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小麦高分子量谷蛋白亚基1Ax2`的AS-PCR鉴定 被引量：5
1
作者 孙宪印 吴科 +3 位作者 钱兆国 卫宪云 米勇 李斯深 《麦类作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期75-77,共3页
为了从DNA水平上快速鉴定Glu-A1位点编码的1Ax2*优质亚基,建立了稳定的检测1Ax2*优质亚基基因的PCR扩增体系。通过该体系,1Ax2*优质亚基基因扩增出2652bp特异片段,而其他亚基基因则不能扩增出该片段。验证材料的PCR鉴定结果与SDS-PAGE... 为了从DNA水平上快速鉴定Glu-A1位点编码的1Ax2*优质亚基,建立了稳定的检测1Ax2*优质亚基基因的PCR扩增体系。通过该体系,1Ax2*优质亚基基因扩增出2652bp特异片段,而其他亚基基因则不能扩增出该片段。验证材料的PCR鉴定结果与SDS-PAGE电泳结果一致,表明利用该体系鉴定1Ax2*亚基是可行的。利用此体系鉴定了44份外引小麦品种(系)的谷蛋白Glu-A1位点,有24个品种(系)含有1Ax2*亚基,1Ax2*亚基出现频率为54.5%。 展开更多
关键词 小麦 1ax2^＊ 等位基因特异性PCR
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高效可回收AX2型Fe3O4-mSiO2-Au纳米复合催化剂的制备及其性能 被引量：1
2
作者 王志强 韩伟昌 +3 位作者 张成宇 祝强韬 戚栋明 孙阳艺 《浙江理工大学学报（自然科学版）》 2020年第6期797-805,共9页
为制备一种催化性能优良的磁性介孔二氧化硅载Au复合催化剂,采用溶胶-凝胶法,利用硅源前驱体在Fe3O4种子粒子上的异相成核与生长,制备了一种AX2型胶体分子结构的Fe3O4-mSiO2载体材料,并继续负载Au后得到复合催化剂。通过TEM、BET、FI-IR... 为制备一种催化性能优良的磁性介孔二氧化硅载Au复合催化剂,采用溶胶-凝胶法,利用硅源前驱体在Fe3O4种子粒子上的异相成核与生长,制备了一种AX2型胶体分子结构的Fe3O4-mSiO2载体材料,并继续负载Au后得到复合催化剂。通过TEM、BET、FI-IR、XRD对所得复合催化剂的形貌和结构组成进行表征和分析。结果表明:通过调控氨水的用量,可得到AX2型Fe3O4-mSiO2载体材料,其具有大的比表面积和良好的介孔孔道结构,可均匀负载Au NPs得到复合催化剂。在还原剂NaBH4存在下,将该复合催化剂用于催化罗丹明B(RhB)、4-硝基苯酚(4-NP)的还原反应,表现出良好的催化活性(5 min内将RhB分子100%转换为leuco分子形式)、有效的循环利用性(高达7次)和高稳定性,且RhB和4-NP的催化一级动力学常数分别为0.67 min^-1和0.32 min^-1。复合催化剂表面上均匀稳定分布有Au NPs,其存在的介孔孔道结构可将吸附的RhB、4-NP分子更好的与Au NPs活性位点接触,促进电子转移,从而提高了还原反应速率。该研究为设计新型高比表面积可回收催化剂载体材料提供了一种有效途径。 展开更多
关键词 ax2型胶体分子 磁性 介孔氧化硅 Au纳米粒子(Au NPs) 催化剂
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解题后回味思索函数y=kx+h+p（ax2+bx+c）1/2的图像特点
3
作者 甘大旺 《中学数学研究》 2017年第5期15-16,共2页
2015年清华大学领军计划自主招生的数学试卷由30道选择题构成,每题提供4个选项而正确答案不一定唯一选取,其中的第27题是：引例设非负实数x、y满足2x＋y=1,则x＋（x^2＋y^2）^（1/2）的（ ）（A）最小值为4/5（B）最小值为2/5.
关键词 函数式 非负实数 ax2+bx+c y=kx+h+p 曲线段 合情推理 领军 已知函数 平行直线 直角坐标系
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AurkC调控DNA损伤修复蛋白表达对非小细胞肺癌吉非替尼获得性耐药的机制
4
作者 莫建梅 黄少远 朱峰 《中国药理学通报》 北大核心 2026年第2期304-311,共8页
目的探索AurkC在非小细胞肺癌(non-small-cell lung cancer,NSCLC)细胞中对吉非替尼耐药的作用机制。方法体外培养人肺癌HCC827和吉非替尼耐药HCC827GR细胞,MTT法检测细胞增殖,耐药细胞模型中检测AurkC的蛋白表达水平。构建AurkC过表达... 目的探索AurkC在非小细胞肺癌(non-small-cell lung cancer,NSCLC)细胞中对吉非替尼耐药的作用机制。方法体外培养人肺癌HCC827和吉非替尼耐药HCC827GR细胞,MTT法检测细胞增殖,耐药细胞模型中检测AurkC的蛋白表达水平。构建AurkC过表达细胞系,Western blot和免疫荧光染色法检测细胞核中γ-H2AX(S139)的蛋白表达水平和核内DNA损伤灶点。彗星实验评估DNA损伤程度,West-ern blot检测DNA损伤修复相关蛋白表达。结果半抑制浓度(IC50)及耐药指数(RI)结果显示,HCC827的IC50值为(0.004±0.001)μm·L^(-1),HCC827GR的IC50为(14.630±5.348)μm·L^(-1),RI为3402.326,表明其对吉非替尼高度耐受;Western blot结果显示,AurkC的表达水平在耐药细胞株中远远高于敏感细胞株(P<0.01)。与阴性对照组加吉非替尼刺激后相比,过表达组细胞经吉非替尼刺激后,γ-H2AX蛋白表达水平明显降低(P<0.01),细胞核内DNA损伤灶点明显减少(P<0.01),细胞橄榄尾距明显降低(P<0.01),与DNA损伤修复功能相关分子TP53BP1、ATR、p-ATR、ATM、p-ATM和MRE11、BRCA1、p-BRCA1的表达水平均明显下调(P<0.01)。结论AurkC通过抑制DNA损伤修复相关蛋白表达促进NSCLC对吉非替尼的耐药。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 吉非替尼 耐药机制 AurkC Γ-H2AX DNA损伤修复
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脉管畸形儿童患者介入术后外周血遗传物质损伤分析
5
作者 石越龙 庞英 +4 位作者 郭占春 马娅 陈英民 王小山 陈睿 《中国辐射卫生》 2025年第2期149-154,173,共7页
目的 观察脉管畸形儿童患者介入术后外周血遗传物质的变化情况。方法 选取2021年2月—2024年1月在山东某儿童医院完成介入术的108例脉管畸形患儿为研究对象,收集患儿的临床资料和介入术前后外周静脉血样本,应用γ-H2AX和外周血淋巴细胞... 目的 观察脉管畸形儿童患者介入术后外周血遗传物质的变化情况。方法 选取2021年2月—2024年1月在山东某儿童医院完成介入术的108例脉管畸形患儿为研究对象,收集患儿的临床资料和介入术前后外周静脉血样本,应用γ-H2AX和外周血淋巴细胞染色体畸变(chromosomal aberration,CA)2种生物学指标,检测脉管畸形患儿介入术前后的外周血遗传物质损伤水平。结果 患儿年龄中位数为7岁,体重中位数为27 kg,剂量面积乘积(Dose area product,DAP)中位数为24.20 Gy·cm^(2),DAP/kg中位数为1.04 Gy·cm^(2)/kg。脉管畸形患儿介入术后γ-H2AX和CA率均显著升高(Z=5.924,P <0.001;Z=8.515,P <0.001)。7例患儿术后CA率显著高于其他患儿,接近或超过4%。DAP/kg≥1 Gy·cm^(2)/kg患儿的术后γ-H2AX焦点率和CA率显著高于DAP/kg <1 Gy·cm^(2)/kg的患儿(U=7.586,P=0.031;U=6.835,P=0.009),不同年龄、体重、手术部位亚组中,术后γ-H2AX焦点率和CA率无显著性差异,介入术前后γ-H2AX焦点率差值与DAP/kg呈正相关趋势(R=0.493,P=0.027)。结论 介入术中电离辐射可致脉管畸形患儿外周血遗传物质损伤水平升高,并表现出一定的剂量相关性,部分患儿异常敏感。需要进一步的研究探寻脉管畸形患儿介入术后遗传物质损伤的影响因素,这对于降低患儿远后期癌症风险,实现个性化诊疗具有重要意义。 展开更多
关键词 脉管畸形 介入手术 Γ-H2AX 染色体畸变
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中波紫外线辐射对人角膜上皮细胞和兔角膜损伤效应的研究
6
作者 崔名慧 于豪冰 +4 位作者 朱燊 王心园 王杨凯 刘小宇 胡波 《实用临床医药杂志》 2025年第12期19-25,共7页
目的 比较不同剂量中波紫外线(UVB)辐射后人角膜上皮(HCET)细胞和兔角膜的生物学指标变化,以评估UVB辐射对角膜损伤效应的影响。方法 在细胞实验中,将HCET细胞按照辐射剂量分为0、6、12、18、24 mJ/cm^(2)组。通过CCK-8检测UVB辐射对HCE... 目的 比较不同剂量中波紫外线(UVB)辐射后人角膜上皮(HCET)细胞和兔角膜的生物学指标变化,以评估UVB辐射对角膜损伤效应的影响。方法 在细胞实验中,将HCET细胞按照辐射剂量分为0、6、12、18、24 mJ/cm^(2)组。通过CCK-8检测UVB辐射对HCET细胞活力的影响,采用免疫荧光检测细胞内DNA损伤水平。在动物实验中,将15只健康新西兰白兔(30眼)按照辐射剂量随机分为0、1.35、2.16、4.32、6.48 J/cm^(2)组,辐射组UVB暴露时间为30 min/d,持续3 d。采用裂隙灯显微镜检查、荧光素钠染色、中央角膜厚度检测、光学相干断层扫描(OCT)成像、苏木素-伊红(HE)染色等方法评估角膜损伤情况。结果 与对照组相比,辐射组随着辐射剂量的增加,细胞活力逐渐下降,DNA损伤水平逐渐升高。辐射组随辐射剂量的升高,兔角膜混浊程度逐渐加重,中央角膜区逐渐增厚,OCT呈现高强度散射光信号并形成阴影区域。HE染色、免疫组化、蛋白免疫印迹(WB)及荧光素钠染色结果显示,1.35 J/cm^(2)组对角膜造成轻微损伤,损伤到达角膜上皮层;2.16 J/cm^(2)组角膜呈密集点状分布,损伤由上皮层到达基质浅层,促红细胞生成素肝细胞受体A2(EphA2)蛋白着染细胞数量较少,颜色较浅,结果呈弱阳性;4.32 J/cm^(2)组和6.48 J/cm^(2)组角膜呈不可逆损伤,损伤由角膜上皮层、基质浅层逐渐深入到内皮层,EphA2蛋白着染细胞数量较多,颜色较深,结果为强阳性。结论 本研究通过细胞和动物实验综合评估了UVB对HCET细胞和新西兰白兔角膜的剂量依赖性损伤效应,阐明了UVB辐射可通过上调γ-磷酸化组蛋白H2AX(γH2AX)和EphA2诱导角膜细胞DNA损伤、促进炎症反应和引发细胞凋亡,初步探究角膜损伤自我修复能力和过程,为进一步研究紫外线辐射致角膜损伤机制和防护药物提供依据。 展开更多
关键词 中波紫外线 眼角膜损伤 角膜上皮细胞 氧化应激 线粒体损伤 DNA损伤 促红细胞生成素肝细胞受体A2 γ-磷酸化组蛋白H2AX
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三元层状材料M_2AX的研究进展 被引量：12
7
作者 田无边 王佩玲 +2 位作者 张国军 阚艳梅 李永祥 《无机材料学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2007年第5期783-790,共8页
三元层状陶瓷材料(M_(n+1)AX_n)因其具有独特的力学、热学和电学性能而备受关注.本文综述其中的一个分支-M_2AX相在计算材料学方面的最新结果,并归纳块材的力学性能和抗氧化性能的研究结果,文中还简述了该材料的热学和电学性能,并展望了... 三元层状陶瓷材料(M_(n+1)AX_n)因其具有独特的力学、热学和电学性能而备受关注.本文综述其中的一个分支-M_2AX相在计算材料学方面的最新结果,并归纳块材的力学性能和抗氧化性能的研究结果,文中还简述了该材料的热学和电学性能,并展望了M_2AX系列材料的应用前景. 展开更多
关键词 M2AX 电子结构 制备 性能
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X射线辐照诱导人神经胶质瘤细胞DNA双链损伤研究 被引量：8
8
作者 裴淑艳 赵晋 +4 位作者 马影 张丹 聂聪 王丽丽 郭忠 《辐射研究与辐射工艺学报》 CAS CSCD 2017年第4期21-28,共8页
采用免疫荧光染色法检测X射线诱导M059K细胞磷酸化组蛋白H2AX(γH2AX)和磷酸化的毛细血管扩张性共济失调症突变基因(pATM)焦点的形成;流式细胞仪分析M059K细胞γH2AX和pATM表达的周期依赖性。免疫荧光染色检测结果显示,γH2AX和pATM焦... 采用免疫荧光染色法检测X射线诱导M059K细胞磷酸化组蛋白H2AX(γH2AX)和磷酸化的毛细血管扩张性共济失调症突变基因(pATM)焦点的形成;流式细胞仪分析M059K细胞γH2AX和pATM表达的周期依赖性。免疫荧光染色检测结果显示,γH2AX和pATM焦点阳性细胞分别以照射后0.5、4 h表达最高,照射后24h,高剂量组焦点阳性细胞达100%。流式细胞仪分析结果显示,γH2AX和pATM的表达具有细胞周期依赖性。照射后0.5、4 h,γH2AX和pATM在细胞各期的表达均明显增加,并以G0/G1期为著;照射后24 h,γH2AX和pATM在G0/G1和S期表达降低,而G2/M期细胞表达明显增加。细胞呈现明显的G2/M期阻滞。结果提示,γH2AX和ATM信号通路参与X射线诱导的M059K细胞DNA双链断裂。 展开更多
关键词 X射线辐照 M059K细胞 DNA双链损伤 γH2AX pATM
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五子衍宗方对环磷酰胺致成年雄性小鼠睾丸生殖细胞DNA损伤及P53通路的影响 被引量：6
9
作者 刘静 张长城 +3 位作者 宋来新 黄威峰 袁丁 赵海霞 《中药材》 CAS 北大核心 2017年第1期183-187,共5页
目的:探讨五子衍宗方对环磷酰胺(Cyclophosphamide,CTX)致成年雄性小鼠睾丸生殖细胞DNA损伤及P53通路的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:将雄性BALB/c小鼠随机分为正常对照组、模型组及五子衍宗方低、高剂量组,五子衍宗方低、高剂量... 目的:探讨五子衍宗方对环磷酰胺(Cyclophosphamide,CTX)致成年雄性小鼠睾丸生殖细胞DNA损伤及P53通路的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:将雄性BALB/c小鼠随机分为正常对照组、模型组及五子衍宗方低、高剂量组,五子衍宗方低、高剂量组分别提前灌胃给予五子衍宗方140、280 mg/kg,其余各组灌胃给予生理盐水。从第3天开始,除正常对照组腹腔注射生理盐水外,其余各组注射CTX 50 mg/kg,隔2 d注射1次,连续10次。参照精液分析方法检测小鼠精子浓度、精子形态正常率、精子活率;单细胞凝胶电泳观察小鼠睾丸细胞DNA损伤的变化;免疫组化检测小鼠睾丸DNA损伤蛋白γ-H2AX的定位与表达变化;Western blot检测小鼠睾丸生殖细胞内DNA损伤相关蛋白γ-H2AX、Ku70及DNA损伤修复相关蛋白p-P53、P21核内表达水平。结果:与模型组比较,五子衍宗方低、高剂量均可显著升高模型组小鼠精子浓度、精子形态正常率及精子活率,显著降低彗星尾长、尾距、Olive尾矩和尾部DNA百分率及睾丸组织中γ-H2AX的阳性点数。Western blot结果表明,与模型组比较,五子衍宗方可显著降低睾丸生殖细胞核内DNA损伤相关蛋白γ-H2AX、Ku70及DNA损伤修复相关蛋白p-P53、P21的表达。结论:五子衍宗方能显著减轻CTX致小鼠睾丸生殖细胞DNA损伤,其机制可能与调控P53信号通路有关。 展开更多
关键词 五子衍宗方 环磷酰胺 DNA损伤 Γ-H2AX P53
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用流式细胞术检测γ射线诱发淋巴细胞γ-H2AX与照射剂量的关系 被引量：7
10
作者 胡海亮 王治东 +3 位作者 张学清 陈茂胜 薛绍礼 陈英 《辐射研究与辐射工艺学报》 CAS CSCD 2012年第2期120-124,共5页
本研究使用流式细胞术检测了外周血淋巴细胞γ-H2AX表达水平,探讨了该方法用于辐射生物剂量估算的可能性。采集健康人外周血,进行体外60Coγ射线照射,利用γ-H2AX特异性抗体对淋巴细胞进行间接免疫荧光标记,采用流式细胞仪分析淋巴细胞... 本研究使用流式细胞术检测了外周血淋巴细胞γ-H2AX表达水平,探讨了该方法用于辐射生物剂量估算的可能性。采集健康人外周血,进行体外60Coγ射线照射,利用γ-H2AX特异性抗体对淋巴细胞进行间接免疫荧光标记,采用流式细胞仪分析淋巴细胞中γ-H2AX的几何平均荧光强度值,并计算出相对荧光强度;比较了仪器类型和参数设定对上述两项指标的影响,以上述两项指标分别建立照射后30 min的剂量-效应曲线并进行对比。结果显示:参数设定和仪器类型均明显影响60Coγ射线照射后γ-H2AX几何平均荧光强度,而对相对荧光强度无显著影响。因此,用流式细胞仪分析γ-H2AX的相对荧光强度,较好地解决了实验的稳定性和重复性问题,有望成为一种估算辐射生物剂量的新方法。 展开更多
关键词 流式细胞术 Γ射线 Γ-H2AX 剂量效应关系
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氧氟沙星对锦鲤抗氧化系统和DNA损伤的影响 被引量：7
11
作者 沈洪艳 王冰 +2 位作者 赵月 曹志会 武彤 《环境科学与技术》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期59-66,共8页
由于抗生素对人体健康和生态环境潜在的威胁,其大量使用已引起人们广泛关注。该研究通过毒性暴露试验,研究了氟喹诺酮类抗生素氧氟沙星(OFLX)对锦鲤抗氧化酶活性和DNA损伤的影响。结果表明,随着暴露浓度和时间的增加,OFLX对锦鲤鱼肝SOD... 由于抗生素对人体健康和生态环境潜在的威胁,其大量使用已引起人们广泛关注。该研究通过毒性暴露试验,研究了氟喹诺酮类抗生素氧氟沙星(OFLX)对锦鲤抗氧化酶活性和DNA损伤的影响。结果表明,随着暴露浓度和时间的增加,OFLX对锦鲤鱼肝SOD活性、MDA和GST含量呈现显著的诱导效应。当OFLX浓度200 mg/L,暴露13 d时,锦鲤肝脏各项抗氧化酶活性指标均出现显著降低,表明OFLX对锦鲤的抗氧化系统的累积毒性超出了鱼体的自身调节能力,导致鱼体的抗氧化系统的损伤。鱼鳃组蛋白H2AX(γ-H2AX)磷酸化结果表明,OFLX可造成鱼体DNA损伤,诱导鱼鳃γ-H2AX产生和簇集,且呈现明显的剂量-效应关系。OFLX浓度200 mg/L,暴露4 d时鱼鳃γ-H2AX浓度达到最大值(110.49 ng/L)。随着暴露时间继续增加,各浓度组γ-H2AX含量均有所下降,表明OFLX可能导致造成DNA双链的断裂,导致γ-H2AX浓度下降。该结果为评估OFLX对锦鲤的抗氧化系统和DNA毒性影响提供了较为可靠的依据。 展开更多
关键词 氧氟沙星 毒性效应 锦鲤鱼 氧化损伤 DNA双键断裂 Γ-H2AX
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五子衍宗方对环磷酰胺致小鼠睾丸细胞DNA损伤的影响 被引量：7
12
作者 赵海霞 黄威峰 +3 位作者 宋来新 刘静 彭奔 张长城 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期466-470,共5页
目的探讨五子衍宗方(枸杞子、菟丝子、覆盆子、车前子、五味子)对环磷酰胺致成年雄性小鼠睾丸细胞DNA损伤的影响。方法将50只成年雄性Balb/C小鼠中40只腹腔注射环磷酰胺后随机均分为模型对照组(生理盐水)以及五子衍宗方低、中、高剂量组... 目的探讨五子衍宗方(枸杞子、菟丝子、覆盆子、车前子、五味子)对环磷酰胺致成年雄性小鼠睾丸细胞DNA损伤的影响。方法将50只成年雄性Balb/C小鼠中40只腹腔注射环磷酰胺后随机均分为模型对照组(生理盐水)以及五子衍宗方低、中、高剂量组(100、200、400 mg/kg),10只另设正常对照组(生理盐水),乙醚麻醉小鼠后颈椎脱臼处死。检测小鼠精子数量、精子活率及精子畸形率,酶联免疫吸附测定法(ELISA)法检测血清中8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)的含有量,单细胞凝胶电泳技术检测睾丸细胞DNA损伤程度,Western blot检测睾丸组织中磷酸化的肿瘤抑制蛋白53(p-P53)、γ位磷酸化的组蛋白(γ-H2AX)蛋白表达。结果相较于模型对照组,五子衍宗方各组可显著升高小鼠精子数量、精子活率,显著降低精子畸形率、血清8-OHdG水平,显著降低睾丸组织中p-P53与γ-H2AX蛋白表达。结论五子衍宗方能通过下调p-P53、γ-H2AX蛋白表达来显著减轻环磷酰胺致小鼠睾丸细胞DNA损伤。 展开更多
关键词 五子衍宗方 环磷酰胺 8-OHDG DNA损伤 Γ-H2AX
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2-乙酰氨基芴诱导γH2AX焦点的形成 被引量：7
13
作者 刁汇玲 周春仙 +1 位作者 余艳柯 杨军 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期131-137,共7页
目的探讨DNA损伤剂2-乙酰氨基芴(2-AAF)是否可诱导γH2AX焦点的形成及γH2AX作为检测DNA损伤的一个新的特异指标的可能性。方法用2-AAF处理中国仓鼠CHL细胞,应用免疫荧光方法检测γH2AX焦点的形成,并通过中性彗星实验验证DNA损伤的程度... 目的探讨DNA损伤剂2-乙酰氨基芴(2-AAF)是否可诱导γH2AX焦点的形成及γH2AX作为检测DNA损伤的一个新的特异指标的可能性。方法用2-AAF处理中国仓鼠CHL细胞,应用免疫荧光方法检测γH2AX焦点的形成,并通过中性彗星实验验证DNA损伤的程度。结果0.1,1,5和20mg·L-1的2-AAF都可使细胞核内γH2AX焦点数量及有γH2AX焦点生成的细胞数量增加,但只有20mg·L-12-AAF处理的细胞才出现明显的彗尾增长及有彗尾的细胞数量增加。另外,磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)家族抑制物渥曼青霉素可抑制2-AAF诱导的γH2AX焦点形成。结论2-AAF可通过激活PI3K家族成员使H2AX磷酸化,进而诱导γH2AX焦点的形成。γH2AX检测DNA损伤的敏感性优于彗星实验,因此,γH2AX有可能成为衡量DNA损伤程度的良好指标。 展开更多
关键词 γH2AX 2-乙酰氨基芴 DNA损伤
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电离辐射对Jurkat细胞γ-H2AX蛋白表达的影响 被引量：4
14
作者 倪冠英 何淑梅 +1 位作者 董娟聪 金顺子 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期895-899,共5页
目的:探讨电离辐射诱导Jurkat细胞γ-H2AX蛋白表达的影响。方法:采用流式细胞术(FCM)分别检测2.0GyX线照射后不同时间点(0、0.5、1.0、4.0、8.0、16.0及24.0h)和0.5、1.0、2.0、4.0及6.0Gy不同剂量X线照射后Jurkat细胞γ-H2AX表达变化,... 目的:探讨电离辐射诱导Jurkat细胞γ-H2AX蛋白表达的影响。方法:采用流式细胞术(FCM)分别检测2.0GyX线照射后不同时间点(0、0.5、1.0、4.0、8.0、16.0及24.0h)和0.5、1.0、2.0、4.0及6.0Gy不同剂量X线照射后Jurkat细胞γ-H2AX表达变化,并于量效实验同时进行Jurkat细胞凋亡率检测。结果:与假照组比较,2.0GyX线照射后Jurkat细胞γ-H2AX表达水平于1.0h内达最大值,1.0h后开始呈时间依赖性下降,16.0h仍高于假照水平(P<0.01),24.0h降至与对照无明显差异;不同剂量X线照射后1.0h,Jurkat细胞γ-H2AX的表达水平在0.5Gy以内没有明显变化,0.5Gy以后呈剂量依赖性升高,4.0Gy时达最高水平(P<0.01),6.0Gy时表达略下降;不同剂量X线照射后8.0h,γ-H2AX表达在0～4.0Gy范围内随剂量增大而逐渐升高,4.0Gy时达到最高水平(P<0.01),6.0Gy时表达有所下降。结论:X射线能诱导Jurkat细胞γ-H2AX表达增高,在一定范围内存在时间和剂量依赖关系。 展开更多
关键词 电离辐射 蛋白表达 Γ-H2AX JURKAT细胞
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醋酸棉酚诱导人粘液表皮样癌MEC-1细胞DNA双链断裂 被引量：3
15
作者 郭忠 赵晋 +3 位作者 薛同敏 马建秀 汪晨净 黄双盛 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期164-170,共7页
本文研究醋酸棉酚(gossypol acetic acid,GAA)对人粘液表皮样癌细胞MEC-1体外增殖的影响,并初步探讨其抑制肿瘤细胞增殖的机制。体外培养人粘液表皮样癌细胞系MEC-1细胞,用MTT法检测GAA对MEC-1细胞增殖的影响;用中性彗星实验检测GAA对ME... 本文研究醋酸棉酚(gossypol acetic acid,GAA)对人粘液表皮样癌细胞MEC-1体外增殖的影响,并初步探讨其抑制肿瘤细胞增殖的机制。体外培养人粘液表皮样癌细胞系MEC-1细胞,用MTT法检测GAA对MEC-1细胞增殖的影响;用中性彗星实验检测GAA对MEC-1细胞的DNA双链断裂;用免疫荧光染色法检测GAA诱导的磷酸化组蛋白γH2AX焦点形成。结果显示,5～40μmol/L的GAA以时间和浓度依赖方式抑制MEC-1细胞的生长;2.5～40μmol/L的GAA作用24h,或20μmol/L的GAA作用3～48h,CASP软件分析显示MEC-1彗星细胞的头部DNA百分含量减少,尾长、彗星长度、尾部DNA百分含量、尾矩和Olive尾矩增加;2.5～20μmol/L的GAA作用24h,或20μmol/L的GAA作用3～48h,γH2AX阳性细胞率随着浓度和时间的增加而增加。上述结果表明GAA抑制MEC-1细胞增殖,诱导DNA双链断裂是其抑制肿瘤细胞增殖的机制之一。 展开更多
关键词 醋酸棉酚 MEC-1 DNA双链断裂 γH2AX
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香烟烟雾提取物对人呼吸道上皮细胞DNA损伤和凋亡的影响 被引量：8
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作者 付强 成静 +7 位作者 韩中博 李小兰 陈小燕 张鹏 肖徽 陶德定 胡俊波 龚建平 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第10期1191-1197,共7页
背景与目的:香烟烟雾可以致多种细胞发生DNA损伤已有报道证实。本研究旨在进一步阐明香烟烟雾提取物(cigarettesmokeextract,CSE)作用于正常人类支气管上皮细胞系(normalhumanbronchialepithelialcells,NHBE)和肺腺癌细胞系SPC-A1后引起... 背景与目的:香烟烟雾可以致多种细胞发生DNA损伤已有报道证实。本研究旨在进一步阐明香烟烟雾提取物(cigarettesmokeextract,CSE)作用于正常人类支气管上皮细胞系(normalhumanbronchialepithelialcells,NHBE)和肺腺癌细胞系SPC-A1后引起的DNA损伤和凋亡情况。方法:不同浓度的CSE作用于NHBE和SPC-A1细胞,用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测两种细胞活性。荧光标记的磷酸化H2AX组蛋白(γ-H2AX)抗体特异性标记细胞核内DNA双链断裂(DNAdouble-strandbreaks,DSBs)处的γ-H2AX,然后用流式细胞仪定量检测并分析DNA损伤。用免疫印迹检测γ-H2AX表达。同时,亚G1峰法(SubG1peak)和AnnexinⅤ-FITC/碘化丙啶双染色流式细胞术检测CSE诱导的细胞凋亡。用激光共聚焦显微镜观察细胞损伤和凋亡形态学变化。结果:MTT结果显示,随CSE浓度和作用时间增加,细胞活性均逐渐降低。CSE可引起细胞DNA双链断裂,γ-H2AX最大值在作用后4h左右,然后逐渐降低。DNA损伤后平均12h可以出现凋亡。另外,激光共聚焦显微镜观察到两种细胞内的γ-H2AX量在细胞受到CSE刺激后快速大量的积聚,呈现典型细胞损伤的形态学变化,较为明显的凋亡形态学特征4h后方可出现。结论:CSE能直接引起NHBE和SPC-A1细胞的DNA损伤和凋亡,且存在着浓度和时间依赖关系。 展开更多
关键词 肺肿瘤/化学诱导 香烟烟雾提取物/毒性 Γ-H2AX DNA损伤 凋亡 流式细胞术
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与细胞周期G_2/M期进程相关的H2AX磷酸化 被引量：7
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作者 涂文志 尚增甫 +5 位作者 李兵 刘晓丹 王豫 徐勤枝 让蔚清 周平坤 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期339-345,共7页
γH2AX焦点(foci)被普遍当做DNA双链断裂(DSB)损伤的分子标志物.为探讨细胞周期进程相关的H2AX磷酸化规律特征,采用胸腺嘧啶双阻滞结合噻氨酯哒唑(nocodazole)的后续处理,将HeLa细胞同步于有丝分裂的前中期.然后,用流式细胞仪检测细胞... γH2AX焦点(foci)被普遍当做DNA双链断裂(DSB)损伤的分子标志物.为探讨细胞周期进程相关的H2AX磷酸化规律特征,采用胸腺嘧啶双阻滞结合噻氨酯哒唑(nocodazole)的后续处理,将HeLa细胞同步于有丝分裂的前中期.然后,用流式细胞仪检测细胞周期、Western印迹和免疫荧光法,观察γH2AX表达和γH2AX焦点的形成.结果显示,细胞进入G2/M期和有丝分裂过程中,γH2AX水平显著增加;在无DNA DSB发生的情况下,部分M期细胞中也存在大量的γH2AX焦点.随着细胞完成有丝分裂从M期退出再进入G1期,γH2AX的表达水平逐渐降低.这种γH2AX表达变化特征与G2/M期密切关联的PLK1和Cyclin B1的表达规律相类似.在4 Gy大剂量照射下,HeLa细胞于照后8到12 h出现明显的G2/M期阻滞.γH2AX焦点数在照后1 h达高峰,随后降低,照后8 h又上升,出现了第2个峰值.与之不同的是,在1 Gy低剂量照射下,细胞的G2/M期阻滞微弱,γH2AX焦点数在照后0.5 h最高,随后下降,且无反弹,符合DNA DSB的修复动力学特征.因此,将γH2AX当做DNA DSB分子标志物时,还需要考虑细胞周期变化的影响.γH2AX适合作为1 Gy以下照射的DNA双链断裂损伤的分子标志. 展开更多
关键词 γH2AX 细胞周期 G2/M阻滞 DNA双链断裂 分子标志物
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冬凌草甲素诱导人胰腺癌SW1900细胞DNA损伤及对H2AX蛋白表达的影响 被引量：4
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作者 罗兰 侯杰 +2 位作者 邱冰 曹惠君 魏凤香 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第16期3881-3883,共3页
目的研究冬凌草甲素(ORI)诱导胰腺癌SW1900细胞DNA损伤对磷酸化组蛋白(H2AX)表达的影响。方法彗星实验检测ORI诱导胰腺癌SW1900细胞DNA损伤的程度。Western印迹检测不同浓度ORI作用胰腺癌SW1900细胞后H2AX蛋白的磷酸化。免疫荧光实验检... 目的研究冬凌草甲素(ORI)诱导胰腺癌SW1900细胞DNA损伤对磷酸化组蛋白(H2AX)表达的影响。方法彗星实验检测ORI诱导胰腺癌SW1900细胞DNA损伤的程度。Western印迹检测不同浓度ORI作用胰腺癌SW1900细胞后H2AX蛋白的磷酸化。免疫荧光实验检测Phos-S1981ATM和γ-H2AX焦点。结果彗星实验结果表明不同浓度的ORI(20,40,80μmol/L)处理SW1900细胞48 h后,可发生DNA损伤,并且随浓度增加,DNA损伤加重。Western印迹检测不同浓度ORI作用胰腺癌SW1900细胞后,H2AX蛋白发生磷酸化,γ-H2AX随着浓度增加表达增大。免疫荧光实验发现Phos-S1981ATM和γ-H2AX焦点随着浓度增加表达量增加。结论 ORI可以诱导胰腺癌SW1900细胞DNA损伤;H2AX蛋白发生磷酸化,具体DNA损伤信号通路有待进一步研究。 展开更多
关键词 冬凌草甲素 胰腺癌SW1900 DNA损伤 H2AX蛋白
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r-H2AX在不同食管癌株系中的剂量时间效应特点 被引量：2
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作者 史鸿云 祝淑钗 +3 位作者 卢付河 王玉祥 苑兰惠 何丽 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期321-326,共6页
目的通过检测不同食管癌株系的r-H2AX时间剂量效应关系,了解r-H2AX的动力学特点。方法将食管癌ECA109和TE13两种细胞株分别给予1、2、4和8Gy的6MV-X线照射,并分别于0.5、1、2、4、8、12、24 h收集细胞提取蛋白,检测r-H2AX时间及剂量效... 目的通过检测不同食管癌株系的r-H2AX时间剂量效应关系,了解r-H2AX的动力学特点。方法将食管癌ECA109和TE13两种细胞株分别给予1、2、4和8Gy的6MV-X线照射,并分别于0.5、1、2、4、8、12、24 h收集细胞提取蛋白,检测r-H2AX时间及剂量效应特点。结果 (1)ECA109细胞和TE13细胞随着放疗剂量的增加,r-H2AX表达量第一次最高点出现的时间逐渐提前。(2)ECA109细胞接受低剂量照射后,r-H2AX在24 h内能够恢复到放疗前的水平,且剂量越低恢复越快;TE13细胞接受1、2、4和8Gy照射后24 h内r-H2AX均不能恢复到放疗前水平。(3)在0.5、1、2 h这3个时间点,随着放疗剂量的增加,r-H2AX的表达量并不都是逐渐增加。结论 TE13细胞较ECA109细胞敏感,照射后r-H2AX更难恢复到正常水平。 展开更多
关键词 食管癌 r-H2AX 时间效应 剂量效应
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应用γH_2AX检测甲醛致DNA损伤的研究 被引量：2
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作者 刁汇玲 高金祥 +2 位作者 赵冬梅 马中女 巩永凤 《工业卫生与职业病》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期129-132,共4页
目的探讨磷酸化的H2AX(即γH2AX)能否灵敏、快速、简便的检测甲醛致DNA损伤。方法用甲醛处理中国仓鼠肺细胞株(V79)肺细胞,应用免疫荧光实验检测γH2AX焦点的形成,并通过单细胞凝胶实验验证DNA损伤程度。结果20μmol/L甲醛处理V79细胞10... 目的探讨磷酸化的H2AX(即γH2AX)能否灵敏、快速、简便的检测甲醛致DNA损伤。方法用甲醛处理中国仓鼠肺细胞株(V79)肺细胞,应用免疫荧光实验检测γH2AX焦点的形成,并通过单细胞凝胶实验验证DNA损伤程度。结果20μmol/L甲醛处理V79细胞10 min即可诱导γH2AX焦点形成增加,但2 h时才出现彗尾增长。1μmol/L甲醛处理细胞8 h时,γH2AX平均焦点数及焦点细胞率与对照组相比明显增加,差异有统计学意义(P<0.05),但此浓度在所有时间段都不能导致彗尾增长。结论γH2AX可在早期监测甲醛对DNA的损伤,并能检测到低浓度的甲醛致DNA损伤,因此,其敏感性优于单细胞凝胶实验。 展开更多
关键词 γH 2AX 甲醛 DNA损伤
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