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含分子内佐剂的ASFV重组蛋白制备和免疫效果评价
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作者 李玉林 周方方 +4 位作者 闫生辉 于巧玲 王继创 石盼盼 王云龙 《中国兽医杂志》 北大核心 2025年第3期22-28,共7页
为了探究两种分子内佐剂促吞噬肽Tuftsin和破伤风毒素肽TT联合作用对非洲猪瘟病毒(ASFV)重组蛋白P753体液和细胞免疫的影响,本试验采用生物信息学软件确定了ASFV结构蛋白P72、P54和P30的优势表位并构建重组载体pET-28a(+)-p753和pET-28a... 为了探究两种分子内佐剂促吞噬肽Tuftsin和破伤风毒素肽TT联合作用对非洲猪瘟病毒(ASFV)重组蛋白P753体液和细胞免疫的影响,本试验采用生物信息学软件确定了ASFV结构蛋白P72、P54和P30的优势表位并构建重组载体pET-28a(+)-p753和pET-28a(+)-p753-Tuftsin-TT,利用大肠杆菌表达系统表达重组蛋白,经纯化和透析复性后采用蛋白质印迹法(Western blot)和斑点酶联免疫吸附测定(Dot-ELISA)鉴定重组蛋白的免疫原性和免疫反应性。将2种重组蛋白与兽用商品化疫苗佐剂ISA 61 VG混匀后免疫小鼠,通过检测小鼠血清抗体水平、脾脏淋巴细胞增殖情况和细胞因子(IL-2、IL-4和IFN-γ)分泌水平来评价2种重组蛋白诱导的体液和细胞免疫效果。结果显示,2种重组蛋白在37℃、0.5 mmol/L IPTG条件下诱导表达4 h时以包涵体形式表达且表达量最高,经纯化复性后均具有免疫原性和免疫反应性。免疫小鼠后,P753组和P753-Tuftsin-TT组抗体水平均在首免42 d进入平台期,抗体水平均高于PBS组,其中,P753-Tuftsin-TT组抗体水平最高,抗原刺激指数和细胞因子(IL-2、IL-4和IFN-γ)含量极显著高于P753组(P <0.000 1)。结果表明,分子内佐剂Tuftsin和TT联合使用可显著提升P753重组抗原引起的体液和细胞免疫应答能力,为ASFV亚单位疫苗佐剂的研发提供参考。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒(asfv) 分子内佐剂 亚单位疫苗 体液免疫 细胞免疫
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ASFV基因Ⅰ/Ⅱ型重组毒株与基因Ⅰ型、Ⅱ型高毒力毒株的致病力试验数据比较
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作者 戈胜强 左媛媛 +5 位作者 常星 巩明霞 刘春菊 于小静 李金明 王志亮 《中国动物检疫》 2025年第8期72-77,共6页
非洲猪瘟病毒(ASFV)按其毒力分为高毒力、中毒力和低毒力三类。我国现有两类高毒力毒株,分别为2018年传入的基因Ⅱ型毒株和2021年出现的基因Ⅰ/Ⅱ型重组毒株。2023年越南和俄罗斯均发现了基因Ⅰ/Ⅱ型重组病毒,且其全基因组序列与中国分... 非洲猪瘟病毒(ASFV)按其毒力分为高毒力、中毒力和低毒力三类。我国现有两类高毒力毒株,分别为2018年传入的基因Ⅱ型毒株和2021年出现的基因Ⅰ/Ⅱ型重组毒株。2023年越南和俄罗斯均发现了基因Ⅰ/Ⅱ型重组病毒,且其全基因组序列与中国分离株高度相似。为研究基因Ⅰ/Ⅱ型重组病毒的毒力水平,汇总了中国、越南和俄罗斯开展的重组病毒动物试验数据,并与基因Ⅰ型、Ⅱ型高毒力毒株进行致病力比较。结果显示同等攻毒剂量下,重组病毒导致的死亡起始或终止时间更早,提示其毒力可能更强。本文为非洲猪瘟相关研究和防控提供了参考。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 基因Ⅰ/Ⅱ型重组毒株 高毒力毒株
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越南非洲猪瘟疫苗AVAC ASF LIVE(ASFV-G-ΔMGF)研究工作分析与思考 被引量:3
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作者 戈胜强 沙洲 +5 位作者 左媛媛 初薛霏 徐天刚 张永强 李金明 王志亮 《中国动物检疫》 CAS 2024年第2期36-41,共6页
非洲猪瘟(Afcrian swine fever,ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)感染引起的烈性传染病。近日,越南正式将经临床试验验证的非洲猪瘟弱毒疫苗AVAC ASF LIVE(ASFV-G-ΔMGF)在其全国推广使用。本文对越南非洲猪瘟弱... 非洲猪瘟(Afcrian swine fever,ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)感染引起的烈性传染病。近日,越南正式将经临床试验验证的非洲猪瘟弱毒疫苗AVAC ASF LIVE(ASFV-G-ΔMGF)在其全国推广使用。本文对越南非洲猪瘟弱毒疫苗ASFV-G-ΔMGF相关研究数据进行了总结分析,分别从ASFVG-ΔMGF株攻毒保护能力评价、传代细胞培养株临床动物实验、野猪口服接种试验、毒力返强验证等方面,结合国内相关ASFV基因缺失株试验数据进行了分析。总结分析发现:越南上市的ASFV-G-ΔMGF疫苗株,二次免疫接种后攻毒保护效果更好,但在对野猪的口服接种评价中,其口鼻接种效果存在不确定性;随着疫苗株在动物体内的不断传代,其存在毒力返强和毒株变异风险,导致接种猪只临床症状明显;ASFV-G-ΔMGF株虽然有较好的攻毒保护能力和可靠的生产优势,但仍缺乏相关研究数据,特别是在垂直传播、交叉保护、基因突变等方面。后续仍需对ASFV-G-ΔMGF株的临床应用效果进一步评价。 展开更多
关键词 非洲猪瘟 减毒活疫苗 越南 asfv-G-ΔMGF疫苗株
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基于非洲猪瘟病毒B646 L和I177L基因双重实时荧光定量PCR鉴别ASFV-G-ΔI177 L疫苗株的检测方法
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作者 郭瑞 韩小改 +2 位作者 娄亚坤 杨楠 任宝红 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2024年第12期52-57,共6页
为建立一种可鉴别非洲猪瘟病毒(ASFV)野毒株与ASFV-G-ΔI177L(I177L基因缺失株)疫苗株的实时荧光定量PCR检测方法,本试验针对非洲猪瘟病毒B646L与I177L两种基因保守性高的区域,分别设计了引物和探针,通过引物、探针最佳工作浓度筛选和... 为建立一种可鉴别非洲猪瘟病毒(ASFV)野毒株与ASFV-G-ΔI177L(I177L基因缺失株)疫苗株的实时荧光定量PCR检测方法,本试验针对非洲猪瘟病毒B646L与I177L两种基因保守性高的区域,分别设计了引物和探针,通过引物、探针最佳工作浓度筛选和退火温度优化,建立了一种双重实时荧光定量PCR核酸检测方法,并验证该方法的敏感性、特异性、重复性。结果显示,该检测方法建立的标准曲线线性关系良好,R2均>0.99;对pUC57-B646L和pUC57-I177L质粒标准品最低检出限均为10 copies/μL;与其他常见猪病病原无交叉反应,特异性强;批内变异系数为0.11%~1.39%,批间变异系数为0.21%~0.96%,均小于1.4%,重复性和稳定性良好。结果表明,本试验成功建立了一种性能良好的非洲猪瘟病毒B646L与I177L基因双重实时荧光定量PCR核酸检测方法,可为临床上非洲猪瘟病毒野毒株和ASFV-G-ΔI177L疫苗株的检测和鉴别提供技术支撑。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒(asfv) B646L基因 I177L基因 双重实时荧光定量PCR
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不同全自动核酸提取仪对ASFV、PEDV提取效果的比较
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作者 黄丽娜 陈秀萍 +2 位作者 甘跃灵 谢璐娜 王雪妹 《今日养猪业》 2024年第3期1-3,共3页
【目的】以倍比稀释的ASFV(非洲猪瘟病毒)阳性对照样品以及PEDV(猪流行性腹泻病毒)阳性对照样品为检测对象,对比3款全自动核酸提取仪对DNA和RNA的提取效果,旨在帮助猪场配备的实验室筛选合适、可靠的全自动核酸提取仪。【方法】倍比稀... 【目的】以倍比稀释的ASFV(非洲猪瘟病毒)阳性对照样品以及PEDV(猪流行性腹泻病毒)阳性对照样品为检测对象,对比3款全自动核酸提取仪对DNA和RNA的提取效果,旨在帮助猪场配备的实验室筛选合适、可靠的全自动核酸提取仪。【方法】倍比稀释好的ASFV、PEDV阳性对照样品,每个梯度设置3个平行重复,诺维赞核酸提取仪(VNP-32P)为处理1,西安天隆核酸提取仪(NP968-C)为处理2,博日核酸提取仪(NPA-32P)为处理3,根据3款全自动核酸提取仪及提取试剂盒的说明书将对应阳性样品进行核酸提取,再根据英迪康的virotype?非洲猪瘟病毒2.0 PCR检测试剂盒以及世纪元亨的流行性腹泻病毒实时荧光RT-PCR检测试剂盒的说明书进行体系配制、上样、程序设置,进行核酸扩增。【结果】同一浓度梯度的ASFV、PEDV阳性对照样品,处理3所提核酸的扩增结果 CT值较处理1和处理2的低,而处理1和处理2提取效果不相上下。【结论】3款核酸提取仪的稳定性都满足需求;博日核酸提取仪(NPA-32P)的提取效果优于另外2款,诺维赞核酸提取仪(VNP-32P)和西安天隆核酸提取仪(NP968-C)的提取效果接近。 展开更多
关键词 全自动核酸提取仪 asfv PEDV 稳定性效果
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ASFV抗原重组腺病毒的构建及免疫保护效果
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作者 惠丽丽 岳慧贤 +6 位作者 蒋依倩 张艳艳 齐宇 李思齐 付林 李其炫 扈荣良 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2024年第21期100-106,128,共8页
为了构建非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)抗原重组腺病毒并探讨不同抗原的免疫原性,试验以ASFV基因Ⅱ型SY18株基因组为模板,采用无缝连接技术构建13种带有His标签的ASFV抗原重组腺病毒,通过间接免疫荧光技术鉴定重组腺病... 为了构建非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)抗原重组腺病毒并探讨不同抗原的免疫原性,试验以ASFV基因Ⅱ型SY18株基因组为模板,采用无缝连接技术构建13种带有His标签的ASFV抗原重组腺病毒,通过间接免疫荧光技术鉴定重组腺病毒在HEK-239AD细胞中的表达情况,并用构建的13种重组腺病毒与前期构建的25种重组腺病毒分别于试验第0,14,28天免疫小鼠,200μL/只(重组腺病毒稀释至1×10^(8)TCID_(50)/mL)。第3次免疫后第7天,通过摘眼球方法采集血液,制备血清,利用血清中和试验筛选出5种效果较好的可刺激动物机体产生ASFV抑制性抗体的抗原,并将这5种重组腺病毒混合后免疫猪只,每种重组腺病毒(稀释至1×10^(8)TCID_(50)/mL)用量为0.5 mL/头;首免(第0天)后第14天进行二免,二免后第14天口服ASFV基因Ⅱ型SY18株(效价为1×10^(4)TCID_(50)/mL)200μL攻毒,探究重组腺病毒免疫保护效果。结果表明:本次试验构建的13种重组腺病毒均能在HEK-239AD细胞中稳定表达;从免疫小鼠血清中和试验筛选出5种抑制ASFV效果较好的重组腺病毒为rAdCMV-D129L、rAdCMV-EP84R、rAdCMV-E146L、rAdCMV-NP419L、rAdCMV-S273R。5头免疫重组腺病毒的猪均在攻毒后延迟发病,其中4头猪最终死亡,1头存活,保护率为20%,免疫PBS的猪只在攻毒后发病快,并全部死亡。说明ASFV抗原重组腺病毒可以刺激机体产生免疫反应,但用经过血清中和试验筛选出来的5种抗原制备的重组腺病毒无法提供完全保护。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 重组腺病毒 抗原鉴定 病毒复制 抑制性抗体
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越南非洲猪瘟疫苗NAVET-ASFVAC(ASFV-G-ΔI177L)研究现状及思考
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作者 戈胜强 徐天刚 +5 位作者 尼博 刘春菊 韩乃君 王晓华 郑辉 王志亮 《中国动物检疫》 CAS 2023年第10期82-86,共5页
非洲猪瘟(African Swine Fever,ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)感染引起的猪高度致死性传染病,迄今全球还没有能预防它的有效疫苗。目前基因缺失减毒活疫苗和亚单位疫苗是最具潜力的疫苗研发策略。据报道,越南... 非洲猪瘟(African Swine Fever,ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)感染引起的猪高度致死性传染病,迄今全球还没有能预防它的有效疫苗。目前基因缺失减毒活疫苗和亚单位疫苗是最具潜力的疫苗研发策略。据报道,越南正式批准了ASFV基因缺失弱毒疫苗NAVET-ASFVAC(ASFV-G-AI177L)在其全国范围内使用。ASFV-G-AI177L疫苗株是首个能诱导产生免疫且不排毒的毒株,针对越南地方品种猪具有良好的安全性并可抵抗母本强毒株(ASFV-G)的攻击;在疫苗接种后21 d可产生全面保护,并且大剂量接种安全,带毒时间小于90 d,连续5次传代未观察到毒力返祖。但是临床条件下ASFV-G-AI177L疫苗株仍存在水平传播和病毒血症逐代升高的风险,并且对野猪和妊娠母猪缺乏安全性评价。本文针对越南自美国引进的ASFV-G-AI177L毒株相关临床研究数据进行综述,以期为我国ASF疫苗研究及防控政策制定提供参考。 展开更多
关键词 非洲猪瘟 减毒活疫苗 越南 asfv-G-ΔI177L
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ASFV解旋酶D1133L蛋白表达和抗体检测方法的建立及初步应用 被引量:4
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作者 侯景 申超超 +9 位作者 张大俊 杨博 史喜绢 张婷 杨泽晓 张克山 郑海学 李丹 党文 刘湘涛 《江西农业学报》 CAS 2021年第6期1-6,共6页
为了建立快速检测非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)的血清学方法,本研究原核表达了ASFV的D1133L重组蛋白,并以其为包被抗原,通过反应条件优化,建立了一种快速检测ASFV的间接ELISA方法,并采用该方法检测了ASFV感染猪后D1133... 为了建立快速检测非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)的血清学方法,本研究原核表达了ASFV的D1133L重组蛋白,并以其为包被抗原,通过反应条件优化,建立了一种快速检测ASFV的间接ELISA方法,并采用该方法检测了ASFV感染猪后D1133L的抗体应答情况。结果显示:成功表达纯化了D1133L蛋白,以此为抗原建立了ELISA抗体检测方法,该方法特异性高,灵敏性强,其检测结果与市售试剂盒检测结果的符合率达100%。家猪在感染ASFV后,针对D1133L的抗体在第5天可被检测到,在第7天抗体水平达到顶峰。 展开更多
关键词 asfv 解旋酶 D1133L 抗体检测 应用
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Regulation of antiviral immune response by African swine fever virus(ASFV) 被引量:14
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作者 Xiaojie Zheng Shengming Nie Wen-Hai Feng 《Virologica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2022年第2期157-167,共11页
African swine fever(ASF)is a highly contagious and acute hemorrhagic viral disease with a high mortality approaching 100%in domestic pigs.ASF is an endemic in countries in sub-Saharan Africa.Now,it has been spreading ... African swine fever(ASF)is a highly contagious and acute hemorrhagic viral disease with a high mortality approaching 100%in domestic pigs.ASF is an endemic in countries in sub-Saharan Africa.Now,it has been spreading to many countries,especially in Asia and Europe.Due to the fact that there is no commercial vaccine available for ASF to provide sustainable prevention,the disease has spread rapidly worldwide and caused great economic losses in swine industry.The knowledge gap of ASF virus(ASFV)pathogenesis and immune evasion is the main factor to limit the development of safe and effective ASF vaccines.Here,we will summarize the molecular mechanisms of how ASFV interferes with the host innate and adaptive immune responses.An in-depth understanding of ASFV immune evasion strategies will provide us with rational design of ASF vaccines. 展开更多
关键词 African swine fever virus(asfv) Innate immunity Adaptive immunity Immune evasion VACCINE
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ASFV transcription reporter screening system identifies ailanthone as a broad antiviral compound 被引量:2
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作者 Yuhang Zhang Zhenjiang Zhang +7 位作者 Fan Zhang Jiwen Zhang Jun Jiao Min Hou Nianchao Qian Dongming Zhao Xiaofeng Zheng Xu Tan 《Virologica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2023年第3期459-469,共11页
African swine fever(ASF)is an acute,highly contagious and deadly viral disease in swine that jeopardizes the worldwide pig industry.Unfortunately,there are no authoritative vaccine and antiviral drug available for ASF... African swine fever(ASF)is an acute,highly contagious and deadly viral disease in swine that jeopardizes the worldwide pig industry.Unfortunately,there are no authoritative vaccine and antiviral drug available for ASF control.African swine fever virus(ASFV)is the etiological agent of ASF.Among the ASFV proteins,p72 is the most abundant component in the virions and thus a potential target for anti-ASFV drug design.Here,we con-structed a luciferase reporter system driven by the promoter of p72,which is transcribed by the co-transfected ASFV RNA polymerase complex.Using this system,we screened over 3200 natural product compounds and obtained three potent candidates against ASFV.We further evaluated the anti-ASFV effects and proved that among the three candidates,ailanthone(AIL)inhibits the replication of ASFV at the nanomolar concentration(IC_(50)=15 nmol/L).Our in vitro experiments indicated that the antiviral effect of AIL is associated with its inhibition of the HSP90-p23 cochaperone.Finally,we showed the antiviral activity of AIL on Zika virus and hepatitis B virus(HBV),which supports that AIL is a potential broad-spectrum antiviral agent. 展开更多
关键词 African swine fever virus(asfv) Replication inhibition Broad-spectrum antiviral drugs Ailanthone(AIL)
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ASFV核酸防污染恒温隔绝式荧光PCR检测方法的建立
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作者 陈雪蓉 徐林 +2 位作者 王远微 汤承 岳华 《四川畜牧兽医》 2022年第8期33-36,共4页
本研究基于UNG酶的生物学特性(能特异性识别并切割DNA分子中出现的尿嘧啶核苷),在PCR反应体系中引入UNG酶,使用农业农村部172号公告推荐的荧光定量PCR方法的引物和探针,通过对上下游引物、探针、Taq酶等反应体系的优化,建立防污染的恒... 本研究基于UNG酶的生物学特性(能特异性识别并切割DNA分子中出现的尿嘧啶核苷),在PCR反应体系中引入UNG酶,使用农业农村部172号公告推荐的荧光定量PCR方法的引物和探针,通过对上下游引物、探针、Taq酶等反应体系的优化,建立防污染的恒温隔绝式荧光PCR(iiPCR)检测方法。结果显示:优化后的iiPCR方法特异性好,只扩增出ASFV的特异片段,对猪瘟病毒、高致病性蓝耳病病毒、伪狂犬病毒、流行性乙型脑炎病毒、猪细小病毒、猪流行性腹泻病毒等病原不能检出,检测下限为25.5拷贝/μL;具有良好的稳定性,组内和组间变异系数均<5%。该方法对实验室环境及操作人员的要求不严格,对PCR反应的反应性、便捷性和时效性无影响,也不影响后续实验,同时可以解决阳性对照物及扩增产物对PCR扩增体系污染的问题,减少假阳性的出现,提高检测方法的可靠性,为ASFV的诊断提供了可靠的手段。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒(asfv) UNG酶 防污染 恒温隔绝式荧光PCR
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外环境中ASFV核酸检出情况及分析 被引量:4
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作者 王久红 《湖北畜牧兽医》 2021年第11期23-24,共2页
为切断非洲猪瘟病毒(Africanswinefevervirus,ASFV)传播途径,避免其传入猪场,开展了对ASFV污染情况的调查。对湖北金林原种畜牧有限公司2020年至2021年上半年外来车辆、人员及购进物资等采集的共3778份样品进行了ASFV核酸的检测,以评估... 为切断非洲猪瘟病毒(Africanswinefevervirus,ASFV)传播途径,避免其传入猪场,开展了对ASFV污染情况的调查。对湖北金林原种畜牧有限公司2020年至2021年上半年外来车辆、人员及购进物资等采集的共3778份样品进行了ASFV核酸的检测,以评估外环境中非洲猪瘟疫情的风险。结果显示,人员和物资ASFV核酸检出率分别为0.53%(12/2278)和0.63%(6/948),车辆ASFV核酸检出率最高,为4.53%(25/552);在车辆样品中,外来生猪运输车辆ASFV核酸检出率最高,为13.50%(22/163),外出售猪车辆和外出接送人员车辆分别为6.25%(1/16)和3.03%(2/66)。表明养猪企业应持续加强对车辆、人员及物资的检测,尤其是对外来生猪运输车的检测,还需加强猪场消毒,切断ASFV传播途径,阻挡ASFV传入猪场。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒(asfv) 检测 防控 外环境
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ASFV多表位融合基因MeP72基因的克隆、表达及其间接ELISA检测方法建立 被引量:7
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作者 郭晶 孟庆玲 +5 位作者 乔军 李重阳 伍晔晖 王立霞 马帅 才学鹏 《生物技术》 CAS 2018年第6期548-553,共6页
[目的]建立以重组多表位融合蛋白reMeP72为包被抗原的ASFV间接ELISA检测方法。[方法]预测分析ASFV结构蛋白P72的优势抗原表位,串连优势抗原表位并优化稀有密码子以合成多表位融合抗原基因MeP72。在毕赤酵母表达系统中诱导表达,分析重组... [目的]建立以重组多表位融合蛋白reMeP72为包被抗原的ASFV间接ELISA检测方法。[方法]预测分析ASFV结构蛋白P72的优势抗原表位,串连优势抗原表位并优化稀有密码子以合成多表位融合抗原基因MeP72。在毕赤酵母表达系统中诱导表达,分析重组融合蛋白的反应原性。用reMeP72做包被抗原,建立ASFV的ELISA间接检测方法。[结果]成功构建了402bp的MeP72基因片段。SDS-PAGE和WesternBlotting分析该蛋白在14kDa有条带,证明其反应原性良好。经ELISA反应条件优化,建立的ELISA方法与猪的其他病原的阳性血清不发生交叉反应,且可检测到稀释倍数为1∶512ASFV阳性血清,证明其特异性和敏感性良好。[结论]建立了抗原包被浓度为15μg/mL,一抗、二抗稀释倍数分别为1∶200、1∶5000倍的特异性和敏感性良好的reMeP72-ELISA检测方法。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 MeP72 毕赤酵母表达 间接ELISA检测方法
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非洲猪瘟病毒调控宿主细胞凋亡的研究进展
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作者 李强 高鹏 +6 位作者 周琼琼 周磊 盖新娜 韩军 郭鑫 张永宁 杨汉春 《中国兽医杂志》 北大核心 2025年第9期108-118,共11页
非洲猪瘟(ASF)是由非洲猪瘟病毒(ASFV)感染引起猪的一种热性、出血性和高度接触性传染病。临床上,ASF以高热、皮肤发绀和多种脏器广泛出血等病理损伤为特征,具有极高的发病率和死亡率,严重危害全球养猪业。目前,该病尚无安全有效的疫苗... 非洲猪瘟(ASF)是由非洲猪瘟病毒(ASFV)感染引起猪的一种热性、出血性和高度接触性传染病。临床上,ASF以高热、皮肤发绀和多种脏器广泛出血等病理损伤为特征,具有极高的发病率和死亡率,严重危害全球养猪业。目前,该病尚无安全有效的疫苗和治疗药物,因而被世界动物卫生组织(WOAH)列为法定报告的动物疫病。ASFV主要靶向猪的单核吞噬细胞系统,包括巨噬细胞和单核细胞,常引发淋巴细胞耗竭以及靶细胞和旁细胞死亡,其中细胞凋亡是关键的死亡形式之一。研究已证实,诱导细胞凋亡是ASFV重要的致病机制,与其引起的病理损伤密切相关。ASFV基因组庞大且可编码众多蛋白,尽管许多蛋白功能尚待探索,但已有证据显示,ASFV能够通过编码多种病毒蛋白来精细调控宿主细胞的凋亡过程。在病毒感染的早期阶段,ASFV抑制细胞凋亡以促进病毒复制;而在感染后期,ASFV诱导细胞凋亡以利于子代病毒的释放和传播,并帮助病毒逃逸宿主的免疫应答,反映了ASFV在不同复制阶段对细胞凋亡调控的复杂性。本文旨在综述ASFV的概况、细胞凋亡的特征及其发生机制,以及ASFV调控细胞凋亡的分子机制,以期为该病毒的基础研究和科学防控提供参考。 展开更多
关键词 非洲猪瘟(ASF) 非洲猪瘟病毒(asfv) 病理损伤 细胞凋亡 致病机制 分子机制
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非洲猪瘟病毒感染诱导猪体内细胞因子表达变化的研究进展
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作者 殷磊 李志娟 +5 位作者 左媛媛 戈胜强 李桂梅 初薛霏 李金明 王志亮 《中国兽医杂志》 北大核心 2025年第9期119-126,共8页
非洲猪瘟(ASF)是由非洲猪瘟病毒(ASFV)引起的一种急性、高度致死性传染病,已对全球养猪业造成巨大经济损失。由于目前市场上仍没有安全有效的疫苗和治疗药物,深入研究该病的发病机制和宿主的免疫应答对其防控具有重要意义。细胞因子作... 非洲猪瘟(ASF)是由非洲猪瘟病毒(ASFV)引起的一种急性、高度致死性传染病,已对全球养猪业造成巨大经济损失。由于目前市场上仍没有安全有效的疫苗和治疗药物,深入研究该病的发病机制和宿主的免疫应答对其防控具有重要意义。细胞因子作为免疫调节的关键介质,其动态变化不仅能反映机体的免疫状态,更可为揭示病毒与宿主免疫系统的相互作用机制提供重要线索。本文对猪感染ASFV后细胞因子变化趋势的研究进展进行了综述,系统分析了ASFV感染与细胞因子变化趋势的关系,以期为深入探究猪感染ASFV后体内免疫应答相关机制提供新的研究思路和理论依据。 展开更多
关键词 非洲猪瘟(ASF) 非洲猪瘟病毒(asfv) 细胞因子 白细胞介素 干扰素
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非洲猪瘟病毒E184L蛋白的原核表达及单克隆抗体的制备
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作者 李雪雯 李婷婷 +4 位作者 李长尧 焦爽 郑君 荣俊 翁长江 《中国动物传染病学报》 北大核心 2025年第3期130-136,共7页
本研究旨在表达非洲猪瘟病毒(ASFV)E184L蛋白(pE184L),并制备单克隆抗体(mAb),为其功能研究提供物质基础。首先,构建出了原核表达质粒pET21a-E184L并表达重组pE184L-His蛋白,使用镍亲和层析的方法对pE184L进行纯化,用纯化后的蛋白对小... 本研究旨在表达非洲猪瘟病毒(ASFV)E184L蛋白(pE184L),并制备单克隆抗体(mAb),为其功能研究提供物质基础。首先,构建出了原核表达质粒pET21a-E184L并表达重组pE184L-His蛋白,使用镍亲和层析的方法对pE184L进行纯化,用纯化后的蛋白对小鼠进行免疫,随后取阳性小鼠脾细胞与SP2/0细胞进行融合,经间接ELISA方法筛选出能稳定分泌pE184L mAb的杂交瘤细胞。Western blot结果显示,该抗体能够特异性识别过表达的外源pE184蛋白以及ASFV感染猪肺泡巨噬细胞(PAMs)表达的内源pE184蛋白。IFA结果表明该株mAb能特异性标记过表达的pE184L蛋白及在ASFV感染的PAMs细胞中表达的内源pE184L蛋白。Co-IP试验结果表明该株mAb能特异性结合过表达的pE184L蛋白及在ASFV感染的PAMs细胞中表达的内源pE184L蛋白。本研究成功表达并纯化了可溶性E184L蛋白,并制备了1株pE184L mAb,该mAb与pE184L蛋白具有良好的反应性,这为ASFV pE184L的生物学功能研究奠定了基础。 展开更多
关键词 asfv E184L 原核表达 单克隆抗体
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非洲猪瘟病毒检测方法研究进展
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作者 刘书慈 张海林 +7 位作者 汪渤森 张永宁 周磊 盖新娜 郭鑫 韩军 杨汉春 高鹏 《中国兽医杂志》 北大核心 2025年第9期98-107,共10页
非洲猪瘟(ASF)是由非洲猪瘟病毒(ASFV)引起的一种高度接触性传染病,以猪的网状内皮系统感染、高热、全身性出血等为主要临床特征,严重威胁全球养猪业可持续发展。目前尚无确实安全有效的ASF疫苗和抗病毒药物,生物安全仍是该病防控的主... 非洲猪瘟(ASF)是由非洲猪瘟病毒(ASFV)引起的一种高度接触性传染病,以猪的网状内皮系统感染、高热、全身性出血等为主要临床特征,严重威胁全球养猪业可持续发展。目前尚无确实安全有效的ASF疫苗和抗病毒药物,生物安全仍是该病防控的主要和首要措施。疫病防控,检测先行,对ASFV进行及时、高效、准确的检测和监测是其生物安全防控的关键环节。本文从病原学检测、血清学检测和分子生物学检测3个方面综述了国内外ASFV检测方法的研究进展,以期为其科学防控提供参考。 展开更多
关键词 非洲猪瘟(ASF) 非洲猪瘟病毒(asfv) 检测方法
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非洲猪瘟病毒五基因缺失株的发现与分离鉴定 被引量:1
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作者 戈胜强 左媛媛 +7 位作者 路皓东 初薛霏 吕艳 徐天刚 于家荣 李金明 蔡玉梅 王志亮 《中国动物检疫》 2025年第4期78-83,共6页
非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)引起的高度致死性传染病,从1921年首次被发现至今,一直在全球范围内传播。研究表明,ASFV强毒株在传代细胞上连续传代会使其毒力降低,这为研发ASFV... 非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)引起的高度致死性传染病,从1921年首次被发现至今,一直在全球范围内传播。研究表明,ASFV强毒株在传代细胞上连续传代会使其毒力降低,这为研发ASFV弱毒疫苗提供了重要思路。但在原代细胞上多次传代发生基因丢失的相关研究未见报道。本研究将ASFV强毒株在原代猪肺泡巨噬细胞(porcine alveolar macrophage,PAM)上连续传代,发现一株ASFV多基因家族(MGFs)基因缺失毒株,并对其进行了分离纯化。全基因组测序结果显示,该分离株在MGF360和MGF505处有5个基因的缺失,且缺失区域位于ASFV MGFs基因研究的热点区域。体外验证表明,该基因缺失株与母本毒株复制能力相似,会在与母本野毒的混合增殖扩繁中稳定存在。提示ASFV在种子批毒制备过程中应保持较低的传代次数,以防基因缺失毒株出现。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 基因缺失 稳定增殖 病毒纯化
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动物病毒感染过程中转录组m^(6)A甲基化修饰变化及功能研究进展
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作者 杨锡龙 邱祥琦 +5 位作者 田佳静 李梦杰 龚乐乐 王乐乐 孙爱军 庄国庆 《中国兽医学报》 北大核心 2025年第1期163-169,174,共8页
动物病毒感染引起的疫病严重制约养殖业健康发展,深入研究病毒的复制和致病分子机制,将为筛选疫苗和药物靶点提供理论依据。N6-甲基腺苷(N6-methyladenosine,m^(6)A)修饰广泛存在于病毒和宿主转录组,参与调控基因表达而影响病毒复制和... 动物病毒感染引起的疫病严重制约养殖业健康发展,深入研究病毒的复制和致病分子机制,将为筛选疫苗和药物靶点提供理论依据。N6-甲基腺苷(N6-methyladenosine,m^(6)A)修饰广泛存在于病毒和宿主转录组,参与调控基因表达而影响病毒复制和致病性,是继DNA和蛋白质修饰外的一种新的基因表达调控方式。深度解析m^(6)A甲基化修饰在病毒感染过程中的调控分子机制是生命科学领域研究热点和前沿。近几年,已有相关病毒感染过程中病毒和宿主转录组发生m^(6)A甲基化修饰变化以及相关功能研究的报道。基于此,现综述了非洲猪瘟病毒(ASFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、马立克病病毒(MDV)、新城疫病毒(NDV)、禽白血病病毒(ALV)和鸭甲肝病毒(DHAV)感染细胞或宿主过程中引起转录组m^(6)A甲基化修饰的变化,以及对病毒复制和致病性的影响,探讨m^(6)A甲基化修饰在动物病毒复制和致病作用的机制,以期助力动物疫病防控。 展开更多
关键词 m^(6)A甲基化修饰 非洲猪瘟病毒(asfv) 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) 马立克氏病病毒(MDV) 新城疫病毒(NDV)
原文传递
非洲猪瘟病毒抗体阻断ELISA法测量不确定度评估
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作者 柴娟 张璐 +10 位作者 董建斐 周丰超 王雅婷 孙仁杰 陈文静 黄晓兵 冯肖肖 黄靖 郑方宇 谢荣辉 张传亮 《中国动物检疫》 2025年第5期120-124,共5页
为了评估阻断ELISA方法检测结果的可靠性,使用阻断ELISA方法检测非洲猪瘟病毒(ASFV)抗体,并分别使用“影响因素分析”法和“对照样品”法对试验进行测量不确定度评估。“影响因素分析”法和“对照样品”法评估的扩展不确定度(U)分别为0.... 为了评估阻断ELISA方法检测结果的可靠性,使用阻断ELISA方法检测非洲猪瘟病毒(ASFV)抗体,并分别使用“影响因素分析”法和“对照样品”法对试验进行测量不确定度评估。“影响因素分析”法和“对照样品”法评估的扩展不确定度(U)分别为0.053 0和0.044 2 (k=2),表明在控制好移液器、培养箱和酶标仪等仪器引入的不确定度基础上,ELISA方法检测ASFV抗体的整体不确定度相对较低。两种方法评估的不确定度值差异不显著,使用“影响因素分析”法可以通过分析各分量在测量结果中的相对贡献,得到影响结果的关键因素,并进行改进;使用“对照样品”法可减少大量计算过程,操作更简单。ASFV抗体ELISA试验判定引入不确定度,可以提高结果的准确性,有利于进一步完善兽医检测领域不确定度评估体系。 展开更多
关键词 ELISA 非洲猪瘟病毒抗体 测量不确定度 “影响因素分析”法 “对照样品”法
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