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谷子APX基因家族的全基因组鉴定与表达分析
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作者 魏萌涵 解慧芳 +2 位作者 赵二源 邢璐 刘金荣 《分子植物育种》 北大核心 2025年第16期5298-5306,共9页
本研究利用生物信息学方法,从谷子(Setaria italica)基因组数据库中鉴定出9个SiAPX基因家族成员。系统发育分析表明,SiAPX蛋白可分为3个亚家族,每个亚家族的成员同源性较高。SiAPX家族基因分布在6条染色体上。启动子顺式元件分析表明,... 本研究利用生物信息学方法,从谷子(Setaria italica)基因组数据库中鉴定出9个SiAPX基因家族成员。系统发育分析表明,SiAPX蛋白可分为3个亚家族,每个亚家族的成员同源性较高。SiAPX家族基因分布在6条染色体上。启动子顺式元件分析表明,大部分谷子SiAPX基因含有多种与植物激素和非生物胁迫相关的顺式元件。蛋白二级结构主要为无规卷曲和α-螺旋。谷子APX家族基因在不同组织中的表达丰度不同,具有相应的组织特异性。RT-qPCR表明,SiAPX2和SiAPX9这两个基因受干旱胁迫和高氮诱导,表现显著上调表达。本研究为谷子APX基因家族的系统发育关系和功能研究奠定基础。 展开更多
关键词 谷子 抗坏血酸过氧化物酶(apx) 生物信息学 干旱
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大麦APX基因家族的全基因组鉴定及耐逆性分析
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作者 何心钰 梁旋 +3 位作者 郑瑞均 方云霞 胡旭 张晓勤 《杭州师范大学学报(自然科学版)》 2025年第3期288-296,共9页
为探究大麦抗坏血酸过氧化物酶(ascorbate peroxidase,APX)基因对非生物胁迫的响应机制,运用生物信息学方法对大麦APX(HvAPX)基因家族成员进行全基因组鉴定和分析,并利用qRT-PCR方法检测高温、低温、干旱、盐和干旱-盐交叉胁迫下大麦幼... 为探究大麦抗坏血酸过氧化物酶(ascorbate peroxidase,APX)基因对非生物胁迫的响应机制,运用生物信息学方法对大麦APX(HvAPX)基因家族成员进行全基因组鉴定和分析,并利用qRT-PCR方法检测高温、低温、干旱、盐和干旱-盐交叉胁迫下大麦幼苗中APX基因的表达量.从大麦全基因组中共鉴定出13个HvAPX基因,亚细胞定位预测显示主要定位于细胞质和叶绿体中.进化分析发现,亲缘关系近的家族成员其保守基序、基因结构更为相似.荧光定量检测结果显示,低温胁迫下HvAPX3、HvAPX12表达水平显著上调,高温胁迫下HvAPX10表达水平上调,干旱胁迫下HvAPX1、HvAPX3、HvAPX5、HvAPX7、HvAPX13表达水平上调,盐胁迫下HvAPX3、HvAPX7、HvAPX12、HvAPX13表达水平显著上调,交叉胁迫下除HvAPX10外各基因表达量显著增加.这一结果表明,大麦APX基因家族成员可能通过特异性的表达调控,协同维持H_(2)O_(2)稳态,以应对不同的非生物胁迫. 展开更多
关键词 大麦 apx基因家族 非生物胁迫 表达模式
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APX-EM算法的带误差加速
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作者 邓银 唐亚勇 《四川大学学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第1期52-56,共5页
因子分析模型在经济学等领域有着广泛的应用.在应用因子分析模型时需要对模型中的参数进行极大似然估计,EM(Expectation Maximization)算法就是其中一种常用的估计算法.为了克服EM算法收敛速度慢的问题,研究者提出了参数扩展EM算法和基... 因子分析模型在经济学等领域有着广泛的应用.在应用因子分析模型时需要对模型中的参数进行极大似然估计,EM(Expectation Maximization)算法就是其中一种常用的估计算法.为了克服EM算法收敛速度慢的问题,研究者提出了参数扩展EM算法和基于线性预处理和非线性共轭梯度的APX-EM(Accelerated Parameter Expanded EM)算法.APX-EM算法是一种混合加速算法,比EM算法的收敛速度快,更稳定.但是,因APX-EM算法本质上只是EM算法的一种修正,其内在的计算误差可能降低算法的稳定性.本文基于强Wolfe条件提出了一种带误差的APX-EM加速算法,给出了算法的全局收敛性.应用于因子分析模型的数值模拟表明,算法拥有与APX-EM算法同样快的收敛速度,但更稳定. 展开更多
关键词 EM算法 apx-EM算法 因子分析模型 强Wolfe条件
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浅谈APX500音频测试仪在广播系统指标测试中的应用
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作者 杨松林 《西部广播电视》 2025年第6期188-191,共4页
APX500是广播电视媒体中经常使用的一种音频测量仪器,是一款功能强大而精密的仪器,能够为工作人员提供详细且直观的各项音频技术指标。本文首先介绍APX500音频测试仪的基本功能和使用方法,再结合对延迟器BD600的测试工作,浅谈APX500音... APX500是广播电视媒体中经常使用的一种音频测量仪器,是一款功能强大而精密的仪器,能够为工作人员提供详细且直观的各项音频技术指标。本文首先介绍APX500音频测试仪的基本功能和使用方法,再结合对延迟器BD600的测试工作,浅谈APX500音频测试仪在实际工作中的应用及注意事项。 展开更多
关键词 apx500音频测试仪 广播系统 测试指标
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猪传染性胸膜肺炎疫苗抗原ApxⅡ在谷氨酸棒杆菌中的表达及发酵条件优化 被引量:3
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作者 程世前 康竞艺 +3 位作者 陈萌轩 刘秀霞 杨艳坤 白仲虎 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2024年第12期2310-2316,共7页
猪胸膜肺炎放线杆菌是一种高度传染性、致死性呼吸道疾病,已造成养猪业严重损失。细胞毒素ApxⅡ是猪胸膜肺炎PCP(Porcine contagious pleuropneumonia)的主要抗原之一,可以作为猪胸膜肺炎疫苗的有效成分。谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium ... 猪胸膜肺炎放线杆菌是一种高度传染性、致死性呼吸道疾病,已造成养猪业严重损失。细胞毒素ApxⅡ是猪胸膜肺炎PCP(Porcine contagious pleuropneumonia)的主要抗原之一,可以作为猪胸膜肺炎疫苗的有效成分。谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)具有无内毒素和较发达分泌系统的优点,是非常有潜力的重组细菌疫苗蛋白质表达系统。利用C.glutamicum表达系统生产ApxⅡ,实现其高效稳定表达,可为疫苗生产提供技术基础。前期研究已构建ApxⅡ分泌表达菌株,为进一步提高ApxⅡ的表达产量,通过在24孔板发酵优化,得到最优的培养基为CGXⅡ-YT,最优的表达温度为30℃,IPTG浓度为1.0 mmol/L,加入IPTG前培养6 h,发酵培养时间为24 h。进一步在摇瓶中放大发酵培养结果与24孔板发酵培养结果相同。最后在容积为5 L发酵罐中对ApxⅡ进行表达,与使用基础发酵培养基发酵相比,使用CGXⅡ-YT发酵培养基,且在优化后的发酵条件下ApxⅡ表达量明显提高,达到了114.60 mg/L。本研究实现了ApxⅡ在谷氨酸棒杆菌中的分泌表达,为其进一步扩大化生产提供了基础。 展开更多
关键词 细胞毒素apx 谷氨酸棒杆菌 表达
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高温胁迫下‘德钦’紫花苜蓿APX活性和转录水平分析 被引量:8
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作者 赵雁 车伟光 毕玉芬 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期1611-1615,共5页
为揭示‘德钦’紫花苜蓿特异性耐热机理,本研究以热敏型低秋眠级‘阿尔冈金’和耐热型高秋眠级‘赛迪10’为对照,分析比较35℃/30℃(昼温/夜温)高温胁迫下,APX活性、APX同工酶及Cyt APX m RNA相对表达量在‘德钦’叶片中的变化。研究结... 为揭示‘德钦’紫花苜蓿特异性耐热机理,本研究以热敏型低秋眠级‘阿尔冈金’和耐热型高秋眠级‘赛迪10’为对照,分析比较35℃/30℃(昼温/夜温)高温胁迫下,APX活性、APX同工酶及Cyt APX m RNA相对表达量在‘德钦’叶片中的变化。研究结果表明,长期高温胁迫下,耐热型紫花苜蓿品种通过增强APX酶活性、增加APX同工酶表达和新谱带(APX3,Rf=0.54)的表达来提高清除H2O2的能力、抵抗高温胁迫,同时耐热型品种的Cyt APX m RNA也大幅增加。‘德钦’紫花苜蓿的特异耐热性与其高温胁迫末期(35 d)APX活性大幅增加(达25.40%)、APX3(Rf=0.54)谱带的表达以及Cyt APX m RNA转录量大幅增加(达66.67%)有关。APX3和Cyt APX可能在‘德钦’紫花苜蓿适应长期高温胁迫、抗氧化保护方面起主要作用。 展开更多
关键词 '德钦’紫花苜蓿 高温胁迫 apx活性 apx同工酶 apx转录水平
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白菜型冬油菜抗坏血酸过氧化物酶(APX)基因的克隆、表达及其活性分析 被引量:25
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作者 曾秀存 孙万仓 +10 位作者 方彦 刘自刚 董云 孙佳 武军艳 张鹏飞 史鹏辉 孔德晶 张腾国 何丽 赵彩霞 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期1400-1408,共9页
抗坏血酸过氧化物酶(APX)是一种在逆境条件下清除细胞内氧自由基、增强植物抗逆性的关键酶。本研究根据已发表植物抗坏血酸过氧化物酶基因APX的同源保守序列设计引物,采用RT-PCR扩增超强抗寒白菜型冬油菜陇油7号的DNA,获得APX基因开放... 抗坏血酸过氧化物酶(APX)是一种在逆境条件下清除细胞内氧自由基、增强植物抗逆性的关键酶。本研究根据已发表植物抗坏血酸过氧化物酶基因APX的同源保守序列设计引物,采用RT-PCR扩增超强抗寒白菜型冬油菜陇油7号的DNA,获得APX基因开放阅读框,长度为753 bp,编码250个氨基酸残基,推导的氨基酸序列具有APX蛋白的典型特征。生物信息学分析显示,与已报道的大白菜的APX氨基酸序列同源性达99%,该酶蛋白具有高度的进化保守性,其保守序列属于植物的POD超家族,APX相对分子质量和理论等电点依次为27.7 kD和5.58;APX基因无信号肽,是一个亲水性蛋白,可推测其定位于细胞质中;二级结构预测表明陇油7号的APX是由不规则卷曲和α-螺旋组成的稳定蛋白。实时荧光定量PCR和酶活性分析显示,该基因表达和酶活性受低温胁迫诱导,表明该基因在白菜型冬油菜陇油7号适应低温胁迫过程中发挥重要作用。 展开更多
关键词 白菜型油菜 低温 apx基因克隆 表达分析 apx活性
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APX-115 free base对H9c2细胞抵抗高浓度葡萄糖的保护效果
8
作者 卫小娟 李树德 +3 位作者 李治刚 李青玲 何水旺 李思熳 《包头医学院学报》 CAS 2024年第12期8-12,23,共6页
目的:了解Nox抑制剂APX-115 free base对H9c2细胞抵抗高浓度葡萄糖的保护效果。方法:通过CCK8法检测H9c2细胞在不同浓度APX-115 free base预处理后的增殖活力;Western blot法和免疫荧光法检测Nox4蛋白的表达;并观察细胞形态的变化。结果... 目的:了解Nox抑制剂APX-115 free base对H9c2细胞抵抗高浓度葡萄糖的保护效果。方法:通过CCK8法检测H9c2细胞在不同浓度APX-115 free base预处理后的增殖活力;Western blot法和免疫荧光法检测Nox4蛋白的表达;并观察细胞形态的变化。结果:与Model组相比,APX-115 free base浓度为8μmol/L时,细胞增殖活力下降,其他浓度时,细胞增殖活力上升;APX-115 free base各处理组的Nox4蛋白表达均下调;APX-115 free base 5μmol/L处理组的细胞形态恢复梭形,细胞分布逐渐均匀,细胞间空隙减少,细胞数量基本恢复到正常水平。结论:5μmol/L时的APX-115 free base对高糖诱导下H9c2细胞的保护效果最佳。 展开更多
关键词 apx-115 H9C2细胞 保护效果 Nox抑制剂 高糖诱导
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百合APX基因的克隆及转LlAPX提高拟南芥耐盐性 被引量:13
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作者 陈莉 辛海波 +3 位作者 孙向荣 尹慧 李晓昕 义鸣放 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1983-1990,共8页
从铁炮百合‘白天堂’(Lilium longiforum ‘White Heaven’)组培苗叶片中克隆得到一个抗坏血酸过氧化物酶基因(APX)的cDNA序列,全长1074bp,推断其编码251个氨基酸。系统进化树分析表明APX在进化过程中保守性很高。通过构建过表达载... 从铁炮百合‘白天堂’(Lilium longiforum ‘White Heaven’)组培苗叶片中克隆得到一个抗坏血酸过氧化物酶基因(APX)的cDNA序列,全长1074bp,推断其编码251个氨基酸。系统进化树分析表明APX在进化过程中保守性很高。通过构建过表达载体,转化拟南芥,其APX酶活性提高了4.7-7.8倍,AsA含量提高了1.5~2.3倍,其种子耐盐性提高。 展开更多
关键词 铁炮百合 apx 克隆 耐盐性
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琯溪蜜柚汁胞在发育与粒化过程中APX活性变化及同工酶分析 被引量:7
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作者 钟凤林 郭志雄 +2 位作者 李开拓 王江波 潘东明 《热带亚热带植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期27-31,共5页
对不同发育时期的琯溪蜜柚(Citrus grandis‘Guanximiyou’)汁胞进行APX活性测定及同工酶分析。结果表明,随着汁胞的发育,APX活性增大;而柚子衰老腐烂时,APX活性迅速降低。APX同工酶随着汁胞发育而发生变化,花后150d的APX同工酶增加了1... 对不同发育时期的琯溪蜜柚(Citrus grandis‘Guanximiyou’)汁胞进行APX活性测定及同工酶分析。结果表明,随着汁胞的发育,APX活性增大;而柚子衰老腐烂时,APX活性迅速降低。APX同工酶随着汁胞发育而发生变化,花后150d的APX同工酶增加了1个组分(迁移率0.66),且随着汁胞的成熟,其表达量增加。花后230d时柚子开始衰老腐烂,花后242d已难以看到大部分APX同工酶酶谱。粒化汁胞的APX活性比正常汁胞大,同工酶酶谱亮度和清晰度也大,推测溪蜜柚汁胞在粒化过程中APX可清除活性氧自由基,抵抗氧化损伤。 展开更多
关键词 蜜柚 汁胞 发育 粒化 apx 同工酶
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盐地碱蓬(Suaedasalsa)APX基因的克隆及盐胁迫下的表达 被引量:28
11
作者 马长乐 王萍萍 +2 位作者 曹子谊 赵彦修 张慧 《植物生理与分子生物学学报》 CAS CSCD 2002年第4期261-266,共6页
从盐地碱蓬 (Suaedasalsa)中克隆了抗坏血酸过氧化物酶 (ascorbateperoxidase ,APX)的全长cDNA(SsAPX) ,基因注册号为AY0 34 893。SsAPX全长 1.1kb ,推导的氨基酸序列长为 2 5 0个氨基酸残基。BLAST同源性分析表明 ,该cDNA与已报告的菠... 从盐地碱蓬 (Suaedasalsa)中克隆了抗坏血酸过氧化物酶 (ascorbateperoxidase ,APX)的全长cDNA(SsAPX) ,基因注册号为AY0 34 893。SsAPX全长 1.1kb ,推导的氨基酸序列长为 2 5 0个氨基酸残基。BLAST同源性分析表明 ,该cDNA与已报告的菠菜(Spinaciaoleracea)细胞质抗坏血酸过氧化物酶基因同源性最高 ,在核苷酸水平上一致性为 87% ,在氨基酸水平上一致性为 89%。Southern杂交表明APX基因在盐地碱蓬基因组中只有 1个拷贝。盐 (NaCl 40 0mmol/L)处理不同时间后的Northern杂交分析表明盐地碱蓬中SsAPX基因在盐胁迫下表达量增加 ,而且在盐胁迫下抗坏血酸过氧化物酶的活性也显著地增加 ,说明该基因受盐诱导。 展开更多
关键词 盐地碱蓬 CDNA apx 活性氧 盐胁迫
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胸膜肺炎放线杆菌ApxII毒素结构基因的原核表达以及重组蛋白的免疫原性分析 被引量:7
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作者 王春来 刘思国 +3 位作者 王牟平 彭永刚 宫强 孔宪刚 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期63-66,共4页
猪传染性胸膜肺炎(Porcine infectious pleuropneumonia)是由胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)引起的猪的一种呼吸道疾病。本实验以APP血清7型的一株现地分离株L25-4株为研究对象,对其分泌的ApxⅡ毒素的结构基因... 猪传染性胸膜肺炎(Porcine infectious pleuropneumonia)是由胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)引起的猪的一种呼吸道疾病。本实验以APP血清7型的一株现地分离株L25-4株为研究对象,对其分泌的ApxⅡ毒素的结构基因apxⅡA进行了全基因克隆和测序,并利用原核表达载体pGEX-6P-1在E.coli中进行了原核表达。表达产物以包涵体形式存在,包涵体蛋白经过洗涤后作为抗原用于Western-blotting免疫印迹实验,结果表明重组的ApxⅡA蛋白具有良好的免疫原性。 展开更多
关键词 胸膜肺炎放线杆菌 apxⅡ毒素 原核表达 免疫原性
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龙眼胚性愈伤组织维生素C过氧化物酶基因(apx)及NADH脱氢酶基因(nad2)部分序列的克隆 被引量:8
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作者 王凤华 赖钟雄 +1 位作者 郑金贵 吕柳新 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期45-48,共4页
 采用PCR技术从龙眼胚性愈伤组织中扩增出维生素C过氧化物酶基因 (apx)的部分cDNA序列longan1及NADH脱氢酶基因(nad2)的部分cDNA序列longan31,其中longan31是首次从体胚中克隆到的NADH脱氢酶基因(nad2).杂交结果显示,longan1与胚性愈...  采用PCR技术从龙眼胚性愈伤组织中扩增出维生素C过氧化物酶基因 (apx)的部分cDNA序列longan1及NADH脱氢酶基因(nad2)的部分cDNA序列longan31,其中longan31是首次从体胚中克隆到的NADH脱氢酶基因(nad2).杂交结果显示,longan1与胚性愈伤组织和球形胚的RNA具有明显杂交信号,说明longan1在胚性愈伤组织和球形胚阶段特异表达. 图 3参 展开更多
关键词 龙眼 体细胞胚胎发生 apx nad2
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NaCl和等渗PEG对荞麦SOD及APX活性的影响 被引量:13
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作者 战伟龑 张学杰 +2 位作者 杨德翠 马德源 杨洪兵 《江苏农业科学》 CSCD 北大核心 2009年第5期101-102,共2页
采用不同浓度NaC l和等渗PEG对2个荞麦品种进行处理,低浓度NaC l能明显促进2个荞麦品种根和叶的SOD及APX活性,等渗PEG处理时增加幅度较小;高盐度处理时苦荞根和叶的SOD及APX活性仍保持较高的水平,甜荞正相反,说明苦荞的耐胁迫性大于甜荞。
关键词 荞麦 NACL处理 等渗PEG SOD活性 apx活性
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猪传染性胸膜肺炎放线杆菌ApxⅣ毒素基因的克隆与表达 被引量:14
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作者 王方昆 王一成 +1 位作者 袁秀芳 徐丽华 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期657-660,共4页
以猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(APP)血清2型标准菌株基因组DNA为模板,用PCR方法扩增ApxⅣ毒素基因特异片段1.5 kb左右,将PCR产物纯化后与pMD18-T连接并测序,结果该片段的碱基序列与GenBank中标准株序列的同源性为98%。随后将该片段亚克隆... 以猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(APP)血清2型标准菌株基因组DNA为模板,用PCR方法扩增ApxⅣ毒素基因特异片段1.5 kb左右,将PCR产物纯化后与pMD18-T连接并测序,结果该片段的碱基序列与GenBank中标准株序列的同源性为98%。随后将该片段亚克隆到原核表达载体pET-28a(+)的多克隆位点,经鉴定后得到重组质粒pET-ApxⅣ,将此重组质粒转化到受体菌BL21-DL3中,并用诱导剂乳糖进行诱导表达,5 h后表达达到高峰。经12%SDS-PAGE电泳检测,表达得到的融合蛋白约为61 000。经Western blotting分析,表达蛋白能与APP阳性血清发生特异性反应,而与阴性血清不反应。 展开更多
关键词 猪胸膜肺炎放线杆菌 apx 克隆 表达
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猪传染性胸膜肺炎放线杆菌毒素apxⅢA基因的克隆和表达 被引量:8
16
作者 邵美丽 刘思国 +4 位作者 王春来 郭洋 张秀华 郭设平 佟恒敏 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期139-141,共3页
以猪传染性胸膜肺炎放线杆菌血清2型参考株基因组DNA为模板,PCR方法扩增出apxⅢA基因3.1kb的片段,扩增产物克隆于pMD18-T中,重组质粒经酶切鉴定后进行核苷酸序列测定,并与GenBank中不同血清型胸膜肺炎放线杆菌apxⅢA基因进行比较,结果... 以猪传染性胸膜肺炎放线杆菌血清2型参考株基因组DNA为模板,PCR方法扩增出apxⅢA基因3.1kb的片段,扩增产物克隆于pMD18-T中,重组质粒经酶切鉴定后进行核苷酸序列测定,并与GenBank中不同血清型胸膜肺炎放线杆菌apxⅢA基因进行比较,结果显示核苷酸同源性均在96%以上。将该基因片段亚克隆到原核表达载体pGEX-6P-1的BamHⅠ/SalⅠ位点,成功构建了重组表达载体pGEX-apxⅢA,转化大肠杆菌BL-21(DE3)中并获得表达。SDS-PAGE结果显示,表达的融合蛋白分子量约为140Ku,与预测相符,Westernblot证明该融合蛋白具有免疫学活性。该融合蛋白的成功表达为猪传染性胸膜肺炎亚单位疫苗的研制奠定了基础。 展开更多
关键词 猪胸膜肺炎放线杆菌 apxⅢA基因
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猪胸膜肺炎放线杆菌ApxIVA基因特异片段的克隆和表达 被引量:7
17
作者 彭永刚 刘思国 +3 位作者 王牟平 宫强 王春来 沈国顺 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期103-106,共4页
以猪胸膜肺炎放线杆菌的血清7型国内分离株25_4株基因组DNA为模板,PCR方法扩增apxIVA特异片段,PCR产物经纯化后与载体PMD18_T进行连接、转化,经酶切及序列分析鉴定后,亚克隆到原核表达载体pGEX_6P_1中,构建成重组表达质粒pGEX_apxI... 以猪胸膜肺炎放线杆菌的血清7型国内分离株25_4株基因组DNA为模板,PCR方法扩增apxIVA特异片段,PCR产物经纯化后与载体PMD18_T进行连接、转化,经酶切及序列分析鉴定后,亚克隆到原核表达载体pGEX_6P_1中,构建成重组表达质粒pGEX_apxIVA,转入到大肠杆菌BL21中,以IPTG进行诱导,进行SDS_PAGE电泳。结果表明,25_4株apxIVAgene与基因库中标准7型apxIVAgene同源性达97%,所表达的融合蛋白相对分子量为44kD,与实际预测相符。apxIVA毒素特异片段的成功表达为猪胸膜肺炎放线杆菌病的诊断打下基础。 展开更多
关键词 猪胸膜肺炎放线杆菌 分泌蛋白 载体 克隆 表达 apxⅣA
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猪胸膜肺炎放线杆菌ApxⅡ-ELISA抗体检测试剂盒的研制与应用 被引量:4
18
作者 贾凡 王建银 +4 位作者 胡军勇 石碧 李树清 陈焕春 周锐 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期283-287,共5页
根据胸膜肺炎放线杆菌ApxⅡ毒素的特点,建立了一种能够诊断猪传染性胸膜肺炎和进行免疫后效果评估的血清学方法ApxⅡ-ELISA。本研究将该诊断方法进一步研制成试剂盒,对其特异性、敏感性、重复性和稳定性进行了测试,与间接血凝试验试剂... 根据胸膜肺炎放线杆菌ApxⅡ毒素的特点,建立了一种能够诊断猪传染性胸膜肺炎和进行免疫后效果评估的血清学方法ApxⅡ-ELISA。本研究将该诊断方法进一步研制成试剂盒,对其特异性、敏感性、重复性和稳定性进行了测试,与间接血凝试验试剂盒进行了对比研究,并用该试剂盒检测了来自中国、英国、丹麦、美国、加拿大和澳大利亚的临床猪血清1 453份。结果表明,ApxⅡ-ELISA试剂盒具有很高的特异性和敏感性;3批试剂盒的批内和批间的重复性良好(变异系数均<15%);试剂盒在2~8℃保存9个月,稳定性良好;ApxⅡ-ELISA试剂盒能够有效的诊断猪传染性胸膜肺炎,同时也可作为一种评价猪群免疫后免疫效果的有效方法。 展开更多
关键词 胸膜肺炎放线杆菌 apxⅡ—ELISA 诊断 免疫效果评估
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玉米APX基因的克隆及其原核表达研究 被引量:4
19
作者 任瑛 赵美爱 +2 位作者 郭新梅 裴玉贺 宋希云 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2014年第4期49-55,共7页
为了研究冷胁迫处理下的玉米抗坏血酸过氧化物酶的作用,根据GenBank发表的APX基因的ORF序列设计引物,利用RT-PCR从冷胁迫后的玉米自交系(E28)叶片总RNA中经cDNA转化,pMD19-T载体的亚克隆,获得APX基因开放阅读框,长度为753 bp,编码250个... 为了研究冷胁迫处理下的玉米抗坏血酸过氧化物酶的作用,根据GenBank发表的APX基因的ORF序列设计引物,利用RT-PCR从冷胁迫后的玉米自交系(E28)叶片总RNA中经cDNA转化,pMD19-T载体的亚克隆,获得APX基因开放阅读框,长度为753 bp,编码250个氨基酸残基。生物信息学分析显示,APX相对分子质量和理论等电点依次为27.3 kDa和5.56。将携带完整的ORF序列连入表达载体pET-28a(+)中,APX基因经IPTG诱导后高效表达,SDS-PAGE电泳检测到目标蛋白的大小约为27.3 kDa,与预测结果一致。抗盐分析显示,重组大肠杆菌BL21(pET28-APX)的抗盐性明显高于对照菌株BL21(pET28)且其抗NaCl的临界浓度为0.6 mol/L,这为后期对作物的抗逆研究提供了科学依据。 展开更多
关键词 apx 原核表达 pET28a(+) IPTG BL21(DE3)
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胸膜肺炎放线杆菌apxⅡCA基因的克隆、表达及ApxⅡ-ELISA检测方法的初步建立 被引量:8
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作者 徐晓娟 何启盖 +1 位作者 徐高原 陈焕春 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期335-337,共3页
根据国外已发表的胸膜肺炎放线杆菌 (APP) Apx 的基因序列设计了 1对引物 ,从我国 APP武汉株扩增出约3.5 kb的 apx CA基因。测序结果表明 ,该基因的大小与国外已报道的 1型和 9型 APP的 apx CA基因大小一致 ,同源性达 99%。将该基因连... 根据国外已发表的胸膜肺炎放线杆菌 (APP) Apx 的基因序列设计了 1对引物 ,从我国 APP武汉株扩增出约3.5 kb的 apx CA基因。测序结果表明 ,该基因的大小与国外已报道的 1型和 9型 APP的 apx CA基因大小一致 ,同源性达 99%。将该基因连接到原核表达载体 p ET- 17b,构建了原核表达质粒 p ET- apx CA,并在大肠杆菌 BL 2 1(DE3)中表达出了大小约 10 5 0 0 0的 Apx 蛋白。提取包涵体蛋白作为抗原包被 EL ISA酶标板 ,对已知阳性、阴性血清和临床送检血清样品进行了 EL ISA检测 ,从而为最终建立 Apx - EL 展开更多
关键词 胸膜肺炎放线杆菌 apxⅡCA基因 克隆 表达 ELISA
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