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ARID4B在牛磺酸调节成肌细胞C2C12蛋白质合成中的作用
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作者 高学军 王璐璐 +2 位作者 祁昊 王哲 甄贞 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期46-53,共8页
肌肉细胞蛋白质合成能力与畜禽产肉量性状有关,试验旨在探究转录因子AT富集区4B(AT-rich interaction domain 4B,ARID4B)对牛磺酸(Taurine,Tau)调节成肌细胞C2C12蛋白质合成的影响。向体外培养C2C12细胞培养液中分别添加0、60、120、180... 肌肉细胞蛋白质合成能力与畜禽产肉量性状有关,试验旨在探究转录因子AT富集区4B(AT-rich interaction domain 4B,ARID4B)对牛磺酸(Taurine,Tau)调节成肌细胞C2C12蛋白质合成的影响。向体外培养C2C12细胞培养液中分别添加0、60、120、180和240μmol·L^(-1) Tau,采用BCA(Bicinchoniic acid)蛋白定量试剂盒和SUnSET法分别检测细胞总蛋白质含量和蛋白质合成速率,采用Western blot检测细胞中蛋白质合成相关信号通路分子mTOR磷酸化变化。进一步检测添加最适浓度Tau同时转染siRNA敲低ARID4B对mTOR磷酸化和mTOR mRNA水平的影响。结果表明,Tau以剂量依赖性方式促进C2C12细胞蛋白质合成。当Tau浓度为120μmol·L^(-1)时,蛋白质合成总量、蛋白质合成速率和mTOR磷酸化水平达到峰值,后逐渐下降。Tau显著促进ARID4B蛋白表达,敲低ARID4B后,细胞蛋白质合成以及mTOR磷酸化水平显著降低,敲低ARID4B也显著抑制Tau对蛋白质合成、mTOR磷酸化以及mTOR mRNA表达促进作用。综上,ARID4B通过正向调节mTOR mRNA表达促进mTOR磷酸化,调节C2C12细胞中蛋白质合成。 展开更多
关键词 C2C12 牛磺酸 MTOR 蛋白质合成 arid4b
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肝组织中ARID4B和DSN1蛋白表达水平在肝细胞癌患者预后评估中的价值
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作者 闫春伟 田立蕊 张璐 《国际消化病杂志》 CAS 2020年第6期423-430,共8页
目的探索ARID家族富含AT的相互作用域4B(ARID4B)以及Nnf1的剂量抑制因子(DSN1)蛋白表达水平在肝细胞癌(HCC)患者预后评估中的作用。方法使用癌症基因组图谱(TCGA)和基因表达数据库(GEO)中的数据来分析HCC中ARID4B和DSN1的表达。所有组... 目的探索ARID家族富含AT的相互作用域4B(ARID4B)以及Nnf1的剂量抑制因子(DSN1)蛋白表达水平在肝细胞癌(HCC)患者预后评估中的作用。方法使用癌症基因组图谱(TCGA)和基因表达数据库(GEO)中的数据来分析HCC中ARID4B和DSN1的表达。所有组织样本均取自2016年6月至2017年6月在秦皇岛市第三医院外科接受肝切除手术且术前未行化学治疗或放射治疗的HCC患者。取新鲜冷冻的130对HCC组织和邻近非癌肝组织(ANLT)样品,采用实时定量聚合酶链反应(real-time qPCR)检测ARID4B mRNA和DSN1 mRNA的表达水平。对130例经37%甲醛溶液固定、石蜡包埋的HCC组织样品进行免疫组织化学分析,以检测ARID4B和DSN1在HCC组织中的表达水平并确定其临床意义。结果生物信息学分析、RT-PCR结果表明,与ANLT相比,ARID4B和DSN1在HCC组织中高表达(P<0.05)。ARID4B高表达与肿瘤结节数(P=0.042)、TNM分期(P=0.001)密切相关。DSN1高表达与性别(P=0.035)、甲胎蛋白(AFP)(P=0.005)、肿瘤结节数(P=0.023)密切相关。此外,Kaplan-Meier和Cox比例风险分析表明,ARID4B和DSN1高表达与HCC患者的不良生存率显著相关,并且ARID4B和DSN1是HCC患者整体生存和无病生存的独立预后因素。结论ARID4B和DSN1可作为预测HCC患者预后的生物学标志物。 展开更多
关键词 肝细胞癌 arid4b DSN1 总体生存率 无病生存率
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Effects of Different siRNA Transfection Methods on Expression of ARID4B in HepG2 Cells
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作者 Xiaohui WANG Mingyu GONG 《Medicinal Plant》 CAS 2020年第2期44-46,共3页
[Objectives]This study aimed to optimize the siRNA transfection method for ARID4B gene and lay a foundation for further study on the effect of ARID4B low expression on the biological function of liver cancer cells Hep... [Objectives]This study aimed to optimize the siRNA transfection method for ARID4B gene and lay a foundation for further study on the effect of ARID4B low expression on the biological function of liver cancer cells HepG2.[Methods]HepG2 cells were cultured for 0,4 and 24 h,respectively and then transfected with ARID4B targeting siRNA.The mRNA expression of ARID4B gene was detected by RT-qPCR,and the protein expression was detected by Western blot.[Results]When HepG2 cells were transfected at 0 h after seeding,the expression of ARID4B was the lowest in both mRNA and protein levels,that is,the inhibition effect was the best.[Conclusions]Transfection at different time points after seeding of HepG2 cells had different inhibition effect on the expression of ARID4B.Transfection at 0 h after seeding showed the best inhibition effect. 展开更多
关键词 SIRNA HEPG2 CELL arid4b TRANSFECTION method
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miR-519b-3p表达与局部晚期直肠癌患者术前放化疗应答的相关性及机制研究 被引量:2
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作者 罗加林 刘鲁迎 +5 位作者 沈金闻 张娜 孙权权 刘鹏 卢珂 朱远 《肿瘤学杂志》 CAS 2019年第7期627-633,共7页
[目的]研究miR-519b-3p表达与局部晚期直肠癌术前放化疗应答的相关性,并探讨miR-519b-3p是否通过靶向作用ARID4B提高局部晚期直肠癌患者术前放化疗的反应性。[方法 ]实时定量PCR检测局部晚期直肠癌患者miR-519b-3p的表达水平,用miR-519b... [目的]研究miR-519b-3p表达与局部晚期直肠癌术前放化疗应答的相关性,并探讨miR-519b-3p是否通过靶向作用ARID4B提高局部晚期直肠癌患者术前放化疗的反应性。[方法 ]实时定量PCR检测局部晚期直肠癌患者miR-519b-3p的表达水平,用miR-519b-3p模拟物或抑制剂转染HCT116或SW480细胞,体外验证其表达水平与放化疗反应的相关性;双荧光素酶报告实验用于检测miR-519b-3p与ARID4B之间的相互作用;通过重组质粒构建及细胞转染调节相关基因在细胞内的表达,通过建立裸鼠异位移植瘤模型,在体验证miR-519b-3p对ARID4B的调节作用。[结果]实验发现miR-519b-3p表达与局部晚期直肠癌患者对pCRT的反应性相关,miR-519b-3p在局部晚期直肠癌应答患者中呈现为高表达。miR-519b-3p的过表达增强了体外放化疗的反应性。在机理上,我们发现miR-519b-3p直接与ARID4B mRNA的3′UTR结合,其表达与miR-519b-3p表达呈负相关。功能实验显示miR-519b-3p以ARID4B依赖方式直接与直肠癌患者对术前放化疗的反应密切相关。[结论] miR-519b-3p通过靶向作用ARID4B提高局部晚期直肠癌患者术前放化疗的反应性。 展开更多
关键词 局部晚期直肠癌 术前同步放化疗 miR-519b-3p arid4b
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