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新种苦豆子无毛毛壳菌Achaetomium sophora HY17产槐定碱发酵条件优化
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作者 唐致云 王文凯 +1 位作者 刘冠兰 顾沛雯 《草业学报》 北大核心 2025年第10期151-163,共13页
本研究旨在从苦豆子内生真菌中筛选获得高产槐定碱的菌株,并对其进行分类鉴定和产碱发酵条件优化,提高碱产率,为发酵过程提供优良的菌种资源。以前期从苦豆子健康种子中分离的50株内生真菌为材料,采用生物碱沉淀法和酸性染料比色法初筛... 本研究旨在从苦豆子内生真菌中筛选获得高产槐定碱的菌株,并对其进行分类鉴定和产碱发酵条件优化,提高碱产率,为发酵过程提供优良的菌种资源。以前期从苦豆子健康种子中分离的50株内生真菌为材料,采用生物碱沉淀法和酸性染料比色法初筛,利用高效液相色谱法复筛得到高产槐定碱菌株,通过形态学和分子生物学确定其分类地位;通过单因素试验、Plackett-Burman试验、最陡爬坡试验和Box-Behnken design试验考察培养基成分(培养基种类、碳源和氮源)、发酵条件(培养天数和pH)、前体物质和诱导子对该菌株碱产率的影响,确定最佳产碱培养基、发酵条件和前体物质。结果表明,筛选获得一株高产槐定碱的菌株HY17,经鉴定为新种,命名为苦豆子无毛毛壳菌。Achaetomium sophora HY17菌株产槐定碱的最佳发酵参数为:在初始pH=6,碳源和氮源分别为玉米粉和干酪素的SDY液体培养基上培养8 d,添加L-赖氨酸、L-哌啶酸和苯丙氨酸浓度分别为1.044 g·L^(-1),0.081 g·L^(-1),1.995 g·L^(-1)时,碱产率达到最大,为1.369 mg·g^(-1)。与对照相比,优化后碱产率提高了61.95%。A.sophora HY17菌株能够稳定高产槐定碱,这为通过微生物发酵生产槐定碱提供了一种新方法。 展开更多
关键词 苦豆子无毛毛壳菌achaetomium sophora HY17 筛选鉴定 槐定碱 发酵条件优化 响应面法分析
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Achaetomium sp.Xz8甘露聚糖酶在毕赤酵母中的表达及其酶学性质分析 被引量:7
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作者 李文革 石鹏君 +3 位作者 卢海强 姚斌 张祺玲 戴良英 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期87-94,共8页
甘露聚糖酶作为最主要的半纤维素酶类现已被广泛地应用在饲料、造纸、洗涤剂、食品及石油开采等领域。本研究从高温真菌Achaetomium sp.Xz8菌株中利用兼并引物和Thermal asymmetric interlaced PCR(Tail-PCR)的方法克隆获得一个新的... 甘露聚糖酶作为最主要的半纤维素酶类现已被广泛地应用在饲料、造纸、洗涤剂、食品及石油开采等领域。本研究从高温真菌Achaetomium sp.Xz8菌株中利用兼并引物和Thermal asymmetric interlaced PCR(Tail-PCR)的方法克隆获得一个新的糖苷水解酶5家族的甘露聚糖酶基因(man5Xz8)。基因全长1 239bp,序列分析发现其编码412个氨基酸和1个终止密码子,预测的信号肽序列为N端的20个氨基酸。将成熟蛋白序列克隆到毕赤酵母分泌型表达载体p PIC9中,利用甲醇诱导重组酵母菌表达目的蛋白,经SDS-PAGE电泳分析,表达蛋白分子量约55.0 k Da。对其酶学性质进行测定,Man5Xz8的最适p H值为5.0,在p H值9.0可以保持40%以上的酶活性,在p H值5.0~9.0具有良好的p H稳定性。最适作用温度为50℃,并对SDS具有较高的耐受性。以角豆胶为底物,Man5Xz8的比活、Km及Vmax值分别为101.6 U·mg-1、4.4 mg·m L-1、128.2μmol·min-1·mg-1。因此,Man5Xz8为后期研究甘露聚糖酶的工业应用和酸碱催化机制提供了良好的材料。 展开更多
关键词 achaetomium sp.Xz8 甘露聚糖酶 克隆 毕赤酵母 酶学性质
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Antioxidant and hepatoprotective potentials of novel endophytic fungus Achaetomium sp.,from Euphorbia hirta 被引量:1
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作者 KPG Uma Anitha S.Mythili 《Asian Pacific Journal of Tropical Medicine》 SCIE CAS 2017年第6期658-663,共6页
Objective: To isolate, identify and evaluate the antioxidant, antimicrobial, hepatoprotective potentials, total phenolic content, flavonoid content, tannin content of ethyl acetate extract of endophytic fungus Achaeto... Objective: To isolate, identify and evaluate the antioxidant, antimicrobial, hepatoprotective potentials, total phenolic content, flavonoid content, tannin content of ethyl acetate extract of endophytic fungus Achaetomium sp., isolated from Euphorbia hirta. Methods: Hepatoprotectivity of ethyl acetate extract of Achaetomium sp., was evaluated by CCl4 induced toxicity in Hep G2 cells and subsequently analyzed for cell viability using MTT assay. It also demonstrates antioxidant and antimicrobial potentials by DPPH radical scavenging assay and well diffusion assay respectively. Quantification of total phenolic content, tannin content and flavonoid content were assessed by spectroscopic methods. Results: Phenols, flavonoids and tannins were the phytochemicals present in ethyl acetate extract of Achaetomium sp., with rich phenolic content exhibited potent hepatoprotective, antimicrobial and antioxidant activities. The hepatoprotective activity was recorded as of 72.13%±2.948% of cell viability at a concentration of 150 μg/m L, whereas the standard silymarin showed 93.260%±0.784%. It was observed to be dose dependent, when CCl4 exposed Hep G2 cells were treated with different concentrations of ethyl acetate extract. Antibacterial activity showed significant inhibition against Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeroginosa, and Klebsiella pneumonia. The antioxidant activity ranged from 66.890%±1.385% to 87.340%±0.289% with(44.02±1.57) μg of total phenolics,(54.54±1.82) μg of flavonoid content and(18.790±1.018) μg of tannin content. Ascorbic acid, BHT(butylated hydroxyl toluene) Gallic acid and Pyrogallol were used as standards which showed 98.370%±0.763%; 97.080%±0.636%; 94.890%±1.103% and 96.980%±0.098% reducing potential respectively. Conclusions: The results reveal that the metabolites produced by endophytic fungi isolated from Euphorbia hirta could be novel natural products that could lead to new drug discovery. 展开更多
关键词 Euphorbia hirta ENDOPHYTIC achaetomium HEPATOPROTECTIVE ANTIOXIDANT ANTIMICROBIAL
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Achaetomium sp.Xz8来源的甘露聚糖酶Man5Xz8热稳定性的研究
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作者 刘赟 卢海强 +1 位作者 石鹏君 谢响明 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期49-55,91,共8页
嗜热真菌Achaetomium sp.Xz8来源的甘露聚糖酶Man5Xz8和Humicola sp.Y1来源的嗜热甘露聚糖酶Man5A氨基酸序列一致性高达90.0%,然而两者的酶学性质尤其是最适温度和热稳定性却存在着很大的不同。Man5Xz8的最适温度为50℃,仅在30℃下保持... 嗜热真菌Achaetomium sp.Xz8来源的甘露聚糖酶Man5Xz8和Humicola sp.Y1来源的嗜热甘露聚糖酶Man5A氨基酸序列一致性高达90.0%,然而两者的酶学性质尤其是最适温度和热稳定性却存在着很大的不同。Man5Xz8的最适温度为50℃,仅在30℃下保持稳定,而Man5A最适温度为70℃,且在50℃下具有良好的热稳定性。为研究不同区域关键氨基酸位点对甘露聚糖酶热稳定性的影响,以Man5Xz8为研究材料,通过生物信息学方法分析,分别构建了单点突变体V124I及△SG。实验结果表明,突变体V124I及△SG和原酶Man5Xz8具有相似的最适p H和最适温度,但在热稳定性方面较原酶有很大提高:在50℃下处理10 min后,突变体V124I的相对剩余酶活力较原酶Man5Xz8提高了26.9%,突变体△SG在50℃下处理1 h保持稳定。通过对甘露聚糖酶不同区域氨基酸位点的研究,发现了与酶热稳定性相关的关键结构区域及位点,为以后更好的研究第5家族的甘露聚糖酶提供了一定的理论指导。 展开更多
关键词 甘露聚糖酶 嗜热微生物 achaetomium sp. 热稳定性 生物信息学
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