目的检测长链非编码RNA(LncRNA)ARAP1-AS1在胰腺癌中的表达,并初步探讨其对胰腺癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭生物学行为的影响。方法收集25例胰腺癌组织标本及相应癌旁组织标本,qPCR法检测ARAP1-AS1表达。体外培养人胰腺癌细胞系PANC-1...目的检测长链非编码RNA(LncRNA)ARAP1-AS1在胰腺癌中的表达,并初步探讨其对胰腺癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭生物学行为的影响。方法收集25例胰腺癌组织标本及相应癌旁组织标本,qPCR法检测ARAP1-AS1表达。体外培养人胰腺癌细胞系PANC-1,分为对照组、siRNA-对照组(转染siRNA对照序列)、敲除组(转染ARAP1-AS1 siRNA)、pcDNA3.1-对照组(转染pcDNA3.1)和过表达组(转染pcDNA3.1-ARAP1-AS1)。qPCR法检测转染效率,CCK-8法检测细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell法检测细胞侵袭能力,蛋白印迹(WB)法检测增殖细胞核抗原(PCNA)、B淋巴细胞瘤-2蛋白(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白表达。结果胰腺癌组织中ARAP1-AS1表达水平较癌旁组织(2.26±0.13 vs 1.00±0.00)显著升高(P<0.05)。与siRNA-对照组相比,敲除组PANC-1细胞中ARAP1-AS1水平(1.01±0.02 vs 0.29±0.03)及PCNA、Bcl-2、MMP-9蛋白水平、细胞OD值(0.57±0.05 vs 0.23±0.03)、划痕愈合率(78.53±7.02 vs 48.60±5.26)、侵袭数(229.63±22.59 vs 104.25±15.04)显著降低(P<0.05),Bax蛋白水平及细胞凋亡率(4.52±0.42 vs 32.40±1.84)显著升高(P<0.05)。与pcDNA3.1-对照组相比,过表达组PANC-1细胞中ARAP1-AS1水平(1.02±0.03 vs 2.06±0.08)及PCNA、Bcl-2、MMP-9蛋白水平、细胞OD值(0.57±0.05 vs 0.90±0.08)、划痕愈合率(77.65±6.67 vs 91.22±7.34)、侵袭数(225.34±19.65 vs 327.50±25.40)显著升高(P<0.05),Bax蛋白水平及细胞凋亡率(4.58±0.48 vs 2.29±0.24)显著降低(P<0.05)。结论 LncRNA ARAP1-AS1在胰腺癌中高表达,其能促进胰腺癌细胞PANC-1增殖、迁移及侵袭,减少细胞凋亡。展开更多
文摘目的检测长链非编码RNA(LncRNA)ARAP1-AS1在胰腺癌中的表达,并初步探讨其对胰腺癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭生物学行为的影响。方法收集25例胰腺癌组织标本及相应癌旁组织标本,qPCR法检测ARAP1-AS1表达。体外培养人胰腺癌细胞系PANC-1,分为对照组、siRNA-对照组(转染siRNA对照序列)、敲除组(转染ARAP1-AS1 siRNA)、pcDNA3.1-对照组(转染pcDNA3.1)和过表达组(转染pcDNA3.1-ARAP1-AS1)。qPCR法检测转染效率,CCK-8法检测细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell法检测细胞侵袭能力,蛋白印迹(WB)法检测增殖细胞核抗原(PCNA)、B淋巴细胞瘤-2蛋白(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白表达。结果胰腺癌组织中ARAP1-AS1表达水平较癌旁组织(2.26±0.13 vs 1.00±0.00)显著升高(P<0.05)。与siRNA-对照组相比,敲除组PANC-1细胞中ARAP1-AS1水平(1.01±0.02 vs 0.29±0.03)及PCNA、Bcl-2、MMP-9蛋白水平、细胞OD值(0.57±0.05 vs 0.23±0.03)、划痕愈合率(78.53±7.02 vs 48.60±5.26)、侵袭数(229.63±22.59 vs 104.25±15.04)显著降低(P<0.05),Bax蛋白水平及细胞凋亡率(4.52±0.42 vs 32.40±1.84)显著升高(P<0.05)。与pcDNA3.1-对照组相比,过表达组PANC-1细胞中ARAP1-AS1水平(1.02±0.03 vs 2.06±0.08)及PCNA、Bcl-2、MMP-9蛋白水平、细胞OD值(0.57±0.05 vs 0.90±0.08)、划痕愈合率(77.65±6.67 vs 91.22±7.34)、侵袭数(225.34±19.65 vs 327.50±25.40)显著升高(P<0.05),Bax蛋白水平及细胞凋亡率(4.58±0.48 vs 2.29±0.24)显著降低(P<0.05)。结论 LncRNA ARAP1-AS1在胰腺癌中高表达,其能促进胰腺癌细胞PANC-1增殖、迁移及侵袭,减少细胞凋亡。
