文摘【目的】早发性肌无力综合征(early onset muscle weakness syndrome,MW)是新近发现的一种荷斯坦牛遗传缺陷,患病犊牛表现为出生后趴卧不起、后肢肌肉萎缩等,其遗传机制与L型钙通道蛋白α1S亚基编码基因CACNA1S的单碱基突变相关。本研究旨在建立该遗传缺陷的分子检测方法,并探究其在国内荷斯坦牛群体中的扩散情况。【方法】基于MW致病位点特异性DNA序列,设计扩增阻滞突变系统-聚合酶链式反应(ARMS-PCR)检测引物,对317份荷斯坦牛冻精和毛囊样本进行MW遗传缺陷基因筛查,通过Sanger测序对ARMS-PCR检测结果进行验证,并利用系谱数据追溯MW突变源头。【结果】ARMS-PCR检出MW携带者21头,携带率为6.62%(21/317),未发现缺陷基因纯合子,提示该突变为隐性纯合致死。Sanger测序与ARMS-PCR所得基因型完全一致,证明该技术具有高度准确性。系谱追溯表明,MW携带者的遗传来源可追溯至1984年出生的荷斯坦公牛Southwind Bell of Bar-Lee。【结论】MW遗传缺陷已在中国荷斯坦牛群体中扩散且携带率较高,建议牧场应尽早开展MW遗传缺陷基因检测和风险评估,采取科学的选种选配措施以减少遗传缺陷导致的经济损失。
