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肺腺癌EGFR突變免疫組化與ARMS PCR檢測相關性研究
1
作者 黃香婷 陳建勇 湯寶怡 《镜湖医学》 2025年第1期17-20,F0003,共5页
目的研究免疫組化和ARMS PCR檢測肺腺癌表皮生長因子受體(epidermal growth factor receptor,EGFR)突變的相關性,探討替代EGFR基因突變檢測的可行性。方法使用細胞學、細胞塊和組織切片進行EGFR突變ARMS PCR法檢測及免疫組化突變蛋白(de... 目的研究免疫組化和ARMS PCR檢測肺腺癌表皮生長因子受體(epidermal growth factor receptor,EGFR)突變的相關性,探討替代EGFR基因突變檢測的可行性。方法使用細胞學、細胞塊和組織切片進行EGFR突變ARMS PCR法檢測及免疫組化突變蛋白(delE746-A750、L858R)檢測,並對兩種檢測方法進行相關性分析。結果在116例肺腺癌進行免疫組化EGFR檢測,免疫組化評分為0分共39例,其中29例(74.4%)ARMS PCR檢測有突變;評分為1分共5例,其中4例(80.0%)ARMS PCR檢測有突變;評分為2分共14例,其中14例(100%)ARMS PCR檢測有突變;評分為3分共58例,其中58例(100%)ARMS PCR檢測有突變。以免疫組化評分≤1+為陰性,≥2+為陽性,其敏感度為69.2%,特異度為100%,而陽性預測值為100%,陰性預測值為25.6%。結論免疫組化檢測EGFRdelE746-A750及L858R突變蛋白的方法操作簡單、快捷、易判讀,可以替代EGFR基因突變ARMS PCR檢測或作為初篩方案。 展开更多
关键词 EGFR突變 免疫組化 arms pcr檢測 肺腺癌
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美国引进甘蔗热带种的ARMS PCR真实性鉴定 被引量：1
2
作者 李旭娟 毛钧 +3 位作者 赵培方 刘洪博 王晓燕 陆鑫 《中国糖料》 2023年第4期24-29,共6页
甘蔗遗传基础狭窄已经极大地阻碍了其育种进程,挖掘优异种质资源、创新亲本材料将成为未来甘蔗育种的重要方向之一。利用四引物扩增受阻突变PCR体系(ARMS PCR)对国家甘蔗种质资源圃保存的美国引进的24份疑似热带种材料进行真实性鉴定。... 甘蔗遗传基础狭窄已经极大地阻碍了其育种进程,挖掘优异种质资源、创新亲本材料将成为未来甘蔗育种的重要方向之一。利用四引物扩增受阻突变PCR体系(ARMS PCR)对国家甘蔗种质资源圃保存的美国引进的24份疑似热带种材料进行真实性鉴定。PCR鉴定结果表明,供试材料中有‘Green German’、‘Black Fiji’、‘Chittan’、‘IN 84-072’和‘NG 21-002’这5份材料扩增带型与热带种‘拔地拉’(Badila)一致,仅出现428 bp的共有条带和278 bp的热带种特有条带,属于热带种带型;而其它19份材料同时具有278 bp的热带种特有条带和203 bp的割手密特有条带,属于热带种与割手密的杂交种带型。经过上述分子鉴定得出结论,24份美国引进的甘蔗种质中有‘Green German’、‘Black Fiji’、‘Chittan’、‘IN 84-072’和‘NG 21-002’这5份材料为热带种材料,建议后续加强其农艺性状和抗性调查,并作为甘蔗热带种新血缘亲本进行杂交利用。 展开更多
关键词 甘蔗热带种 arms pcr 真实性 鉴定 甘蔗育种
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ARMS-PCR结合毛细管电泳可以定量检测淋巴瘤MYD88基因L265P突变 被引量：1
3
作者 丁子轩 刘红 +4 位作者 解珺丹 姚红 马亮 邱桥成 沈宏杰 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期1663-1667,共5页
目的:研究ARMS-PCR结合毛细管电泳法对提高淋巴瘤患者MYD88基因L265P突变的检测灵敏度和定量检测突变比例的可行性。方法:采用ARMS-PCR方法对淋巴瘤患者MYD88基因进行扩增,使用ABI3730测序仪对扩增产物进行毛细管电泳检测L265P的突变比... 目的:研究ARMS-PCR结合毛细管电泳法对提高淋巴瘤患者MYD88基因L265P突变的检测灵敏度和定量检测突变比例的可行性。方法:采用ARMS-PCR方法对淋巴瘤患者MYD88基因进行扩增,使用ABI3730测序仪对扩增产物进行毛细管电泳检测L265P的突变比例;同时采用基因组DNA直接测序法对MYD88基因5号外显子开放阅读框区域进行双向测序。结果:经过对梯度稀释的质粒标准品的检测,ARMS-PCR结合毛细管电泳和直接测序法检测L265P突变的灵敏度分别为0. 2%和5%,对184例既往淋巴瘤患者的检出率分别为13. 59%和8. 28%(p <0. 001)。而前者更可以对突变比例进行定量,拟合优度(R2=0. 979)和可重复性(CV=2. 86%、1. 94%、5. 49%)均较为理想。结论:ARMS-PCR结合毛细管电泳可以对淋巴瘤患者MYD88基因L265P突变进行定量检测,检测灵敏度显著高于传统的直接测序法,因而可作为对后者的补充,可以有效地进行早期诊断和监测微小残留。 展开更多
关键词 淋巴瘤 MYD88基因 基因突变 arms—pcr 毛细管电泳
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ARMS-PCR反应中不同长度扩增子对肿瘤组织表皮生长因子受体基因突变检测的影响
4
作者 胡荣君 杨国华 +1 位作者 郭志伟 周彩存 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期476-481,共6页
研究应用ARMS-PCR技术分别为表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)基因19外显子缺失和L858R点突变建立3种不同长度扩增子定量检测方法。实验采用不同长度扩增子检测95例非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NS... 研究应用ARMS-PCR技术分别为表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)基因19外显子缺失和L858R点突变建立3种不同长度扩增子定量检测方法。实验采用不同长度扩增子检测95例非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者新鲜冰冻肿瘤组织样本和108例患者石蜡切片样本(formalin-fixation and paraffin-embedding,FFPE)19外显子缺失和L858R突变。结果显示携带突变的FFPE样本中,长度最短扩增子(RDEL-1和RL858R-1)检测样本突变结果显著优于其他2种扩增子(P<0.001;P<0.001);新鲜冰冻肿瘤组织样本不同扩增子检测结果无显著性差异(19外显子缺失:P=0.270;L858R:P=0.249);不同扩增子对野生型(wild type,WT)样本具有很高的检测特异性。研究结果表明试验中采用的几种不同长度扩增子ARMS-PCR方法可适用于新鲜冰冻肿瘤组织EGFR突变检测,但FFPE样本更优选最短的扩增子(RDEL-1和RL858R-1)检测方法。 展开更多
关键词 arms—pcr EGFR 19外显子缺失 L858R pcr扩增子
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98例原发性血小板增多症Jak2基因突变的定量分析及其临床意义 被引量：4
5
作者 晁红颖 沈益民 +6 位作者 张日 冯宇峰 岑建农 姚利 沈宏杰 朱子玲 薛永权 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2009年第3期665-669,共5页
为研究JAK2V617F在原发性血小板增多症(ET)患者中的发生率和突变类型,定量分析突变转录本水平并初步探讨其临床意义,采用ARMS(amplification-refractory mutation sequencing)PCR法检测JAK2V617F突变的发生率及其突变类型,采用毛细管电... 为研究JAK2V617F在原发性血小板增多症(ET)患者中的发生率和突变类型,定量分析突变转录本水平并初步探讨其临床意义,采用ARMS(amplification-refractory mutation sequencing)PCR法检测JAK2V617F突变的发生率及其突变类型,采用毛细管电泳法定量分析JAK2V617F突变转录本水平。结果显示:98例ET患者中59例JAK2V617F为阳性,其中纯合突变18例。纯合突变及杂合突变患者的平均年龄均较野生型为高(p值均(0.05);18例纯合突变患者的白细胞计数高于41例杂合突变者,且二者均高于野生型(p值均(0.05)。毛细管电泳定量分析显示,纯合突变患者JAK2V617F突变转录本水平为(89.9±6.7)%,高于杂合突变患者的(57.1±6.7)%(p(0.05);年龄小于60岁患者的JAK2V617F突变转录本水平为(62.3±16.5)%,低于年龄大于60岁患者的JAK2V617F突变转录本水平为(72.4±15.8)%(p(0.05)。JAK2V617F阳性组中血栓的发生率高于阴性组,其中纯合突变者高于杂合突变者,发生血栓者的JAK2V617FF转录本水平高于无血栓者(p值均(0.05)。结论:JAK2V617F阳性与阴性ET患者有着不同的临床特征,分析其突变类型及检测其转录本水平对明确疾病状态、观察疾病进展及指导治疗有重要意义。 展开更多
关键词 原发性血小板增多症 JAK2V617F arms—pcr 毛细管电泳
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肿瘤细胞蜡块EGFR突变检测在肺腺癌诊疗中的应用 被引量：1
6
作者 杜丹丹 官伟宁 +1 位作者 陈昇 郝吉庆 《临床与实验病理学杂志》 CAS 北大核心 2023年第11期1388-1391,共4页
目的 探讨ARMS荧光PCR法检测肺腺癌细胞蜡块EGFR基因突变的临床应用价值。方法 收集112例晚期肺腺癌患者的淋巴结细针穿刺、浆膜腔积液离心沉渣制作细胞蜡块,采用HE、免疫组化EnVision法染色,判断细胞形态学与免疫表型结果是否相符。应... 目的 探讨ARMS荧光PCR法检测肺腺癌细胞蜡块EGFR基因突变的临床应用价值。方法 收集112例晚期肺腺癌患者的淋巴结细针穿刺、浆膜腔积液离心沉渣制作细胞蜡块,采用HE、免疫组化EnVision法染色,判断细胞形态学与免疫表型结果是否相符。应用ARMS荧光PCR法检测EGFR基因突变,分析其疗效。结果 肺腺癌细胞呈腺腔样、花环样、洋葱皮或桑葚样排列,细胞可呈二维片状或三维簇团状结构。免疫表型:腺癌细胞表达TTF-1、Napsin A、CK7、CEA和CK(AE1/AE3),不表达p63和p40、Syn、CD56和CgA,Ki-67增殖指数为5%~10%。PCR法检测有52例EGFR基因突变(检出率46.4%),其中18号外显子G719A突变1例,19号外显子缺失突变21例,20号外显子插入突变1例,21号外显子L858R突变26例、L861Q突变3例。统计分析显示:112例肺腺癌EGFR基因突变与标本来源差异有统计学意义。随访50例行EGFR-TKI治疗的突变患者,肿瘤客观缓解率达56.0%(28/50)。结论 采用ARMS荧光PCR法检测肿瘤细胞蜡块标本EGFR基因突变,为晚期肺癌患者EGFR-TKI靶向治疗提供可靠依据。 展开更多
关键词 肺肿瘤 腺癌 EGFR基因突变 细胞蜡块 arms荧光pcr法
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云南籍葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症基因突变研究 被引量：4
7
作者 许冰莹 黄尤光 +3 位作者 程振江 田兴亚 李家林 李桢 《昆明医学院学报》 2007年第4期6-12,共7页
目的研究云南籍葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)基因突变型特点,探讨检测G6PD缺乏症基因突变型的有效方法.方法应用硝基四氮蓝(NBT)纸片法进行G6PD缺乏症定性筛查,等位基因特异抗突变系统(ARMS),聚合酶链反应-单链构象多态性分析(PCR-SSCP),... 目的研究云南籍葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)基因突变型特点,探讨检测G6PD缺乏症基因突变型的有效方法.方法应用硝基四氮蓝(NBT)纸片法进行G6PD缺乏症定性筛查,等位基因特异抗突变系统(ARMS),聚合酶链反应-单链构象多态性分析(PCR-SSCP),变性梯度凝胶电泳(DGGE)和DNA测序分析46例云南籍G6PD缺乏症患者的G6PD基因突变类型.结果46例样本经PCR-ARMS法发现nt-1388G→A 18例(39.13?),nt-1376G→T 2例(4.30?);经PCR-SSCP法发现有22例样本有电泳迁移率异常,其DNA测序结果与PCR-ARMS法的结果吻合,并发现2例nt-1311C→T;经PCR-DGGE法分析G6PD exon12发现有30例样本发现异常泳动条带,DNA测序证实26例(56.52?)为nt-1388G→A,4例(8.7?)nt-1376G→T.而PCR-DGGE法分析G6PD exon2未发现有异常泳动条带的样本.结论(1)nt-1388G→A、nt-1376G→T是云南省主要的基因突变型也是中国人中最常见的两种突变型,揭示中华民族有着共同的起源;(2)在检测突变的PCR-ARMS法、PCR-SSCP法和PCR-DGGE法三种方法中,以PCR-DGGE法结合DNA测序,阳性检出率高,简便、快捷、灵敏、结果准确可靠. 展开更多
关键词 云南人 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症 基因 突变型 pcr—arms pcr—SSCP pcr—DGGE DNA测序
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骨髓增殖性肿瘤JAK2基因突变分析及临床诊断意义
8
作者 徐月 阴常欣 +2 位作者 何涵 孟凡义 杨默 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第17期2284-2286,共3页
目的探讨JAK2基因突变在骨髓增殖性肿瘤(myeloproliferative neoplasms,MPNs)患者中的诊断价值。方法采用扩增受阻突变PCR(amplification refractory mutation PCR,ARMS-PCR)的方法检测原发性血小板增多症(essential thrombocythemia,E... 目的探讨JAK2基因突变在骨髓增殖性肿瘤(myeloproliferative neoplasms,MPNs)患者中的诊断价值。方法采用扩增受阻突变PCR(amplification refractory mutation PCR,ARMS-PCR)的方法检测原发性血小板增多症(essential thrombocythemia,ET)4例、真性红细胞增多症(polycythemia vera,PV)4例、慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)5例、慢性特发性骨髓纤维化(chronic idiopathic myelofibrosis,CIMF)1例和15例疑似MPNs的骨髓或外周血白细胞基因组JAK2 V617F点突变。结果 29例患者中共发现11例(37.9%)JAK2V617F突变,8例为杂合型突变,3例为纯合型突变;其中ET中2例(50.0%),PV中2例(50.0%),CIMF中1例(100.0%),疑似MPNs患者6例(40.0%),未发现CML患者有突变病例。结论 JAK2 V617F突变为bcr/abl阴性MPNs患者主要的分子遗传学异常标志,可作为临床诊断的指标之一,同时,ARMS-PCR方法能够检测出突变是杂合型还是纯合型。 展开更多
关键词 JAK2 骨髓增殖性肿瘤 突变 arms—pcr
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犬瘟热毒株CDV/R-20/12部分生物学特性鉴定
9
作者 吕九云 孟洋 +1 位作者 王丽萍 张彦龙 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第7期117-119,共3页
为了验证从健康貉子肺脏中分离的1株貉源犬瘟热毒株CDV/R-20/12的生物学特性,研究应用ARMS-PCR、致病性试验、同居感染试验、毒力返强试验及免疫后中和抗体效价测定对其进行鉴定。结果表明:该毒株为犬瘟热弱毒株,具有稳定的免疫原性。
关键词 犬瘟热 弱毒株 鉴定 arms—pcr 免疫原性 安全性
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JAK2V617F突变分型和相对定量研究——附123例慢性骨髓增殖性疾病检测结果分析 被引量：1
10
作者 沈益民 晁红颖 +6 位作者 张日 冯宇峰 岑建农 姚利 沈宏杰 朱子玲 薛永权 《中国实用内科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期240-242,共3页
目的研究JAK2V617F突变在慢性骨髓增殖性疾病(CMPD)中的发生率和突变类型,并对突变转录本水平进行定量分析。方法对2003年1月至2008年5月苏州大学附属第一医院就诊的CMPD患者采用突变特异性扩增系统(ARMS)PCR方法检测JAK2V617F的发生率... 目的研究JAK2V617F突变在慢性骨髓增殖性疾病(CMPD)中的发生率和突变类型,并对突变转录本水平进行定量分析。方法对2003年1月至2008年5月苏州大学附属第一医院就诊的CMPD患者采用突变特异性扩增系统(ARMS)PCR方法检测JAK2V617F的发生率及其突变类型;采用毛细管电泳方法定量分析JAK2V617F突变转录本水平。结果123例CMPD患者共检出90例JAK2V617F阳性,其中35例真性红细胞增多症(PV)患者中JAK2V617F阳性率100%,85例原发性血小板增多症(ET)患者中JAK2V617F阳性率62.4%,低于PV患者,差异有统计学意义(P<0.05);3例慢性骨髓纤维化(IMF)患者中JAK2V617F阳性率66.7%。90例JAK2V617F突变患者中共检出纯合突变35例,其中PV患者17例(17/35),占48.6%,ET患者17例(17/85),占20.0%,低于PV患者,差异有统计学意义(P<0.05),IMF患者1例;毛细管电泳定量分析显示,纯合型突变患者JAK2V617F突变转录本水平较杂合型突变患者低,差异有统计学意义(P<0.05);杂合型PV患者JAK2V617F突变转录本水平高于杂和型ET患者,差异有统计学意义(P<0.05)。93例患者进行了染色体检查,6例有核型异常,但未发现特异性染色体改变。结论ARMS-PCR可作为JAK2V617F突变较准确的检测方法,结合毛细管电泳可用于此突变的定量分析以及临床CMPD的诊断。 展开更多
关键词 慢性骨髓增殖性疾病 JAK2V617F arms—pcr 毛细管电泳
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