光结果显示,二者的结合反应使HSA生色团氨基酸残基疏水性增加,二级结构发生改变;圆二色谱结果表明,加入AFG1使得HSA的α-螺旋含量增加。 展开更多
关键词 黄曲霉毒素g1 人血清白蛋白 光谱 分子对接 结合反应
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支气管给予黄曲霉毒素G_1对大鼠肺组织CC-10表达的影响 被引量:1
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作者 申海涛 吕平 +4 位作者 张祥宏 邢欣 邢凌霄 严霞 王俊灵 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期631-635,共5页
目的:探讨1次性支气管给予黄曲霉毒素G1(AFG1)对大鼠肺组织CC-10表达的影响。方法:按30μg/kg剂量经支气管1次性给予雄性SD大鼠AFG1处理。处理1、3、7和14d后分别处死动物。收集肺泡灌洗液(BALF),采用生化法检测乳酸脱氢酶(LDH)活力。... 目的:探讨1次性支气管给予黄曲霉毒素G1(AFG1)对大鼠肺组织CC-10表达的影响。方法:按30μg/kg剂量经支气管1次性给予雄性SD大鼠AFG1处理。处理1、3、7和14d后分别处死动物。收集肺泡灌洗液(BALF),采用生化法检测乳酸脱氢酶(LDH)活力。采用流式细胞术(FCM)和蛋白免疫印迹(Western blotting)方法检测肺组织中CC-10蛋白的表达;采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测CC-10mRNA水平的表达。结果:给予AFG1作用后肺泡灌洗液中LDH活力升高(P<0.01),至14d时恢复到正常水平。FCM和蛋白免疫印迹方法检测CC-10蛋白结果发现AFG1作用3、7和14d,CC-10蛋白表达明显低于对照组(P<0.01,P<0.01),蛋白免疫印迹结果同FCM一致。AFG1作用3、7和14d大鼠肺组织CC-10 mRNA表达明显低于对照组(P<0.01)。结论:支气管1次性给予AFG1作用对大鼠肺组织具有明显的致损伤作用,降低CC-10蛋白和mRNA的表达水平。 展开更多
关键词 黄曲霉毒素g1 支气管肺泡灌洗液 CLARA细胞分泌蛋白
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检测中草药提取物中黄曲霉毒素的高灵敏方法 被引量:5
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作者 赵淑锐 徐艳霞 +1 位作者 徐菲 郜文 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2011年第3期379-383,共5页
目的建立中草药提取物中黄曲霉毒素B1,B2,G1,G2的高灵敏测定方法。方法样品经提取和过滤后用免疫亲和柱净化和衍生,然后采用不同比例(15%~30%)乙腈/水梯度洗脱,用具荧光检测器的高效液相色谱仪检测。结果检出限:黄曲霉素G1为0.09 ppb... 目的建立中草药提取物中黄曲霉毒素B1,B2,G1,G2的高灵敏测定方法。方法样品经提取和过滤后用免疫亲和柱净化和衍生,然后采用不同比例(15%~30%)乙腈/水梯度洗脱,用具荧光检测器的高效液相色谱仪检测。结果检出限:黄曲霉素G1为0.09 ppb;B2为0.02 ppb;B1为0.03 ppb;G2为0.04 ppb,均低于文献报道的检出限,样品加标回收率为90%~103.2%。结论该方法简单、快速、准确、灵敏度高,可用于中药中黄曲霉毒素含量的测定。 展开更多
关键词 高效液相色谱 柱前衍生 黄曲霉毒素B1 B2 g1 G2 中草药提取物
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香砂六君丸中的黄曲霉素B_1、B_2、G_1、G_2的含量测定及安全性评价 被引量:3
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作者 宋晓宁 张志勇 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期2252-2253,共2页
目的建立高效液相色谱法测定香砂六君丸中的黄曲霉素B1、B2、G1、G2的含量测定,并评价香砂六君丸中黄曲霉素安全性。方法采用C18柱,流动相为甲醇-水(45∶55),紫外光衍生,荧光检测器,激发波长为360nm,发射波长450nm,并对全国流通领域的... 目的建立高效液相色谱法测定香砂六君丸中的黄曲霉素B1、B2、G1、G2的含量测定,并评价香砂六君丸中黄曲霉素安全性。方法采用C18柱,流动相为甲醇-水(45∶55),紫外光衍生,荧光检测器,激发波长为360nm,发射波长450nm,并对全国流通领域的香砂六君丸中黄曲霉素B1、B2、G1、G2进行测定。结果建立的HPLC法,4种物质平均回收率92.6%、93.18%、92.99%、91.69%,RSD分别为:1.61%、1.72%、1.59%、1.31%,全国流通领域的香砂六君丸所含黄曲霉素的含量安全情况较好。结论该方法操作简便,结果稳定可靠,可作为该制剂的定量分析方法及安全评价。 展开更多
关键词 香砂六君丸 黄曲霉素B1、B2、g1、G2 含量测定
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