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菠萝酵母双杂交文库构建及AcETR2a互作蛋白的筛选
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作者 王燕莹 温雨兴 李运合 《植物生理学报》 北大核心 2025年第7期1019-1031,共13页
乙烯广泛应用于菠萝催花来调节产期,但其诱导开花的分子机理尚不清楚,前期研究发现菠萝乙烯受体基因Ananas comosus ethylene response 2(AcETR2a)在菠萝开花过程中起着重要作用。为了进一步筛选AcETR2a的互作蛋白,本研究构建了菠萝花... 乙烯广泛应用于菠萝催花来调节产期,但其诱导开花的分子机理尚不清楚,前期研究发现菠萝乙烯受体基因Ananas comosus ethylene response 2(AcETR2a)在菠萝开花过程中起着重要作用。为了进一步筛选AcETR2a的互作蛋白,本研究构建了菠萝花芽分化的cDNA文库,以AcETR2a为诱饵蛋白,利用酵母双杂交系统对其互作蛋白进行筛选和分析,并对部分候选蛋白进行点对点验证。结果筛选到了60个阳性克隆,经测序鉴定出46个与AcETR2a互作的候选蛋白;GO和KEGG富集结果表明,候选蛋白主要参与细胞进程、代谢过程、生物调控等生物过程,并涉及核苷酸代谢、氨基酸代谢、碳水化合物代谢、信号转导及运输等通路。酵母双杂交点对点验证结果表明,AcETR2a与转录因子AcABI4、木葡聚糖内糖基转移酶/水解酶AcXTH9之间存在强互作。研究结果为揭示AcETR2a的蛋白互作关系网提供了参考依据。 展开更多
关键词 菠萝 acetr2a 酵母双杂交 蛋白互作
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