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细胞内物质转运调节分子ARFGAP3的克隆表达及生化活性
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作者 刘晓勤 张成岗 +2 位作者 邢桂春 陈清棠 贺福初 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第4期507-513,共7页
ADP核糖基化因子 GTP酶活化蛋白 (ARFGAP)是重要的细胞内物质转运调节分子 .在 2 2周孕龄人胎肝cDNA文库中发现一种新基因 ,其编码的氨基酸序列与大鼠ARF1GAP有 32 %同源性 .将这种新基因命名为“ARFGAP3” ,对其进行功能研究 ,利用逆... ADP核糖基化因子 GTP酶活化蛋白 (ARFGAP)是重要的细胞内物质转运调节分子 .在 2 2周孕龄人胎肝cDNA文库中发现一种新基因 ,其编码的氨基酸序列与大鼠ARF1GAP有 32 %同源性 .将这种新基因命名为“ARFGAP3” ,对其进行功能研究 ,利用逆转录 聚合酶链式反应 (RT PCR ) ,从人胎盘总RNA中扩增ARFGAP3全长cDNA序列 ,并将其亚克隆到 pGEM T载体 ;采用RNA印迹法和斑点杂交法 ,检测其组织表达谱 ,发现在多种腺体和睾丸中有很高水平ARFGAP3基因转录 ,并且只有一种约 2 7kb的转录本 .利用基因重组技术 ,构建表达质粒 pBAD/Thio ARFGAP3,在大肠杆菌中表达 ,采用亲和层析法纯化表达产物 ,利用肠激酶切除重组融合蛋白N端引导序列 .检测重组ARFGAP3的生化活性 ,证实ARFGAP3对ARF1具有GAP活性 ,促进ARF1结合的GTP水解为GDP ,磷脂酰肌醇二磷酸 (PIP2 )增强其GAP活性 ,而磷脂酰胆碱 (PC) 展开更多
关键词 arfgap3 细胞内物质转运 ADP核糖基化因子 GTP酶活化蛋白 生化活性
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裸燕麦麸皮提取物和低频脉冲刺激干预PFD大鼠对ArfGAP3通路的影响
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作者 李碧慧 王悦棠 +3 位作者 刘完美 时欢 徐赛群 何娴婕 《生物化工》 CAS 2023年第3期80-82,共3页
目的:分析裸燕麦麸皮提取物和低频脉冲刺激分别干预盆底功能障碍(PFD)大鼠对ADP核糖基化因子GTP结合蛋白3(ArfGAP3)信号通路的影响。方法:将30只大鼠随机均分为模型组、药物干预组、物理干预组,比较各组干预后病灶局部组织中ArfGAP3、... 目的:分析裸燕麦麸皮提取物和低频脉冲刺激分别干预盆底功能障碍(PFD)大鼠对ADP核糖基化因子GTP结合蛋白3(ArfGAP3)信号通路的影响。方法:将30只大鼠随机均分为模型组、药物干预组、物理干预组,比较各组干预后病灶局部组织中ArfGAP3、透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅳ型胶原蛋白(Ⅳ-C)含量的统计学差异。用回归模型分析HA、LN、Ⅳ-C和ArfGAP3的综合关联。结果:药物干预组和模型组、物理干预组和模型组、物理干预组和药物干预组两两比较,各指标差异均有统计意义(P<0.05)。各指标对ArfGAP3蛋白影响程度依次为LN蛋白、HA蛋白、Ⅳ-C蛋白。结论:低频脉冲刺激和裸燕麦麸皮提取物虽然均能对PFD大鼠病灶局部ArfGAP3通路产生激活作用,但低频脉冲刺激物理治疗方式能更为快捷且显著的降低LN蛋白表达,增加HA、Ⅳ-C蛋白表达,可能对病灶局部肌功能恢复有更好促进作用。 展开更多
关键词 低频 脉冲刺激 裸燕麦麸皮 盆底功能障碍 arfgap3信号通路
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ARFGAP 3在小鼠盆底肌损伤模型中的表达 被引量:2
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作者 陈茂 洪莉 +6 位作者 胡鸣 汤剑明 王琳琳 李素廷 陈乾 李秉枢 洪莎莎 《中国计划生育和妇产科》 2019年第10期84-87,96,I0002,共6页
目的探讨ADP核糖基化因子GTP结合蛋白3(ADP ribosylation factor GTPase binding protein 3,ARFGAP 3)在小鼠盆底肌损伤模型中的表达变化以及在压力性尿失禁(stress urinary incontinence, SUI)靶向治疗中的初步分析。方法选择雌性成年... 目的探讨ADP核糖基化因子GTP结合蛋白3(ADP ribosylation factor GTPase binding protein 3,ARFGAP 3)在小鼠盆底肌损伤模型中的表达变化以及在压力性尿失禁(stress urinary incontinence, SUI)靶向治疗中的初步分析。方法选择雌性成年处鼠C 57 BL/6小鼠40只,随机分为5组,每组8只。根据造模后取材时间点的不同分为1 d、3 d、7 d、14 d组和对照组。造模采用经典的阴道扩张法模拟产伤构建盆底肌损伤小鼠模型,分别于处理后第1、3、7、14 d处死小鼠,取盆底肌组织进行分析,对照组常规饲养1周后取盆底肌作相同处理。HE染色观察盆底肌病理变化,确定损伤的存在及持续时间;免疫组织化学法和Western-blot法检测ARFGAP 3蛋白水平表达变化;q-PCR检测ARFGAP 3的mRNA表达变化。结果①1 d、3 d组盆底肌损伤变化明显,肌膜间可见大量炎性细胞浸润,部分肌纤维小灶性坏死,肌间隙增宽,肌束结构不清晰;7 d组盆底肌组织损伤趋于修复,少量肌纤维萎缩,炎性浸润减少,结缔组织增生;14 d组小鼠盆底肌纤维、肌束结构与对照组相比基本恢复正常,肌间隙略宽。②免疫组化染色、Western-blot检测以及q-PCR结果相一致,各造模组较对照组小鼠盆底肌组织中ARFGAP 3表达上调(P<0.05),3 d组上调较各造模组最明显。结论①模拟产伤法构建的盆底肌损伤模型中盆底肌损伤明显,成功构建盆底肌损伤小鼠模型,有助于进一步探究SUI发病机制;②小鼠盆底肌损伤后ARFGAP 3表达上调,且于第3 d增高最明显,随后表达逐渐降低,这表明ARFGAP 3可能参与了盆底肌损伤修复过程。 展开更多
关键词 ARFGAP 3 盆底肌损伤 模拟产伤 损伤修复
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