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拟南芥雄性不育突变体atk1-7的遗传定位与功能分析
1
作者 莫翱溦 许鹏辉 +1 位作者 姚远 陆平利 《植物生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期1229-1240,共12页
拟南芥ATK1是一种微管依赖性的驱动蛋白,在有丝分裂和减数分裂纺锤体组装过程中发挥着重要作用。本研究利用正向遗传学在拟南芥Ler背景下筛选到一个育性缺陷突变株。与野生型相比,该突变体营养生长不受影响,果荚短小无种子。亚历山大红... 拟南芥ATK1是一种微管依赖性的驱动蛋白,在有丝分裂和减数分裂纺锤体组装过程中发挥着重要作用。本研究利用正向遗传学在拟南芥Ler背景下筛选到一个育性缺陷突变株。与野生型相比,该突变体营养生长不受影响,果荚短小无种子。亚历山大红染色揭示其花粉完全败育。甲苯胺蓝染色发现其四分体形成异常,出现多核现象,暗示减数分裂过程异常。遗传分析表明该突变为单基因隐性突变。利用图位克隆将目的基因定位于4号染色体上约60 kb区间。通过分析该区域内的基因,发现已报道减数分裂相关基因ATK1位于该区间内,确定为潜在目的基因。通过基因组测序发现,在该突变体中ATK1基因的第8个外显子区域有一个28 bp的缺失,产生一个丢失Motor结构域的截短蛋白。异等位杂交实验证实了该突变基因为ATK1,并把这一新突变体命名为atk1-7。利用DAPI染色和着丝粒荧光原位杂交技术分析减数分裂过程中的染色体行为,发现同源染色体和姐妹染色单体的分离过程均存在异常。利用转基因互补实验首次发现单独的ATK1蛋白Motor结构域能够恢复突变体的不育表型,表明Motor结构域具有极其重要的功能。 展开更多
关键词 atk1 atk1蛋白 驱动蛋白 减数分裂 Motor结构域
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香芹酚对2型糖尿病肝损伤的影响及机制 被引量：6
2
作者 卿菁 周衡 +3 位作者 陈莉 赵伟 吴青 李珊珊 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2024年第2期131-135,I0022-I0026,共10页
目的观察香芹酚对2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)小鼠损伤肝脏的保护作用,并从Toll样受4(Toll-like receptor4,TLR4)/核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)、蛋白激酶B1(protein kinase B1,AKT1)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(m... 目的观察香芹酚对2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)小鼠损伤肝脏的保护作用,并从Toll样受4(Toll-like receptor4,TLR4)/核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)、蛋白激酶B1(protein kinase B1,AKT1)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)信号通路的角度探讨其可能的分子机制。方法将自发性2型糖尿病db/db小鼠随机分为模型组、香芹酚组,并将db/m小鼠设置为对照组。给药6周后检测小鼠空腹血糖(fasting blood glucose,FBG);酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法检测空腹胰岛素、糖化血清蛋白(glycated serum protein,GSP)、谷草转氨酶(aspartate transaminase,AST)、谷丙转氨酶(alanine aminotrans,ALT)、高密度脂蛋白(high density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)、低密度脂蛋白(low density lipoprotein cholesterol,LDL-C);苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosin staining,HE)及碘酸雪夫氏染色(periodic Acid-Schiff stain,PAS)观察肝组织病理形态学变化;蛋白免疫印迹法(Western Blot,WB)检测小鼠肝组织中TLR4、NF-κB、核苷酸结合寡聚化域蛋白样受体3(Nod-like receptor protein 3,NALP3)、AKT1、磷酸化蛋白激酶B1(phospho-protein kinase B1,p-AKT1)、胰岛素受体(Iusulin receptor,INSR)、磷酸化胰岛素受体(phospho-Iusulin receptor,p-INSR)、mTOR、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(phospho-mammalian target of rapamycin,p-mTOR)、胰岛素受体底物1(Iusulin receptor substrate1,IRS1)和磷酸化胰岛素受体底物1(phospho-Iusulin receptor substrate1,p-IRS1)蛋白表达。结果香芹酚组小鼠的空腹血糖、GSP、AST、ALT、TC、LDL-C、TG水平、TLR4、NF-κB、NALP3、INSR、p-INSR、IRS1、p-IRS1蛋白水平明显下降(P<0.05),HDL-C水平明显升高(P<0.05),香芹酚组肝脏组织病理损伤较模型组明显减少。结论香芹酚对T2DM小鼠损伤的肝脏具有保护作用,其机制可能与抑制TLR4/NF-κB、ATK1/mTOR炎症信号通路有关。 展开更多
关键词 香芹酚 2型糖尿病 肝损伤 TLR4/NF-κB信号通路 atk1/mTOR信号通路
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姜黄素通过ATK/FoxM1信号通路调控胃癌干细胞增殖及凋亡 被引量：15
3
作者 贺东黎 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2016年第32期4731-4737,共7页
背景:姜黄素对多种肿瘤细胞及肿瘤干细胞有抑制作用,但其对胃癌干细胞的影响及作用机制尚未见报道。目的:探索姜黄素对胃癌干细胞的影响及作用机制。方法:利用肿瘤球形成实验和胃癌表面标记物(EpCAM及CD44)从胃癌SGC7901细胞系中分离胃... 背景:姜黄素对多种肿瘤细胞及肿瘤干细胞有抑制作用,但其对胃癌干细胞的影响及作用机制尚未见报道。目的:探索姜黄素对胃癌干细胞的影响及作用机制。方法:利用肿瘤球形成实验和胃癌表面标记物(EpCAM及CD44)从胃癌SGC7901细胞系中分离胃癌干细胞;MTT实验检测姜黄素对胃癌干细胞增殖的影响;流式细胞仪检测姜黄素对胃癌干细胞凋亡的影响;Western blot检测胃癌干细胞中FoxM 1、p-AKT及AKT的表达;给予PI3K/AKT信号通路阻断剂LY294002干预胃癌干细胞,研究AKT信号通路与Fox M1信号通路的调控关系。结果与结论:(1)成功从胃癌SGC7901细胞系中分离出了EpCAM+/CD44+双阳性胃癌干细胞;(2)姜黄素可以抑制胃癌干细胞的增殖,促进其凋亡,抑制干细胞中FoxM1及p-AKT的表达;(3)PI3K/AKT信号通路阻断剂LY294002能够抑制胃癌细胞中p-AKT及FoxM1的表达;(4)结果提示,姜黄素可以通过阻断ATK/FoxM1信号通路抑制胃癌干细胞增殖并促进其凋亡。 展开更多
关键词 姜黄素 肿瘤干细胞 胃肿瘤 细胞增殖 细胞凋亡 组织工程 干细胞 ATK/FoxM1信号通路 P-AKT FOXM1 胃癌SGC7901细胞 胃癌 增殖 凋亡
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蓖麻RcAKT1基因的克隆与序列分析 被引量：1
4
作者 包丽坤 耿学军 《安徽农业科学》 CAS 2017年第21期138-142,共5页
[目的]对蓖麻Rc AKT1基因进行克隆和序列分析。[方法]提取盐胁迫处理的蓖麻新鲜叶片总RNA,采取RACE法克隆蓖麻Rc AKT1基因的3'末端和5'末端,利用生物信息学软件DNAman对两端序列进行拼接,最后设计一对特异性引物,从而获得蓖麻Rc... [目的]对蓖麻Rc AKT1基因进行克隆和序列分析。[方法]提取盐胁迫处理的蓖麻新鲜叶片总RNA,采取RACE法克隆蓖麻Rc AKT1基因的3'末端和5'末端,利用生物信息学软件DNAman对两端序列进行拼接,最后设计一对特异性引物,从而获得蓖麻Rc AKT1基因的ORF全长序列,并对该序列进行生物信息学分析。[结果]该基因的开放阅读框序列长度为2 253 bp,推测可不间断编码751个氨基酸。选取其他植物的AKT1序列与蓖麻Rc AKT1序列进行比对,结果显示同源性很高,其一致性在84%~97%。[结论]经过生物信息学分析,发现蓖麻Rc AKT1属于ANK超级家族,是亲水性蛋白质。 展开更多
关键词 蓖麻 内整流K+通道蛋白基因 基因克隆 生物信息学分析
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