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芪蛭降糖胶囊调控NLRP3/caspase-1/GSDMD通路抑制足细胞焦亡改善糖尿病肾损伤的机制研究 被引量:4
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作者 苏珊珊 郭兆安 +3 位作者 杨欢 刘慧 唐静楠 姜晓宇 《细胞与分子免疫学杂志》 北大核心 2025年第3期204-210,共7页
目的 探究芪蛭降糖胶囊(QZJT)通过含pyrin结构域NOD样受体家族3/半胱天冬酶1/消皮素D(NLRP3/caspase-1/GSDMD)信号通路对糖尿病肾病(DN)小鼠肾损伤的影响。方法 小鼠随机分为6组,分别为正常组(NC)、模型组(DN)、 QZJT低剂量组(L-QZJT)、... 目的 探究芪蛭降糖胶囊(QZJT)通过含pyrin结构域NOD样受体家族3/半胱天冬酶1/消皮素D(NLRP3/caspase-1/GSDMD)信号通路对糖尿病肾病(DN)小鼠肾损伤的影响。方法 小鼠随机分为6组,分别为正常组(NC)、模型组(DN)、 QZJT低剂量组(L-QZJT)、 QZJT高剂量组(H-QZJT)、阳性对照组(参芪降糖颗粒给药,SQJT)、 ML385组[核呼吸因子2(Nrf2)抑制剂],模型构建成功后给药处理,通过测定空腹血糖(FBG)、 24 h尿白蛋白(UAlb)、血清肌酐(SCr)、血尿素(BUN)及肾脏/体质量比值(K/B)评估小鼠肾功能损伤程度;HE及PAS染色评估肾组织的病理变化;ELISA检测血清中炎性细胞因子白细胞介素1β(IL-1β)、 IL-18含量;Western blot法检测足细胞标志物及相关通路蛋白水平。结果 与NC组相比,DN组的FBG、 24 h UAlb、 SCr和BUN升高,K/B质量比值升高。与DN组相比,QZJT低剂量及高剂量给药组的FBG、 24 h UAlb、 SCr及BUN均降低,同时K/B质量比降低,高剂量QZJT的治疗效果与参芪降糖颗粒相当。QZJT改善DN小鼠肾组织病理学损伤,提高了足细胞标志物肾病蛋白(Nephrin)的蛋白水平,降低了NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、 pro-caspase-1和GSDMD-N的蛋白水平。ML385处理后,小鼠的肾组织细胞肿胀和形态改变,炎性浸润面积增加,NLRP3、 ASC、 pro-caspase-1和GSDMD-N的蛋白水平上调,IL-1β和IL-18水平升高。结论 QZJT可能通过作用Nrf2调控NLRP3/caspase-1/GSDMD通路抑制足细胞焦亡,改善DN小鼠肾损伤。 展开更多
关键词 芪蛭降糖胶囊(QZJT) 糖尿病肾病 NLRP3/caspase-1/gsdmd信号通路 NRF2 细胞焦亡
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黑逍遥散对APP/PS1小鼠神经炎症及NLRP3/Caspase-1/GSDMD信号通路的影响 被引量:4
2
作者 周君 李明成 +3 位作者 吕育洁 孟志鹏 胡韵韵 王虎平 《中国实验方剂学杂志》 北大核心 2025年第9期124-133,共10页
目的:观察黑逍遥散对阿尔茨海默病模型小鼠学习记忆能力的影响,并从核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(NLRP3)/胱天蛋白酶-1(Caspase-1)/Gasdermin家族蛋白D(GSDMD)信号通路介导的神经炎症反应探讨其作用机制。方法:将SPF级4月龄APP/PS1小... 目的:观察黑逍遥散对阿尔茨海默病模型小鼠学习记忆能力的影响,并从核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(NLRP3)/胱天蛋白酶-1(Caspase-1)/Gasdermin家族蛋白D(GSDMD)信号通路介导的神经炎症反应探讨其作用机制。方法:将SPF级4月龄APP/PS1小鼠随机分为模型组、MCC950组及黑逍遥散高、中、低剂量组,另将C57BL/6J小鼠作为空白组。适应性喂养7 d后,对各组小鼠分别进行干预,黑逍遥散高、中、低剂量组分别灌胃给药对应剂量药液(25.79、12.90、6.45 g·kg^(-1)·d^(-1)),MCC950组腹腔注射给药(10 mg·kg^(-1)·2 d^(-1)),空白组给予等体积生理盐水灌胃。干预90 d后用Y迷宫和Morris水迷宫试验测试学习记忆能力,苏木素-伊红(HE)染色观察海马神经元结构改变,免疫组化检测海马CA3区淀粉样蛋白前体(APP)表达水平,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测海马组织白细胞介素(IL)-10、IL-18、IL-1β表达水平,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测海马组织NLRP3、Caspase-1、GSDMD、GSDMD-N蛋白表达,免疫荧光检测GSDMD-N和离子钙结合衔接分子-1(Iba-1)的共定位表达。结果:①Y迷宫实验结果显示,与空白组比较,模型组自发交替率显著减少(P<0.01);与模型组比较,黑逍遥散高、低剂量组自发交替率显著增加(P<0.01)。②Morris水迷宫实验结果显示,在1~4 d的定位航行测试中,随着训练时间的延长,各组逃避潜伏期时间均缩短。第4天,与空白组比较,模型组逃避潜伏期明显升高(P<0.05);与模型组比较,MCC950组和黑逍遥散低剂量组逃避潜伏期明显缩短(P<0.05)。在空间探索实验中,与空白组比较,模型组跨越平台位置的次数显著降低(P<0.01);与模型组比较,黑逍遥散低剂量组跨越平台次数明显增高(P<0.05)。③HE染色显示,模型组海马CA3区细胞损伤,排列松散且不规则、肿胀、边界不清,细胞核固缩、深染;MCC950与黑逍遥散各剂量组均能不同程度地改善APP/PS1海马CA3区细胞的损伤。④免疫组化结果表明,与空白组比较,模型组海马CA3区APP表达显著增多(P<0.01),MCC950和黑逍遥散高、中、低剂量组能降低APP/PS1海马CA3区APP的表达水平(P<0.01)。⑤ELISA检测结果表明,模型组海马IL-18、IL-1β水平显著升高,IL-10水平显著降低(P<0.01);与模型组比较,MCC950组和黑逍遥散中、低剂量组海马IL-18水平显著降低(P<0.01),MCC950组及黑逍遥散高、中、低剂量组海马IL-1β水平显著降低(P<0.01),MCC950组和黑逍遥散中、低剂量组海马IL-10水平升高(P<0.05,P<0.01)。⑥Western blot检测结果显示,与空白组比较,模型组海马NLRP3、Caspase-1、GSDMD、GSDMD-N蛋白表达显著升高(P<0.01);与模型组比较,各给药组海马NLRP3、Caspase-1含量减少(P<0.05,P<0.01),黑逍遥散高、中、低剂量组海马GSDMD含量减少(P<0.05,P<0.01),黑逍遥散中、低剂量组海马GSDMD-N含量减少(P<0.05,P<0.01)。⑦免疫荧光检测结果显示,与空白组比较,模型组海马区GSDMD-N与Iba-1共表达增加(P<0.01);与模型组比较,各给药组海马区GSDMD-N与Iba-1共表达减少(P<0.01)。结论:黑逍遥散可能通过调控NLRP3/Caspase-1/GSDMD信号通路影响炎症因子的释放,进而缓解神经炎症,改善海马组织病理学改变和学习记忆障碍以治疗阿尔茨海默病。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 黑逍遥散 神经炎症 核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(NLRP3)/胱天蛋白酶-1(caspase-1)/Gasdermin家族蛋白D(gsdmd)信号通路 实验研究
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基于胆固醇外流探讨黄芩苷调控NLRP3/caspase-1/GSDMD改善动脉粥样硬化
3
作者 于宁 宋囡 +1 位作者 曹媛 贾连群 《中国中西医结合杂志》 北大核心 2025年第5期578-583,共6页
目的探讨黄芩苷调控NOD-样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)/半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(caspase-1)/消皮素D(GSDMD)焦亡通路介导胆固醇外流改善动脉粥样硬化(AS)的作用及机制。方法将30只ApoE-/-AS小鼠随机分为模型组、黄芩苷组、辛伐... 目的探讨黄芩苷调控NOD-样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)/半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(caspase-1)/消皮素D(GSDMD)焦亡通路介导胆固醇外流改善动脉粥样硬化(AS)的作用及机制。方法将30只ApoE-/-AS小鼠随机分为模型组、黄芩苷组、辛伐他汀组,每组10只,另取10只C57BL/6J小鼠作为对照组。模型组及药物干预组高脂饮食喂饲,对照组普通饮食喂饲。8周后,黄芩苷组以黄芩苷50 mg/(kg·d)、辛伐他汀组以辛伐他汀2.275 mg/(kg·d)灌胃,对照组与模型组给予等量生理盐水灌胃,干预4周。全自动生化分析仪检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量;HE染色观察主动脉脂质沉积;透射电镜观察主动脉超微结构;ELISA法检测血清活性氧(ROS)含量;免疫组化法检测主动脉CD36、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、ATP结合盒转运体A1(ABCA1)表达;RT-qPCR法及Wes全自动蛋白分析仪检测主动脉NLRP3、caspase-1、GSDMD mRNA及蛋白表达。结果对照组主动脉内膜光滑,未见脂质沉积,内皮细胞胞膜完整;模型组主动脉内膜有明显隆起的斑块,泡沫细胞周围有大量针状空隙的胆固醇结晶聚集,内皮细胞肿胀,包膜结构不完整且可见气泡状突出物形成,线粒体数目减少;黄芩苷组及辛伐他汀组几乎无斑块形成,内皮细胞及线粒体病变较模型组明显改善。与对照组比较,模型组小鼠血清TC、TG、LDL-C水平、ROS含量、主动脉CD36蛋白表达、NLRP3、caspase-1、GSDMD mRNA及蛋白表达升高(P<0.01),血清HDL-C水平、主动脉PPARγ、ABCA1蛋白表达降低(P<0.01)。与模型组比较,黄芩苷组、辛伐他汀组TC、TG、LDL-C水平、ROS含量、主动脉CD36蛋白、NLRP3、caspase-1、GSDMD mRNA及蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01),血清HDL-C水平、主动脉PPARγ、ABCA1蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01)。结论黄芩苷具有减轻主动脉脂质沉积,改善动脉粥样硬化作用,其机制可能与促进巨噬细胞胆固醇外流,抑制NLRP3/caspase-1/GSDMD焦亡通路有关。 展开更多
关键词 黄芩苷 动脉粥样硬化 胆固醇逆转运 NLRP3/caspase-1/gsdmd信号通路 细胞焦亡
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RHOH通过NLRP3/Caspase-1/GSDMD通路介导鼻咽癌细胞焦亡机制的研究
4
作者 刘丹 岑瑞祥 +1 位作者 徐芬 喻辉 《吉林医学》 2025年第10期2344-2348,共5页
目的:探讨RHOH在鼻咽癌(NPC)中的表达特征及其通过NLRP3/Caspase-1/GSDMD信号通路介导细胞焦亡的潜在机制,为NPC的靶向治疗提供理论依据。方法:首先基于GEO数据库GSE53819数据集进行生物信息学分析,筛选与NLRP3表达显著相关的上游基因,... 目的:探讨RHOH在鼻咽癌(NPC)中的表达特征及其通过NLRP3/Caspase-1/GSDMD信号通路介导细胞焦亡的潜在机制,为NPC的靶向治疗提供理论依据。方法:首先基于GEO数据库GSE53819数据集进行生物信息学分析,筛选与NLRP3表达显著相关的上游基因,并结合差异表达结果确定RHOH为研究靶点。随后利用NPC细胞系HNE-2,采用CCK-8、克隆形成和Transwell实验评估RHOH对NPC细胞活力、增殖和侵袭能力的影响;同时检测NLRP3/Caspase-1/GSDMD通路关键分子的表达变化,并通过透射电子显微镜观察炎性小体的超微结构。结果:生物信息学分析显示,RHOH与NLRP3表达呈显著正相关(r=0.85,P<0.05),且在NPC组织中显著下调(P<0.05)。细胞实验结果表明,RHOH过表达组中RHOH的mR-NA和蛋白表达均明显高于对照组。功能实验显示,RHOH过表达显著抑制NPC细胞的活力、克隆形成及侵袭能力(P<0.05)。机制方面,RHOH过表达可显著上调NLRP3、Caspase-1及GSDMD的mRNA和蛋白水平(P<0.05),并在超微结构水平观察到典型炎性小体结构,提示细胞焦亡的激活。结论:RHOH在NPC中表达下调,可能通过激活NLRP3/Caspase-1/GSD-MD信号通路诱导细胞焦亡,从而抑制肿瘤的恶性生物学行为。 展开更多
关键词 鼻咽癌 RHOH 细胞焦亡 NLRP3炎性小体 caspase-1 gsdmd
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桂枝茯苓丸加味调控Caspase-1/GSDMD信号通路预防子宫内膜息肉术后复发的机制研究 被引量:5
5
作者 吉丽 万朝霞 +3 位作者 周丽 任青玲 尚振中 刘承东 《辽宁中医杂志》 北大核心 2025年第5期67-71,共5页
目的探讨桂枝茯苓丸加味预防子宫内膜息肉术后复发的疗效及可能作用机制。方法将85例痰湿瘀结证子宫内膜息肉术后患者随机分为治疗组(43例)、对照组(42例),对照组给予地屈孕酮治疗,治疗组给予桂枝茯丸加味联合地屈孕酮治疗。治疗3个月... 目的探讨桂枝茯苓丸加味预防子宫内膜息肉术后复发的疗效及可能作用机制。方法将85例痰湿瘀结证子宫内膜息肉术后患者随机分为治疗组(43例)、对照组(42例),对照组给予地屈孕酮治疗,治疗组给予桂枝茯丸加味联合地屈孕酮治疗。治疗3个月经周期,比较两组中医证候积分、Caspase-1/GSDMD信号通路[Gasdermin家族蛋白D(Gasdermin Family protein D,GSDMD)、半胱氨酸蛋白酶-1(caspase-1)、白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-18(Interleukin-18,IL-18)]、增殖和凋亡基因[增殖细胞核相关抗原Ki-67(Ki-67)、B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(B-cell lymphoma/leukemia-2 gene,Bc1-2)]、临床疗效、不良反应及复发率。结果①治疗组经期延长/经量过多、经色紫黯/淋漓不尽、经行泄泻、经期出血、经行腹痛评分及中医证候总分低于对照组(P<0.05)。②治疗组子宫内膜组织GSDMD、Caspase-1、IL-1β、IL-18表达低于对照组(P<0.05)。③治疗组子宫内膜组织Ki-67、Bcl-2表达低于对照组(P<0.05)。④治疗组总有效率93.02%(40/43)高于对照组76.19%(32/42)(χ^(2)=4.647,P<0.05)。⑤治疗组不良反应(11.63%,5/43)、复发率(4.65%,2/43)低于对照组33.33%(14/42)、21.43%(9/42)(χ^(2)=5.767,5.308,P<0.05)。结论桂枝茯苓丸加味能够提高子宫内膜息肉术后患者临床疗效,减少不良反应及复发率,可能与抑制Caspase-1/GSDMD信号通路、拮抗炎症反应与下调细胞增殖和凋亡基因表达等因素有关。 展开更多
关键词 子宫内膜息肉 桂枝茯苓丸 caspase-1/gsdmd信号通路 增殖和凋亡基因
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基于NLRP3/ASC/Caspase-1途径探讨清热散浊饮对痛风性关节炎合并高尿酸血症模型大鼠的作用机制 被引量:2
6
作者 李浩林 柏倩 +5 位作者 程伟刚 李伟青 杨娟娟 贺佩鑫 杨会军 王海东 《中国实验方剂学杂志》 北大核心 2025年第3期49-57,共9页
目的:探讨清热散浊饮治疗痛风性关节炎(GA)合并高尿酸血症(HUA)的效果及相关作用机制。方法:将60只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、秋水仙碱组(0.5 mg·kg^(-1))、清热散浊饮低、中、高剂量组(17、34、68 g·kg^(-1)),每组1... 目的:探讨清热散浊饮治疗痛风性关节炎(GA)合并高尿酸血症(HUA)的效果及相关作用机制。方法:将60只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、秋水仙碱组(0.5 mg·kg^(-1))、清热散浊饮低、中、高剂量组(17、34、68 g·kg^(-1)),每组10只,除正常组外,其余大鼠均使用改良后GA合并HUA的造模方法;同时给药组每日下午灌胃相应药物,正常组和模型组灌胃等体积无菌生理盐水。末次给药2 h后测定大鼠血清尿酸(SUA)浓度,计算大鼠造模后0.5、12、24、48 h踝关节肿胀程度并对关节炎症评分,苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠踝关节病理组织形态,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测大鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、C反应蛋白(CRP)、白细胞介素-18(IL-18)含量,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测各组大鼠踝关节滑膜组织中NOD样受体蛋白3(NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、胱天蛋白酶-1(Caspase-1)、焦孔素D(GSDMD)、核转录因子-κB(NF-κB)mRNA表达水平,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠滑膜组织中NLRP3、ASC、Caspase-1蛋白表达,免疫组化检测关节滑膜组织中GSDMD、NF-κB蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠SUA浓度明显升高(P<0.05),踝关节肿胀程度及关节炎症评分升高(P<0.05),滑膜内血管数量增多,滑膜囊内见炎细胞灶,血清TNF-α、IL-1β、CRP、IL-18含量明显升高(P<0.05),踝关节滑膜组织中NLRP3、ASC、Caspase-1、GSDMD、NF-κB mRNA及蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与模型组比较,清热散浊饮中、高剂量组大鼠SUA浓度明显降低(P<0.05),踝关节肿胀程度减轻(P<0.05),关节炎症评分降低(P<0.05),血清TNF-α、IL-1β、CRP、IL-18含量降低(P<0.05),踝关节滑膜组织中NLRP3、ASC、Caspase-1、GSDMD、NF-κB mRNA水平及蛋白表达水平降低(P<0.05),但在改善踝关节病理组织形态方面,仅有高剂量组大鼠踝关节滑膜形态良好,关节软骨未见明显病变。结论:清热散浊饮可能通过下调NLRP3/ASC/Caspase-1通路活性,抑制TNF-α、IL-1β、CRP、IL-18等炎症因子表达,从而发挥防治GA合并HUA的作用。 展开更多
关键词 清热散浊饮 NOD样受体蛋白3(NLRP3)/凋亡相关斑点样蛋白(asc)/胱天蛋白酶-1(caspase-1)通路 痛风性关节炎 高尿酸血症
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基于NLRP3/Caspase-1/GSDMD通路探讨黄连解毒汤改善APP/PS1小鼠细胞焦亡、神经炎症和学习认知功能的作用机制 被引量:4
7
作者 程炜 杨硕 +2 位作者 何章欣 陈苇 谭爱华 《中国实验方剂学杂志》 北大核心 2025年第12期11-19,共9页
目的:探讨黄连解毒汤通过NOD样受体蛋白3(NLRP3)/胱天蛋白酶-1(Caspase-1)/消皮素D(GSDMD)通路抑制阿尔茨海默病(AD)小鼠细胞焦亡和神经炎症的作用机制。方法:将30只淀粉样前体蛋白/突变人早老蛋白1(APP/PS1)双转基因小鼠随机均分为模型... 目的:探讨黄连解毒汤通过NOD样受体蛋白3(NLRP3)/胱天蛋白酶-1(Caspase-1)/消皮素D(GSDMD)通路抑制阿尔茨海默病(AD)小鼠细胞焦亡和神经炎症的作用机制。方法:将30只淀粉样前体蛋白/突变人早老蛋白1(APP/PS1)双转基因小鼠随机均分为模型组(Model组)、阳性药组(Donepezil组,0.65 mg·kg^(-1))、黄连解毒汤组(HLJDT组,5.2 g·kg^(-1));10只C57BL/6小鼠为空白组(Control组)。采用Morris水迷宫和新物体识别实验评估小鼠学习记忆能力;采用尼氏染色观察小鼠海马区神经元形态、数目及分布情况;采用高尔基染色观察小鼠海马区神经元突触形态及密度;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测小鼠海马区神经炎症相关因子及细胞焦亡通路NLRP3/Caspase-1/GSDMD mRNA表达情况;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测突触后致密蛋白95(PSD95)、淀粉样前体蛋白(APP)、炎症相关因子核转录因子-κB(NF-κB)、磷酸化(p)-NF-κB、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)及焦亡通路NLRP3、Caspase-1、GSDMD、GSDMD-N的表达情况。结果:与Control组比较,Model组小鼠小鼠学习记忆能力显著下降(P<0.01);海马CA3区神经元数量和海马CA1区树突棘数量显著减少(P<0.01);海马组织中NLRP3、Caspase-1、GSDMD、NF-κB、TNF-α、IL-1β、IL-18 mRNA表达水平显著升高(P<0.01);海马组织中PSD95蛋白表达水平显著降低,NLRP3、Caspase-1、GSDMD、p-NF-κB/NF-κB、TNF-α、IL-1β、APP表达水平显著升高(P<0.01)。与Model组比较,Donepezil组和HLJDT组小鼠学习记忆能力明显升高(P<0.05,P<0.01);海马CA3区神经元数量和海马CA1区树突棘数量显著增加(P<0.01);海马组织中NLRP3、Caspase-1、GSDMD、NF-κB、TNF-α、IL-1β、IL-18 mRNA表达水平明显降低(P<0.05,P<0.01);海马组织中NLRP3、Caspase-1、GSDMD、p-NF-κB/NF-κB、TNF-α、IL-1β、APP表达水平显著下降,PSD95水平明显升高(P<0.05,P<0.01),Donepezil组GSDMD-N水平差异无统计学意义,HLJDT组GSDMD-N表达水平明显下降(P<0.05)。结论:该研究证实黄连解毒汤能够改善APP/PS1双转基因小鼠的学习记忆能力,抑制了神经元丢失和突触损害,这可能是通过NLRP3/Caspase-1/GSDMD途径抑制细胞焦亡来发挥作用的。 展开更多
关键词 黄连解毒汤 阿尔茨海默病 神经炎症 细胞焦亡 NOD样受体蛋白3(NLRP3)/胱天蛋白酶-1(caspase-1)/消皮素D(gsdmd)信号通路
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中等强度耐力运动对老年性骨质疏松症小鼠NLRP3/Caspase-1/GSDMD焦亡通路的影响 被引量:1
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作者 匡一瑾 周丹丹 +5 位作者 周予婧 刘松涛 唐暹 佘艳 尹林玉 艾坤 《湖南中医药大学学报》 2025年第4期617-623,共7页
目的 基于类NOD样受体家族含吡啶结构域蛋白3(NLRP3)/半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)/气孔蛋白D(GSDMD)信号通路探索中等强度耐力运动抗老年性骨质疏松症(SOP)的作用。方法 将21只18月龄雄性C57小鼠随机分为18月龄组、20月龄组、运动组,每... 目的 基于类NOD样受体家族含吡啶结构域蛋白3(NLRP3)/半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)/气孔蛋白D(GSDMD)信号通路探索中等强度耐力运动抗老年性骨质疏松症(SOP)的作用。方法 将21只18月龄雄性C57小鼠随机分为18月龄组、20月龄组、运动组,每组7只,采用自然衰老的雄性小鼠复制SOP动物模型,另取7只6月龄雄性C57小鼠作为青年组。青年组和18月龄组在适应性喂养1周后处死并取材,运动组小鼠进行中等强度耐力运动,20月龄组不作任何处理,干预8周后取材。采用MicroCT检测各组小鼠左侧股骨骨密度(BMD),ELISA检测各组小鼠血清骨代谢标志物Ⅰ型胶原C端肽(CTX-1)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRACP)、I型前胶原氨基端前肽(PINP)、特异性碱性磷酸酶B(B-ALP)水平及右侧股骨白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-18(IL-18)含量变化,Western blot检测各组小鼠右侧股骨中NLRP3、Caspase-1、气孔蛋白D的N端片段(GSDMD-N)蛋白表达水平。结果 与青年组比较,18月龄组和20月龄组血清CTX-1、TRACP,右侧股骨NLRP3、Caspase-1、GSDMD-N、IL-1β、IL-18表达水平均升高(P<0.05,P<0.01),血清PINP、B-ALP和左侧股骨BMD均降低(P<0.05,P<0.01);与18月龄组比较,20月龄组血清CTX-1、TRACP和右侧股骨NLRP3、Caspase-1、GSDMD-N、IL-1β、IL-18表达水平均升高(P<0.05,P<0.01),血清PINP、B-ALP和左侧股骨BMD均降低(P<0.05,P<0.01);与20月龄组相比,运动组血清CTX-1、TRACP,右侧股骨NLRP3、Caspase-1、GSDMD-N、IL-1β、IL-18表达水平均降低(P<0.05,P<0.01),血清PINP、B-ALP和左侧股骨BMD均升高(P<0.05,P<0.01)。结论 中等强度耐力运动可提高SOP小鼠的骨密度、调节骨代谢,这一作用可能与其抑制NLRP3/Caspase-1/GSDMD信号通路、降低炎症和焦亡水平有关。 展开更多
关键词 老年性骨质疏松症 耐力运动 炎症 焦亡 NLRP3 caspase-1 gsdmd
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基于NLRP3/Caspase-1/GSDMD通路探讨逍遥散加味对实验性自身免疫性甲状腺炎模型大鼠细胞焦亡的机制影响 被引量:1
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作者 赵培伯 戚晓楠 +1 位作者 贾春艳 张兰 《中华中医药学刊》 北大核心 2025年第11期55-59,I0008,共6页
目的基于细胞焦亡NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)/含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1(Caspase-1)/消皮素D(GSDMD)信号通路,以实验性自身免疫性甲状腺炎(Experimental autoimmune thyroiditis,EAT)模型大鼠为研究对象,探究逍遥散... 目的基于细胞焦亡NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)/含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1(Caspase-1)/消皮素D(GSDMD)信号通路,以实验性自身免疫性甲状腺炎(Experimental autoimmune thyroiditis,EAT)模型大鼠为研究对象,探究逍遥散加味治疗桥本氏甲状腺炎(Hashimoto’s thyroiditis,HT)的作用机制。方法40只SD大鼠随机分配空白组10只、造模组30只。造模组经皮下多点注射猪甲状腺球蛋白佐剂免疫乳结合饮用高碘水建立EAT大鼠模型。成模后随机分为模型组10只、逍遥散加味组10只及硒酵母组10只。逍遥散加味组予7.65 g/(kg·d)逍遥散加味溶液,硒酵母组予36μg/(kg·d)硒酵母片水溶液,余两组均予蒸馏水等体积灌胃。8周后,HE染色观察EAT大鼠甲状腺组织形态结构;透射电子显微镜下观察EAT大鼠甲状腺滤泡上皮细胞超微结构;酶联免疫吸附测定法(Enzym-linkedimmunosorbent assay,ELISA)检测EAT大鼠血清甲状腺过氧化物酶抗体(Thyroid peroxidase antibody,TPOAb)、甲状腺球蛋白抗体(Thyroglobulin antibody,TgAb)水平、白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-18(Interleukin-18,IL-18)水平;Western Blot检测EAT大鼠甲状腺组织细胞焦亡相关蛋白表达。结果(1)HE染色及透射电镜结果示:模型组大鼠甲状腺组织存在明显的病理损伤,甲状腺滤泡上皮细胞膜结构模糊、破损,线粒体明显肿胀,膜结构模糊、溶解,粗面内质网扩张;各治疗组的大鼠甲状腺病理损伤程度均减轻,线粒体与内质网损伤程度均有减轻,其中逍遥散加味组减轻程度最为明显。(2)ELISA检测可见:模型组大鼠血清TgAb、TPOAb抗体及血清IL-1β、IL-18水平较空白组呈显著升高趋势(P<0.01),各治疗组均能降低大鼠血清TPOAb、TgAb抗体及血清IL-1β、IL-18水平(P<0.01,P<0.05),逍遥散加味组下降尤甚。(3)WB检测各组焦亡相关蛋白表达水平所示:模型组大鼠甲状腺组织NLRP3、Cleaved-Caspase-1、GSDMD-N、凋亡相关的斑点样蛋白(ASC)蛋白的表达水平均呈显著升高趋势(P<0.01),余治疗组均显著下降(P<0.01,P<0.05),以逍遥散加味组降低程度最为明显。结论逍遥散加味减轻甲状腺组织的病理损伤,降低TPOAb、TgAb抗体水平,抑制细胞焦亡状态,其作用机制可能与调控NLRP3/Caspase-1/GSDMD信号通路相关。 展开更多
关键词 逍遥散加味 NLRP3/caspase-1/gsdmd通路 细胞焦亡 实验性自身免疫性甲状腺炎
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基于GSDMD基因介导NLRP3/Caspase-1/GSDMD通路的粉防己碱诱导三阴性乳腺癌细胞焦亡机制研究
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作者 辛国松 刘禹含 +4 位作者 侯妍秀 李文兰 于淼 季宇彬 李海茹 《中草药》 北大核心 2025年第18期6657-6666,共10页
目的探究粉防己碱对三阴性乳腺癌(triple-negative breast cancer,TNBC)细胞的作用及作用机制,明确其是否通过调控NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NOD-like receptor family pyrin domain containing 3,NLRP3)/半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-... 目的探究粉防己碱对三阴性乳腺癌(triple-negative breast cancer,TNBC)细胞的作用及作用机制,明确其是否通过调控NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NOD-like receptor family pyrin domain containing 3,NLRP3)/半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(cystein-asparate protease-1,Caspase-1)/Gasdermin D蛋白(Gasdermin D,GSDMD)通路诱导细胞焦亡,为TNBC的治疗提供新策略。方法使用不同浓度粉防己碱处理MDA-MB-231细胞,采用MTT法检测细胞增殖抑制情况。运用GSDMD小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)转染技术沉默GSDMD基因,通过荧光显微镜观察转染效率,并利用Western blotting验证转染后GSDMD蛋白表达变化。设置对照组及粉防己碱(5、10、20μg/mL)组和粉防己碱(20μg/mL)+GSDMD siRNA(siGSDMD)组,采用细胞形态观察、集落实验、膜联蛋白V(Annexin V)/碘化丙啶(propidium iodide,PI)双染色法、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)细胞毒性实验、划痕实验、Transwell实验、Western blotting及qRTPCR,分别从细胞形态、克隆能力、焦亡率、膜通透性、迁移与侵袭能力以及蛋白和基因表达水平多个维度,系统评估粉防己碱对MDA-MB-231细胞的影响,并探究其是否通过NLRP3/Caspase-1/GSDMD通路发挥作用。结果粉防己碱显著抑制MDA-MB-231细胞增殖,呈剂量相关性(P<0.01),且能有效诱导细胞焦亡,表现为细胞形态改变、膜完整性破坏、细胞核固缩以及焦亡率和LDH释放量的显著增加(P<0.01)。同时,随着粉防己碱给药浓度的增加,细胞的集落数目、划痕愈合率和侵袭细胞数显著降低(P<0.01)。机制研究发现,粉防己碱上调NLRP3、Caspase-1、白细胞介素-18(interleukin-18,IL-18)和IL-1β的蛋白及m RNA表达(P<0.01),促进pro-IL-1β向mature-IL-1β转化。而siGSDMD干预可显著逆转粉防己碱的调控作用(P<0.01),表明GSDMD基因在粉防己碱诱导的焦亡过程中发挥关键作用。结论粉防己碱通过调控NLRP3/Caspase-1/GSDMD通路诱导MDA-MB-231细胞焦亡,抑制细胞增殖、迁移和侵袭。 展开更多
关键词 粉防己碱 三阴性乳腺癌 NLRP3/caspase-1/gsdmd通路 gsdmd基因 细胞焦亡
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大黄糖络丸调控NLRP3/Caspase-1/GSDMD通路改善糖尿病大鼠大血管炎症损伤的作用机制
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作者 闫丰喆 白敏 +5 位作者 杨丽霞 宋冰 张延英 郭超 梁永林 朱向东 《中国现代应用药学》 北大核心 2025年第15期2580-2587,共8页
目的明确大黄糖络丸对糖尿病大鼠大血管损伤的干预作用,并基于NLRP3/Caspase-1/GSDMD通路介导炎症损伤探讨其具体机制。方法选取40只SPF级9周龄ZDF(纯合子fa/fa)大鼠进行实验,适应性喂养1周后采用Purina#5008饲料诱导3周复制糖尿病大鼠... 目的明确大黄糖络丸对糖尿病大鼠大血管损伤的干预作用,并基于NLRP3/Caspase-1/GSDMD通路介导炎症损伤探讨其具体机制。方法选取40只SPF级9周龄ZDF(纯合子fa/fa)大鼠进行实验,适应性喂养1周后采用Purina#5008饲料诱导3周复制糖尿病大鼠模型,成模后随机分为模型对照组、二甲双胍组(0.18g·kg^(-1))和大黄糖络丸高、中、低剂量组(2.16、1.08、0.54 g·kg^(-1)),另选8只同龄ZDF(杂合子fa/+)大鼠作为空白对照组,干预12周后测定大鼠体质量和空腹血糖。采用全自动生化分析仪检测血浆中TC、TG、LDL-c、HDL-c的含量;采用HE染色法观察大鼠血管组织病理形态变化;采用ELISA技术检测血清中IL-1β和IL-18的含量;采用Westernblotting与RT-qPCR技术检测血管组织中NLRP3、ASC、Caspase-1、GSDMD蛋白和mRNA表达水平。结果与空白对照组相比,模型对照组大鼠体质量和空腹血糖含量显著升高(P<0.05),TC、TG、LDL-c含量显著升高(P<0.05),HDL-c含量显著降低(P<0.05),血管内细胞排列不规则且出现细胞空泡,血管内膜增厚,IL-1β、IL-18含量显著增加(P<0.05),NLRP3、ASC、Caspase-1、GSDMD蛋白和mRNA表达显著增加(P<0.05)。与模型对照组相比,大黄糖络丸高、中量组及二甲双胍组大鼠体质量和空腹血糖均显著降低(P<0.05),TC、TG、LDL-c含量显著升高(P<0.05),HDL-c含量显著降低(P<0.05),不同程度改善了血管病理损伤,血清中炎症因子(IL-1β、IL-18)含量显著降低(P<0.05),NLRP3、ASC、Caspase-1、GSDMD的蛋白与mRNA表达显著降低(P<0.05)。与大黄糖络丸低剂量组相比,大黄糖络丸高剂量组有更加显著的改善作用(P<0.05)。结论大黄糖络丸能够显著改善糖尿病大鼠血管损伤,并呈剂量依赖性,其具体机制与大黄糖络丸抑制NLRP3/Caspase-1/GSDMD通路改善血管炎症性损伤有关。 展开更多
关键词 糖尿病大血管病变 大黄糖络丸 炎症损伤 NLRP3/caspase-1/gsdmd通路
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消疹方通过NLRP3/caspase-1/GSDMD信号通路抑制细胞焦亡而减轻EGFR抑制剂所致小鼠皮肤毒性
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作者 王心甜 程呈 +3 位作者 罗玲 陈彦 刘玉萍 邢海燕 《中国病理生理杂志》 北大核心 2025年第7期1392-1399,共8页
目的:探讨消疹方(Xiaozhen Fang,XZF)减轻表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)抑制剂诱导的小鼠皮肤毒性的作用及其潜在机制。方法:建立皮肤毒性小鼠模型,设置空白组、厄洛替尼(150 mg/kg)组、厄洛替尼(150 mg/kg... 目的:探讨消疹方(Xiaozhen Fang,XZF)减轻表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)抑制剂诱导的小鼠皮肤毒性的作用及其潜在机制。方法:建立皮肤毒性小鼠模型,设置空白组、厄洛替尼(150 mg/kg)组、厄洛替尼(150 mg/kg)和消疹方(45 g/kg)联合给药组,每组5只。评估动物皮肤毒性严重程度、体重变化、利用Western blot检测皮肤组织中消皮素D(gasdermin D,GSDMD)、胱天蛋白酶1(caspase-1)和白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)的表达水平,同时利用免疫荧光分析皮肤组织中GSDME、IL-1β、caspase-1和核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)的表达水平;体外培养HacaT细胞,制备XZF含药血清,厄洛替尼刺激细胞24 h后,分别给予不同浓度的XZF含药血清干预24 h,采用MTT法评估细胞活力,通过透射电镜观察细胞超微结构,同时通过免疫荧光分析p53结合蛋白1(p53-binding protein 1,53BP1)的表达情况。结果:皮肤毒性小鼠模型经XZF治疗后,皮疹发生率降低,四肢红肿程度减轻,体重显著升高(P<0.05),背部组织中GSDMD、GSDME、IL-1β、caspase-1和NLRP3表达水平下调(P<0.05或P<0.01);经XZF含药血清干预后,HacaT细胞焦亡显著受到抑制(P<0.01),电镜下观察细胞表面相对完整,没有明显的孔洞或损伤,且细胞中53BP1蛋白免疫荧光强度显著下调(P<0.01)。结论:消疹方对EGFR抑制剂诱导的小鼠皮肤毒性具有逆转作用,其可能通过NLRP3/caspase-1/GSDMD信号通路调控细胞焦亡从而发挥细胞保护效应,从而减轻其引起的皮肤毒性。 展开更多
关键词 消疹方 厄洛替尼 皮肤毒性 细胞焦亡 NLRP3/caspase-1/gsdmd信号通路
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清化养肺颗粒通过调控NLRP3/Caspase-1/GSDMD信号通路抑制肺纤维化巨噬细胞焦亡的机制
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作者 何星灵 李姿儒 +10 位作者 张小娇 李思静 刘东华 陈嘉慧 李嘉祺 余航宇 汤慧敏 廖慧丽 鲁路 倪世豪 杨忠奇 《中华中医药杂志》 北大核心 2025年第5期2567-2573,共7页
目的:探讨清化养肺颗粒(QHYF)对特发性肺纤维化(IPF)的治疗作用及其潜在机制。方法:将小鼠随机分为对照组(Control组),模型组(Model组),QHYF低、中、高剂量组(QHYF-L组、QHYF-M组、QHYF-H组)和吡非尼酮组(PFD组),采用博来霉素诱导建立IP... 目的:探讨清化养肺颗粒(QHYF)对特发性肺纤维化(IPF)的治疗作用及其潜在机制。方法:将小鼠随机分为对照组(Control组),模型组(Model组),QHYF低、中、高剂量组(QHYF-L组、QHYF-M组、QHYF-H组)和吡非尼酮组(PFD组),采用博来霉素诱导建立IPF模型;体外培养RAW264.7巨噬细胞,采用LPS建立细胞焦亡模型。观察小鼠一般情况,记录体质量、肺系数;观察肺组织病理变化;检测肺组织羟脯氨酸(Hyp)及炎症因子[白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]水平;采用免疫组化评估α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达水平;通过转录组学分析小鼠基因表达的变化;Western Blot检测核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-1(Caspase-1)、消皮素D(GSDMD)、IL-1β蛋白表达;免疫荧光观察活性氧(ROS)水平及F4/80和GSDMD表达情况;qPCR检测NLRP3、Caspase-1、GSDMD mRNA水平。结果:与Model组比较,第28天时QHYF-H组及PFD组体质量显著增加(P<0.01),肺系数、病理评分均显著降低(P<0.01,P<0.05),肺Hyp含量、α-SMA表达、ROS、IL-1β和TNF-α水平显著降低(P<0.01,P<0.05)。转录组分析显示,QHYF组抑制纤维化与焦亡相关基因表达。与Model组比较,QHYF-H组及PFD组肺组织中NLRP3、Caspase-1、GSDMD、IL-1β蛋白及NLRP3、Caspase-1、GSDMD mRNA表达显著下降(P<0.01,P<0.05),巨噬细胞焦亡信号显著降低(P<0.01)。体外实验表明,QHYF含药血清较LPS组可显著降低焦亡细胞NLRP3、Caspase-1、GSDMD mRNA表达水平(P<0.01),这种改善作用可被NLRP3激动剂显著逆转(P<0.01)。结论:QHYF通过调控NLRP3/Caspase-1/GSDMD信号通路抑制IPF巨噬细胞焦亡。 展开更多
关键词 清化养肺颗粒 特发性肺纤维化 巨噬细胞 焦亡 机制 NLRP3/caspase-1/gsdmd信号通路 炎症因子
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基于NLRP3/Caspase-1/GSDMD信号通路探讨化瘀通络灸对血管性痴呆大鼠学习记忆能力及海马CA1区神经损伤的影响
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作者 邱帅辉 杨琪琪 +5 位作者 杨骏 王克坡 周欣华 李蔚然 王佩云 李飞 《中国针灸》 北大核心 2025年第11期1591-1599,共9页
目的:观察化瘀通络灸对血管性痴呆(VD)大鼠NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)/半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)/消皮素D(GSDMD)信号通路的影响,探讨化瘀通络灸对学习记忆能力及海马CA1区神经损伤改善的机制。方法:80只SPF级雄... 目的:观察化瘀通络灸对血管性痴呆(VD)大鼠NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)/半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)/消皮素D(GSDMD)信号通路的影响,探讨化瘀通络灸对学习记忆能力及海马CA1区神经损伤改善的机制。方法:80只SPF级雄性Wistar大鼠,通过水迷宫实验剔除3只,从剩余大鼠中随机选取12只作为假手术组,剩余大鼠采用改良双侧颈总动脉结扎法制备VD模型,将造模成功的36只大鼠随机分为模型组、西药组和艾灸组,每组12只。西药组予尼莫地平溶液(12 mg/kg)灌胃干预;艾灸组予以化瘀通络灸干预,予“神庭”“大椎”悬灸,予“百会”隔附子饼灸,每穴每次灸20 min。均每日1次,连续干预21 d。造模前后及干预后,采用Morris水迷宫实验评估大鼠认知功能。干预后,采用免疫荧光法观察大鼠海马CA1区小胶质细胞活化及形态,透射电镜观察大鼠海马CA1区神经元超微结构,Western blot法检测大鼠海马CA1区NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、Caspase-1、GSDMD及白细胞介素-1β(IL-1β)蛋白表达,ELISA法检测大鼠海马CA1区白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量。结果:与假手术组比较,模型组大鼠平均逃避潜伏期延长(P<0.01),穿越平台次数减少(P<0.01);海马CA1区小胶质细胞突起增厚,胞质肥大,离子钙结合衔接分子1(IBA-1)相对荧光强度增强(P<0.05);海马CA1区神经元超微结构严重损害,粗面内质网肿胀,线粒体畸形、肿胀,甚至部分线粒体嵴断裂溶解,呈空泡样变化;海马CA1区NLRP3、ASC、Caspase-1、GSDMD、IL-1β蛋白表达升高(P<0.001),IL-6、IL-8及TNF-α含量增加(P<0.001)。与模型组比较,西药组与艾灸组大鼠平均逃避潜伏期缩短(P<0.01),穿越平台次数增加(P<0.01);海马CA1区小胶质细胞突起较细小,IBA-1相对荧光强度降低(P<0.05);海马CA1区神经元超微结构损伤均有不同程度改善;海马CA1区NLRP3、ASC、Caspase-1、GSDMD、IL-1β蛋白表达降低(P<0.001),IL-6、IL-8及TNF-α含量降低(P<0.001)。与西药组比较,艾灸组大鼠平均逃避潜伏期缩短(P<0.05),穿越平台次数增加(P<0.05);海马CA1区IBA-1相对荧光强度降低(P<0.05);海马CA1区神经元超微结构损伤改善;海马CA1区NLRP3、ASC、Caspase-1、GSDMD、IL-1β蛋白表达降低(P<0.001),IL-6、IL-8及TNF-α含量降低(P<0.001)。结论:化瘀通络灸能提高VD大鼠学习记忆能力,抑制小胶质细胞过度活化,改善海马CA1区神经损伤,其机制可能与调控NLRP3/Caspase-1/GSDMD信号通路,减轻炎症反应有关。 展开更多
关键词 血管性痴呆 化瘀通络灸 NLRP3/caspase-1/gsdmd信号通路 小胶质细胞 神经损伤
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基于miR-223-3p/NLRP3/Caspase-1/GSDMD信号轴探讨新风胶囊对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞焦亡的影响
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作者 王梦娜 汪元 +4 位作者 曹周芳 黄旦 孙艳秋 孙玥 王露琳 《中成药》 北大核心 2025年第5期1680-1687,共8页
目的 探讨新风胶囊对脂多糖(LPS)诱导的类风湿关节炎滑膜成纤维细胞(RA-FLS)的影响。方法 构建LPS诱导的RA-FLS炎症模型;SD大鼠灌胃给药制备新风胶囊含药血清;双荧光素酶报告分析miR-223-3p和NLRP3的靶向关系;构建miR-223-3p抑制表达质... 目的 探讨新风胶囊对脂多糖(LPS)诱导的类风湿关节炎滑膜成纤维细胞(RA-FLS)的影响。方法 构建LPS诱导的RA-FLS炎症模型;SD大鼠灌胃给药制备新风胶囊含药血清;双荧光素酶报告分析miR-223-3p和NLRP3的靶向关系;构建miR-223-3p抑制表达质粒(inhibitor)及阴性对照组,转染至RA-FLS中;分为LPS组、mimics NC组、mimics组、inhibitor NC组、inhibitor组;同时设置NC-FLS组、RA-FLS组、LPS组、新风胶囊组、新风胶囊+inhibitor-NC组、新风胶囊+inhibitor组、新风胶囊+inhibitor+MCC950组。采用CCK-8试剂盒法检测细胞增殖,流式细胞术检测RA-FLS细胞焦亡的改变;ELISA法检测IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-8水平;RT-qPCR法检测NLRP3、Caspase-1、GSDMD mRNA及miR-223-3p miRNA表达;Western blot法检测NLRP3、Caspase-1、GSDMD蛋白表达。结果 筛选得出20%新风胶囊为最佳含药血清浓度。双荧光素酶报告基因说明miR-223-3p与NLRP3存在结合位点。与NC-inhibitor比较,转染miR-223-3p inhibitor后细胞焦亡增多,IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-8水平升高,同时NLRP3、Caspase-1、GSDMD蛋白及mRNA表达升高;与NC-mimics比较,转染miR-223-3p mimics后则出现相反的结果。与模型组比较,新风胶囊含药血清组IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-8水平降低,miR-223-3p miRNA表达升高,同时NLRP3、Caspase-1、GSDMD蛋白及mRNA表达降低,细胞焦亡改善。结论 新风胶囊能够减轻炎症反应,减少细胞焦亡,其机制可能与调控miR-223-3p/NLRP3/Caspase-1/GSDMD信号轴有关。 展开更多
关键词 新风胶囊 类风湿关节炎 滑膜成纤维细胞 miR-223-3p/NLRP3/caspase-1/gsdmd信号轴 细胞焦亡
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异鼠李素调控NLRP3/ASC/caspase-1轴介导的细胞焦亡减轻急性肺损伤的机制研究 被引量:2
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作者 孙亚磊 郭宇 +5 位作者 王欣雨 张雅素 程雪 朱珂 陈立典 冯晓东 《中国中药杂志》 北大核心 2025年第15期4120-4128,共9页
旨在探讨异鼠李素(Isor)对急性肺损伤(ALI)的干预作用及对NOD样受体热蛋白结构域3(NLRP3)/凋亡相关斑点样蛋白(ASC)/半胱氨酸蛋白酶-1(caspase-1)轴介导的细胞焦亡机制的调控效应。在体内实验中,将60只BALB/c小鼠分为5组,除对照组外,其... 旨在探讨异鼠李素(Isor)对急性肺损伤(ALI)的干预作用及对NOD样受体热蛋白结构域3(NLRP3)/凋亡相关斑点样蛋白(ASC)/半胱氨酸蛋白酶-1(caspase-1)轴介导的细胞焦亡机制的调控效应。在体内实验中,将60只BALB/c小鼠分为5组,除对照组外,其他组小鼠灌胃给药1 h后气管滴注LPS造模,12 h后取材。体外实验中,RAW264.7细胞分为5组,除对照组外,其他组细胞药物预处理2 h后进行造模、指标检测。苏木素-伊红(HE)染色法观察肺组织的病理改变,同时检测肺肿胀程度、肺泡灌洗液(BALF)中蛋白水平、肺组织髓过氧化物酶(MPO)水平。细胞计数试剂8(CCK-8)方法进行细胞增殖毒性及细胞活力测定实验。酶联免疫吸附测定(ELISA)检测白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-18、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,免疫组化、免疫荧光、免疫印迹等方法检测NLRP3、ASC、剪切的半胱氨酸蛋白酶-1(cleaved caspase-1)、气孔蛋白D的N端片段(GSDMD-N)等蛋白水平。结果显示,在体内实验中,Isor能显著改善小鼠肺组织的病理损伤状态,降低肺肿胀程度、BALF中蛋白水平、肺组织MPO水平、炎症因子IL-1β、IL-6、IL-18、TNF-α等的水平,抑制NLRP3/ASC/caspase-1轴及焦亡核心基因GS-DMD-N的高表达。在体外实验中,通过细胞增殖毒性实验确定了Isor的安全剂量。Isor能减少细胞死亡,抑制NLRP3/ASC/caspase-1轴、GSDMD-N及炎症因子的表达水平。综上所述,Isor可能通过调控NLRP3/ASC/caspase-1轴介导的细胞焦亡,从而发挥减轻ALI的效应。 展开更多
关键词 急性肺损伤 细胞焦亡 NLRP3/asc/caspase-1轴 巨噬细胞 异鼠李素
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脑泰方通过caspase-1/GSDMD信号通路抗脑缺血再灌注损伤神经细胞焦亡的研究
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作者 王文凤 杜麒麟 +3 位作者 方锐 廖君 胡红玉 葛金文 《世界科学技术-中医药现代化》 北大核心 2025年第7期1851-1866,共16页
目的本研究旨在探索脑泰方(Naotaifang,NTF)抗脑缺血再灌注损伤(Cerebral ischemia reperfusion injury,CIRI)神经细胞焦亡的机制研究。方法首先通过网状Meta分析比较脑泰方与丁苯酞(dl-3-n-butylphthalide,NBP)对缺血性脑卒中的临床疗... 目的本研究旨在探索脑泰方(Naotaifang,NTF)抗脑缺血再灌注损伤(Cerebral ischemia reperfusion injury,CIRI)神经细胞焦亡的机制研究。方法首先通过网状Meta分析比较脑泰方与丁苯酞(dl-3-n-butylphthalide,NBP)对缺血性脑卒中的临床疗效,确定丁苯酞为本研究的阳性对照药物。然后采用大脑中动脉栓塞/再灌注(Middle cerebral artery occlusion/reperfusion,MCAO/R)法建立大鼠CIRI模型。将60只成年雄性SD大鼠按随机数字表法分为模型组(Model组)、脑泰方低剂量组(NTF-L组)、脑泰方中剂量组(NTF-M组)、脑泰方高剂量组(NTF-H组)、丁苯酞组(NBP组)和假手术组(Sham组),每组10只。MCAO/R术后,脑泰方(NTF-L组为4.5 g/kg、NTF-M组为9 g/kg、NTF-H组为18 g/kg)或丁苯酞(60 mg/kg)或蒸馏水(Sham组、Model组)连续灌胃7天。采用Zea Longa法进行神经功能评分,TTC染色检测脑梗死体积,HE染色和尼氏染色观察缺血侧皮质区神经细胞改变,ELISA法测定血清IL-1β与IL-18水平,Western blot检测缺血侧皮质区caspase-1以及GSDMD焦亡蛋白表达。结果网状Meta分析表明:在临床有效率、神经功能缺损评分、血栓素B2(Thromboxane B2,TXB2)表达三方面,丁苯酞组与脑泰方组干预效应值没有统计学差异。动物实验结果表明:Model组大鼠神经功能评分显著升高,脑梗死体积明显增大,缺血皮质区神经细胞结构被破坏,神经细胞及尼氏小体数量明显减少,IL-1β、IL-18炎症因子及caspase-1、GSDMD焦亡蛋白含量显著升高(P<0.01)。NTF-H组显著降低了Model组大鼠神经功能评分与脑梗死体积,明显改善了神经细胞形态及尼氏小体数量,明显降低了IL-1β、IL-18炎症因子及caspase-1、GSDMD焦亡蛋白表达(P<0.01);NTF-H组与NBP组在神经功能评分,脑梗死体积,IL-1β、IL-18、caspase-1以及GSDMD表达水平上均无明显统计学差异(P>0.05)。结论脑泰方和丁苯酞对缺血性脑卒中患者均有一定的治疗效果,且两者间并无明显差异,丁苯酞为本研究合适的阳性对照药物;脑泰方可通过caspase-1/GSDMD信号通路减轻神经细胞焦亡发挥抗CIRI的作用。 展开更多
关键词 脑泰方 脑缺血再灌注损伤 网状Meta分析 焦亡 caspase-1 gsdmd
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葛根素通过NLRP3/caspase-1/GSDMD信号通路对糖尿病小鼠心肌损伤的影响
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作者 陈秋燕 王璐 +1 位作者 黄仁彬 徐小惠 《中国药理学通报》 北大核心 2025年第7期1259-1264,共6页
目的研究葛根素(puerarin,PR)对糖尿病小鼠心肌损伤的保护作用及机制。方法随机选取8只雄性C57BL/6J小鼠作为对照组,剩下的小鼠通过腹腔注射链脲佐菌素(STZ)构建糖尿病模型,造模成功的小鼠随机分为模型组、PR高、中、低剂量组、焦亡抑制... 目的研究葛根素(puerarin,PR)对糖尿病小鼠心肌损伤的保护作用及机制。方法随机选取8只雄性C57BL/6J小鼠作为对照组,剩下的小鼠通过腹腔注射链脲佐菌素(STZ)构建糖尿病模型,造模成功的小鼠随机分为模型组、PR高、中、低剂量组、焦亡抑制剂(NSA)组和焦亡诱导剂(Nigericin)组,连续给药12周。末次给药结束后取小鼠血清和心脏组织,观察小鼠心肌的变化,检测血清中乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)含量,检测小鼠心肌组织中焦亡相关因子(NLRP3、caspase-1、GSDMD、IL-18、IL-1β)的蛋白和mRNA表达情况。结果与正常组相比,模型组小鼠心肌组织肿胀、扭曲,心肌排列紊乱,胶原纤维增多,血清中LDH、CK-MB含量增加、心肌组织中焦亡相关因子的表达均明显增高(P<0.05或P<0.01)。与模型组相比,PR及NSA组小鼠心肌组织病理变化明显改善,血清LDH、CK-MB含量明显降低,心肌组织中焦亡相关因子的表达得到明显抑制(P<0.05或P<0.01),Nigericin组未见明显改变。结论PR对糖尿病小鼠的心肌损伤具有保护作用,其机制可能与抑制NLRP3/caspase-1/GSDMD焦亡信号通路有关。 展开更多
关键词 葛根素 糖尿病 心肌损伤 细胞焦亡 炎症 NLRP3/caspase-1/gsdmd
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基于NLRP3/Caspase-1/GSDMD信号通路探讨温和汤治疗热性惊厥药效机制
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作者 余欢 郭文媛 +3 位作者 邓羿駃 李鑫 王孟清 帅云飞 《中国中医药信息杂志》 2025年第7期25-33,共9页
目的基于NLRP3/Caspase-1/GSDMD信号通路,通过网络药理学探讨温和汤治疗热性惊厥(FS)的作用机制,并进行实验验证。方法通过TCMSP、BATMAN-TCM、PubChem数据库及SwissADME平台检索并筛选温和汤活性成分及其作用靶点,通过GenCards、OMIM、... 目的基于NLRP3/Caspase-1/GSDMD信号通路,通过网络药理学探讨温和汤治疗热性惊厥(FS)的作用机制,并进行实验验证。方法通过TCMSP、BATMAN-TCM、PubChem数据库及SwissADME平台检索并筛选温和汤活性成分及其作用靶点,通过GenCards、OMIM、DisGeNET数据库查找FS疾病靶点,将药物与疾病交集靶点及其对应的活性成分导入Cytoscape3.7.2软件构建中药-活性成分-靶点网络,将交集靶点提交至STRING数据库构建蛋白相互作用网络,将交集靶点导入Metascape数据库进行GO和KEGG通路富集分析。建立FS大鼠模型,并予4.05、8.1、16.2 g/kg温和汤灌胃,连续21 d,将大鼠置于(45±0.5)℃恒温水浴箱中诱导惊厥发作,记录大鼠惊厥潜伏时间、惊厥持续时间,观察大鼠行为学表现,HE、Nissl染色观察大鼠海马组织形态,DHE荧光探针技术检测海马组织活性氧(ROS)含量,ELISA检测血清三磷酸腺苷(ATP)、γ-氨基丁酸(GABA)、谷氨酸(Glu)、胱天蛋白酶-1(Caspase-1)、Gasdermin D(GSDMD)、白细胞介素(IL)-1β、IL-18含量,Western blot检测海马组织NLRP3炎症小体相关蛋白表达。结果网络药理学分析得到温和汤活性成分98种,相应靶点1838个,与疾病交集靶点162个,核心成分是β-谷甾醇、槲皮素、木犀草素、反式角鲨烯、谷甾醇、皂角苷等,核心靶点有EGFR、TNF、JUN、MTOR等,主要通过参与调控炎症反应及细胞凋亡、线粒体功能与能量代谢等,介导PI3K-Akt信号通路及钙信号通路等抗炎途径发挥抗惊厥作用。实验结果表明,温和汤可延长FS模型大鼠惊厥潜伏时间,缩短惊厥持续时间,降低惊厥级别;改善海马组织病理损伤,修复受损神经元;显著降低血清ROS、Glu、Caspase-1、GSDMD、IL-1β、IL-18含量,显著升高ATP、GABA含量;降低海马组织NLRP3、ASC、pro-Caspase-1、pro-IL-1β、pro-IL-18蛋白表达。结论温和汤可能通过NLRP3/Caspase-1/GSDMD信号通路干预FS大鼠,抑制细胞焦亡以减轻神经炎症,进而影响神经递质GABA、Glu平衡,从而发挥抗FS、预防脑组织损伤的作用。 展开更多
关键词 热性惊厥 温和汤 网络药理学 实验验证 NLRP3/caspase-1/gsdmd信号通路
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柴朴汤通过调控NLRP3/Caspase-1/GSDMD通路改善哮喘大鼠细胞焦亡的作用机制 被引量:1
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作者 彭果然 程贝贝 +1 位作者 丁蓉珍 戴爱国 《中国实验方剂学杂志》 北大核心 2025年第22期135-144,共10页
目的:探讨柴朴汤对支气管哮喘大鼠的治疗作用及其对核苷酸结合寡聚化结构域样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)/胱天蛋白酶-1(Caspase-1)/消皮素D(GSDMD)通路的影响,阐明其改善细胞焦亡的机制。方法:将60只雄性SD大鼠随机分为正常组,... 目的:探讨柴朴汤对支气管哮喘大鼠的治疗作用及其对核苷酸结合寡聚化结构域样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)/胱天蛋白酶-1(Caspase-1)/消皮素D(GSDMD)通路的影响,阐明其改善细胞焦亡的机制。方法:将60只雄性SD大鼠随机分为正常组,模型组,柴朴汤低剂量组(5.0 g·kg^(-1))、中剂量组(10.0 g·kg^(-1))、高剂量组(20.0 g·kg^(-1)),地塞米松组(1.0 mg·kg^(-1)),每组10只。除正常组外,其余各组大鼠采用卵清蛋白(OVA)致敏和激发建立哮喘模型。柴朴汤各组大鼠灌胃给予相应剂量的柴朴汤药液,地塞米松组大鼠灌胃给予地塞米松,正常组和模型组给予等体积生理盐水。连续干预14 d后,检测各组大鼠哮喘体征评分;运用小动物肺功能检测仪检测大鼠动态肺顺应性(Cdyn)、肺阻力(RL)及功能残气量(FRC);通过苏木素-伊红(HE)染色、马松(Masson)染色及过碘酸-希夫(PAS)染色观察大鼠肺组织病理形态;采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测大鼠肺泡灌洗液中白细胞介素(IL)-6、IL-1β、IL-18的炎症因子水平;免疫组化法观察肺组织NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)的表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肺组织中NLRP3、Caspase-1、GSDMD等焦亡相关蛋白的表达水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠体征评分、炎症评分、胶原纤维沉积率、PAS评分、RL、FRC、肺泡灌洗液中IL-6、IL-1β、IL-18的水平、肺组织中NLRP3、ASC及其他细胞焦亡相关蛋白的表达均显著升高(P<0.01),Cdyn显著下降(P<0.01)。与模型组比较,柴朴汤低、中、高剂量组均显著改善大鼠哮喘体征,体征评分明显降低(P<0.05,P<0.01);肺功能结果显示,柴朴汤中、高剂量组大鼠的Cdyn明显提高(P<0.05,P<0.01),RL和FRC明显下降(P<0.05,P<0.01);组织病理学分析表明,柴朴汤高剂量组大鼠肺组织炎症评分、胶原纤维沉积和杯状细胞增生均明显降低(P<0.05,P<0.01);ELISA结果显示,柴朴汤低、中、高剂量组大鼠肺泡灌洗液中IL-6、IL-1β和IL-18的水平均明显降低(P<0.05,P<0.01);免疫组化和Western blot分析显示,柴朴汤中、高剂量组大鼠肺组织中NLRP3、ASC及其他细胞焦亡相关蛋白的表达均明显下调(P<0.05,P<0.01)。结论:柴朴汤能够有效改善哮喘大鼠的肺功能和病理损伤,其机制可能与抑制NLRP3/Caspase-1/GSDMD通路,减少细胞焦亡有关。 展开更多
关键词 支气管哮喘 柴朴汤 细胞焦亡 NOD样受体蛋白3/胱天蛋白酶-1/消皮素D(NLRP3/caspase-1/gsdmd)通路 中医药
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