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题名乌头DNA的改良CTAB提取和ISSR检测
被引量：3
- 1
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作者
张岳峰
万里翔
徐敏
侯大斌
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机构
西南科技大学生命科学与工程学院药用植物研究室
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出处
《湖北农业科学》
北大核心
2008年第1期12-14,共3页
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基金
四川省农作物育种攻关课题(2006YZGG12-22)
绵阳市重点科技项目(06S041-05)
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文摘
采用改良的CTAB法与常规CTAB法对23种不同来源的乌头基因组进行提取,通过紫外、电泳、PCR-ISSR等检测方法进行比较。结果表明,改良的CTAB方法得到的DNA浓度和纯度较高,无蛋白质和多糖等杂质影响,并且可以很好地应用于ISSR分子标记分析。
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关键词
乌头
CTAB
DNA提取
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Keywords
aconitum carmichael
CTAB
DNA extraction
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分类号
S567.239
[农业科学—中草药栽培]
Q503
[生物学—生物化学]
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题名乌头基因组DNA提取与RAPD反应体系优化
被引量：6
- 2
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作者
侯大斌
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机构
西南科技大学生命科学与工程学院
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出处
《西南科技大学学报》
CAS
2005年第2期70-74,共5页
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基金
四川省应用基础基金项目(03JY029-037)四川省教育厅重点科技项目(2002A025)
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文摘
采用改进方法提取乌头基因组DNA,建立乌头RAPD分析的PCR反应体系,成功地进行了RAPD扩增,筛选出乌头RAPD的最佳方案为:25μl反应体系中包括dNTPs 0.06 mmol·L-1,引物0.2μmol.μL-1,模板DNA40 ng,Taq酶1U,Mg2+ 4 mmol·L-1,10×buffer缓冲液2.5μl,其余部分为无菌超纯水。PCR扩增循环为95℃3 min,38 ℃1 min,72 ℃2min 1次循环;94 ℃=1 min,38℃1 min,72 ℃2 min,45次循环,最后72℃延伸10 min。
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关键词
乌头
RAPD
基因组DNA
优化
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Keywords
aconitum carmichael Dexb. (Ranunculaceae)
RAPD( Random amplified polymorphic DNA)
genomic DNA
optimization
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分类号
Q521
[生物学—生物化学]
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题名乌头简单序列重复区间扩增条件的优化
- 3
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作者
张岳峰
万里翔
侯大斌
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机构
西南科技大学生命科学与工程学院
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出处
《时珍国医国药》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第9期2136-2138,共3页
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基金
四川省农作物育种攻关课题(No.2006YZGG12-22)
四川省绵阳市重点科技项目(No.06S041-05)
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文摘
目的保证乌头ISSR-PCR的稳定性、提高对乌头遗传多样性,亲缘关系分析、种质鉴定的可靠性。方法收集西南地区23个乌头材料,以Mg2+,dNTP,引物和聚合酶建立L9(34)正交设计,并同时考察模板和甲酰胺浓度及退火温度,建立适宜的ISSR-PCR体系。结果以Mg2+2.0 mmol/L、dNTP 0.25 mmol/L、引物0.3μmol/L、rTaq酶1U、模板1.5 ng/μl、甲酰胺2%及退火温度(Tm-3)℃的ISSR反应体系最优。结论实验建立的ISSR-PCR体系反应稳定,能用于乌头的ISSR分析。
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关键词
乌头
简单序列重复区间
优化
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Keywords
aconitum carmichael Dexb.
Inter- Simple Sequence Repeat
Optimization
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分类号
R284.1
[医药卫生—中药学]
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