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“低钾”诱导神经元凋亡过程中ARNT2上调表达的分析 被引量:3
1
作者 孙林光 银巍 +4 位作者 苏兴文 程文芳 江伟健 邱鹏新 颜光美 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期479-483,共5页
目的 :观察“低钾”诱导大鼠神经元凋亡过程中ARNT2的表达变化 ,探讨ARNT2与神经元凋亡的关系。方法 :建立“低钾”诱导神经元凋亡模型 ,应用RT -PCR分析ARNT2在凋亡过程中mRNA的表达变化 ,Westernblotting分析蛋白质的表达变化 ,间接... 目的 :观察“低钾”诱导大鼠神经元凋亡过程中ARNT2的表达变化 ,探讨ARNT2与神经元凋亡的关系。方法 :建立“低钾”诱导神经元凋亡模型 ,应用RT -PCR分析ARNT2在凋亡过程中mRNA的表达变化 ,Westernblotting分析蛋白质的表达变化 ,间接免疫荧光与激光共聚焦确定亚细胞定位。结果 :“低钾”诱导 30min后大鼠小脑颗粒神经元ARNT2mRNA表达水平即明显上调 ,1h后上调表达最明显 ,并持续至“低钾”诱导后 12h左右 ,ARNT2蛋白质水平的表达变化与mRNA水平的表达变化相似 ,免疫荧光结合激光共聚焦分析显示ARNT2蛋白定位于正常大鼠小脑颗粒神经元细胞核内。结论 :ARNT2分布于正常大鼠小脑颗粒神经元细胞核内 ,在“低钾”诱导的凋亡过程中ARNT2mRNA与蛋白均上调表达。 展开更多
关键词 小脑颗粒神经元 基因 arnt2 细胞凋亡
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靶向Arnt的RNAi慢病毒载体的构建及其在HCCLM6中对Arnt基因表达的影响 被引量:3
2
作者 梁英 吴伟忠 +4 位作者 李薇薇 张宁 孙惠川 王鲁 夏景林 《中国临床医学》 北大核心 2008年第6期879-882,共4页
目的:构建并鉴定Arnt基因特异性RNAi慢病毒载体,将其导入HCCLM6肝癌细胞中,筛选有效抑制ARNT表达的稳定细胞株。方法:针对已经筛选确定的Arnt基因RNAi有效靶序列,合成靶序列的OligoDNA,退火形成双链DNA,与经HpaI和XhoI酶切后的pLVTHM载... 目的:构建并鉴定Arnt基因特异性RNAi慢病毒载体,将其导入HCCLM6肝癌细胞中,筛选有效抑制ARNT表达的稳定细胞株。方法:针对已经筛选确定的Arnt基因RNAi有效靶序列,合成靶序列的OligoDNA,退火形成双链DNA,与经HpaI和XhoI酶切后的pLVTHM载体连接[含U6启动子和绿色荧光蛋白(GFP)]产生LV-shArnt慢病毒载体,PCR筛选阳性克隆,测序鉴定。用LV-shArnt载体,pCMV-dR8.74载体,pMD2G载体三质粒共转染包装细胞293T细胞,包装产生慢病毒,以293T细胞GFP蛋白表达水平测定病毒滴度,挑选细胞克隆,收获病毒上清,将病毒上清转染HCCLM6中,经过GFP筛选得到稳定抑制Arnt表达的HCCLM6细胞株,通过RT-PCR鉴定抑制Arnt表达的效果。结果:双酶切与测序鉴定证实成功构建了ArntshRNA的慢病毒载体,转染包装病毒细胞株获得的病毒上清成功转染了HCCLM6,并且抑制了Arnt的表达。结论:运用pLVTHM载体构建的LV-shArnt慢病毒载体可有效抑制Arnt在肝癌细胞株HCCLM6中的表达,为观察转染shRNA慢病毒表达载体的肿瘤细胞的恶性生物学行为变化奠定了实验基础。 展开更多
关键词 arnt RNA干扰 慢病毒载体
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全反式维A酸对HaCaT细胞Arnt及Ahr表达的影响 被引量:1
3
作者 郭坤 肖生祥 +1 位作者 李静 耿松梅 《中国皮肤性病学杂志》 CAS 北大核心 2014年第9期889-891,共3页
目的研究全反式维A酸作用下,皮肤屏障相关因子Arnt及Ahr的变化,以明确维A酸对皮肤屏障相关因子的影响及可能分子机制。方法 1μmol/L的全反式维A酸作用人角质形成细胞HaCaT 36h后,分别通过基因芯片、实时定量PCR法、免疫印迹法来检测Arn... 目的研究全反式维A酸作用下,皮肤屏障相关因子Arnt及Ahr的变化,以明确维A酸对皮肤屏障相关因子的影响及可能分子机制。方法 1μmol/L的全反式维A酸作用人角质形成细胞HaCaT 36h后,分别通过基因芯片、实时定量PCR法、免疫印迹法来检测Arnt及Ahr在基因及蛋白水平的变化。结果人角质形成细胞HaCaT在全反式维A酸作用36h后,基因表达谱差异显示:Arnt基因下调3.95倍,Ahr基因上调2.13倍;实时定量PCR法结果显示,与对照组比较,加药组Arnt mRNA表达量下降(0.35±0.03)倍(P<0.05),Ahr mRNA表达量升高(2.47±0.07)倍(P<0.05);免疫印迹结果显示:加药组Arnt蛋白明显降低而Ahr蛋白明显升高,差异均具有统计学意义。结论全反式维A酸作用于HaCaT细胞在基因及蛋白水平均可引起Arnt的表达降低和Ahr的表达升高,提示Arnt及Ahr在全反式维A酸对表皮细胞影响过程中发挥不同的生物学作用。 展开更多
关键词 角质形成细胞 维A酸 arnt AHR
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大鼠神经元Arnt2基因cDNA序列的分析 被引量:1
4
作者 孙林光 银巍 +3 位作者 黄奕俊 苏兴文 邱鹏新 颜光美 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第7期974-977,共4页
目的克隆并分析神经元凋亡差异表达5号EST全长cDNA。方法以大鼠大脑MarathonReadycDNA为模板,采用SMARTRACE技术克隆神经元凋亡差异表达5号EST全长cDNA,产物亚克隆到pGEM-Teasy质粒载体后进行序列测定以及同源性分析。结果经过3次5′RAC... 目的克隆并分析神经元凋亡差异表达5号EST全长cDNA。方法以大鼠大脑MarathonReadycDNA为模板,采用SMARTRACE技术克隆神经元凋亡差异表达5号EST全长cDNA,产物亚克隆到pGEM-Teasy质粒载体后进行序列测定以及同源性分析。结果经过3次5′RACE扩增,得到的5号ESTcDNA长度为5663bp,其中包含1个2136bp的完整的开放读码框序列,与已知大鼠基因芳香烃受体核转位因子(2Arylhydrocarbonreceptornucleartranslocator2,Arnt2)完全同源;该cDNA3′端非编码区长达3323bp,包含3个AATAAA加尾信号和1个由12个腺嘌呤核苷酸组成的polyA序列。结论5号EST目标基因为大鼠基因Arnt2,该基因3′端完整的非编码区cDNA序列为首次报道。神经元凋亡差异表达基因Arnt2的克隆鉴定为深入研究小脑颗粒神经元低钾性凋亡机制奠定了基础。 展开更多
关键词 神经元 基因 arnt2 CDNA
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大鼠神经元Arnt2亚细胞定位的预测与分析 被引量:1
5
作者 孙林光 银巍 +4 位作者 黄奕俊 程文芳 苏兴文 邱鹏新 颜光美 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第7期1410-1413,共4页
目的:分析大鼠小脑颗粒神经元Arnt2的亚细胞定位情况。方法:利用CBS生物信息资源,根据Arnt2氨基酸序列(LOCUS:NP_036913)进行真核生物亚细胞定位预测,并寻找Arnt2核输出信号(NES);最后利用激光扫描共聚焦显微术(LSM)确定Arnt2在正常大... 目的:分析大鼠小脑颗粒神经元Arnt2的亚细胞定位情况。方法:利用CBS生物信息资源,根据Arnt2氨基酸序列(LOCUS:NP_036913)进行真核生物亚细胞定位预测,并寻找Arnt2核输出信号(NES);最后利用激光扫描共聚焦显微术(LSM)确定Arnt2在正常大鼠小脑颗粒神经元中的亚细胞定位情况。结果:预测Arnt2在真核生物细胞中主要为细胞核定位,并具有线粒体定位的可能性;预测结果还显示Arnt2氨基酸序列上存在着核输出信号,具体位置为氨基端第143位亮氨酸;LSM分析结果证实Arnt2定位于大鼠小脑颗粒神经元细胞核内。结论:Arnt2定位于正常大鼠小脑颗粒神经元细胞核内;Arnt2具有线粒体定位的可能性,并存在核输出信号,提示在某些诱导因素作用下,Arnt2存在线粒体定向转位的趋势。 展开更多
关键词 神经元 arnt2 亚细胞定位
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小脑颗粒神经元低钾性凋亡过程中Arnt2核浆转位的分析
6
作者 孙林光 银巍 +4 位作者 程文芳 黄奕俊 苏兴文 邱鹏新 颜光美 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期1610-1613,共4页
目的:分析大鼠小脑颗粒神经元(CGNs)“低钾”性凋亡过程中Arnt2亚细胞定位的变化。方法:W estern b lotting法分析“低钾”性凋亡过程中CGNs核抽提物中Arnt2蛋白质的表达变化,间接免疫荧光结合激光扫描共聚焦显微术(LSM)分析Arnt2蛋白... 目的:分析大鼠小脑颗粒神经元(CGNs)“低钾”性凋亡过程中Arnt2亚细胞定位的变化。方法:W estern b lotting法分析“低钾”性凋亡过程中CGNs核抽提物中Arnt2蛋白质的表达变化,间接免疫荧光结合激光扫描共聚焦显微术(LSM)分析Arnt2蛋白质亚细胞定位的变化。结果:在CGNs细胞核抽提物中,“低钾”诱导30 m in后Arnt2蛋白质已明显表达上调,1 h后达至峰值水平,“低钾”诱导6 h后上调表达的Arnt2回落至正常对照水平;LSM分析显示位于正常CGNs细胞核内的Arnt2在“低钾”作用下逐步向胞浆转移,并在CGNs凋亡末期与胞浆线粒体定位的HSP60完全重叠。结论:Arnt2在小脑颗粒神经元“低钾”性凋亡过程中发生了核浆转位;结果提示,Arnt2很可能是通过传递“低钾”诱发的细胞凋亡或存活信号而直接参与小脑颗粒神经元“低钾”性凋亡的调控。 展开更多
关键词 神经元 基因 arnt2 细胞凋亡
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基于AhR/ARNT/NQO1信号通路探索青蒿琥酯对类风湿关节炎骨破坏的抑制作用 被引量:7
7
作者 汪倩 郭婉怡 +5 位作者 刘立玲 陶雪莹 林娜 孔祥英 苏晓慧 韩岚 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期2698-2704,共7页
基于芳香烃受体(aryl hydrocarbon receptor,AhR)/芳香烃受体核转位因子(AhR nucleart ranslocator,ARNT)/醌氧化还原酶NADH 1[NAD(P)H quinone oxidoreductase 1,NQO1]信号通路探索青蒿琥酯(artesunate,ARS)抗类风湿关节炎骨破坏作用... 基于芳香烃受体(aryl hydrocarbon receptor,AhR)/芳香烃受体核转位因子(AhR nucleart ranslocator,ARNT)/醌氧化还原酶NADH 1[NAD(P)H quinone oxidoreductase 1,NQO1]信号通路探索青蒿琥酯(artesunate,ARS)抗类风湿关节炎骨破坏作用。采用巨噬细胞集落刺激因子(macrophage-colony stimulating factor,M-CSF)和核因子-κB受体激活剂(receptor activator of nuclear factor-κB,RANKL)诱导小鼠原代骨髓巨噬细胞向破骨细胞分化的模型,给予ARS(0.2、0.4、0.8μmol·L^(-1))干预后,抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP)染色和F-actin染色来观察破骨细胞的形成和分化,Western blot法检测细胞中AhR和NQO1蛋白表达,免疫荧光定位观察破骨细胞中AhR和ARNT表达分布。同时,建立牛Ⅱ型胶原诱导的类风湿关节炎(collagen induced arthritis,CIA)大鼠模型,并给予ARS(7.5、15、30 mg·kg^(-1))干预,Masson染色观察CIA大鼠软骨和骨破坏情况,免疫组织化学法观察大鼠膝关节组织中AhR、ARNT表达,Western blot法检测膝关节组织中NQO1蛋白表达。结果显示,RANKL诱导组可见大量的TRAP阳性细胞。与RANKL诱导组相比,ARS(0.2、0.4、0.8μmol·L^(-1))可以剂量依赖性地抑制TRAP阳性细胞数目;F-actin染色结果显示,随着ARS剂量的升高,对F-actin形成的抑制作用显著增强;Western blot实验和免疫荧光实验进一步发现,ARS干预以后可明显促进AhR表达,且同时向核内转移,进而激活下游ARNT和抗氧化酶NQO1蛋白表达。同时,成功建立CIA大鼠模型,Masson染色实验结果显示,模型组大鼠的关节骨破坏严重,表现为表层软骨失染,胶原纤维排列紊乱,软骨和骨边界不清晰,而阳性药物和ARS不同剂量均对软骨和骨破坏有不同程度的改善作用,尤其是ARS高剂量组作用效果最显著;免疫组织化学法发现ARS不仅促进CIA大鼠膝关节软骨和骨中AhR与ARNT蛋白表达,还可以促进大鼠膝关节组织NQO1蛋白表达。综上,ARS可能通过激活AhR/ARNT/NQO1信号通路,抑制破骨细胞分化从而改善类风湿关节炎。 展开更多
关键词 青蒿琥酯 类风湿关节炎 破骨细胞 骨破坏 AhR/arnt/NQO1信号通路
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GCLC基因上游AHR/ARNT元件负性调控GCLC基因在大鼠支气管上皮细胞的表达 被引量:1
8
作者 赖宁 李冰 +3 位作者 王健 付欣 洪玮 冉丕鑫 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期429-435,共7页
研究谷氨酰半胱氨酸合成酶催化亚单位(GCLC)基因上游调控序列中2个AHR/ARNT元件的功能,从而了解γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)基因转录调节特征.分别构建缺失2个位点AHR/ARNT元件的GCLC基因上游近端序列的萤光素酶报道基因载体以及含... 研究谷氨酰半胱氨酸合成酶催化亚单位(GCLC)基因上游调控序列中2个AHR/ARNT元件的功能,从而了解γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)基因转录调节特征.分别构建缺失2个位点AHR/ARNT元件的GCLC基因上游近端序列的萤光素酶报道基因载体以及含有2个AHR/ARNT元件核心序列的萤光素酶报道基因载体.转染大鼠支气管上皮细胞(RTE),比较检测野生与缺失报道载体的基因转录调控效率;利用电泳迁移率变动实验(EMSA)和超级迁移率变动实验检测AHR/ARNT元件与AHR以及ARNT因子的特异性结合;通过转染AHR因子真核表达质粒进一步确定AHR/ARNT元件与AHR结合在GCLC基因表达中的最终作用.结果显示,相比其野生序列,缺失AHR/ARNT元件(-1 090^-1 085)和双缺失AHR/ARNT元件(-1 090^-1 085,-215^-210)的GCLC上游调控序列报道载体在RTE显著提高萤光素酶表达(均P<0.05),而缺失AHR/ARNT元件(-215^-210)则未见显著影响(P>0.05);独立AHR/ARNT元件(-1 090^-1 085)具有转录促进作用(P<0.05)而独立AHR/ARNT元件(-215^-210)无明显影响(P>0.05).转染CMV2-AHR能够抑制野生型和缺失型报道载体的萤光素酶表达(P<0.05).EMSA证实GCLC基因上游调控区域的2个AHR/ARNT元件均有核蛋白结合,并且超级迁移率变动实验显示结合的蛋白主要含有转录因子AHR以及ARNT.因此,2个AHR/ARNT元件均可以与异源二聚体AHR/ARNT结合,AHR/ARNT元件(-1 090^-1 085)是GCLC基因中重要的抑制元件. 展开更多
关键词 谷氨酰半胱氨酸合成酶催化亚单位(GCLC) 转录调控 AHR/arnt元件 大鼠支气管上皮细胞(RTE)
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ARNT基因失活小鼠的肾脏缺血再灌注损伤 被引量:1
9
作者 周立 张明 +5 位作者 周结学 吴家清 黎程 蒙善东 申升 刘东 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2011年第18期3328-3332,共5页
背景:如何有效防治肾脏的缺血再灌注损伤,一直是肾移植领域的研究重点。但目前其机制仍然不是很清楚。目的:探讨缺氧诱导因子系统对小鼠肾缺血再灌注损伤的影响及可能的作用机制。方法:选取两种小鼠,一种为芳香族碳氢化合物核转移子(ary... 背景:如何有效防治肾脏的缺血再灌注损伤,一直是肾移植领域的研究重点。但目前其机制仍然不是很清楚。目的:探讨缺氧诱导因子系统对小鼠肾缺血再灌注损伤的影响及可能的作用机制。方法:选取两种小鼠,一种为芳香族碳氢化合物核转移子(aryl hydrocarbon receptor nuclear translocator,ARNT)基因敲除小鼠,一种为同窝对照组小鼠。每种小鼠分别进行假手术、缺血再灌注、缺血再灌注时注射重组人促红细胞生成素、缺血再灌注时注射等量生理盐水。建立小鼠肾脏缺血再灌注损伤模型,分别比较再灌注损伤后1h血清促红细胞生成素含量、24h血清肌酐值、肾组织PAS染色肾小管损伤评分和TUNEL法计算肾小管细胞凋亡数。结果与结论:再灌注后1h血清促红细胞生成素水平ARNT敲除组明显低于对照组(P<0.01)。24h血清肌酐水平ARNT敲除组明显高于对照组(P<0.01)。ARNT敲除组明显比对照组损伤程度重,肾小管评分明显高于对照组(P<0.01)。ARNT敲除组阳性凋亡细胞数明显多于ARNT+/+组(P<0.01)。补充促红细胞生成素后,ARNT敲除组与对照组比较,差异无显著性意义(P>0.05)。结果表明,缺氧诱导因子系统对肾脏缺血再灌注损伤有重要的保护作用。可能是促红细胞生成素来介导其最大的保护效应。 展开更多
关键词 arnt 促红细胞生成素 缺氧诱导因子 肾脏 缺血再灌注损伤
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中国南方人群TGFβ3和ARNT2基因多态性与非综合征性唇腭裂的关联研究 被引量:2
10
作者 唐莹 朱军 +4 位作者 邓莹 代礼 李明蓉 宋庆高 熊贵发 《中国医药导报》 CAS 2017年第9期115-119,共5页
目的探讨TGFβ3和ARNT2基因与非综合征性唇腭裂发生的关系。方法收集了2006~2010年的119个中国南方非综合征性唇腭裂核心家系作为研究对象,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测TGFβ3基因的多态位点rs2300607和rs2... 目的探讨TGFβ3和ARNT2基因与非综合征性唇腭裂发生的关系。方法收集了2006~2010年的119个中国南方非综合征性唇腭裂核心家系作为研究对象,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测TGFβ3基因的多态位点rs2300607和rs2268625,以及ARNT2基因的多态位点rs2228099和rs3768017,并进行传递不平衡检验(TDT)和基于核心家系的关联分析(FBAT)。结果 TDT分析结果显示:TGFβ3基因中的rs2268625位点在唇裂合并腭裂核心家系中,存在传递不平衡(P=0.02)。FBAT分析结果显示:ARNT2基因中rs2228099/rs3768017构成的CT和GG基因型与子代唇腭裂发生危险性增加有显著关联(P=0.008、0.012)。结论在我国南方人群中,TGFβ3基因和ARNT2基因多态性与非综合征性唇腭裂存在关联。 展开更多
关键词 唇裂 腭裂 TGFΒ3 arnt2 多态性 单核苷酸
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核转录因子ARNT对KLF4调控作用的初步研究 被引量:1
11
作者 耿松梅 谭升顺 《中国皮肤性病学杂志》 CAS 北大核心 2006年第4期198-200,共3页
目的 探讨核转录因子ARNT和KLF4间可能存在的信号调控机制。方法构建ARNT真核表达质粒,并与其二聚体配体基因AHR表达质粒分别联合含KLF4启动子的荧光素酶报告载体体外共转染细胞,通过对荧光素酶活性检测分析ARNT对KLF4基因的调控作用... 目的 探讨核转录因子ARNT和KLF4间可能存在的信号调控机制。方法构建ARNT真核表达质粒,并与其二聚体配体基因AHR表达质粒分别联合含KLF4启动子的荧光素酶报告载体体外共转染细胞,通过对荧光素酶活性检测分析ARNT对KLF4基因的调控作用。结果同空白对照比较,细胞中转染含ARNT质粒后,引起KLF4启动子荧光素酶活性增高2倍多。另一方面,共转染ARNT及其二聚体配体基因AHR,KLF4启动子荧光素酶活性较空白对照降低近1/8。结论ARNT可活化KLF4启动子,激活KLF4表达,而AHR共转染明显抑制KLF4启动子活性。 展开更多
关键词 核转录因子 KLF4 调控
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Hepatoprotective and antioxidant effects of dietary Glycyrrhiza polysaccharide against TCDD-induced hepatic injury and RT-PCR quantification of AHR2,ARNT2,CYPIA mRNA in Jian Carp(Cyprinus carpio var.Jian) 被引量:9
12
作者 Jinliang Du Liping Cao +1 位作者 Rui Jia Guojun Yin 《Journal of Environmental Sciences》 SCIE EI CAS CSCD 2017年第1期181-190,共10页
To evaluate the protective effects of Glycyrrhiza polysaccharide(GPS) against 2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin(TCDD)-induced hepatotoxicity in Jian carp,the fish were fed diets containing GPS at doses of 0.1,0.... To evaluate the protective effects of Glycyrrhiza polysaccharide(GPS) against 2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin(TCDD)-induced hepatotoxicity in Jian carp,the fish were fed diets containing GPS at doses of 0.1,0.5 and 1.0 g/kg for 60 days before an intraperitoneal injection of 0.6 μg/kg TCDD at a volume of 0.05 mL/10 g body weight.At 72 hr post-injection,blood and liver samples were taken for biochemical analysis and the fish liver samples were used for the preparation of pathological slices.The results showed that increases in alanine aminotransferase(GPT),aspartate aminotransferase(GOT),lactate dehydrogenase(LDH),and alkaline phosphatase(AKP) in serum induced by TCDD were significantly inhibited by pre-treatment with 1.0 g/kg GPS.Following the 1.0 g/kg GPS pre-treatment,total protein(TP),albumin(Alb),catalase(CAT),glutathione peroxidase(GPx),total antioxidant capacity(T-AOC) and superoxide dismutase(SOD) activities in liver tissue increased significantly,malondialdehyde(MDA) formation(P &lt; 0.05 or P &lt; 0.01) was significantly inhibited,and the expression of cytochrome P4501A(CYP1A),aryl hydrocarbon receptor 2(AHR2) and aryl hydrocarbon receptor nuclear translocator 2(ARNT2) mRNA(P &lt; 0.05) was significantly enhanced.Histological observations on fish liver were obtained by preparing paraffin tissue sections via HE staining,and the results showed that histological changes were obviously reduced by 0.5 and 1.0 g/kg GPS.GPS significantly reduced liver tissue damage caused by TCDD.Overall,these results proved the hepatoprotective effect of GPS in protecting against fish liver injury induced by TCDD,and supported the use of GPS(1.0 g/kg) as a hepatoprotective and antioxidant agent in fish. 展开更多
关键词 Aryl hydrocarbon receptor 2(AHR2) Aryl hydrocarbon receptor nuclear translocator 2(arnt2) Cytochrome P4501A(CYP1A) Cyprinus carpio var.Jian Glycyrrhiza polysaccharide 2 3 7 8-Tetrachlorodibenzo-p-dioxin(TCDD)
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脑和肌肉ARNT样蛋白1、周期昼夜节律调节因子2、Notch1、糖原合成酶激酶-3β在结直肠腺癌组织中的表达及意义 被引量:1
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作者 蒋海涛 杜胜奇 +1 位作者 李福青 王红 《癌症进展》 2023年第8期837-842,共6页
目的探讨脑和肌肉ARNT样蛋白1(BMAL1)、周期昼夜节律调节因子2(PER2)、Notch1、糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)在结直肠腺癌组织中的表达及意义。方法实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测11例结直肠癌患者手术切除的新鲜结直肠癌... 目的探讨脑和肌肉ARNT样蛋白1(BMAL1)、周期昼夜节律调节因子2(PER2)、Notch1、糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)在结直肠腺癌组织中的表达及意义。方法实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测11例结直肠癌患者手术切除的新鲜结直肠癌组织及相应癌旁组织中BMAL1、PER2、Notch1、GSK-3βmRNA的相对表达量;免疫组化法检测50例手术切除的结直肠腺癌及癌旁组织、30例经内镜切除的结直肠腺瘤组织中BMAL1、PER2、Notch1、GSK-3β蛋白的表达情况。结果结直肠癌组织中,BMAL1、PER2 mRNA的相对表达量均低于癌旁组织,差异均有统计学意义(P﹤0.05);结直肠癌组织和癌旁组织中Notch1、GSK-3βmRNA的相对表达量比较,差异均无统计学意义(P﹥0.05)。免疫组化结果显示,结直肠腺癌组织、结直肠腺瘤组织及结直肠腺癌癌旁组织中,BMAL1、PER2的表达呈递增趋势,而Notch1、GSK-3β的表达呈递减趋势。淋巴结转移、TNM分期为Ⅲ~Ⅳ期结直肠腺癌患者结直肠腺癌组织中BMAL1、Notch1蛋白表达均高于无淋巴结转移、TNM分期为Ⅰ~Ⅱ期患者(P﹤0.05);病理类型为黏液腺癌的结直肠腺癌组织中PER2蛋白的表达高于管状腺癌(P﹤0.05),GSK-3β的表达低于管状腺癌(P﹤0.05)。Spearman相关分析结果显示,结直肠癌组织中BMAL1的表达与PER2的表达呈正相关(r=0.332,P=0.018),PER2的表达与GSK-3β的表达呈负相关(r=-0.291,P=0.040),Notch1的表达与GSK-3β的表达呈正相关(r=0.285,P=0.045),其余指标间的表达无相关性。结论BMAL1、Notch信号通路、GSK-3β均可能参与调控结直肠癌的发生、发展过程,且GSK-3β可能与BMAL1和Notch信号通路之间存在相互调控作用。 展开更多
关键词 结直肠腺癌 脑和肌肉arnt样蛋白1 周期昼夜节律调节因子2 NOTCH1 糖原合成酶激酶-3Β
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脑和肌肉ARNT样蛋白1水平在食管鳞癌组织的表达及其临床意义
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作者 汤金星 魏立 +5 位作者 陈晓 朱晓明 董冠中 杨冬 何苡 王建军 《中华实验外科杂志》 CAS 北大核心 2023年第11期2347-2350,共4页
目的:探讨脑和肌肉ARNT样蛋白1(BMAL1)在食管癌组织中表达水平及其与食管癌患者临床病理特征和预后的关系。方法:选取2021年2月至2023年2月河南省人民医院手术切除的77例食管癌组织和癌旁组织作为研究对象,采用免疫组织化学分析两组组织... 目的:探讨脑和肌肉ARNT样蛋白1(BMAL1)在食管癌组织中表达水平及其与食管癌患者临床病理特征和预后的关系。方法:选取2021年2月至2023年2月河南省人民医院手术切除的77例食管癌组织和癌旁组织作为研究对象,采用免疫组织化学分析两组组织中BMAL1蛋白表达水平;分析BMAL1表达水平与临床病理特征的关系。以BMAL1表达平均值作为阈值,分为高表达组和低表达组,分析BMAL1表达与预后的关系。组间计量数据比较采用t检验。结果:癌旁组织BMAL1蛋白和mRNA表达水平(1.69±0.28、2.42±0.29)明显低于食管癌组织中BMAL1蛋白和mRNA表达水平(0.87±0.10、1.10±0.28),差异有统计学意义(t=24.280、28.750,P<0.05)。不同年龄、性别和肿瘤大小患者BMAL1蛋白表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。Ⅲ期患者BMAL1蛋白表达水平(1.87±0.21)明显高于Ⅰ~Ⅱ期患者(1.44±0.12),差异有统计学意义(t=10.520,P<0.05)。低分化患者BMAL1蛋白表达水平(1.87±0.21)明显高于中高分化患者(1.44±0.12),差异有统计学意义(t=16.710,P<0.05)。淋巴结转移患者BMAL1蛋白表达水平(1.84±0.24)明显高于未淋巴结转移患者(1.46±0.16),差异有统计学意义(t=7.392,P<0.05)。高表达组和低表达组患者3年生存率分别为37.84%(14/37)和62.50%(25/40),高表达患者术后生存率(37.84%)明显低于低表达组(62.50%),差异有统计学意义(Log-rank=10.342,P<0.05)。高表达组患者细胞核增殖抗原(Ki-67)表达阳性率[86.49%(32/37)]明显高于低表达组患者阳性率[42.50%(17/40)],差异有统计学意义(χ^(2)=7.569,P<0.05)。BMAL1表达水平、分化程度、TNM分期和淋巴结转移等特征与食管癌患者预后密切相关(P<0.05)。多因素Cox回归分析显示,BMAL1高表达水平是食管癌患者预后的独立危险因素[风险比(HR)=1.398,95%可信区间(CI):1.123~1.409,P<0.01]。结论:BMAL1在食管癌组织中呈高表达,与患者临床TNM分期、分化程度、淋巴结转移和Ki-67表达水平等临床病理特征和标志物呈正相关,BMAL1表达越高患者预后越差。 展开更多
关键词 脑和肌肉arnt样蛋白1 食管癌 临床病理特征 预后 细胞核增殖抗原
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血清CITED2、BMAL1、NSUN3水平与脓毒症并发急性肾损伤患者病情的相关性及对预后的影响
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作者 陈曼宁 李璐 +3 位作者 刘睿 黎璞 彭细娟 高雅 《疑难病杂志》 2026年第3期291-297,共7页
目的分析血清富含ED尾的CBP/p300相互作用反式激活因子2(CITED2)、脑-肌肉芳烃受体核转录因子样蛋白-1(BMAL1)、NOP2/Sun RNA甲基转移酶3(NSUN3)水平与脓毒症并发急性肾损伤(AKI)患者病情的相关性及对预后不良的影响。方法选取2023年2月... 目的分析血清富含ED尾的CBP/p300相互作用反式激活因子2(CITED2)、脑-肌肉芳烃受体核转录因子样蛋白-1(BMAL1)、NOP2/Sun RNA甲基转移酶3(NSUN3)水平与脓毒症并发急性肾损伤(AKI)患者病情的相关性及对预后不良的影响。方法选取2023年2月—2025年3月空军军医大学唐都医院重症医学科收治的脓毒症并发AKI患者123例作为脓毒症AKI组,脓毒症并发AKI患者根据AKI分期标准分为Ⅰ期45例、Ⅱ期40例、Ⅲ期38例,根据治疗28 d的生存情况分为生存亚组81例与死亡亚组42例,另选取同期医院收治的单纯脓毒症患者115例作为脓毒症组、健康志愿者123例作为健康对照组。采用ELISA法检测血清CITED2水平,qRT-PCR法检测血清BMAL1、NSUN3 mRNA表达;Pearson相关性分析变量间关系;多因素Cox分析影响脓毒症并发AKI患者预后不良的因素;受试者工作特征(ROC)曲线分析脓毒症并发AKI患者预后不良的预测价值。结果健康对照组、脓毒症组、脓毒症AKI组血清CITED2、NSUN3 mRNA水平依次升高,血清BMAL1 mRNA水平依次降低(F/P=544.535/<0.001、728.950/<0.001、478.098/<0.001);Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期脓毒症AKI患者血清CITED2、NSUN3 mRNA水平依次升高,血清BMAL1 mRNA水平依次降低(F/P=33.532/<0.001、22.012/<0.001、72.544/<0.001);死亡亚组血清CITED2、NSUN3 mRNA高于生存亚组,血清BMAL1 mRNA水平低于生存亚组(t/P=7.514/<0.001、7.639/<0.001、8.095/<0.001);脓毒症AKI患者血清CITED2、NSUN3 mRNA分别与APACHEⅡ评分、SOFA评分呈正相关(CITED2:r/P=0.512/<0.001、0.508/<0.001;NSUN3 mRNA:0.506/<0.001、0.513/<0.001),血清BMAL1 mRNA与APACHEⅡ评分、SOFA评分呈负相关(r/P=-0.527/<0.001、-0.519/<0.001);APACHEⅡ评分高、SOFA评分高、CITED2高、NSUN3 mRNA高是脓毒症AKI患者预后不良的独立危险因素[HR(95%CI)=2.078(1.353~3.192)、2.343(1.458~3.765)、2.436(1.763~3.366)、2.651(1.777~3.954)],BMAL1 mRNA高是独立保护因素[HR(95%CI)=0.314(0.172~0.572)];血清CITED2、BMAL1 mRNA、NSUN3 mRNA单独及三者联合预测脓毒症AKI患者预后不良的曲线下面积(AUC)分别为0.794、0.814、0.810、0.916,三者联合优于各自单独预测价值(Z/P=2.780/0.005、2.084/0.037、2.435/0.015)。结论脓毒症并发AKI患者血清CITED2、NSUN3 mRNA水平升高,BMAL1 mRNA水平下降,三者与病情程度、预后不良有关,可作为潜在的脓毒症并发AKI患者28 d内死亡的生物指标。 展开更多
关键词 脓毒症 急性肾损伤 富含ED尾的CBP/p300相互作用反式激活因子2 脑-肌肉芳烃受体核转录因子样蛋白-1 NOP2/Sun RNA甲基转移酶3 病情程度 预后
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基于生物信息学与机器学习破译脊髓损伤中铁死亡相关生物标志物及中药预测 被引量:1
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作者 徐少华 杨晓善 +2 位作者 农小霞 张勇 张文捷 《中国急救医学》 2025年第4期306-315,共10页
目的 探索铁死亡相关基因在脊髓损伤(SCI)中的表达及作用机制,预测SCI铁死亡相关生物标志物,进行药物敏感性检测及中药预测。方法 基于生物信息学与机器学习算法,下载GSE24179数据集,通过limma R包筛选差异基因,构建蛋白互作(PPI)网络... 目的 探索铁死亡相关基因在脊髓损伤(SCI)中的表达及作用机制,预测SCI铁死亡相关生物标志物,进行药物敏感性检测及中药预测。方法 基于生物信息学与机器学习算法,下载GSE24179数据集,通过limma R包筛选差异基因,构建蛋白互作(PPI)网络进行修剪从而筛选差异表达基因(DEGs)。获得铁死亡相关基因,通过支持向量机(SVM)及受试者工作特征(ROC)曲线进行决策及评估以筛选潜在生物标志物,再进行免疫浸润分析,CellMiner数据库进行药物敏感性预测,LASSO回归模型确定生物标志物。通过TCD数据库及Coremine数据库构建中药-化学成分-基因调控轴,统计性味归经并总结关键中药。结果 获取128个DEGs,生物功能包含脂质代谢、氧化应激与铁死亡密切相关;获得12个铁死亡相关的差异表达基因(FRDEGs),经SVM决策及ROC曲线评估共纳入10个铁死亡相关生物标志物(PFRBs),PFRBs中多数基因存在线性相关,以Arnt样蛋白1(ARNTL)-核受体共激活因子3(NCOA3)相关性最强;免疫浸润分析组间对比显示,ARNTL与NBCs、MBCs、gdTCs、Mono相关皆有统计学意义,与NBCs的相关性尤为显著;药敏预测显示,6-巯基嘌呤对ARNTL及AKR1C3敏感;LASSO回归模型显示,NCOA3、CYP4F8及AKR1C3为保持预测性能的最小变量区间;中药预测结果显示,药味多为苦、甘、辛,药性多寒、温,表里经多为脾胃和肺大肠,生姜、菟丝子、红花、火麻仁是关键中药。结论 ARNT和NCOA3可能通过铁死亡途径介导调控初始B细胞从而干预SCI的免疫微环境,6-巯基嘌呤的药物敏感性最强,部分类药/药性化学成分及中药能够干预SCI,尤其是匹立尼酸及生姜,其中的相关性有待深究。 展开更多
关键词 脊髓损伤 铁死亡 生物信息学 机器学习 arnt样蛋白1(arntL) 核受体共激活因子3(NCOA3)
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苯并(a)芘对H1299细胞CYP1A1酶活力和相关基因表达的影响 被引量:6
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作者 姜英 陈曦 +4 位作者 饶凯敏 杨光涛 汪倩 刘爱林 袁晶 《毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期253-257,共5页
目的研究BaP对人肺腺癌细胞(H1299)CYP1A1酶活力和CYP1A1及其相关基因表达的影响。方法用不同浓度BaP(8、16、32、64和128μmol/L)处理H1299细胞24 h。实时荧光定量PCR方法检测H1299细胞中CYP1A1、HSP90、AhR和ARNT基因的mRNA表达水平;... 目的研究BaP对人肺腺癌细胞(H1299)CYP1A1酶活力和CYP1A1及其相关基因表达的影响。方法用不同浓度BaP(8、16、32、64和128μmol/L)处理H1299细胞24 h。实时荧光定量PCR方法检测H1299细胞中CYP1A1、HSP90、AhR和ARNT基因的mRNA表达水平;表面等离子共振技术(surface plasmon resonance,SPR)检测CYP1A1和HSP90蛋白表达水平;荧光分光光度法测定CYP1A1酶活力(7-ethoxyresorufin-o-deethylase,EROD)。结果与溶剂对照组相比,CYP1A1和ARNT基因mRNA水平在BaP为16和64μmol/L时有统计学意义(P<0.01),AhR和HSP90在各染毒组中均有统计学意义(P<0.05)。在16、32和64μmol/L的BaP染毒组中,CYP1A1和HSP90蛋白水平高于对照组。在16、32、64和128μmol/L的BaP染毒组中均可诱导CYP1A1酶活力显著性增强(P<0.01)。结论该试验条件下,在H1299细胞,BaP可通过诱导CYP1A1与其上游转录因子AhR和ARNT的mRNA以及蛋白表达而增强CYP1A1酶活力。 展开更多
关键词 苯并(A)芘 表面等离子体共振技术 CYP1A1 AHR arnt
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真鲷去毒相关基因cDNA序列的克隆与肝脏组成型表达分析
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作者 王琳 梁旭方 +2 位作者 黄燕 胡永乐 陈亮 《生态毒理学报》 CAS CSCD 2009年第3期422-427,共6页
赤潮发生时产生的一些海洋生物毒素对人类和海洋动物的安全形成潜在的威胁甚至导致死亡.为从分子水平探讨鱼类中海洋藻毒素的去毒分子机理,采用RT-PCR法克隆了真鲷(Pagrus major)肝脏芳香烃受体核转位蛋白(ARNT)和I时相异生素代谢酶细... 赤潮发生时产生的一些海洋生物毒素对人类和海洋动物的安全形成潜在的威胁甚至导致死亡.为从分子水平探讨鱼类中海洋藻毒素的去毒分子机理,采用RT-PCR法克隆了真鲷(Pagrus major)肝脏芳香烃受体核转位蛋白(ARNT)和I时相异生素代谢酶细胞色素P4501A(CYP1A)基因cDNA核心序列,同时,应用半定量RT-PCR方法,以β-肌动蛋白作为外参照,在其指数期增长的范围内研究了芳香烃受体(AHR)、ARNT、CYP1A、II时相异生素代谢酶alpha型谷胱甘肽S-转移酶(GSTA1、GSTA2)、rho型谷胱甘肽S-转移酶(GSTR)、热休克蛋白70(HSP70)基因组成型表达水平.结果发现,真鲷ARNT、CYP1A基因cDNA核心序列片段分别长438bp和908bp,分别编码146和302个氨基酸.序列同源性分析发现,真鲷与门齿鲷(Stenotomus chrysops)、石首鱼(Micropogon undulatus)ARNT基因氨基酸序列同源性高达97.2%、95.2%,与斑马鱼(Brachydanio rerio)、人、大鼠、小鼠ARNT同源性较低(77.2%~79.3%).真鲷与门齿鲷、金头鲷(Sparus auratus)、欧洲川鲽(Rhombus maximus)、欧洲海鲈(Dicentrachus labrax)CYP1A基因氨基酸序列同源性较高,为84.8%~94.0%,与斑马鱼、人、小鼠CYP1A同源性较低,为59.6%~77.8%.真鲷肝脏AHR、ARNT、CYP1A、GSTA1、GSTA2、GSTR和HSP70基因组成型表达水平分别为(25.32±6.56)%、(26.22±4.24)%、(146.5±16.06)%、(55.42±3.75)%、(48.82±10.89)%、(79.47±3.13)%、(107.42±14.34)%. 展开更多
关键词 芳香烃受体(AHR) 芳香烃受体核转位蛋白(arnt) 细胞色素P4501A 谷胱甘肽S-转移酶 热休克蛋白70 基因克隆 表达分析 真鲷(Pagrus major)
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弥漫性胶质瘤瘤周水肿组织BMAL1的表达及其临床意义
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作者 郭迎春 王宇 +1 位作者 张志欣 王磊 《中国临床神经外科杂志》 2024年第4期218-221,共4页
目的探讨弥漫性胶质瘤瘤周水肿组织脑和肌肉ARNT样蛋白1(BMAL1)的表达及其临床意义。方法选取2021年6月至2023年1月手术切除的64例弥漫性胶质瘤瘤周水肿组织,免疫组化法检测瘤周水肿组织BMAL1表达;术前进行脑MRI检查,计算水肿指数评估... 目的探讨弥漫性胶质瘤瘤周水肿组织脑和肌肉ARNT样蛋白1(BMAL1)的表达及其临床意义。方法选取2021年6月至2023年1月手术切除的64例弥漫性胶质瘤瘤周水肿组织,免疫组化法检测瘤周水肿组织BMAL1表达;术前进行脑MRI检查,计算水肿指数评估瘤周水肿程度。结果64例均伴有瘤周水肿,其中轻度水肿20例,中度水肿9例,重度水肿35例;瘤周水肿组织BMAL1高表达39例,低表达25例。瘤周水肿组织BMAL1免疫组化染色评分与水肿指数呈明显正相关(r=0.408;95%CI 0.179~0.594;P<0.001)。多因素logistic回归分析显示,BMAL1高表达是弥漫性胶质瘤并发重度瘤周水肿的独立影响因素(OR=5.558;95%CI 1.897~8.467;P<0.001)。结论弥漫性胶质瘤瘤周水肿组织BMAL1表达水平与瘤周水肿程度呈正相关,提示BMAL1可能参与弥漫性胶质瘤瘤周水肿的发生、进展。 展开更多
关键词 弥漫性胶质瘤 脑和肌肉arnt样蛋白1(BMAL1) 瘤周水肿 影响因素
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老年抑郁症患者芳香烃受体核转移蛋白和神经元PAS结构域蛋白表达与认知功能的关系 被引量:5
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作者 张颖 李洁 +2 位作者 李刚 李涛 梁海翔 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2018年第12期2956-2959,共4页
目的探讨老年脑卒中后抑郁和原发抑郁症患者芳香烃受体核转移蛋白(Arnt)2和神经元PAS结构域蛋白(Npas)4的表达与认知功能的关系。方法老年患者173例,依据汉密尔顿抑郁量表(HAMD)-24评分结合脑卒中病史分为:脑卒中后抑郁组(47例)、原发... 目的探讨老年脑卒中后抑郁和原发抑郁症患者芳香烃受体核转移蛋白(Arnt)2和神经元PAS结构域蛋白(Npas)4的表达与认知功能的关系。方法老年患者173例,依据汉密尔顿抑郁量表(HAMD)-24评分结合脑卒中病史分为:脑卒中后抑郁组(47例)、原发性抑郁组(52例)、脑卒中组(45例)、对照组(29例)。分别于入院1 w内和2 w后通过事件相关电位P300分析各组患者认知功能;取患者空腹外周静脉血分离白细胞,荧光定量PCR和Western印迹分别检测Arnt2、Npas4 mRNA和蛋白表达情况。结果与对照组相比,入院1 w内和2 w后的脑卒中后抑郁组、原发性抑郁组、脑卒中组P300潜伏期显著延长,P300波幅显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与原发抑郁组和脑卒中组相比,脑卒中后抑郁组P300潜伏期显著延长,P300波幅显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05);入院2 w后脑卒中后抑郁组、原发性抑郁组、脑卒中组较入院1 w内P300潜伏期显著缩短,P300波幅显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。脑卒中后抑郁组和原发性抑郁组Arnt2 mRNA和蛋白的相对表达量明显高于脑卒中组和对照组,Npas4 mRNA和蛋白的相对表达量明显低于脑卒中组和对照组,差异有统计学意义(P<0.01);脑卒中后抑郁组Arnt2、Npas4 mRNA和蛋白的相对表达量与原发性抑郁组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论老年脑卒中后抑郁与原发抑郁症患者均存在认知功能障碍,前者更为严重;Arnt2高表达和Npas4低表达可通过诱导海马神经功能损伤来介导老年抑郁症患者认知功能障碍。 展开更多
关键词 脑卒中后抑郁 原发性抑郁症 芳香烃受体核转移蛋白(arnt)2 神经元PAS结构域蛋白(Npas)4 认知功能
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