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细胞内物质转运调节分子ARFGAP3的克隆表达及生化活性
1
作者
刘晓勤
张成岗
+2 位作者
邢桂春
陈清棠
贺福初
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2001年第4期507-513,共7页
ADP核糖基化因子 GTP酶活化蛋白 (ARFGAP)是重要的细胞内物质转运调节分子 .在 2 2周孕龄人胎肝cDNA文库中发现一种新基因 ,其编码的氨基酸序列与大鼠ARF1GAP有 32 %同源性 .将这种新基因命名为“ARFGAP3” ,对其进行功能研究 ,利用逆...
ADP核糖基化因子 GTP酶活化蛋白 (ARFGAP)是重要的细胞内物质转运调节分子 .在 2 2周孕龄人胎肝cDNA文库中发现一种新基因 ,其编码的氨基酸序列与大鼠ARF1GAP有 32 %同源性 .将这种新基因命名为“ARFGAP3” ,对其进行功能研究 ,利用逆转录 聚合酶链式反应 (RT PCR ) ,从人胎盘总RNA中扩增ARFGAP3全长cDNA序列 ,并将其亚克隆到 pGEM T载体 ;采用RNA印迹法和斑点杂交法 ,检测其组织表达谱 ,发现在多种腺体和睾丸中有很高水平ARFGAP3基因转录 ,并且只有一种约 2 7kb的转录本 .利用基因重组技术 ,构建表达质粒 pBAD/Thio ARFGAP3,在大肠杆菌中表达 ,采用亲和层析法纯化表达产物 ,利用肠激酶切除重组融合蛋白N端引导序列 .检测重组ARFGAP3的生化活性 ,证实ARFGAP3对ARF1具有GAP活性 ,促进ARF1结合的GTP水解为GDP ,磷脂酰肌醇二磷酸 (PIP2 )增强其GAP活性 ,而磷脂酰胆碱 (PC)
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关键词
arfgap3
细胞内物质转运
ADP核糖基化因子
GTP酶活化蛋白
生化活性
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职称材料
裸燕麦麸皮提取物和低频脉冲刺激干预PFD大鼠对ArfGAP3通路的影响
2
作者
李碧慧
王悦棠
+3 位作者
刘完美
时欢
徐赛群
何娴婕
《生物化工》
CAS
2023年第3期80-82,共3页
目的:分析裸燕麦麸皮提取物和低频脉冲刺激分别干预盆底功能障碍(PFD)大鼠对ADP核糖基化因子GTP结合蛋白3(ArfGAP3)信号通路的影响。方法:将30只大鼠随机均分为模型组、药物干预组、物理干预组,比较各组干预后病灶局部组织中ArfGAP3、...
目的:分析裸燕麦麸皮提取物和低频脉冲刺激分别干预盆底功能障碍(PFD)大鼠对ADP核糖基化因子GTP结合蛋白3(ArfGAP3)信号通路的影响。方法:将30只大鼠随机均分为模型组、药物干预组、物理干预组,比较各组干预后病灶局部组织中ArfGAP3、透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅳ型胶原蛋白(Ⅳ-C)含量的统计学差异。用回归模型分析HA、LN、Ⅳ-C和ArfGAP3的综合关联。结果:药物干预组和模型组、物理干预组和模型组、物理干预组和药物干预组两两比较,各指标差异均有统计意义(P<0.05)。各指标对ArfGAP3蛋白影响程度依次为LN蛋白、HA蛋白、Ⅳ-C蛋白。结论:低频脉冲刺激和裸燕麦麸皮提取物虽然均能对PFD大鼠病灶局部ArfGAP3通路产生激活作用,但低频脉冲刺激物理治疗方式能更为快捷且显著的降低LN蛋白表达,增加HA、Ⅳ-C蛋白表达,可能对病灶局部肌功能恢复有更好促进作用。
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关键词
低频
脉冲刺激
裸燕麦麸皮
盆底功能障碍
arfgap3
信号通路
暂未订购
ARFGAP 3在小鼠盆底肌损伤模型中的表达
被引量:
2
3
作者
陈茂
洪莉
+6 位作者
胡鸣
汤剑明
王琳琳
李素廷
陈乾
李秉枢
洪莎莎
《中国计划生育和妇产科》
2019年第10期84-87,96,I0002,共6页
目的探讨ADP核糖基化因子GTP结合蛋白3(ADP ribosylation factor GTPase binding protein 3,ARFGAP 3)在小鼠盆底肌损伤模型中的表达变化以及在压力性尿失禁(stress urinary incontinence, SUI)靶向治疗中的初步分析。方法选择雌性成年...
目的探讨ADP核糖基化因子GTP结合蛋白3(ADP ribosylation factor GTPase binding protein 3,ARFGAP 3)在小鼠盆底肌损伤模型中的表达变化以及在压力性尿失禁(stress urinary incontinence, SUI)靶向治疗中的初步分析。方法选择雌性成年处鼠C 57 BL/6小鼠40只,随机分为5组,每组8只。根据造模后取材时间点的不同分为1 d、3 d、7 d、14 d组和对照组。造模采用经典的阴道扩张法模拟产伤构建盆底肌损伤小鼠模型,分别于处理后第1、3、7、14 d处死小鼠,取盆底肌组织进行分析,对照组常规饲养1周后取盆底肌作相同处理。HE染色观察盆底肌病理变化,确定损伤的存在及持续时间;免疫组织化学法和Western-blot法检测ARFGAP 3蛋白水平表达变化;q-PCR检测ARFGAP 3的mRNA表达变化。结果①1 d、3 d组盆底肌损伤变化明显,肌膜间可见大量炎性细胞浸润,部分肌纤维小灶性坏死,肌间隙增宽,肌束结构不清晰;7 d组盆底肌组织损伤趋于修复,少量肌纤维萎缩,炎性浸润减少,结缔组织增生;14 d组小鼠盆底肌纤维、肌束结构与对照组相比基本恢复正常,肌间隙略宽。②免疫组化染色、Western-blot检测以及q-PCR结果相一致,各造模组较对照组小鼠盆底肌组织中ARFGAP 3表达上调(P<0.05),3 d组上调较各造模组最明显。结论①模拟产伤法构建的盆底肌损伤模型中盆底肌损伤明显,成功构建盆底肌损伤小鼠模型,有助于进一步探究SUI发病机制;②小鼠盆底肌损伤后ARFGAP 3表达上调,且于第3 d增高最明显,随后表达逐渐降低,这表明ARFGAP 3可能参与了盆底肌损伤修复过程。
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关键词
ARFGAP
3
盆底肌损伤
模拟产伤
损伤修复
暂未订购
题名
细胞内物质转运调节分子ARFGAP3的克隆表达及生化活性
1
作者
刘晓勤
张成岗
邢桂春
陈清棠
贺福初
机构
军事医学科学院放射医学研究所
北京医科大学第一医院神经内科
出处
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2001年第4期507-513,共7页
基金
国家自然科学基金资助项目 (3 973 0 3 10
3 0 0 70 3 86)~~
文摘
ADP核糖基化因子 GTP酶活化蛋白 (ARFGAP)是重要的细胞内物质转运调节分子 .在 2 2周孕龄人胎肝cDNA文库中发现一种新基因 ,其编码的氨基酸序列与大鼠ARF1GAP有 32 %同源性 .将这种新基因命名为“ARFGAP3” ,对其进行功能研究 ,利用逆转录 聚合酶链式反应 (RT PCR ) ,从人胎盘总RNA中扩增ARFGAP3全长cDNA序列 ,并将其亚克隆到 pGEM T载体 ;采用RNA印迹法和斑点杂交法 ,检测其组织表达谱 ,发现在多种腺体和睾丸中有很高水平ARFGAP3基因转录 ,并且只有一种约 2 7kb的转录本 .利用基因重组技术 ,构建表达质粒 pBAD/Thio ARFGAP3,在大肠杆菌中表达 ,采用亲和层析法纯化表达产物 ,利用肠激酶切除重组融合蛋白N端引导序列 .检测重组ARFGAP3的生化活性 ,证实ARFGAP3对ARF1具有GAP活性 ,促进ARF1结合的GTP水解为GDP ,磷脂酰肌醇二磷酸 (PIP2 )增强其GAP活性 ,而磷脂酰胆碱 (PC)
关键词
arfgap3
细胞内物质转运
ADP核糖基化因子
GTP酶活化蛋白
生化活性
Keywords
arfgap3
intracellular transport
ADP-ribosylation factor (ARF)
GTPase activating protein (GAP)
biochemical activity
分类号
Q26 [生物学—细胞生物学]
Q73 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
裸燕麦麸皮提取物和低频脉冲刺激干预PFD大鼠对ArfGAP3通路的影响
2
作者
李碧慧
王悦棠
刘完美
时欢
徐赛群
何娴婕
机构
长沙医学院
出处
《生物化工》
CAS
2023年第3期80-82,共3页
基金
湖南省教育厅科学研究项目(湘教通[2022]323号-22C0679、湘教通[2021]352号-21C0880)。
文摘
目的:分析裸燕麦麸皮提取物和低频脉冲刺激分别干预盆底功能障碍(PFD)大鼠对ADP核糖基化因子GTP结合蛋白3(ArfGAP3)信号通路的影响。方法:将30只大鼠随机均分为模型组、药物干预组、物理干预组,比较各组干预后病灶局部组织中ArfGAP3、透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅳ型胶原蛋白(Ⅳ-C)含量的统计学差异。用回归模型分析HA、LN、Ⅳ-C和ArfGAP3的综合关联。结果:药物干预组和模型组、物理干预组和模型组、物理干预组和药物干预组两两比较,各指标差异均有统计意义(P<0.05)。各指标对ArfGAP3蛋白影响程度依次为LN蛋白、HA蛋白、Ⅳ-C蛋白。结论:低频脉冲刺激和裸燕麦麸皮提取物虽然均能对PFD大鼠病灶局部ArfGAP3通路产生激活作用,但低频脉冲刺激物理治疗方式能更为快捷且显著的降低LN蛋白表达,增加HA、Ⅳ-C蛋白表达,可能对病灶局部肌功能恢复有更好促进作用。
关键词
低频
脉冲刺激
裸燕麦麸皮
盆底功能障碍
arfgap3
信号通路
Keywords
low frequency
pulse stimulation
naked oat bran
pelvic floor dysfunction
arfgap3
signaling pathway
分类号
R686 [医药卫生—骨科学]
暂未订购
题名
ARFGAP 3在小鼠盆底肌损伤模型中的表达
被引量:
2
3
作者
陈茂
洪莉
胡鸣
汤剑明
王琳琳
李素廷
陈乾
李秉枢
洪莎莎
机构
武汉大学人民医院妇产科
出处
《中国计划生育和妇产科》
2019年第10期84-87,96,I0002,共6页
基金
国家自然科学基金资助项目(项目编号:81771562)
中央高校基本科研业务费专项资金重大培育类(项目编号:2041018kf0066)
文摘
目的探讨ADP核糖基化因子GTP结合蛋白3(ADP ribosylation factor GTPase binding protein 3,ARFGAP 3)在小鼠盆底肌损伤模型中的表达变化以及在压力性尿失禁(stress urinary incontinence, SUI)靶向治疗中的初步分析。方法选择雌性成年处鼠C 57 BL/6小鼠40只,随机分为5组,每组8只。根据造模后取材时间点的不同分为1 d、3 d、7 d、14 d组和对照组。造模采用经典的阴道扩张法模拟产伤构建盆底肌损伤小鼠模型,分别于处理后第1、3、7、14 d处死小鼠,取盆底肌组织进行分析,对照组常规饲养1周后取盆底肌作相同处理。HE染色观察盆底肌病理变化,确定损伤的存在及持续时间;免疫组织化学法和Western-blot法检测ARFGAP 3蛋白水平表达变化;q-PCR检测ARFGAP 3的mRNA表达变化。结果①1 d、3 d组盆底肌损伤变化明显,肌膜间可见大量炎性细胞浸润,部分肌纤维小灶性坏死,肌间隙增宽,肌束结构不清晰;7 d组盆底肌组织损伤趋于修复,少量肌纤维萎缩,炎性浸润减少,结缔组织增生;14 d组小鼠盆底肌纤维、肌束结构与对照组相比基本恢复正常,肌间隙略宽。②免疫组化染色、Western-blot检测以及q-PCR结果相一致,各造模组较对照组小鼠盆底肌组织中ARFGAP 3表达上调(P<0.05),3 d组上调较各造模组最明显。结论①模拟产伤法构建的盆底肌损伤模型中盆底肌损伤明显,成功构建盆底肌损伤小鼠模型,有助于进一步探究SUI发病机制;②小鼠盆底肌损伤后ARFGAP 3表达上调,且于第3 d增高最明显,随后表达逐渐降低,这表明ARFGAP 3可能参与了盆底肌损伤修复过程。
关键词
ARFGAP
3
盆底肌损伤
模拟产伤
损伤修复
Keywords
arfgap3
pelvic floor muscle injury
simulated birth injury
damage repair
分类号
R711.4 [医药卫生—妇产科学]
暂未订购
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
细胞内物质转运调节分子ARFGAP3的克隆表达及生化活性
刘晓勤
张成岗
邢桂春
陈清棠
贺福初
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2001
0
在线阅读
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职称材料
2
裸燕麦麸皮提取物和低频脉冲刺激干预PFD大鼠对ArfGAP3通路的影响
李碧慧
王悦棠
刘完美
时欢
徐赛群
何娴婕
《生物化工》
CAS
2023
0
暂未订购
3
ARFGAP 3在小鼠盆底肌损伤模型中的表达
陈茂
洪莉
胡鸣
汤剑明
王琳琳
李素廷
陈乾
李秉枢
洪莎莎
《中国计划生育和妇产科》
2019
2
暂未订购
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