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白魔芋抗坏血酸过氧化物酶的全基因组鉴定及热胁迫下AaAPXs的功能分析
1
作者 厉健康 顾晓瑞 +5 位作者 王一 陈蕾 屈锋 胡玲玉 蔡阳光 牛义 《生物工程学报》 2026年第1期271-287,共17页
白魔芋(Amorphophallus albus)为天南星科魔芋属多年生草本植物,也是典型的“喜温不耐热”的经济作物,对温度变化较为敏感。魔芋是唯一可以大量产生葡甘露聚糖(konjac glucomannan,KGM)的物种,KGM是一种低热量、可溶性多糖膳食纤维,在... 白魔芋(Amorphophallus albus)为天南星科魔芋属多年生草本植物,也是典型的“喜温不耐热”的经济作物,对温度变化较为敏感。魔芋是唯一可以大量产生葡甘露聚糖(konjac glucomannan,KGM)的物种,KGM是一种低热量、可溶性多糖膳食纤维,在食品、医药及工业领域有广泛应用。魔芋的生长旺盛期处于夏季高温季节,连续的高温会给魔芋造成严重且不可逆转的损害。抗坏血酸过氧化物酶(ascorbate peroxidase,APX)家族具有清除植物因非生物胁迫产生过量活性氧的功能,在植物抵御非生物胁迫中发挥重要的作用。为解析APX家族在魔芋耐热中的作用,本研究对白魔芋中的APX家族成员进行了鉴定,对它们在染色体上的分布、蛋白的理化性质、基因的结构、系统进化关系等生物信息学进行了分析,并通过实时荧光定量PCR(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)分析了各个成员在热胁迫下的表达趋势。结果表明,在白魔芋中共鉴定了10个AaAPX成员,其中AaAPX1和AaAPX8在热胁迫下表达量上调,AaAPX3呈现出先升高再下降然后再升高的趋势,AaAPX7则呈现出下调的趋势。亚细胞定位表明AaAPX1定位在细胞质,AaAPX3定位在细胞质和细胞核膜。此外,在酵母中进行基因过表达表明,与对照相比,过表达AaAPX1和AaAPX3均能不同程度提高酵母在热胁迫下的存活率。本研究为进一步明确APX在白魔芋热胁迫中的调控机制奠定了基础。 展开更多
关键词 白魔芋 APX基因家族 热胁迫 实时荧光定量PCR 亚细胞定位 酵母转基因
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南瓜APX基因家族鉴定及其在盐胁迫下的表达特征研究
2
作者 程相杰 徐鹏亮 +6 位作者 任广乾 郭志伟 刘贺娟 张蓓 王童童 李新峥 任福森 《种子》 北大核心 2025年第11期72-80,共9页
为阐明中国南瓜抗坏血酸过氧化物酶(APX)基因家族在盐胁迫响应中的作用,对CmoAPX家族成员进行了全基因组鉴定与表达分析。通过生物信息学方法鉴定到8个CmoAPX基因,分属3个亚组,预测定位于叶绿体或过氧化物酶体,其启动子富含胁迫与激素... 为阐明中国南瓜抗坏血酸过氧化物酶(APX)基因家族在盐胁迫响应中的作用,对CmoAPX家族成员进行了全基因组鉴定与表达分析。通过生物信息学方法鉴定到8个CmoAPX基因,分属3个亚组,预测定位于叶绿体或过氧化物酶体,其启动子富含胁迫与激素响应元件。转录组及qRT-PCR分析表明,盐胁迫下CmoAPX基因呈现差异化表达模式:CmoAPX2作为核心响应基因被强烈诱导;CmoAPX4高水平稳定表达,保障基础抗氧化功能;CmoAPX1表达受显著抑制,可能参与信号负调控。研究表明,CmoAPX基因家族形成了“核心响应—基础维持—冗余微调”的复杂抗盐调控网络。CmoAPX2和CmoAPX1是极具潜力的耐盐育种候选基因,为葫芦科作物抗逆改良提供了理论依据和基因资源。 展开更多
关键词 中国南瓜 APX基因家族 盐胁迫 全基因组分析 表达模式
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谷子APX基因家族的全基因组鉴定与表达分析
3
作者 魏萌涵 解慧芳 +2 位作者 赵二源 邢璐 刘金荣 《分子植物育种》 北大核心 2025年第16期5298-5306,共9页
本研究利用生物信息学方法,从谷子(Setaria italica)基因组数据库中鉴定出9个SiAPX基因家族成员。系统发育分析表明,SiAPX蛋白可分为3个亚家族,每个亚家族的成员同源性较高。SiAPX家族基因分布在6条染色体上。启动子顺式元件分析表明,... 本研究利用生物信息学方法,从谷子(Setaria italica)基因组数据库中鉴定出9个SiAPX基因家族成员。系统发育分析表明,SiAPX蛋白可分为3个亚家族,每个亚家族的成员同源性较高。SiAPX家族基因分布在6条染色体上。启动子顺式元件分析表明,大部分谷子SiAPX基因含有多种与植物激素和非生物胁迫相关的顺式元件。蛋白二级结构主要为无规卷曲和α-螺旋。谷子APX家族基因在不同组织中的表达丰度不同,具有相应的组织特异性。RT-qPCR表明,SiAPX2和SiAPX9这两个基因受干旱胁迫和高氮诱导,表现显著上调表达。本研究为谷子APX基因家族的系统发育关系和功能研究奠定基础。 展开更多
关键词 谷子 抗坏血酸过氧化物酶(APX) 生物信息学 干旱
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大麦APX基因家族的全基因组鉴定及耐逆性分析
4
作者 何心钰 梁旋 +3 位作者 郑瑞均 方云霞 胡旭 张晓勤 《杭州师范大学学报(自然科学版)》 2025年第3期288-296,共9页
为探究大麦抗坏血酸过氧化物酶(ascorbate peroxidase,APX)基因对非生物胁迫的响应机制,运用生物信息学方法对大麦APX(HvAPX)基因家族成员进行全基因组鉴定和分析,并利用qRT-PCR方法检测高温、低温、干旱、盐和干旱-盐交叉胁迫下大麦幼... 为探究大麦抗坏血酸过氧化物酶(ascorbate peroxidase,APX)基因对非生物胁迫的响应机制,运用生物信息学方法对大麦APX(HvAPX)基因家族成员进行全基因组鉴定和分析,并利用qRT-PCR方法检测高温、低温、干旱、盐和干旱-盐交叉胁迫下大麦幼苗中APX基因的表达量.从大麦全基因组中共鉴定出13个HvAPX基因,亚细胞定位预测显示主要定位于细胞质和叶绿体中.进化分析发现,亲缘关系近的家族成员其保守基序、基因结构更为相似.荧光定量检测结果显示,低温胁迫下HvAPX3、HvAPX12表达水平显著上调,高温胁迫下HvAPX10表达水平上调,干旱胁迫下HvAPX1、HvAPX3、HvAPX5、HvAPX7、HvAPX13表达水平上调,盐胁迫下HvAPX3、HvAPX7、HvAPX12、HvAPX13表达水平显著上调,交叉胁迫下除HvAPX10外各基因表达量显著增加.这一结果表明,大麦APX基因家族成员可能通过特异性的表达调控,协同维持H_(2)O_(2)稳态,以应对不同的非生物胁迫. 展开更多
关键词 大麦 APX基因家族 非生物胁迫 表达模式
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高效区分胸膜肺炎放线杆菌自然感染和疫苗免疫猪的ELISA检测方法构建
5
作者 李建铭 侯晋辉 +4 位作者 徐广鑫 高俊龙 史郑婷 赵睿 袁晋 《河南农业大学学报》 北大核心 2025年第6期1028-1036,共9页
【目的】构建一种能够高效区分胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)自然感染和疫苗免疫猪的检测方法,以便准确评估APP自然感染流行情况。【方法】将以低温诱导表达的可溶性蛋白APP ApxⅣ作为包被抗原,采用方阵滴定... 【目的】构建一种能够高效区分胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)自然感染和疫苗免疫猪的检测方法,以便准确评估APP自然感染流行情况。【方法】将以低温诱导表达的可溶性蛋白APP ApxⅣ作为包被抗原,采用方阵滴定法优化各反应条件,初步建立针对APP ApxⅣ的间接ELISA抗体检测方法,并对该方法的特异性、敏感性、重复性及与商品化试剂盒的符合率进行评估。【结果】抗原最适包被质量浓度为0.75 mg·L^(-1),包被条件为37℃1 h+4℃14 h;最适封闭液为质量分数2%的海藻糖,封闭条件为37℃1.5 h;血清最适稀释倍数为50倍,孵育条件为37℃1 h;酶标二抗最适稀释倍数为10000倍,孵育条件为37℃30 min;最适显色条件为25℃10 min。该方法与猪链球菌、大肠杆菌和副猪嗜血杆菌等细菌的阳性血清无交叉反应,与猪圆环2型、猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征和猪伪狂犬等病毒的阳性血清无交叉反应,与APP灭活疫苗免疫猪的阳性血清无交叉反应。APP阳性血清稀释200倍后检测结果仍为阳性,批内及批间重复性试验的变异系数分别为1.31%~6.27%和0.73%~4.05%。随机选择200份临床血清进行检测,与商品化试剂盒的整体符合率达86.50%。【结论】基于APP ApxⅣ蛋白建立的间接ELISA抗体检测方法特异灵敏,重复性好,符合率高,可以有效区分APP自然感染和疫苗免疫猪。 展开更多
关键词 胸膜肺炎放线杆菌 ApxⅣ蛋白 间接ELISA 抗体检测 自然感染 疫苗免疫
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槜李APX基因家族的克隆与等位变异分析
6
作者 李彦彪 汪骏翔 +2 位作者 袁梦婷 陆其华 刘洋 《浙江农业科学》 2025年第12期2956-2964,共9页
为鉴定分析槜李抗坏血酸过氧化物酶(ascorbate peroxidase, APX)基因家族,本研究以龙种槜李为研究材料,结合前期已取得的转录组数据,以中国李基因组序列为模板进行检索并设计引物,经过PCR、分子克隆、序列分析验证,成功分离出6个槜李AP... 为鉴定分析槜李抗坏血酸过氧化物酶(ascorbate peroxidase, APX)基因家族,本研究以龙种槜李为研究材料,结合前期已取得的转录组数据,以中国李基因组序列为模板进行检索并设计引物,经过PCR、分子克隆、序列分析验证,成功分离出6个槜李APX基因(PsAPX-1a、PsAPX-1b、PsAPX-1c、PsAPX-1d、PsAPX-1e和PsAPX-1f)。NCBI检索发现,PsAPX-1f上存在1个氨基酸缺失位点,导致其不能形成完整的目标基因。将PsAPX-1a、PsAPX-1b、PsAPX-1c、PsAPX-1d、PsAPX-1e提交至GenBank,获得登录号分别为PP277487、PP277488、PP277489、PP277490、PP277491。多序列比对发现,PsAPX-1a、PsAPX-1b、PsAPX-1c、PsAPX-1d和PsAPX-1e的相似性为98.8%~99.7%。PsAPX-1a包含79 bp的3′UTR,3个外显子和2个内含子,不含5′UTR,存在1个1 656 bp的开放读码框,编码552个氨基酸。蛋白质结构预测表明,PsAPX-1a蛋白具有APX保守结构域,与青梅、杏树、桃树等物种具有较高的同源性,该蛋白序列与槜李的抗逆与开花有关。本研究结果对探究槜李抗坏血酸代谢调控分子机制提供了参考。 展开更多
关键词 槜李 APX基因 基因克隆 序列分析
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浅谈APX500音频测试仪在广播系统指标测试中的应用
7
作者 杨松林 《西部广播电视》 2025年第6期188-191,共4页
APX500是广播电视媒体中经常使用的一种音频测量仪器,是一款功能强大而精密的仪器,能够为工作人员提供详细且直观的各项音频技术指标。本文首先介绍APX500音频测试仪的基本功能和使用方法,再结合对延迟器BD600的测试工作,浅谈APX500音... APX500是广播电视媒体中经常使用的一种音频测量仪器,是一款功能强大而精密的仪器,能够为工作人员提供详细且直观的各项音频技术指标。本文首先介绍APX500音频测试仪的基本功能和使用方法,再结合对延迟器BD600的测试工作,浅谈APX500音频测试仪在实际工作中的应用及注意事项。 展开更多
关键词 APX500音频测试仪 广播系统 测试指标
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白菜型冬油菜抗坏血酸过氧化物酶(APX)基因的克隆、表达及其活性分析 被引量：25
8
作者 曾秀存 孙万仓 +10 位作者 方彦 刘自刚 董云 孙佳 武军艳 张鹏飞 史鹏辉 孔德晶 张腾国 何丽 赵彩霞 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期1400-1408,共9页
抗坏血酸过氧化物酶(APX)是一种在逆境条件下清除细胞内氧自由基、增强植物抗逆性的关键酶。本研究根据已发表植物抗坏血酸过氧化物酶基因APX的同源保守序列设计引物,采用RT-PCR扩增超强抗寒白菜型冬油菜陇油7号的DNA,获得APX基因开放... 抗坏血酸过氧化物酶(APX)是一种在逆境条件下清除细胞内氧自由基、增强植物抗逆性的关键酶。本研究根据已发表植物抗坏血酸过氧化物酶基因APX的同源保守序列设计引物,采用RT-PCR扩增超强抗寒白菜型冬油菜陇油7号的DNA,获得APX基因开放阅读框,长度为753 bp,编码250个氨基酸残基,推导的氨基酸序列具有APX蛋白的典型特征。生物信息学分析显示,与已报道的大白菜的APX氨基酸序列同源性达99%,该酶蛋白具有高度的进化保守性,其保守序列属于植物的POD超家族,APX相对分子质量和理论等电点依次为27.7 kD和5.58;APX基因无信号肽,是一个亲水性蛋白,可推测其定位于细胞质中;二级结构预测表明陇油7号的APX是由不规则卷曲和α-螺旋组成的稳定蛋白。实时荧光定量PCR和酶活性分析显示,该基因表达和酶活性受低温胁迫诱导,表明该基因在白菜型冬油菜陇油7号适应低温胁迫过程中发挥重要作用。 展开更多
关键词 白菜型油菜 低温 APX基因克隆 表达分析 APX活性
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铅胁迫对玉米幼苗叶片光系统功能及光合作用的影响 被引量：71
9
作者 姚广 高辉远 +2 位作者 王未未 张立涛 部建雯 《生态学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期1162-1169,共8页
通过同时测定玉米叶片的叶绿素荧光快速诱导动力学曲线和对820nm光的吸收、分析叶片的气体交换过程以及叶绿体活性氧清除关键酶的活性,研究了不同浓度的铅(Pb)胁迫对玉米光系统Ⅰ(PSⅠ)、光系统Ⅱ(PSⅡ)的光化学活性和光合作用的影响,... 通过同时测定玉米叶片的叶绿素荧光快速诱导动力学曲线和对820nm光的吸收、分析叶片的气体交换过程以及叶绿体活性氧清除关键酶的活性,研究了不同浓度的铅(Pb)胁迫对玉米光系统Ⅰ(PSⅠ)、光系统Ⅱ(PSⅡ)的光化学活性和光合作用的影响,并分析了Pb胁迫下两个光系统的相互关系。结果表明:铅胁迫显著抑制了玉米地上部分和地下部分的生长、降低了叶片光合色素含量、并通过非气孔因素限制了光合作用、导致过剩激发能的增加;铅胁迫显著抑制了超氧化物歧化酶(SOD)和抗坏血酸过氧化物酶(APX)的活性、伤害了PSII反应中心、PSII的受体侧和供体侧(放氧复合体)以及PSI光化学活性。 展开更多
关键词 铅胁迫 PSII PSI 放氧复合体(OEC) 820nm光吸收 SOD和APX
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砀山酥梨石细胞发育过程中木质素代谢关键酶POD类型的分析 被引量：15
10
作者 于娟娟 李玲 +3 位作者 金青 蔡永萍 林毅 吕芮宏 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期1037-1044,共8页
以不同发育时期的砀山酥梨为材料,通过组织化学定位、过氧化物酶(POD)活性及同工酶谱技术,研究木质素代谢关键酶POD不同类型,即谷胱甘肽POD(GSH-PX)、愈创木酚POD(PPOD)、抗坏血酸POD(APX)活性变化与石细胞中木质素代谢的关系,探讨梨果... 以不同发育时期的砀山酥梨为材料,通过组织化学定位、过氧化物酶(POD)活性及同工酶谱技术,研究木质素代谢关键酶POD不同类型,即谷胱甘肽POD(GSH-PX)、愈创木酚POD(PPOD)、抗坏血酸POD(APX)活性变化与石细胞中木质素代谢的关系,探讨梨果实石细胞发育过程中木质素代谢关键酶POD的类型。结果表明:(1)在砀山酥梨果实发育过程中,位于石细胞细胞壁及邻近区域的POD参与木质素在石细胞细胞壁上的沉积;(2)花后15～123d,POD同工酶谱带主要分为3组酶活性区,其中PODⅠ的Rf值为0.13～0.23,PODⅡ的Rf值为0.44,PODⅢ的Rf值为0.63～0.96;(3)PPOD是砀山酥梨果实发育过程中木质素代谢关键酶POD的主要类型,参与木质素的合成,促进石细胞团的发育。 展开更多
关键词 梨 GSH-PX PPOD APX 石细胞 木质素
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百合APX基因的克隆及转LlAPX提高拟南芥耐盐性 被引量：13
11
作者 陈莉 辛海波 +3 位作者 孙向荣 尹慧 李晓昕 义鸣放 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1983-1990,共8页
从铁炮百合‘白天堂’（Lilium longiforum ‘White Heaven’）组培苗叶片中克隆得到一个抗坏血酸过氧化物酶基因（APX）的cDNA序列,全长1074bp,推断其编码251个氨基酸。系统进化树分析表明APX在进化过程中保守性很高。通过构建过表达载... 从铁炮百合‘白天堂’（Lilium longiforum ‘White Heaven’）组培苗叶片中克隆得到一个抗坏血酸过氧化物酶基因（APX）的cDNA序列,全长1074bp,推断其编码251个氨基酸。系统进化树分析表明APX在进化过程中保守性很高。通过构建过表达载体,转化拟南芥,其APX酶活性提高了4.7-7.8倍,AsA含量提高了1.5~2.3倍,其种子耐盐性提高。 展开更多
关键词 铁炮百合 APX 克隆 耐盐性
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蝴蝶兰抗坏血酸过氧化物酶基因克隆及其表达研究 被引量：13
12
作者 许传俊 孙叙卓 +4 位作者 李玲 茹志伟 曾碧玉 刘育梅 黄珺梅 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期769-776,共8页
从蝴蝶兰(Phalaenopsis)中克隆获得了抗坏血酸过氧化物酶基因(APX)同源序列,命名为PhAPX(GenBank登录号为:FJ161977)。PhAPX cDNA全长为1320bp,完整的编码框为747bp,编码249个氨基酸。生物信息学分析结果表明,PhAPX属于过氧化物酶家族Cl... 从蝴蝶兰(Phalaenopsis)中克隆获得了抗坏血酸过氧化物酶基因(APX)同源序列,命名为PhAPX(GenBank登录号为:FJ161977)。PhAPX cDNA全长为1320bp,完整的编码框为747bp,编码249个氨基酸。生物信息学分析结果表明,PhAPX属于过氧化物酶家族ClassⅠ的成员,PhAPX蛋白可能是胞质型APX,与其他植物的APX相似性较高。real-time PCR分析表明PhAPX是一个广谱表达的基因,在蝴蝶兰根、茎、叶、花等各个部位都有表达。机械伤害和盐处理都可以诱导PhAPX表达上调,表明PhAPX在胁迫防御中起作用。 展开更多
关键词 蝴蝶兰 APX 克隆 表达 REAL-TIME PCR
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茶树鲜叶抗坏血酸过氧化物酶活性的变化规律及测定方法 被引量：40
13
作者 孙云 江春柳 +2 位作者 赖钟雄 邵巍 王秀英 《热带作物学报》 CSCD 2008年第5期562-566,共5页
探讨茶树鲜叶抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性的测定条件,分析不同茶树品种以及茶树鲜叶不同叶位APX活性的变化。结果表明:聚乙烯聚吡咯烷酮(PVPP)加入量约为鲜叶重的1.5倍,酶提取液pH为7.8,反应液pH为7.0,抗坏血酸(AsA)浓度为0.50mmol/L... 探讨茶树鲜叶抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性的测定条件,分析不同茶树品种以及茶树鲜叶不同叶位APX活性的变化。结果表明:聚乙烯聚吡咯烷酮(PVPP)加入量约为鲜叶重的1.5倍,酶提取液pH为7.8,反应液pH为7.0,抗坏血酸(AsA)浓度为0.50mmol/L时茶树鲜叶APX活性最高;茶树鲜叶APX活性随冷藏时间的延长呈下降趋势;福建7个主要茶树品种以福鼎大白茶的APX活性最高,铁观音的APX活性最低;茶树鲜叶不同叶位APX活性变化趋势为:芽>第一叶>第二叶>第三叶>老叶>嫩茎。 展开更多
关键词 茶树 鲜叶 抗坏血酸过氧化物酶(APX) 酶活性 测定方法
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低温胁迫下钼对冬小麦抗氧化酶活性的影响 被引量：66
14
作者 孙学成 谭启玲 +2 位作者 胡承孝 甘巧巧 易长城 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期952-959,共8页
目的揭示钼提高冬小麦抗寒力的生理机制。方法采用盆栽试验的方法,以冬小麦钼高效品种97003和钼低效品种97014为材料,研究了在低温胁迫下施钼对冬小麦叶片抗氧化酶活性影响。结果低温处理2、4和6d时施钼均显著提高了超氧化物歧化酶(SOD... 目的揭示钼提高冬小麦抗寒力的生理机制。方法采用盆栽试验的方法,以冬小麦钼高效品种97003和钼低效品种97014为材料,研究了在低温胁迫下施钼对冬小麦叶片抗氧化酶活性影响。结果低温处理2、4和6d时施钼均显著提高了超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)和抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性,显著降低了2个冬小麦品种叶片中超氧阴离子产生速率;施钼后,随着低温胁迫时间的延长,2个冬小麦品种叶片中4种抗氧化酶活性均先升高而后呈下降或突降趋势,说明施钼能使冬小麦通过正常的低温锻炼过程,有利于植株在经受更长时间低温胁迫时维持较高的抗寒力;钼对冬小麦钼高、低效品种叶片中抗氧化酶活性的影响存在基因型差异,与钼高效品种相比,钼低效品种缺钼处理叶片SOD、CAT、POD和APX等抗氧化酶活性下降幅度更大,活性氧自由基积累速率更大,这可能是钼低效品种在缺钼条件下更易受到低温伤害的原因之一。结论钼通过调控活性氧代谢过程来影响冬小麦的抗寒力。 展开更多
关键词 钼 冬小麦 低温胁迫 超氧化物歧化酶(SOD) 过氧化氢酶(CAT) 过氧化物酶(POD) 抗坏血酸过氧化物酶(APX)
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NaCl和等渗PEG对荞麦SOD及APX活性的影响 被引量：13
15
作者 战伟龑 张学杰 +2 位作者 杨德翠 马德源 杨洪兵 《江苏农业科学》 CSCD 北大核心 2009年第5期101-102,共2页
采用不同浓度NaC l和等渗PEG对2个荞麦品种进行处理,低浓度NaC l能明显促进2个荞麦品种根和叶的SOD及APX活性,等渗PEG处理时增加幅度较小;高盐度处理时苦荞根和叶的SOD及APX活性仍保持较高的水平,甜荞正相反,说明苦荞的耐胁迫性大于甜荞。
关键词 荞麦 NACL处理 等渗PEG SOD活性 APX活性
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植物抗坏血酸过氧化物酶的表达调控以及对非生物胁迫的耐受作用 被引量：68
16
作者 李泽琴 李静晓 张根发 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期45-54,共10页
抗坏血酸过氧化物酶(Ascorbate peroxidase,APX)属于I型血红素过氧化物酶,它催化H2O2依赖的L-抗坏血酸氧化作用,对抗坏血酸表现出高度的专一性。植物APX基因家族由4个亚家族组成,分别为细胞质、叶绿体、线粒体和过氧化物酶体基因亚家族... 抗坏血酸过氧化物酶(Ascorbate peroxidase,APX)属于I型血红素过氧化物酶,它催化H2O2依赖的L-抗坏血酸氧化作用,对抗坏血酸表现出高度的专一性。植物APX基因家族由4个亚家族组成,分别为细胞质、叶绿体、线粒体和过氧化物酶体基因亚家族,每个亚家族中又含有不同的APX同工酶。作为植物抗坏血酸-谷胱甘肽循环中的一个关键组分,APX在细胞H2O2代谢过程中起着至关重要的作用。研究表明植物APX是氧化还原信号系统中调节细胞水平H2O2非常重要的一种酶,APX同工酶的表达机制非常复杂,细胞质APX受多种信号调节表达,两种叶绿体APX通过选择性剪接进行组织特异性调节。通过调控产生的APX可调节细胞中的氧化还原信号,进而提高植物对非生物胁迫的耐受性。文章综述了植物APX的催化机制、表达调控机理以及响应植物非生物逆境胁迫的重要作用。 展开更多
关键词 抗坏血酸过氧化物酶(APX) 环境胁迫 活性氧(ROS) 基因表达调控 分子机理
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琯溪蜜柚汁胞在发育与粒化过程中APX活性变化及同工酶分析 被引量：7
17
作者 钟凤林 郭志雄 +2 位作者 李开拓 王江波 潘东明 《热带亚热带植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期27-31,共5页
对不同发育时期的琯溪蜜柚(Citrus grandis‘Guanximiyou’)汁胞进行APX活性测定及同工酶分析。结果表明,随着汁胞的发育,APX活性增大;而柚子衰老腐烂时,APX活性迅速降低。APX同工酶随着汁胞发育而发生变化,花后150d的APX同工酶增加了1... 对不同发育时期的琯溪蜜柚(Citrus grandis‘Guanximiyou’)汁胞进行APX活性测定及同工酶分析。结果表明,随着汁胞的发育,APX活性增大;而柚子衰老腐烂时,APX活性迅速降低。APX同工酶随着汁胞发育而发生变化,花后150d的APX同工酶增加了1个组分(迁移率0.66),且随着汁胞的成熟,其表达量增加。花后230d时柚子开始衰老腐烂,花后242d已难以看到大部分APX同工酶酶谱。粒化汁胞的APX活性比正常汁胞大,同工酶酶谱亮度和清晰度也大,推测溪蜜柚汁胞在粒化过程中APX可清除活性氧自由基,抵抗氧化损伤。 展开更多
关键词 蜜柚 汁胞 发育 粒化 APX 同工酶
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盐地碱蓬(Suaedasalsa)APX基因的克隆及盐胁迫下的表达 被引量：28
18
作者 马长乐 王萍萍 +2 位作者 曹子谊 赵彦修 张慧 《植物生理与分子生物学学报》 CAS CSCD 2002年第4期261-266,共6页
从盐地碱蓬 (Suaedasalsa)中克隆了抗坏血酸过氧化物酶 (ascorbateperoxidase ,APX)的全长cDNA(SsAPX) ,基因注册号为AY0 34 893。SsAPX全长 1.1kb ,推导的氨基酸序列长为 2 5 0个氨基酸残基。BLAST同源性分析表明 ,该cDNA与已报告的菠... 从盐地碱蓬 (Suaedasalsa)中克隆了抗坏血酸过氧化物酶 (ascorbateperoxidase ,APX)的全长cDNA(SsAPX) ,基因注册号为AY0 34 893。SsAPX全长 1.1kb ,推导的氨基酸序列长为 2 5 0个氨基酸残基。BLAST同源性分析表明 ,该cDNA与已报告的菠菜(Spinaciaoleracea)细胞质抗坏血酸过氧化物酶基因同源性最高 ,在核苷酸水平上一致性为 87% ,在氨基酸水平上一致性为 89%。Southern杂交表明APX基因在盐地碱蓬基因组中只有 1个拷贝。盐 (NaCl 40 0mmol/L)处理不同时间后的Northern杂交分析表明盐地碱蓬中SsAPX基因在盐胁迫下表达量增加 ,而且在盐胁迫下抗坏血酸过氧化物酶的活性也显著地增加 ,说明该基因受盐诱导。 展开更多
关键词 盐地碱蓬 CDNA APX 活性氧 盐胁迫
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猪传染性胸膜肺炎放线杆菌ApxⅣ毒素基因的克隆与表达 被引量：14
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作者 王方昆 王一成 +1 位作者 袁秀芳 徐丽华 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期657-660,共4页
以猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(APP)血清2型标准菌株基因组DNA为模板,用PCR方法扩增ApxⅣ毒素基因特异片段1.5 kb左右,将PCR产物纯化后与pMD18-T连接并测序,结果该片段的碱基序列与GenBank中标准株序列的同源性为98%。随后将该片段亚克隆... 以猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(APP)血清2型标准菌株基因组DNA为模板,用PCR方法扩增ApxⅣ毒素基因特异片段1.5 kb左右,将PCR产物纯化后与pMD18-T连接并测序,结果该片段的碱基序列与GenBank中标准株序列的同源性为98%。随后将该片段亚克隆到原核表达载体pET-28a(+)的多克隆位点,经鉴定后得到重组质粒pET-ApxⅣ,将此重组质粒转化到受体菌BL21-DL3中,并用诱导剂乳糖进行诱导表达,5 h后表达达到高峰。经12%SDS-PAGE电泳检测,表达得到的融合蛋白约为61 000。经Western blotting分析,表达蛋白能与APP阳性血清发生特异性反应,而与阴性血清不反应。 展开更多
关键词 猪胸膜肺炎放线杆菌 ApxⅣ 克隆 表达
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猪胸膜肺炎放线杆菌ApxIVA基因特异片段的克隆和表达 被引量：7
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作者 彭永刚 刘思国 +3 位作者 王牟平 宫强 王春来 沈国顺 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期103-106,共4页
以猪胸膜肺炎放线杆菌的血清7型国内分离株25＿4株基因组DNA为模板,PCR方法扩增apxIVA特异片段,PCR产物经纯化后与载体PMD18＿T进行连接、转化,经酶切及序列分析鉴定后,亚克隆到原核表达载体pGEX＿6P＿1中,构建成重组表达质粒pGEX＿apxI... 以猪胸膜肺炎放线杆菌的血清7型国内分离株25＿4株基因组DNA为模板,PCR方法扩增apxIVA特异片段,PCR产物经纯化后与载体PMD18＿T进行连接、转化,经酶切及序列分析鉴定后,亚克隆到原核表达载体pGEX＿6P＿1中,构建成重组表达质粒pGEX＿apxIVA,转入到大肠杆菌BL21中,以IPTG进行诱导,进行SDS＿PAGE电泳。结果表明,25＿4株apxIVAgene与基因库中标准7型apxIVAgene同源性达97%,所表达的融合蛋白相对分子量为44kD,与实际预测相符。apxIVA毒素特异片段的成功表达为猪胸膜肺炎放线杆菌病的诊断打下基础。 展开更多
关键词 猪胸膜肺炎放线杆菌 分泌蛋白 载体 克隆 表达 apxⅣA
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